Содержание ругуляторных cD4+cD25+cd127t-клеток в циркуляции и эндометрии у фертильных и бесплодных женщин в разные фазы менструального цикла

Хонина Наталья Алексеевна; Селедцова Н.В.; Тихонова М.А.; Овсянникова Т.В.; Черных Е.Р.

ИММУНОЛОГИЯ РЕПРОДУКЦИИ

Хонина НА.1, Селедцова Н.В.2, Тихонова М.А.1, Овсянникова Т.В.2, Черных Е.Р.1

СОДЕРЖАНИЕ РУГУЛЯТОРНЫХ CD4+CD25+CD127' T-КЛЕТОК В ЦИРКУЛЯЦИИ И ЭНДОМЕТРИИ у фертильных и бесплодных женщин в разные фазы менструального цикла

1ФБГУ Институт клинической иммунологии СО РАМН, 630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14; 2Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО Ран, 630090, г Новосибирск, пр. академика Лаврентьева, 8

В работе проведено комплексное исследование содержания CD4+CD25+CD127- Т-клеток в периферической крови и эндометриальной ткани в динамике менструального цикла у здоровых фертильных женщин (n = 12) и женщин с бесплодием неясного генеза (n = 12). Результаты исследования показали достоверное увеличение у фертильных женщин циркулирующих и эндометриальных Т-регуляторных клеток в фазу средней секреции. У женщин с бесплодием содержание CD4+CD25+CD127- Т-клеток в динамике цикла не меняется. При сравнительном анализе, проведенном у женщин, установили, что у женщин с бесплодием количество регуляторных Т-клеток в крови и эндометрии в фазу средней секреции достоверно меньше, чем у фертильных женщин. Результаты анализа корреляционной связи между количеством CD4+CD25+CD127-клеток в крови и содержанием эстрадиола выявили прямую зависимость между указанными параметрами (rs = 0,59; p = 0,04; n = 24).

Ключевые слова: бесплодие; регуляторные CD4+CD25+CD127' Т-клетки; эстрадиол; периферическая кровь; эндометриальная ткань.

Khonina N.A.1, Seledtsova N.V2, Tikhonova M.A. \ Ovsyanikova T.V2, Chernykh E.R.1

CD4+CD25+CD127- T CELLS IN FERTILE WOMEN AND WOMEN WITH UNEXPLAINED INFERTILITY IN DIFFERENT PHASES OF MENSTRUAL CYCLE

institute of Clinical Immunology of Russian Academy of Medical Sciences of Siberian Branch, 630099, Novosibirsk, Russia; institute of chemical Biology & Fundamental Medicine of Russian Academy Medical Sciences of Siberian Branch, 630090, Novosibirsk, Russia

The fluctuation of CD4+CD25+CD127- T-cells in a peripheral, menstrual blood and an endometrial tissue in different phases of a normal menstrual cycle of healthy fertile women (n = 12) and women with unexplained infertility (n = 12) was evaluated. The data has showed the increase in number of T-cell in peripheral blood and endometrial tissue in fertile women in peri-implantation phase. In women with infertility number of CD4+CD25+CD127- T cells does not change in the dynamics of the menstrual cycle. The comparative analysis has shown that women with infertility has significantly decreased number CD4+CD25+CD127- T-cell both in peripheral blood and endometrial tissue. The analyses of correlation between CD4+CD25+CD127- blood cells and estradiol revealed a direct relationship between these parameters (rs = 0,59; p = 0,04; n = 24). S

Key words: infertility; regulatory CD4+CD25+CD127~ T-cells; estradiol; peripheral blood; endometrial tissue

Одним из приоритетных направлений репродуктивной иммунологии является изучение основных механизмов, контролирующих индукцию иммунологической толерантности. В этом аспекте важную роль отводят популяции регуляторных OD4+cD25+Т-клеток (Treg), которые участвуют в формировании иммуносупрессорного фона при беременности, что позволяет имплантироваться и развиваться полуаллогенному плоду. Сообщения последних лет о способности Treg ингибировать цитотоксическую активность CD8 Т-лимфоцитов и натуральных киллерных клеток (НК) позволили рассматривать Treg в качестве основных претендентов на роль клеток, контролирующих баланс в системе мать - плод [1]. Имеются данные, показывающие, что низкая экспрессия рецептора интерлейкина (IL)-7 (CD127) с коэкспрессией CD25 характерна

Для корреспонденции: Хонина Наталья Алексеевна, e mail: nkhonina@mail.ru.

For correspondence: Khonina Natalya Alekseevna, e-mail: nkhonina@mail.ru

для Treg, которые характеризуются анергией и способны су-прессировать ответ Т-клеток на аллоантигены в культурах in vitro [2, 3].

Супрессорный эффект Treg может иметь важное значение в ограничении нормального иммунного ответа, например, к аллоантигенам отца при беременности. В литературе представлено достаточно данных об иммунорегуляторной роли CD4+CD25+-клеток, в том числе подтверждающих их значение в формировании иммунологической толерантности при беременности. Известно, что физиологическое течение беременности сопровождается повышением содержания CD4+CD25+-клеток, а развитие гестационных осложнений ассоциировано с его снижением [4, 5]. В последние годы появились данные о повышении уровня CD4+CD25+CD127-клеток в крови у беременных и его снижении в децидуальной ткани у женщин со спонтанными выкидышами [6]. Согласно результатам исследований последних лет, роль Treg в репродуктивном процессе не ограничивается индукцией толерантности к аллоантигенам плода во время беременности, не исключается их участие

- 151 -

ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014

Содержание (в %) CD4+CD25+CD127- Т-клеток в периферической крови и эндометриальной ткани у женщин в динамике менструального цикла.

Количество t-клеток в периферической крови (а) и в эндометриальной ткани (б) фертильных женщин; количество t-клеток в периферической крови (в) и в эндометриальной ткани (г) женщин с бесплодием. 1 - фолликулярная фаза; 2 - фаза средней секреции.

в формировании системной [7, 8], локальной [9] иммуносупрессии в периовуляторный период. В экспериментальных работах показано, что перенос CD4+CD25+-клеток от здоровых беременных мышей на 1-2-й день самкам с дефицитом Treg (DBA/2J) предотвращал выкидыши и способствовал развитию беременности [10]. Очевидно, дефицит Treg в периовуляторном периоде ассоциирован с нарушением имплантации эмбриона и последующим выкидышем.

Вероятно, накопление естественных и активация индуцибельных Treg в период “открытия имплантационного окна” находятся под контролем половых гормонов. Из данных литературы известно о вариабельности Т-, В-лимфоцитов, НК [11], дендритных клеток [12] и CD4+cD25+FoxP3-клеток [7] в динамике менструального цикла у здоровых женщин, а в культурах in vitro показано прямое влияние эстрадиола [13] на генерацию CD4+CD25+-клеток. Однако исследования по содержанию Treg в эндометрии в различные фазы цикла в норме и при патологии репродукции отсутствуют. В нашей работе планируется провести комплексное исследование содержания CD4+CD25+CD127--клеток в периферической циркуляции и эндометриальной ткани в динамике менструального цикла у фертильных женщин и пациенток с бесплодием неясного генеза.

Материалы и методы. Обследованы 12 женщин с бесплодием неясного генеза (1-я группа) и 12 фертильных женщин, имеющих детей (2-я группа, контроль). На момент исследования у женщин с бесплодием не выявили причину инфертильности (регулярный овуляторный менструальный цикл, проходимость маточных труб, фертильная сперма партнера, отсутствие анатомических дефектов репродуктивных органов, отсутствие гинекологических и эндокринных заболеваний). Средний возраст женщин в 1-й группе составил 29,5 ± 2,9 года, в контрольной - 30,2 ± 1,3 года. Все манипуляции у женщин из обеих групп осуществляли с их информированного согласия. Факт овуляции оценивали с помощью динамической фолликулометрии. У всех женщин провели исследование содержания гормонов в сыворотке крови - эстрадиола (2-4-й день цикла) и прогестерона (2-4-й и 22-24-й дни цикла).

Иммунологическое обследование проводили дважды - в фолликулярную фазу (2-4-й день) и фазу средней секреции (5-7-й день после овуляции) менструального цикла. Для исследования у женщин забирали венозную кровь, менструальную кровь с помощью стерильного шприца и биоптат эндометриальной ткани, который получали путем аспирации с помощью внутриматочного зонда «Пай-пель». Биоптаты помещали в холодный физиологический раствор, затем механически измельчали и фильтровали через стальное сито. Затем из крови и биоптата выделяли мононуклеарные клетки (МНК) в градиенте плотности фиколла-верографина. Содержание регуляторных Treg Т-клеток (CD4+CD25+CD127-) оценивали методом проточной цитометрии с использованием коктейля антител (Becton Dickinson, США) с применением программы Cell Quest.

Статистическую обработку полученных результатов проводили, используя программу “STATISTICA 6.0”. Сравнение вариационных рядов осуществляли с помощью непараметрического С-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. Достоверность различия частоты встречаемости признака определяли, используя метод х2. Корреляционный анализ проводили методом ранговой корреляции Спирмена.

Результаты. При исследовании содержания CD4+ CD25+CD127--клеток у фертильных женщин в периферической крови в начале цикла (фолликулярная фаза) и периову-ляторный период (фаза средней секреции) установили, что

количество Treg достоверно возрастает в динамике цикла (см. рисунок, а). При индивидуальном анализе увеличение количества CD4+CD25+CD127--клеток в периферической крови регистрировали у 77% женщин. Аналогичные изменения выявили при исследовании уровня CD4+CD25+CD127--клеток в эндометриальной ткани, что проявилось достоверно более высоким содержанием Treg в эндометрии в периову-ляторном периоде по сравнению с таковым в менструальной крови у женщин в начале цикла (см. рисунок, б). При этом повышение количества CD4+CD25+CDl27--клеток отметили у 86% женщин. При сравнительном анализе содержания CD4+CD25+CD127--клеток в фолликулярной фазе цикла выявили тенденцию к более высокому количеству Treg в менструальной крови по сравнению с таковым в периферической крови (см. таблицу). Причем если в начале цикла содержание CD4+CD25+CD127--клеток в менструальной и периферической крови различается на 18%, то в периовуляторный период в эндометрии накапливается на 32% больше клеток, чем в циркуляции (х=0,02). Полученные данные впервые продемонстрировали повышение содержания эндометриальных CD4+CD25+CD127--клеток у фертильных женщин в динамике менструального цикла, а также показали, что нарастание уровня Treg в периовуляторную фазу происходит как на системном, так и на локальном уровне, но в большей степени выражено в эндометриальной ткани.

Результаты исследований, проведенных у женщин с бесплодием, не выявили значимых изменений в содержании циркулирующих CD4+CD25+CD127--клеток в динамике цикла (см. рисунок, в). При индивидуальном анализе повышение доли Treg в периферической крови регистрировали только у 27% женщин. Достоверных различий в содержании CD4+CD25+CD127--клеток в менструальной крови у женщин в начале цикла и эндометриальной ткани в периовуляторный период также не обнаружили (см. рисунок, г). Только у 25% женщин увеличивалось количество Treg в эндометрии в динамике цикла. Содержание циркулирующих и эндометриальных Treg в фолликулярной и

- 152 -

ИММУНОЛОГИЯ РЕПРОДУКЦИИ

Содержание (...) CD4+CD25+CD127--ktotok в периферической крови и эндометрии у фертильных женщин и женщин с бесплодием

Группа женщин Периферическая кровь Эндометриальная ткань

Параметр фолликулярная фаза фаза средней секреции фолликулярная фаза фаза средней секреции

CD4+CD25+CD127- 1-я (бесплодие) „ сл Р НО р со 5,3±0,7** 5,0 4,4±0,5** 4,1 5,2±1,3** 4,2

2-я (контроль) 6,5±0,7 7,0 9,6±1,1* 11,0 7,7±1,0 7,5 12,7±1,5* 12,5

Примечание. p < 0,05: * - различия показателей у женщин в динамике менструального цикла, ** - у женщин с бесплодием и фертильных женщин.

периовуляторной фазах цикла также не различалось. Следовательно, в отличие от фертильных женщин у женщин с бесплодием количество Treg в периферической циркуляции и эндометриальной ткани в динамике менструального цикла не увеличивается.

При сравнительном анализе содержания CD4+CD25+CD127--клеток, проведенном у фертильных женщин и пациенток с бесплодием, выявили различия в количестве циркулирующих Treg (см. таблицу). Если в фолликулярной фазе цикла у женщин с бесплодием отметили тенденцию к более низкому количеству Treg (в 1,4 раза), то в периовуляторный период различия усиливались (в 1,8 раза) и становились значимыми. При этом у женщин с бесплодием содержание Treg в периовуляторном периоде осталось меньше, чем у фертильных женщин в начале цикла (5,3 ± 0,7 против 6,5 ± 0,7). Аналогичные различия выявили при сравнительном анализе содержания CD4+CD25+CD127--клеток в эндометрии в оп-позитных группах женщин. При бесплодии уровень Treg в менструальной крови был достоверно ниже (в 1,7 раза), чем у фертильных женщин. Так как у женщин с бесплодием количество CD4+CD25+CD127--клеток в фазу средней секреции не меняется, то различия в содержании Treg в периовулятор-ный период в группах еще более увеличиваются. В итоге в эндометрии у женщин с бесплодием зарегистрировали в 2,4 раза меньше CD4+CD25+CD127--клеток, чем в оппозитной группе. Как показали результаты сравнительного анализа, у женщин с бесплодием количество Treg в эндометрии в пе-риовуляторную фазу остается меньше, чем у фертильных женщин в менструальной крови в начале цикла (5,2 ± 1,3 против 7,7 ± 1). Так, у 2/3 женщин с бесплодием содержание CD4+CD25+CD127--клеток в эндометрии не достигает нижней границы интерквартильного диапазона Treg в менструальной крови у фертильных женщин, различия достоверны (Х2=0,04). Таким образом, женщины с бесплодием характеризуются более низким содержанием Treg в различные фазы цикла, чем фертильные женщины. При этом количество Treg в периовуляторный период у женщин с бесплодием остается меньше, чем у фертильных женщин в начале цикла.

Согласно данным фолликулометрии у женщин, включенных в исследование, регистрировали овуляторный цикл, что предполагает достаточный уровень продукции репродуктивных гормонов. Поэтому можно предположить, что вариабельность содержания Treg в динамике менструального цикла зависит от концентрации эстрадиола и прогестерона в крови. В общей группе женщин уровень эстрадиола, определяемый на 2-4-й день цикла, варьировал в пределах референсных значений (60-587 пмоль/л), составив в среднем 253 ± 45 пмоль/л. При анализе корреляционной связи между содержанием эстрадиола и количеством CD4+CD25+CD127--клеток в крови в фолликулярной фазе цикла выявили прямую зависимость между указанными параметрами (rs=0,59; p=0,04; n=24). Уровень прогестерона в фазу средней секреции у всех женщин, за исключением одной, варьировал в пределах референсных значений (23,759,8 нмоль/л). Но корреляционной зависимости между количеством CD4+CD25+CD127--клеток и уровнем прогестерона не отметили (r=0,46; p=0,2; n=24).

Обсуждение. Полученные результаты продемонстрировали изменения содержания CD4+CD25+CD127--клеток в периферической крови в зависимости от фаз менструального цикла у фертильных женщин. Аналогичные данные по нарастанию количества CD4+CD25+FoxP3+-клеток в периферической циркуляции в периовуляторный период представлены L. Arruvito и соавт. [7]. Но, как известно, наиболее значимые изменения в периим-плантационный период происходят непосредственно в эндометрии. Показано, что рецептивность эндометрия повышается в период “открытия имплантационного окна”, который соответствует фазе средней секреции менструального цикла. Поэтому в своей работе мы расширили исследования и проанализировали динамику содержания CD4+CD25+CD127--клеток не только в периферической циркуляции, но и в эндометрии. Впервые показали закономерные изменения содержания эндометриальных cD4+cD25+cD127--клеток в разные фазы цикла и максимальное увеличение их количества в периовуляторный период.

В последние годы представления о функциях Treg значительно расширились. Получены данные о способности Foxp3+-клеток подавлять продукцию провоспалительных цитокинов, в частности IL-17 [14], и улучшать микроциркуляцию, препятствуя тромбообразованию [15]. Согласно экспериментальным данным, cD4+cD25+ Treg способны повышать функциональную активность эндотелиальных клеток посредством ингибиции NADH-оксидазной активности [16]. В свою очередь эндотелиальные клетки повышают супрессорную функцию CD4+CD25+FoxP3+-клеток [17]. Таким образом, данные литературы свидетельствуют о том, что роль Treg в репродукции не ограничивается супрессорной функцией, важным моментом является их участие в контроле над балансом про- и противовоспалительных цитокинов и улучшении реологических свойств крови.

В настоящей работе впервые показано, что увеличение количества CD4+CD25+CDl27--клеток в динамике менструального цикла характерно только при сохранной репродуктивной функции и не регистрируется при бесплодии. При этом результаты комплексных исследований, одновременно проведенных на системном уровне, в периферической крови, и локально, в эндометриальной ткани, позволили в целом оценить динамику содержания Treg: отмечено значимо более низкое количество CD4+CD25+CD127-клеток в периферической крови и эндометрии у женщин с бесплодием в разные фазы цикла. Полученные результаты согласуются с данными других исследователей, которые продемонстрировали, что в отличие от фертильных женщин у женщин с бесплодием количество циркулирующих CD4+CD25+FoxP3+-клеток в периовуляторный период увеличивается незначительно и сопоставимо с таковым у женщин в менопаузе [7]. На значительное снижение доли CD4+CD25+FoxP3+-клеток в эндометрии у женщин с бесплодием указывают также данные M. Jasper и соавт. [9]. Полученные результаты в совокупности с данными литературы позволяют рассматривать дефицит содержания регуляторных Т-клеток в периовуляторный период как одного из факторов, вовлеченных в патогенез бесплодия.

Известно, что продукция репродуктивных гормонов значительно меняется в динамике менструального цикла, что может иметь большое значение для генерации Treg. Выявленная нами тесная корреляционная взаимосвязь между содержанием CD4+CD25+CD127--клеток в крови и уровнем эстрадиола свидетельствует о том, что генерация Treg регулируется эстрогенами. Поскольку у всех женщин уровень эстрадиола в сыворотке крови колебался в пределах нормы и не различался в группах, то низкое количество CD4+CD25+CD127--клеток у женщин с бесплодием может быть ассоциировано с дефицитом рецепторов к эстрадиолу на Treg. Таким образом, влияние половых гормонов

- 153 -

ИММУНОЛОГИЯ № 3, 2014

на формирование иммуносупрессорного фона может осуществляться опосредованно, через индукцию генерации регуляторных Т-клеток с супрессорной активностью.

В заключение следует отметить важность проведения дальнейших исследований роли Treg в репродуктивном процессе не только с целью получения новых теоретических данных, но и в практических целях. Так, недавно показано, что проведение аллоиммунизации лимфоцитами партнера для профилактики и лечения невынашивания беременности [18] сопровождается повышением содержания CD4+CD25hgh-клеток в периферической крови [19]. Кроме того, работы in vitro по влиянию иммуноглобулина на генерацию treg продемонстрировали значительное увеличение экспрессии тРНК трансформирующего фактора роста в, IL-10 и FOXP3 [20]. В одном из исследований отмечена способность аналога витамина D (TX527) непосредственно усиливать супресссорные свойства CD4+CD25+CD127--клеток [21].

Полученные нами данные о низком содержании Treg в биоматериале у женщин с бесплодием неясного генеза позволяют рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127--клеток в крови и эндометрии как диагностический биомаркер иммунологической формы бесплодия. Дальнейшее исследование Treg в норме и при патологии репродуктивной сферы может способствовать не только более полному пониманию механизмов иммунопатогенеза заболеваний репродуктивного тракта, но и стать предпосылкой эффективной иммунокоррекции выявленных нарушений.

ЛИТЕРАТУРА

1. Trzonkowski P., Szmit Е., Mysliwska J. CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit human cytototoxic activity of CTL and NK cells in humans impact of immunosenescence. Clin. Immunol. 2006; 119: 307-16.

2. Bayer A.L., Lee J.Y., de la Barrera A., Surh C.D., Malek T.R. A function for IL-7R for CD4+CD25+Foxp3+ T regulatory cells. J. Immunol. 2008; 181: 225-34.

3. Liu W., Putnam A.L., Xu-Yu Z., Szot G.L., Lee M.R., Zhu S. et al. CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ Treg cells. J. Exp. Med. 2006; 203(7): 1701-11.

4. Mei S., Tan J., Chen H., Chen Y., Zhang J. Changes of CD4+CD25high regulatory T cells and FOXP3 expression in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. and Steril. 2010; 94(6): 2244-7.

5. Winger E.E., Reed J.L. Foxp3+CD25+ low circulating CD4+ T -regulatory cell levels predict miscarriage risk in newly pregnant women with a history of failure. Am. J. Reprod. Immunol. 2011; 66(4): 320-8.

6. Bao S.H., Wang X.P., De Lin Q., Wang W.J., Yin G.J., Qiu L.H. Decidual CD4+CD25+CD127dim/-regulatory T cells in patients with unexplained recurrent spontaneous miscarriage. Eur. J. Ob-stetr. Gynecol. Reprod. Biol. 2011; 55(1): 94-8.

7. Arruvito L., Sanz M., Banham A.H., Fainboim L. Expansion of CD4+CD25+ and FOXP3+ regulatory T cells during the follicular phase of the menstrual cycle: implications for human reproduction. J. Immunol. 2007; 178: 2572-8.

8. Хонина Н.А., Тихонова М.А., Дзуцева И.Б., Пасман Н.М., Останин А.А., Черных Е.Р. Иммунные дисфункции у женщин с бесплодием неясного генеза и метод их коррекции. Медицинская иммунология. 2010; 12(6): 511-20.

9. Jasper M.J., Tremellen R.P., Robertson S.A. Primary unexplained infertility is associated with reduced expression of the T-regulatory cell transcription factor FoxP3 in endometrial tissue. Mol. Hum. Reprod. 2006; 12: 301-8.

10. Yin Y., Han X., Shi Q., Zhao Y., He Y. Adoptive transfer of CD4+CD25+ regulatory T cells for prevention and treatment of spontaneous abortion. Eur. J. Obstetr. Gynecol. Reprod. Biol. 2012; 161(2): 177-81.

11. Lee S., Kim J., Jang B. Fluctuation of peripheral blood T, B, and

NK cells during a menstrual cycle of normal healthy women. J. Immunol. 2010; 185: 756-62.

12. Schulke L.F., Manconi R., Markham I.S. Endometrial dendritic cell populations during the normal menstrual cycle. Hum. Reprod. 2008; 23(7): 1574-80.

13. Tai P., Wang J., Jin H., Song X., Yan J., Kang Y. et al. Induction of regulatory T cells by physiological level estrogen. J. Cell. Physiol. 2008; 214(2): 456-64.

14. Lee S.K., Kim J.Y., Hur S.E., Kim C.J., Na B.J., Lee M. et al. An imbalance in interleukin-17-producing T and Foxp3 regulatory T cells in women with idiopathic recurrent pregnancy loss. Hum. Reprod. 2011; 26(11): 2964-71.

15. He S., Li M., Ma X., Lin J., Li D. CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells protect the proinflammatory activation of human umbilical vein endothelial cells. Arteroscler. Thromb.Vasc. Biol. 2010; 30: 2621-30.

16. Kassan M., Galan M., Partyka M., Trebak M., Matrougui.K. Interleukin-10 released by CD4CD25 natural regulatory T cells improves microvascular endothelial function through inhibition of NADPH oxidase activity in hypertensive mice. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2011; 31: 2534-42.

17. Bedke Т, Pretsch L., Karakhanova S., Enk A.H., Mahnke

K. Endothelial cells augment the suppressive function of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells: Involvement of programmed death-1 and IL-10. J. Immunol. 2010; 184: 5562-70.

18. Khonina N.A., Broitman E.V, Shevela E.Y., Pasman N.M., Chernykh E.R. Mixed lymptocyte reaction blocking factors (MRL-bf) as potential biomarker for indication and efficacy of paternal lymphocyte immunization in recurrent spontaneous abortion. Arch. Cynecol. Obstetr. 2013; 288: 933-7.

19. Hui Yang, Lihua Qui, Wen Di, Aiming Zhao, Guangjie Chen, Ke Hu et al. Proportional change of CD4+CD25+ regulatory T cells after lymphocyte therapy in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. and Steril. 2009; 92: 301-5.

20. Kessel A., Ammuri H., Peri R., Pavlotzky E.R., Blank M., Shoen-feld Y. et al. Intravenous immunoglobulin therapy affects T regulatory cells by increasing their suppressive function. J. Immunol. 2007; 179(8): 5571-5.

21. Baeke F., Korf H., Overbergh L., Verstuyf A., Thorrez L., Van Lommel L. et al. The vitamin D analog, TX527, promotes a human CD4+CD25highCD127low regulatory T cell profile and induces a migratory signature specific for homing to sites of inflammation. J. Immunol. 2011; 186(1): 132-2.

Поступила 20.11.13

REFERENCES

1. Trzonkowski P., Szmit E., Mysliwska J. CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit human cytototoxic activity of CTL and NK cells in humans impact of immunosenescence. Clin. Immunol. 2006; 119: 307-16.

2. Bayer A.L., Lee J.Y., de la Barrera A., Surh C.D., Malek T.R. A function for IL-7R for CD4+CD25+Foxp3+ T regulatory cells. J. Immunol. 2008; 181: 225-4.

3. Liu W., Putnam A.L., Xu-Yu Z., Szot G.L., Lee M.R., Zhu S. et al. CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ Treg cells. J. Exp. Med. 2006; 203(7): 1701-11.

4. Mei S., Tan J., Chen H., Chen Y., Zhang J. Changes of CD4+CD25high regulatory T cells and FOXP3 expression in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. and Steril. 2010; 94(6): 2244-7.

5. Winger E.E., Reed J.L. Foxp3+CD25+ low circulating CD4+ T -regulatory cell levels predict miscarriage risk in newly pregnant women with a history of failure. Am. J. Reprod. Immunol. 2011; 66(4): 320-8.

6. Bao S.H., Wang X.P., De Lin Q., Wang W.J., Yin G.J., Qiu

L. H. Decidual CD4+CD25+CD127dim/-regulatory T cells in patients with unexplained recurrent spontaneous miscarriage.

- 154

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ АЛЛЕРГОЛОГИЯ

Eur. J. Obstetr. Gynecol. Reprod. Biol. 2011; 55(1): 94-8.

7. Arruvito L., Sanz M., Banham A.H., Fainboim L. Expansion of cD4+cD25+ and FOXP3+ regulatory T cells during the follicular phase of the menstrual cycle: implications for human reproduction. J. Immunol. 2007; 178: 2572-8.

8. Khonina N.A., Tikhonova M.A, Dzutseva I.B., Pasman N.M., Ostanin A.A., Chernykh E.R. Immune dysfunctions in women with unexplained infertility. Meditsinskaya immunologiya. 2010; 12(6): 511-20. (in Russian)

9. Jasper M.J., Tremellen R.P., Robertson S.A. Primary unexplained infertility is associated with reduced expression of the T-regulatory cell transcription factor FoxP3 in endometrial tissue. Mol. Hum. Reprod. 2006; 12: 301-8.

10. Yin Y., Han X., Shi Q., Zhao Y., He Y. Adoptive transfer of CD4+CD25+ regulatory T cells for prevention and treatment of spontaneous abortion. Eur. J. Obstetr. Gynecol. Reprod. Biol. 2012; 161(2): 177-81.

11. Lee S., Kim J., Jang B. Fluctuation of peripheral blood T, B, and NK cells during a menstrual cycle of normal healthy women. J. Immunol. 2010; 185: 756-62.

12. Schulke L.F., Manconi R., Markham I.S. Endometrial dendritic cell populations during the normal menstrual cycle. Hum. Reprod. 2008; 23(7): 1574-80.

13. Tai P., Wang J., Jin H., Song X., Yan J., Kang Y et al. Induction of regulatory T cells by physiological level estrogen. J. Cell. Physiol. 2008; 214(2): 456-64.

14. Lee S.K., Kim J.Y, Hur S.E., Kim C.J., Na B.J., Lee M. et al. An imbalance in interleukin-17-producing T and Foxp3 regulatory T cells in women with idiopathic recurrent pregnancy loss. Hum. Reprod. 2011; 26(11): 2964-71.

15. He S., Li M., Ma X., Lin J., Li D. CD4+CD25+Foxp3+ regulatory

T cells protect the proinflammatory activation of human umbilical vein endothelial cells. Arteroscler. Thromb.Vasc. Biol. 2010; 30: 2621-30.

16. Kassan M., Galan M., Partyka M., Trebak M., Matrougui.K. Interleukin-10 released by CD4CD25 natural regulatory T cells improves microvascular endothelial function through inhibition of NADPH oxidase activity in hypertensive mice. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2011; 31: 2534-42.

17. Bedke Т, Pretsch L., Karakhanova S., Enk A.H., Mahnke K. Endothelial cells augment the suppressive function of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cells: Involvement of programmed death-1 and IL-10. J. Immunol. 2010; 184: 5562-70.

18. Khonina N.A., Broitman E.V., Shevela E.Y., Pasman N.M., Chernykh E.R. Mixed lymptocyte reaction blocking factors (MRL-bf) as potential biomarker for indication and efficacy of paternal lymphocyte immunization in recurrent spontaneous abortion. Arch. Cynecol. Obstetr. 2013; 288: 933-7.

19. Hui Yang, Lihua Qui, Wen Di, Aiming Zhao, Guangjie Chen, Ke Hu et al. Proportional change of CD4+CD25+ regulatory T cells after lymphocyte therapy in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. and Steril. 2009; 92: 301-5.

20. Kessel A., Ammuri H., Peri R., Pavlotzky E.R., Blank M., Shoen-feld Y. et al. Intravenous immunoglobulin therapy affects T regulatory cells by increasing their suppressive function. J. Immunol. 2007; 179(8): 5571-5.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

21. Baeke F., Korf H., Overbergh L., Verstuyf A., Thorrez L., Van Lommel L. et al. The vitamin D analog, Tx527, promotes a human CD4+CD25highCD127low regulatory T cell profile and induces a migratory signature specific for homing to sites of inflammation. J. Immunol. 2011; 186(1): 132-42.

Received 20.11.13

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ АЛЛЕРГОЛОГИЯ

Шершакова Н.Н., Бабахин А.А., Башкатова Е.Н., Камышников О.Ю., Андреев С.М., Шилов-ский И.П., Хаитов М.Р.

аллергенспецифическая иммунотерапия при экспериментальном атопическом дерматите

ФГБУ ГНЦ «Институт иммунологии» ФМБА России, 115478, г Москва

Атопический дерматит (Ад) представляет собой широко распространенное аллергическое заболевание кожного покрова. Профилактика и лечение аллергических заболеваний, в частности Ад, является важной проблемой в аллергологии. В настоящей работе осуществлена попытка проведения экспериментальной аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ) на модели Ад модифицированным (сукцинилирование) и немодифицированным аллергеном. Использована модель Ад на мышах, основанная на эпидермальном введении (сенсибилизация) модельного аллергена овальбумина (ОА). Выявлено, что проведение АСИТ как модифицированным, так и немодифицированным аллергеном ОА понижает уровень аллергенспецифических IgE-антител, а также соотношение как IgG1/IgG2а, так и интерлейкина-4/интерферона-у. При гистологическом анализе образцов кожи установили, что АСИТ улучшает гистологическую картину, снижая аллергическое воспаление, причем модифицированный аллерген оказался более эффективным, чем немодифицированный. Таким образом, можно полагать, что проведение АСИТ мономерным ал-лергоидом (модифицированное сукцинилирование ОА) является перспективным направлением терапии Ад.

Ключевые слова: атопический дерматит; мышиная модель АД; овальбумин; аллергенспецифическая иммунотерапия; модифицированный аллерген.

Для корреспонденции: Шершакова Надежда Николаевна, e-mail: nsh18.81@mail.ru For correspondence: Shershakova Nadezhda Nikolaevna, e-mail: nsh18.81@mail.ru

- 155 -