CC BY
23
УДК: 616.24.001: 612.014.424.5:615.849.112 DOI: 10.12737/article_5947d1137579e5.17285629
СОДЕРЖАНИЕ В МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТКАХ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИЕЙ КОМПОНЕНТОВ G-БЕЛКОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ НИЗКОИНТЕНСИВНЫХ МИКРОВОЛН ЧАСТОТОЙ 1 ГГЦ
С.С. БОНДАРЬ*, И.В. ТЕРЕХОВ*, В.К. ПАРФЕНЮК**
ФГБОУ ВО «Тульский государственный университет», медицинский институт, ул. Болдина, 128, Тула, 300012, Россия,e-mail: trft@mail.ru "ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского»,
ул. Большая Казачья, 112, Саратов, Саратовская обл., 410012, Россия, e-mail: artex123@yandex.ru
Аннотация. У больных с внебольничной пневмонией и у практически здоровых лиц в мононук-леарных клетках периферической крови методом иммуноферментного анализа исследовано содержание компонентов сигнальной системы G-белков, а также влияние на их содержание низкоинтенсивного электромагнитного излучения частотой 1 ГГц. Результаты проведенного анализа показали, что постклиническая фаза внебольничной пневмонии протекает на фоне повышенного уровня в МНК субъединицы а1 G-белка и у12. При этом уровень белков RGS1 и RGS2 у больных с пневмонией был ниже показателей практически здоровых лиц. Анализ последствий однократного кратковременного воздействия на клетки цельной крови микроволн частотой 1 ГГц выявил повышение в МНК уже спустя 3 часа после воздействия содержания субъединиц G-белков и у12, протекавшее на фоне снижения уровня протеинов RGS1 и RGS2. Указанные обстоятельства свидетельствуют об активирующем влиянии электромагнитных излучений нетепловой мощности на метаболические процессы в клетках, за счет изменения активности системы вторичных посредников, ассоциированных с G-белками.
Ключевые слова: G-белки, микроволны, воспаление, метаболизм, сигнальная трансдукция.
CONTENTS IN MONONUCLEAR CELLS OF PERIPHERAL BLOOD IN PATIENTS WITH COMMUNITY-ACQUIRED PNEUMONIA OF G-PROTEIN COMPONENTS UNDER INFLUENCE OF LOW-INTENSIVE MICROWAVE FREQUENCY 1 GHz
S.S. BONDAR*, I.V. TEREKHOV*, V.K. PARFENYUK**
* Tula State University, medical institute, str. Boldina, 128, Tula, 300012, Russia, e-mail: trft@mail.ru " Saratov State Medical University named after V.I. Razumovsky,, str. Bolshaya Kazachya, 112, Saratov, Saratov region., 410012, Russia, e-mail: artex123@yandex.ru
Abstract. On the model of the post-clinical phase of acute infectious inflammatory diseases of the lower respiratory tract and from healthy persons, the biological effects of low-intensity (non-thermal) microwave radiation at a frequency of 1 GHz on the content in mononuclear leukocytes of peripheral blood of individual components of signaling pathways associated with G-proteins were studied.
The analysis showed that patients with subclinical immune-inflammatory process in the MNC the content of a1 subunit G-protein (GNAI1) exceeds the value of the control group on average by 9,1%, and subunit y12 (GNG12) by 15,0%. The RGS1 protein level in the main group was 3,9% lower than in the control group, and RGS2 - 0,8%. Against this background, a single impact on the culture of cells of whole blood with microwave radiation at a frequency of 1 GHz contributes to the increase of MNC GNAI1 and GNG12, as well as to reduce the content cells of proteins RGS1 and RGS2.
Key words: G-proteins, microwave, inflammation, metabolism, signal transduction.
Введение. В формировании ответной реакции клетки на разнообразные внешние сигналы, включая гормоны, нейротрансмиттеры,
нейромодуляторы, а также факторы физической природы, важнейшую роль играют G-белки (белки, связывающие гуанозиновые нук-
леотиды), обеспечивающие передачу сигнала от рецептора к исполнительному аппарату клетки [8,16-18,22,24,29-31]. Являясь посредниками в передаче рецепторного сигнала, G-белки, представляющие собой гетеротримеры, состоят из а, в и у субъединиц. При этом а-субъединица обладает каталитической активностью, позволяющей расщеплять гуанозин-трифосфат (ГТФ) до гуанозиндифосфата (ГДФ) [20-22,24,29-31].
Субъединицы в и у, существующие в связанной друг с другом форме, не обладают каталитическими свойствами, соединяясь с а-субъединицей, обеспечивают блокаду ее каталитической активности в отсутствие рецептор-ного сигнала, связывая ГДФ [20,25].
При связывании рецептора со своим ли-гандом, происходит конформационное изменение связанного с ним G-белка сопровождающееся замещением ГДФ на ГТФ. Связывание а-субъединицы с ГТФ приводит к диссоциации гетеротримерного комплекса, за счет отсоединения а-субъединицы, которая связываясь с соответствующим эффектором, путем его фосфорилирования обеспечивает регуляцию работы соответствующих молекулярных механизмов. Гидролиз ГТФ до ГДФ возвращает активность а-субъединицы до минимального уровня, прерывая передачу сигнала от рецептора, обеспечивая ее объединение с комплексом субъединиц в-у [22,29]. В настоящее время известно, что G-белки представлены полипептидом Gs, активирующим аденилатциклазу, Gi-протеином, ингибирующим аденилатциклазу, трансдуцином и др. протеинами. Помимо регуляции функциональной активности аденилат-циклазы, белки Gs и Gi регулируют работу K+ и Ca2+ ионных каналов и метаботропных рецепторов [21,30].
Высоким полиморфизмом отличаются а-субъединицы G-белка, в частности, для Gai известно 3 изоформы, отличающихся, при этом, различной тканеспецифичностью [24,31]. Альфа и гамма субъединицы связаны с клеточной мембраной остатками жирной кислоты, позволяющей комплексу удерживаться и перемещаться в плоскости мембраны.
Показано, что Gs белки стимулируют цАМФ-зависимые сигнальные пути, обеспечивая, в частности, активацию аденилатциклазы в ответ на активацию вь в2 -адренорецепторов, D1 -дофаминовых рецепторов, 5НТ4, 6, 796
серотониновых рецепторов, Н2-гистаминовых рецепторов, Ю1 -рецепторов дофамина и т.п., тогда как О1 сопряжены с М2 и М4 изоформами ацетилхолиновых рецепторов, 5НТ1, Н2 и Н4 -гистаминовыми рецепторами, а2 (А, В, С)-адренорецепторами, Б2-Б4 дофаминовыми рецепторами, СХСЯ4 рецепторами хемокинов, метаботропными глутаматными рецепторами, рецепторами ГАМК, опиоидными, рецепторами каннабиноидов, мелатонина, рецепторами соматостатина [21,25]. Активация Оз и О1 белков сопровождается соответственно усилением либо снижением активности аденилатциклазы и продукции вторичного посредника передачи сигнала внутрь клетки - цАМФ, что приводит к формированию соответствующего биологического эффекта.
Хорошо известно, что в регуляции активности О-белков важную роль играют ЯОБ белки (регуляторы сигнальных путей О-белков), обладающие свойством ГТФ-аз, обеспечивая ускорение гидролиза ГТФ и прекращение передачи сигнала внутрь клетки и восстановление чувствительности рецепторного аппарата к ли-ганду, определяя готовность сигнального каскада к восприятию следующего информационного сигнала. В настоящее время доказана важная роль данных факторов в предупреждении гипертрофии миокарда, регуляции реактивности иммунокомпетентных клеток к воздействию митогенов, бактериальных компонентов, регуляции клеточного стресса, активации Т-лимфоцитов, синаптической пластичности и др. процессах [20,21,23,25-27].
Таким образом, состояние О-белковой сигнальной системы определяет реакцию клетки на разнообразные сигналы, в том числе, управляющие воздействия иммунной и нейроэндок-ринной регуляции. При этом различные патологические процессы, прежде всего, ишемия, способствуют нарушению функционирования внутриклеточных молекулярных путей, модифицируя реактивность клеток к управляющим сигналам. Указанное обстоятельство требует применения реабилитационных мероприятий, в частности, молекулярной реабилитации, для восстановления биохимических взаимосвязей между молекулярными каскадами [8]. Одним из факторов физической природы, способным модулировать клеточную активность, является низкоинтенсивное электромагнитное излучение частотой 1 ГГц, стимулирующее восстанов-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2017 - V. 24, № 2 - P. 95-104
ление естественных соотношении содержания и активности в клетках протеинкиназ различных сигнальных путей [3,10,19].
Учитывая важную роль G-белков в регуляции клеточного метаболизма и осуществлении клеточной реактивности на разнообразные внешние стимулы, а так же отсутствие в литературе данных относительно влияния низкоинтенсивных микроволнового излучения на содержание в клетках данных факторов, целью настоящего исследования являлось изучение содержания в МНК отдельных субъединиц G-белков, а так же регуляторов сигнальных путей G-белков под влиянием однократного воздействия на клетки цельной крови здоровых лиц и пациентов, перенесших пневмонию микроволн частотой 1 ГГц.
Материалы и методы исследования. В соответствии с целью настоящей работы были обследованы 30 пациентов мужского пола с бактериальной внебольничной пневмонией нетяжелого течения на 15-17-е сутки заболевания, перед выпиской из стационара, в возрасте от 20 до 35 лет, составившие основную группу. Контрольную группу составили 15 практически здоровых молодых человек из числа доноров крови в возрасте от 20 до 33 лет.
Материалом для исследования служила венозная кровь, забиравшаяся в утренние часы (с 7:00 до 7:30) из локтевой вены. Для проведения исследования внутриклеточных маркеров 1 мл цельной крови вносили во флакон, содержащий 4 мл среды DMEM, гепарин (2,5 ЕД/мл), гентамицин (100 мкг/мл) и 1-глютамин (0,6 мг/мл). Подготовленные таким образом образцы облучали в течение 45 минут аппаратом микроволновой терапии «Акватон-02» (ООО «ТЕЛЕМАК», г. Саратов), на частоте 1,0±0,03 ГГц (плотность потока энергии 50 нВт/см2) [2,4,12,15].
После облучения флаконы помещались на 1, 3, 6 и 24 часа в термостат при 37 0С с последующим выделением на градиенте фиколл-верографина (р=1,077) МНК и приготовлением лизатов, для чего использовали 1 мл клеточной суспензии содержащих 0,5*106 МНК. Выделенные клетки дважды отмывали в фосфатно-солевом буфере, после чего лизировали, используя раствор следующего состава: 10 mM Tris, pH 7,4; 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM NaF, 20 mM Na4P2Ü?, 2 mM Na3VO4, 1% Triton X-100, 10% глицерола, 0,1% SDS, 0,5%
деоксихолата, 1 mM PMSF (матричный 0,3 М раствор в DMSO). В лизирующий раствор добавляли (ex temporo) 1% коктейля ингибитора протеаз («Sigma-Aldrich», США), выдерживали на льду (при t=+4-5 0C) в течение 15 минут. Полученные ядерно-цитоплазматические лизаты центрифугировали в течение 10 минут при 15 000 об/мин, с последующим аликвотированием и замораживанием при -76 0С.
Подсчет клеток и анализ жизнеспособности осуществляли с помощью счетчика TC20 (Bio-Rad, США). Жизнеспособность клеток подготовленных культур составляла более 90%.
В клеточных лизатах методом иммунофер-ментного анализа (ИФА) оценивали содержание (концентрацию) субъединицы al (GNAI1) и у12 (GNG12) G-протеина, а также белков RGS1 и RGS2. Исследование выполняли на автоматическом анализаторе Personal LAB (Adaltis Italia S.p.A., Италия), с использованием наборов реактивов производства CUSABIO BIOTECH (Китай).
Статистическую обработку проводили с помощью программы Statistica 7.0. Результаты исследования представлены в виде: среднее значение признака (x) медиану (Ме), 25 и 75 процентили (25%, 75%). Статистическую значимость (р) межгрупповых различий в независимых выборках оценивали с помощью U-критерия Манна-Уитни, в связанных - с использованием критерия Вилкоксона.
Результаты и их обсуждение. В табл. 1 представлено содержание исследованных белков в группе контроля и основной группе.
Таблица 1
Исходное содержание исследованных факторов в группах
Фактор Контрольная группа Основная группа
x 25% Me 75% x 25% Me 75%
GNA11, нг/мл 0,8 0,51 0,77 1,09 0,586 0,44 0,515 0,56
GNG12, нг/мл 0,665 0,565 0,72 0,765 0,521 0,345 0,605 0,68
RGS1, нг/мл 0,672 0,584 0,699 0,76 0,71 0,575 0,68 0,84
RGS2, нг/мл 0,531 0,384 0,49 0,678 0,588 0,374 0,634 0,76
Проведенный анализ показал, что у пациентов с субклиническим иммунно-воспалительным процессом содержание в МНК субъединицы ОЫА11 ниже, чем в контрольной группе в среднем на 26,2% (р=0,0017), а ОЫО12 на 22,0% (р=0,0001). При этом уровень белка ЯОБ1 в основной группе был на 5,2% выше
(р=0,48), чем в группе контроля, а RGS2 - на 11,0% (р=0,4).
В табл. 2. представлены результаты оценки исследованных показателей спустя 24 часа после облучения.
Таблица 2
Содержание исследования исследованных факторов после облучения
Фактор Контрольная группа Основная группа
x 25% Me 75% x 25% Me 75%
GNAI1, нг/мл 0,873 0,63 0,85 1,115 0,639 0,5 0,575 0,62
GNG12, нг/мл 0,765 0,685 0,84 0,845 0,588 0,405 0,66 0,755
RGS1, нг/мл 0,646 0,572 0,677 0,72 0,673 0,545 0,64 0,81
RGS2, нг/мл 0,527 0,38 0,487 0,674 0,585 0,372 0,631 0,756
Проведенный анализ показал, что в облученных культурах практически здоровых лиц уровень GNAI1 возрос в среднем на 71,3%о (р=0,005), а GNG12 на 111,1% (р=0,0017), при этом в основной группе соответствующий прирост составил на 80,5% (>=0,009) и 129,2% (р=0,0012) соответственно. При этом содержание белка ЯОБ1 в основной группе сократилось на 59,4% (р=0,01), а RGS2 - на 6,8% (р=0,1). В основной группе снижение составило 49,3% (р=0,015) и 7,5% (р=0,07) соответственно.
Динамика GNAI1 спустя 1, 3, 6 и 24 часа после однократного облучения клеток цельной крови низкоинтенсивным излучением частотой 1 ГГц представлена на рис. 1.
Рис. 1. Динамика содержание субъединицы GNAI1 в
облученных клетках Примечание: эффект облучения - различие уровня исследованного фактора до и после облучения (%)
Результаты анализа свидетельствуют о более выраженной динамике изменений содер-
жания GNAI1 в облученных клетках группы контроля. При этом уровень данного фактора в группе контроля неуклонно возрастал в течение трех часов после облучения, с некоторым замедлением в течение последующих трех часов после однократного воздействия на клетки микроволн. В основной группе отмечалось более сдержанное повышение содержания в МНК субъединицы GNAI1 в течение 6 часов после облучения до максимальных значений, с дальнейшей стабилизацией эффекта облучения на достигнутом уровне.
Уровень субъединицы GNG12 под воздействием микроволн представлен на рис. 2.
Рис. 2. Динамика содержание субъединицы GNG12 в
облученных клетках Примечание: эффект облучения - различие уровня исследованного фактора до и после облучения (%)
Результаты проведенного исследования свидетельствуют о повышении в облученных клетках содержания у12 субъединицы G-белка, более выраженное в контрольной группе спустя сутки после воздействия. Вместе с тем, в первые три часа после облучения динамика содержания GNG12 была более выражена в основной группе.
Содержание в группах регуляторного белка RGS1, представлено на рис. 3.
Анализ динамики уровня RGS1 в облученных МНК свидетельствуют о том, что в облученных клетках имеет место прогрессирующее снижение уровня исследованного фактора после однократного воздействия на них низкоинтенсивных микроволн частотой 1 ГГц. При этом в основной группе, наиболее выраженные различия достигались спустя 24 часа после однократного воздействия микроволн на МНК. При
этом в группе контроля наблюдалось замедление динамики изменений содержания в МНК ЯОБ1, отмечавшееся с 3 часа после воздействия и продолжавшееся в течение следующих трех часов.
о -ю ■20
ь
!
£ -50
I
Я" .60
ТО -30
л<спон1циз п-хпе оолгучення, чес.
Рис. 3. Динамика содержание субъединицы ЯОБ1 в
облученных клетках Примечание: эффект облучения - различие уровня исследованного фактора до (К) и после (О) облучения (%о)
Содержание в МНК регуляторного белка ЯОБ2, представлено на рис. 4.
Результаты оценки динамики ЯОБ2 в облученных МНК свидетельствуют о прогрессивном снижении содержания в клетке исследованных факторов после однократного воздействия микроволн на клетки. При этом спустя сутки после воздействия, в облученных МНК основной группы, содержание исследованного фак-
тора приближалось к уровню данного фактора в группе контроля до воздействия на клетки микроволн. Напротив, в клеточных культурах, не подвергавшихся воздействию микроволн, имеет место тенденция к повышению содержания в МНК белка ЯОБ2.
Пониженный уровень ингибиторной субъединицы в МНК реконвалесцентов ВП, в сочетании со снижением уровня ОЫО12, способствуют активации аденилатциклазы 2-го типа и накоплению в клетке цАМФ [10]. Несколько повышенный уровень негативного регулятора активности О-белков - протеина ЯОБ1, и в особенности - ЯОБ2, не способствует нормализации функционального состояния МНК, определяя повышенную клеточную реактивность им-мунокомпетентных клеток у реконвалесцентов ВП. Таким образом у обследованных больных имеет место стимуляция активности сигнального пути О-белков, что способствует сохранению повышенной чувствительности клеток к различным внешним воздействиям, опосредуемых соответствующими рецепторами, в частности, Са-чувствительными рецепторами, рецепторами к простагландинам Е1 и Е2, мета-ботропными глутаматными рецепторами, а2-адренергическими рецепторами, М1, М4 мус-кариновыми рецепторами, рецепторами апе-лина и т.п. В этих условиях, снижение содержания в клетке ЯОБ-белков, определяющее замедление гидролиза АДФ, способствует сохранению сигнальной активности О-белков и реактивности соответствующих клеточных типов.
Анализ результатов проведенного исследования свидетельствует о чувствительности содержания компонентов О-белков в МНК к воздействию низкоинтенсивных микроволн частотой 1 ГГц, в особенности у-субъединицы и регуляторного белка ЯОБ2, позволяя говорить о чувствительности Са-зависимых механизмов клеточной регуляции к излучению [27]. При этом в облученных культурах отмечено повышение содержания ОЫА1 и ОЫО12, которое более выражено в МНК практически здоровых лиц. Проведенный анализ показал, что однократное воздействие на клетки микроволн частотой 1 ГГц способствует формированию положительной динамики содержания в МНК соответствующих молекулярных компонентов, что определяет усиление функционирования в облученных клетках эффекторных молекулярных механизмов, контролируемых ОЫА11, в том
I э в
полиция пигпй попг^иния. час
Рис. 4. Динамика содержание субъединицы RGS2 в
облученных клетках Примечание: эффект облучения - различие уровня исследованного фактора до и после облучения (%о)
числе изменение активности терминальных протеинкиназ МАРК/SAPK-сигнального пути -протеинкиназы ERK [7,10]. Указанное обстоятельство определяет сохранение активности рецепторного аппарата клетки и ее чувствительности к управляющим воздействиям, в том числе гормонов и других сигнальных молекул, в том числе простагландинов и хемокинов [21].
Снижение в облученных МНК негативных регуляторов сигнального пути, в особенности -RGS2, наблюдающееся в течение суток после однократного воздействия микроволн, замедляя гидролиз ГТФ, поддерживает активность а-субъединиц комплекса G-белков. При этом создаются условия для поддержания активности рецепторов, сопряженных с G-белками, в частности, глутаматных метаботропных рецепторов [25,26,30]. Указанное обстоятельство, возможно, определяет формирование таких эффектов микроволн, как изменение активности метаболизма тканей и органов, подвергшихся воздействию низкоинтенсивных микроволн частотой 1 ГГц, что может иметь важное значение при применении микроволн в терапевтических целях у больных с разнообразной патологией, в частности, гипертонической болезнью, инсультом, бактериальным сепсисом, а также на фоне различных стрессов и функциональных отклонений [1,2,5-7,9,11,13,14,17,23,26].
Результаты проведенного исследования позволяют говорить о том, что микроволны оказывают модулирующее воздействие на клеточный метаболизм и реактивность различных клеточных типов к разнообразным стимулам, за счет изменения содержания в цитоплазме компонентов входящих в состав G-белков и регуляторов их активности. Изменение содержания в облученных клетках цАМФ, за счет изменения активности аденилатциклазы, обеспечивает регуляцию соответствующих процессов, в том числе контролируемых MAPK/SAPK-сигнальным путем - клеточной пролиферации и роста, в том числе в опухолевых клетках [10,31]. Подобные модулирующие эффекты, могут обеспечивать изменение реактивности клеток в условиях патологической стимуляции, например, при различных эндотоксикозах бактериальной природы [22,26,27]. Кроме того, подобные эффекты микроволн, очевидно, оп0ределяют модуляцию чувствительности
клеток к гормональным стимулам и цитоки-нам, обеспечивая изменение метаболической активности тканей, приводя к системным эффектам, таким как, изменению поведения, облегчению запоминания и т.п. [11,13,25,28].
Заключение. Фаза реконвалесценции вне-больничной пневмонии сопровождается статистически значимым снижением содержания в МНК субъединицы GNAI1 и GNG12 с тенденцией к повышению в клетках содержания вспомогательных белков RGS1 и RGS2.
В облученных культурах МНК практически здоровых лиц спустя сутки после воздействия уровень GNAI1 возрастал в среднем на 71,3% (р=0,005), а GNG12 на 111,1% (р=0,0017), при соответствующем повышении содержания данных белков в группе контроля на 80,5% (р=0,009) и 129,2% (р=0,0012) соответственно. Облучение так же способствовало уменьшению содержания в клетках белка RGS1 в основной группе на 59,4% (р=0,01), а RGS2 - на 6,8% (р=0,1), при изменении их в группе контроля на 49,3% (р=0,015) и 7,5% (р=0,07) соответственно.
Учитывая универсальный характер воздействия микроволн на клетки, а также общие молекулярные механизмы, инициируемые микроволнами, можно полагать, что облучение способствует изменению метаболической активности не только иммунокомпетентных клеток, но и негемопоэтических клеток за счет изменения функциональной активности рецеп-торного аппарата, в частности, метаботропных глутаматных рецепторов, адренергических, М-холинорецепторов и рецепторов хемокинов.
Результаты исследования позволяют говорить о том, что низкоинтенсивные микроволны частотой 1 ГГц являются важным фактором, влияющим на функциональную активность клеток, в том числе на их чувствительность к гормональным и паракринным сигнальным регуляторам. Представляется перспективным дальнейшее исследование биологических эффектов данного физиотерапевтического фактора в аспекте его использования для реабилитации, в том числе иммунореабилитации и нейрореабилитаци, а также восстановления клеточной пластичности после перенесенных стрессов, в том числе, ишемической и гипокси-ческой природы.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2017 - V. 24, № 2 - P. 95-104
Литература
1. Бондарь С.С., Логаткина А.В., Терехов И.В. Зависимость содержания отдельных молекул в аграну-лоцитах цельной крови при ишемической болезни сердца от уровня фосфорилирования протеинкина-зы р38 на фоне низкоинтенсивного СВЧ-облучения // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2016. №1. Публикация 2-6. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2016-1/2-6.pdf (дата обращения: 10.02.2016). DOI: 10.12737/18561.
2. Бондарь С.С., Логаткина А.В., Терехов И.В. Влияние низкоинтенсивного микроволнового излучения частотой 1 ГГц на состояние МАРК/БАРК-сигнального пути в мононуклеарных лейкоцитах // Биомедицинская радиоэлектроника. 2016. № 10. С. 28-36.
3. Брилль Г.Е., Петросян В.И., Синицын Н.И., Ел-кина В.А. Поддержание структуры водного мат-рикса - важнейший механизм гомеостатической регуляции в живых системах (концептуальная модель и ее базовое экспериментальное обоснование) // Биомедицинская радиоэлектроника. 2000. №2. С. 29-31.
4. Власкин С.В., Терехов И.В., Петросян В.И., Дягилев Б.Л. Способ терапевтического воздействия на биологические объекты электромагнитными волнами и устройство для его осуществления: пат. 2445134 Рос. Федерация: МПК: А6Ш500, А6Ш502. № 2010138921/14; заявл. 21.09.2010; опубл. 20.03.2012, Бюл. № 8. 20 с.
5. Логаткина А.В., Бондарь С.С., Терехов И.В., Соб-ченко А.А. Метаболические эффекты низкоинтенсивной дециметровой физиотерапии при артериальной гипертонии // Вестник новых медицинских технологий. 2015. Т. 22, № 2. С. 71-77. Б01: 10.12737/11839
6. Скворцова В.И., Иванова Г.Е., Стаховская Л.В. Возможности расширения реабилитационного потенциала больных с церебральным инсультом // РМЖ. 2011. №9. С. 579.
7. Солодухин К.А., Никифоров В.С., Громов М.С., Парфенюк В.К., Бондарь С.С., Терехов И.В. Влияние низкоинтенсивного СВЧ-облучения на внутриклеточные процессы в мононуклеарах при пневмонии // Медицинская иммунология. 2012. Т.14, №6.
References
Bondar' SC, Logatkina AV, Terekhov IV. Zavisimost' soderzhaniya otdel'nykh molekul v ag-ranulotsitakh tsel'noy krovi pri ishemicheskoy bolezni serdtsa ot urovnya fosforilirovaniya proteinkinazy r38 na fone nizkointensiv-nogo SVCh-oblucheniya [Dependence of the content of individual molecules in whole blood agranulocytes in ischemic heart disease from the level of phosphorylation of protein kinase p38 on the background of low-intensity microwave radiation]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhno-logiy. Elektronnoe izda-nie [internet]. 2016[cited 2016 Feb 10];1[about 9 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula. ru/VNMT/Bulletin/E2016-1/2-6.pdf. DOI: 10.12737/18561.
Bondar' SS, Logatkina AV, Terekhov IV. Vliyanie niz-kointensivnogo mikrovolnovogo izlucheniya chastotoy 1 GGts na sostoyanie MAPK/SAPK-signal'nogo puti v mononuklearnykh leykotsitakh [Influence of low-intensity microwave radiation with a frequency of 1 GHz on the state of the MAPK / SAPK-signaling pathway in mononuclear leukocytes]. Biomeditsinskaya radioelektronika. 2016;10:28-36. Russian. Brill' GE, Petrosyan VI, Sinitsyn NI, Elkina VA. Pod-derzhanie struktury vodnogo matriksa - vazhneyshiy mekhanizm gomeostaticheskoy regulyatsii v zhivykh sistemakh (kontseptual'naya model' i ee bazovoe eks-perimental'noe obosnovanie) [Maintaining the structure of the water matrix is the most important mechanism of homeostatic regulation in living systems (the conceptual model and its basic experimental justification)] . Biomeditsinskaya radioelektronika. 2000;2:29-31. Russian.
Vlaskin SV, Terekhov IV, Petrosyan VI, Dyagilev B. Sposob terapevticheskogo vozdeystviya na biologicheskie ob"ekty elektromagnitnymi volnami i ustroystvo dlya ego osushchestvleniya: pat. 2445134 Ros. Federatsiya: MPK: A61N500, A61N502. № 2010138921/14; zayavl. 21.09.2010; opubl. 20.03.2012, Byul. № 8. 20 s. Russian.
Logatkina AV, Bondar' SS, Terekhov IV, Sobchenko AA. Metabolicheskie effekty nizkointensivnoy detsimetro-voy fizioterapii pri arterial'noy gipertonii [Improving the effectiveness of drug therapy for hypertension in men with combined use of low intensity uhf physiotherapy]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2015;22(2):71-7. DOI: 10.12737/11839. Russian. Skvortsova VI, Ivanova GE, Stakhovskaya LV. Voz-mozhnosti rasshireniya reabilitatsionnogo potentsiala bol'nykh s tserebral'nym insul'tom [The possibilities of expanding the rehabilitation potential of patients with cerebral stroke]. RMZh. 2011;9:579. Russian. Solodukhin KA, Nikiforov VS, Gromov MS, Parfe-nyuk VK, Bondar' SS, Terekhov IV. Vliyanie nizkoin-tensivnogo SVCh-oblucheniya na vnutrikletochnye protsessy v mononuklearakh pri pnevmonii [Influence of low-intensity microwave irradiation on intracellular
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2017 - V. 24, № 2 - P. 95-104
С. 541-544.
8. Стародубов В.И., Еськов В.М., Хадарцев А.А., Яшин А.А., Агарков Н.М., Зарубина Т.В., Кобрин-ский Б.А., Козырев К.М., Пятин В.Ф., Хетагурова А.К., Громов М.С., Воронцова З.А., Филатова О.Е., Глотов В.А., Гонтарев С.Н., Добрынина И.Ю., Лис-топадова Н.А., Матвеев Н.В., Ведясова О.А., Курако-ва Н.Г., Руанет В.В., Логинов С.И., Добрынин Ю.В., Свешников А.В., Смородинов А.В., Терехов И.В., Яшин М.А., Кантаржи Е.П., Логачева В.В., Шаманский К.А. Системные подходы в биологии и медицине (системный анализ, управление и обработка информации) / под ред. А.А. Хадарцева, В.М. Есько-ва, А.А. Яшина, К.М. Козырева. Тула: ООО РИФ «ИНФРА», 2008. 372 с.
9. Терехов И.В., Бондарь С.С., Хадарцев А.А. Лабораторное определение внутриклеточных факторов противовирусной защиты при внебольничной пневмонии в оценке эффектов низкоинтенсивного СВЧ-излучения // Клиническая лабораторная диагностика. 2016. Т. 61, № 6. С. 380-384.
10. Терехов И.В., Петросян В.И., Дягилев Б.Л., Соло-духин К.А., Аржников В.В., Бондарь С.С. Молекулярные механизмы иммунореабилитации при использовании низкоинтенсивного СВЧ-излучения // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2011. Т.1, № 5. С. 34-37.
11. Терехов И.В., Солодухин К.А., Ицкович В.О., Никифоров В.С. Особенности биологического действия низкоинтенсивного СВЧ-излучения на продукцию цитокинов клетками цельной крови при внебольничной пневмонии // Цитокины и воспаление. 2012. Т.11, №4. С. 67-72.
12. Терехов И.В., Солодухин К.А., Никифоров В.С., Ицкович В.О., Шуленин К.С. Особенности биологического эффекта низкоинтенсивного СВЧ-облучения в условиях антигенной стимуляции мо-нонуклеаров цельной крови // Физиотерапевт. 2013. №1. С. 26-32.
13. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Бондарь С.С. Состояние рецепторзависимых сигнальных путей в агранулоцитах периферической крови реконвалес-центов внебольничной пневмонии под влиянием микроволнового излучения // Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2016. Т. 93, №3. С. 23-28. Б01: 10.Ш16/кигоИ:2016323-28.
processes in mononuclears in pneumonia]. Meditsins-kaya immunologiya. 2012;14(6):541-4. Russian. Starodubov VI, Es'kov VM, Khadartsev AA, Yashin AA, Agarkov NM, Zarubina TV, Kobrinskiy BA, Kozyrev KM, Pyatin VF, Khetagurova AK, Gromov MS, Vorontsova ZA, Filatova OE, Glotov VA, Gontarev SN, Dobrynina IYu, Listopadova NA, Matveev NV, Vedyasova OA, Kurakova NG, Ruanet VV, Loginov SI, Dobrynin YuV, Sveshnikov AV, Smorodinov AV, Terekhov IV, Yashin MA, Kantarzhi EP, Logacheva VV, Shamanskiy KA. Sistemnye podkhody v biologii i me-ditsine (sistemnyy analiz, upravlenie i obrabotka in-formatsii) [System approaches in biology and medicine (system analysis, management and information processing)]. pod red. A. A. Khadartseva, V.M. Es'kova, A.A. Yashina, K.M. Kozyreva. Tula: OOO RIF «INFRA»; 2008. Russian.
Terekhov IV, Bondar' SS, Khadartsev AA. Laboratornoe opredelenie vnutrikletochnykh faktorov protivovirus-noy zashchity pri vnebol'nichnoy pnevmonii v otsenke effektov nizkointensivnogo SVCh-izlucheniya [Laboratory determination of intracellular factors of antiviral protection in community-acquired pneumonia in assessing the effects of low-intensity microwave radiation]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2016;61(6):380-4. Russian.
Terekhov IV, Petrosyan VI, Dyagilev BL, Solodukhin KA, Arzhnikov VV, Bondar' SS. Molekulyarnye mekha-nizmy immunoreabilitatsii pri ispol'zovanii nizkoin-tensivnogo SVCh-izlucheniya [Molecular mechanisms of immunorehabilitation in the use of low-intensity microwave radiation]. Byulleten' meditsinskikh internet-konferentsiy. 2011;1(5):34-7. Russian. Terekhov IV, Solodukhin KA, Itskovich VO, Nikifo-rov VS. Osobennosti biologicheskogo deystviya nizkoin-tensivnogo SVCh-izlucheniya na produktsiyu tsitokinov kletkami tsel'noy krovi pri vnebol'nichnoy pnevmonii [Features of the biological effect of low-intensity microwave radiation on the production of cytokines by whole blood cells in community-acquired pneumonia]. Tsitokiny i vospalenie. 2012;11(4):67-72. Russian. Terekhov IV, Solodukhin KA, Nikiforov VS, Itsko-vich VO, Shulenin KS. Osobennosti biologicheskogo effekta nizkointensivnogo SVCh-oblucheniya v uslo-viyakh antigennoy stimulyatsii mononuklearov tsel'noy krovi [Features of the biological effect of low-intensity microwave irradiation under conditions of antigen stimulation of whole blood mononuclear cells]. Fizioterapevt. 2013;1:26-32. Russian. Terekhov IV, Khadartsev AA, Bondar' SS. Sostoyanie retseptorzavisimykh signal'nykh putey v agranulotsi-takh perifericheskoy krovi rekonvalestsentov vne-bol'nichnoy pnevmonii pod vliyaniem mikrovolnovogo izlucheniya [The state of receptor-dependent signaling pathways in peripheral blood agranulocytes of convalescents of community-acquired pneumonia under the influence of microwave radiation]. Voprosy kurortolo-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2017 - V. 24, № 2 - P. 95-104
14. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Никифоров А.А., Бондарь С.С. Продукция цитокинов клетками цельной крови реконвалесцентов внебольничной пневмонии под влиянием низкоинтенсивного СВЧ-облучения // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2014. №1. Публикация 2-57. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/ Bulletin/E2015-1/4815.pdf (дата обращения: 30.06.2014). DOI: 10.12737/5025
15. Терехов И.В., Хадарцев А.А., Никифоров В.С., Бондарь С.С. Функциональное состояние клеток цельной крови при внебольничной пневмонии и его коррекция СВЧ-излучением // Фундаментальные исследования. 2014. № 10. С. 737-741.
16. Фудин Н.А., Кидалов В.Н., Наумова Э.М., Валентинов Б.Г. Саногенез с клеточных позиций // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2015. №4. Публикация 2-15. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2015-
4/5 316.pdf (дата обращения: 30.11.2015). DOI: 10.12737/17081.
17. Хадарцев А.А., Еськов В.М., Хадарцев В.А., Иванов Д.В. Клеточные технологии с позиций синергетики // Вестник новых медицинских технологий. 2009. № 4. С. 7-9.
18. Хадарцев А.А., Морозов В.Н., Хрупачев А.Г., Ка-расева Ю.В., Морозова В.И. Депрессия антистрессовых механизмов как основа развития патологического процесса // Фундаментальные исследования. 2012. № 4-2. С. 371-375.
19. Хадарцева К.А., Беляева Е.А., Борисова О.Н., Атлас Е.Е. Возможности внешнего управления физиологическими и патологическими процессами в организме человека (краткий обзор литературы) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2015. №3. Публикация 8-2. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E20153/52 44.pdf (дата обращения: 28.09.2015). DOI. 10.12737/ 13371.
20. Clapham D.E., Neer E.J. G protein beta gamma sub-units // Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 1997. Vol. 37. P. 167-203. DOI: 10.1146/annurev.pharmtox.37.1.167.
gii, fizioterapii i lechebnoy fizicheskoy kul'tury. 2016;93(3): 23-28. DOI: 10.17116/kurort2016323-28. Russian.
Terekhov IV, Khadartsev AA, Nikiforov AA, Bondar' SS. Produktsiya tsitokinov kletkami tsel'noy krovi rekon-valestsentov vnebol'-nichnoy pnevmonii pod vliya-niem nizkoin-tensivnogo SVCh-oblucheniya [Production of cytokines by whole blood cells of convalescents of community-acquired pneumonia under the influence of low-intensity microwave radiation]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izda-nie [internet]. 2014[cited 2014 Jun 30];1[about 5 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula. ru/VNMT/ Bulle-tin/E2015-1/4815.pdf. DOI: 10.12737/5025
Terekhov IV, Khadartsev AA, Nikiforov VS, Bondar' SS. Funktsional'noe sostoyanie kletok tsel'noy krovi pri vnebol'nichnoy pnevmonii i ego korrektsiya SVCh-izlucheniem [Functional state of whole blood cells in community-acquired pneumonia and its correction by microwave radiation]. Fundamental'nye issledovaniya. 2014;10:737-41. Russian.
Fudin NA, Kidalov VN, Naumova EM, Valentinov BG. Sanogenez s kletochnykh pozitsiy [Sanogenesis from cell positions]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhno-logiy. Elektronnoe izdanie [internet]. 2015;4:[about 10 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu. tu-la.ru/VNMT/Bulletin/E2015-4/5316.pdf. DOI: 10.12737/17081.
Khadartsev AA, Es'kov VM, Khadartsev VA, Ivanov DV. Kletochnye tekhnologii s pozitsiy sinergetiki [Cell technologies from the viewpoint of synergetics]. Vest-nik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2009;4:7-9. Russian.
Khadartsev AA, Morozov VN, Khrupachev AG, Karase-va YuV, Morozova VI. Depressiya antistressovykh mekhanizmov kak osnova razvitiya patologicheskogo protsessa [Depression of anti-stress mechanisms as the basis for the development of the pathological process]. Fundamental'nye issledovaniya. 2012;4-2:371-5. Russian.
Khadartseva KA, Belyaeva EA, Borisova ON, Atlas EE. Vozmozhnosti vneshnego upravleniya fiziologicheski-mi i patologicheskimi protsessami v organizme chelo-veka (kratkiy obzor literatury) [Possibilities of external management of physiological and pathological processes in the human body (brief review of literature)]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie [internet]. 2015[cited 2015 Sep 28];3:[about 8 p.]. Russian. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/
VNMT/Bulletin/E20153/5244.pdf. DOI. 10.12737/ 13371.
Clapham DE, Neer EJ. G protein beta gamma subunits. Annual Review of Pharmacology and Toxicology 1997: 37: 167-203.
DOI: 10.1146/annurev.pharmtox.37.1.167.
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2017 - V. 24, № 2 - P. 95-104
21. Damaj B.B., McColl S.R., Neote K., Songqing N., Ogborn K.T., Hébert C.A., Naccache P.H. Identification of G-protein binding sites of the human interleukin-8 receptors by functional mapping of the intracellular loops // FASEB J. 1996. Vol. 10(12). P. 1426-1434.
22. Larson K.C., Lipko M., Dabrowski M., Draper M.P. Gng12 is a novel negative regulator of LPS-induced inflammation in the microglial cell line BV-2 // Inflamm Res. 2010. Vol. 59(1). P. 15-22. DOI: 10.1007/s00011-009-0062-2.
23. Le T.H., Coffman T.M. RGS2: a "turn-off" in hypertension // Journal of Clinical Investigation. 2003. Vol. 111. P. 441-443.
24. Lee M.J., Evans M., Hla T. The inducible G proteincoupled receptor edg-1 signals via the G(i)/mitogen-activated protein kinase pathway // The Journal of Biological Chemistry. 1996. Vol. 271(19). P. 11272-11279. DOI: 10.1074/jbc.271.19.11272.
25. Morishita R., Saga S., Kawamura N. Differential localization of the gamma 3 and gamma 12 subunits of G proteins in the mammalian brain // J. Neurochem. 1997. Vol. 68(2). P. 820-827. DOI: 10.1046/j.1471-4159.1997.68020820.
26. Nguyen Ch.H., Zhao P., Sobiesiak A.J., Chidiac P. RGS2 is a component of the cellular stress response // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2012. Vol. 426. P. 129-134.
27. Nlend M., Bookman R.J., Conner G.E., Salathe M. Regulator of G-Protein Signaling Protein 2 Modulates Purinergic Calcium and Ciliary Beat Frequency Responses in Airway Epithelia // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2002. Vol. 27. P. 436-445.
28. Oliveira-dos-Santos A.J., Matsumoto G., Snow B.E., Bai D., Houston F.P., Whishaw I.Q., Mariathasan S., Sasaki T., Wakeham A., Ohashi P.S., Roder J.C., Barnes C.A., Siderovski D.P., Penninger J.M. Regulation of T cell activation, anxiety, and male aggression by RGS2 // Proceedings of the National Academy of Sciences. 2000. Vol. 97. P. 12272-12277.
29. Raymond J.R., Mukhin Y.V., Gelasco A., Turner J., Collinsworth G., Gettys T.W., Grewal J.S., Garnovskaya M.N. Multiplicity of mechanisms of serotonin receptor signal transduction // Pharmacology & Therapeutics. 2002. Vol. 92(2-3). P. 179-212. DOI: 10.1016/S0163-7258(01)00169-3.
30. Sidhu A., Niznik H.B. Coupling of dopamine receptor subtypes to multiple and diverse G proteins. International Journal of Developmental Neuroscience // The Official Journal of the International Society for Developmental Neuroscience. 2000. Vol. 18(7). P. 669-677. DOI: 10.1016/S0736-5748(00)00033-2.
31. Zhong M., Clarke S., Vo B.T., Khan S.A. The essential role of Gia2 in prostate cancer cell migration // Mol Cancer Res. 2012. Vol. 10(10). P. 1380-1388. DOI: 10.1158/1541-7786.
Damaj BB, McColl SR, Neote K, Songqing N, Ogborn KT, Hébert CA, Naccache PH. Identification of G-protein binding sites of the human interleukin-8 receptors by functional mapping of the intracellular loops. FASEB J. 1996;10(12):1426-34. Larson KC, Lipko M, Dabrowski M, Draper MP. Gng12 is a novel negative regulator of LPS-induced inflammation in the microglial cell line BV-2. Inflamm Res. 2010;59(1):15-22. DOI: 10.1007/s00011-009-0062-2.
Le TH, Coffman TM. RGS2: a "turn-off" in hypertension. Journal of Clinical Investigation. 2003;111:441-3.
Lee MJ, Evans M, Hla T. The inducible G proteincoupled receptor edg-1 signals via the G(i)/mitogen-activated protein kinase pathway. The Journal of Biological Chemistry. 1996; 271(19): 11272-9. DOI: 10.1074/jbc.271.19.11272.
Morishita R, Saga S, Kawamura N. Differential localization of the gamma 3 and gamma 12 subunits of G proteins in the mammalian brain. J. Neurochem. 1997;68(2):820-7. DOI: 10.1046/j.1471-
4159.1997.68020820.
Nguyen ChH, Zhao P, Sobiesiak AJ, Chidiac P. RGS2 is a component of the cellular stress response. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2012;426:129-34.
Nlend M, Bookman RJ, Conner GE, Salathe M. Regulator of G-Protein Signaling Protein 2 Modulates Puri-nergic Calcium and Ciliary Beat Frequency Responses in Airway Epithelia. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 2002;27:436-45.
Oliveira-dos-Santos AJ, Matsumoto G, Snow BE, Bai D, Houston FP, Whishaw IQ, Mariathasan S, Sasaki T, Wakeham A, Ohashi PS, Roder JC, Barnes CA, Side-rovski DP, Penninger JM. Regulation of T cell activation, anxiety, and male aggression by RGS2. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2000;97:12272-7.
Raymond JR, Mukhin YV, Gelasco A, Turner J, Collins-worth G, Gettys TW, Grewal JS, Garnovskaya MN. Multiplicity of mechanisms of serotonin receptor signal transduction. Pharmacology & Therapeutics 2002;92(2-3):179-212. DOI: 10.1016/S0163-7258(01)00169-3.
Sidhu A, Niznik HB. Coupling of dopamine receptor subtypes to multiple and diverse G proteins. International Journal of Developmental Neuroscience: The Official Journal of the International Society for Developmental Neuroscience 2000;18(7):669-77. DOI: 10.1016/S0736-5748(00)00033-2. Zhong M, Clarke S, Vo BT, Khan SA. The essential role of Gia2 in prostate cancer cell migration. Mol Cancer Res. 2012;10(10):1380-8. DOI: 10.1158/1541-7786.
