CC BY
14
й-2004
БЮЛЛЕТЕНЬ ВОЛГОГРАДСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РАМН
УДК 616 ИМ- 008 6 - 036 IV 12 - 091 575
СОДЕРЖАНИЕ РНК И ЛНК В НЕЙРОНАХ ВЕГЕТАТИВ11ЫХ ГАНГЛИЕВ ПРИ ОСТРОМ И ХРОНИЧЕСКОМ ЭНЛОТОКСИКОЗЕ
И.И. Фро.юв. Д.А. Соснин. А.II. Горячев. В.Н. Повочалов
Оник'Ч общей и экспериментальной патологии ВИЦ РАМН и Администрации Волгоградский области л
Хронический знлотоксикоз (ЭТ) вызывает ком цдексные изменения тканевого м-паболизма бел ков и липилов в органах мишенях: печени, легких сердце. почках |3-5|. что не может не отразиться на нуклеиновом обмене С другой стороны, вегетативная регуляция оказывается одним из важных факторов в развитии хронического эндотоксикоза [2.6.8.10|. ¡Изменение же содержания Р11К и/11 Ж в нейронах вегетативного отдела энлотоксикоза на настоящий момент изучено недостаточно |7. 9|
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучение информативности тканевого 1>.>а ![*> деления РНК и ЛНК в ней{хэнах перифе])мш!ских и паравертеб^тльных вегетативных ганглиев с по мошью методов количественной гистохимии как критерия степени и ха|>актера патологических из менений в них при 1«звитии хищнического эндо токсикоза.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Для моделирования процессов хронического энлотоксикоза были использованы 15 кошек (5 животных составляли контрольную группу). Кош ки ежедневно получали перорально по 0.5 м.ч/кг массы 30 масляного раствора тетрахлорметана и инъекции липополисахарида 5 ТЬурЫтипшп по 0,2 мг/кг массы еженедельно [3|. Животные выво дались на 30 е сутки с начала эксперимента путем передозировки нембутала
Серийные срезы ткани, содержащей элементы вегетативной нервной системы, окрашивались ме гиловым зеленым по Браше (1)ис. 1). С помощью ком пьютерного аппаратного комплекса «Видеотест Мофо 4.0» проводились измерения средней и щгтегратвной яркости. дивергенции, средней и ии гефативной оптической плотности окраски ядер и цитоплазмы нейронов паравертебральных ганглиев и околосердечных нервных элементов |1|. Лля ана лиза изменения ЛНК использовалось свойство дуа лизма окраски метилового зеленого: данный краситель окрашивает ЛНК в зеленый, а РНК н розовый Исходя из данных аппаратного комплекса о составе цвета можно провести анализ не только РНК. но и ЛНК. Дтя отражения содержания последней была взята величина коэффициента /II Ж: произведение яркости окраски ядра на долю зеленого цвета
Базисные показатели при градиентном исследо вании заключались в построении усредненной фун кши танкториальных свойств по каждому краси телю в трех направлениях краниокаулальном, дорсовентральном и транс версальном с помошью орнтнатьной программы Видгоу 1 1 (2001).
Рис. I ^-¡агмет паравергеб/талыюго сичшгичеснти ганглия кошьи ш уровне С7 окрашенный на РНК ЗОе сутки хроннчеал тЭТ Высокое сояержанне И (К в пернкарнонах ганглионтон. относительно млюе н ц/тш-шме к ьчхж-сательтж Увел. 420.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Полученные результаты морфометрии привело ны в табл. 1.
Как видно из таблицы цитоплазма околосердечных нейронов и нейронов паравертебральных тан глиев окрашивалась интенсивнее у животных опыт ной группы по сравнению г контрольной. Окраска ядрышек была более интенсивной в нейронах па-равертебральных ганглиев, по сравнению с около сердечными нейронами, оба показателя практически не изменялись при хроническом ЭТ. Оптическая плотность цитоплазмы нейронов тех и других ганглиев при окраске по Браше была более низкой при ЭТ в сравнении с контролем. Что касается средне т отклонения яркости, то. как в ядрышках, так и в цитоплазме околосердечных нейронов, она имела большую величину в опытной группе по сумвне нию с контрольной. Для нейронов паравертебраль ных ганглиев было выявлено обратное соотноше ние. Величина отношения яркости ядрышка к цитоплазме косвенно отражает степень разнообра зия белка, синтезируемого в метке. Она оказыва лась больше в контроле лля нейронов сердечных ганглиев, и меньше - дтя нейронов паравертебраль ных ганглиев Коэффициент ЛНК в нейронах па расимпатических и симпатических ганглиев был больше у животных опытных групп
ЬЮМПЫЖЬ 1кУ11' н НАДСКОГО НЛУЧнбГОШН1РЛРЙИГ У26651
Таблица 1
Количественные показатели распределения ЛИК и Р1 !К в ней|х>нах вегетативных ганглиев сердца и паравертебральных ганглиев на уровне С61Ъ2 кошек в норме и при хроническом эндотоксикоэе
Параметры Нейроны околосердечных ганглиев Нейроны паравертеСцэальных ганглиев
Контроль ЭТ Контроль ЭТ
Ср яркость окраски цитоплазмы 183.3+4.4 197.2+4.1* 177.7+4.1 197.5+4.3*
Ср яркость окраски ядрышек 129,3+2.8 123,1+2.9 195.83+4.2 193,0+4.3
Отн яркости ядрышко/цитоплазма 0.82+0.02 0.88+0.02* 1.10+0,05 0.97+0.04*
Опт. плотность окраски цитоплазмы 0.14+0.01 0.13+0.01 0.17+0.01 0.11+0.01*
Опт. п/ютность окраски ядрышек 0.33+0.04 0.15+0.02* 0.18+0,02 0.12+0.01*
Откл яркости цитоплазмы 4.83+0.21 6.09+0,22* 11,41+0.04 9.03+0.04*
Отел, яркости ядрышек 5.15+ 0.16 5.50+0.10* 7.38+0.04 7.15+0.03
Коэффициент /1НК 105.45+3.70 136.25+4.19* 60,67+2.23 75.91+2.15*
• Оостоверные рагшчмя \w.trity ,"р\*тими
Определялось также распределение ок|>к:ки от ядра к периферии нейрона. кото{юе показало снижение неоднородности распрелеления РНК в пе рикармоне ганглиоиитов при развитии хроничес кого ЭТ (рис. 2).
Несколько иная картина регистрировалась при исследовании продольного расире.лелния РНК на уровне целого ганглия: при ЭТ разброс интенсив ности увеличивался, регистрировалось в 2.0 3,5 больше пиков интенсивности в расчете на ганг лий (рис. 3).
Рис 2 Радиальное распределение И1К в перихарионе нейронов веи-т.ггинных ганглиев сердца калек ы норме и при хроническом энлоттжаиига
котроль
I'm 3. Продольное распределение ft Ж в паравераЧфдльных гакглннх кошек в норме и при хроническом эдлатоксикоте
лндотжмказ
«ЙШ»
ÎÎ-2QQ4
Г.ЮЛт ННЬ ВОЛГОГРАДСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РАМН
Полученные данные свидетельствуют об измене ниях организации вегег.атинных ганглиев на клеточ ном и тканевом уровне. Анализ интенсивнсмгги окраски говорит об усилении сиггтеза РНК в нейронах как ответ на ¡нзвитие хронического ЭТ При этом, если экгп1*?ссия РНК в ницюнах сераечных ганг лиев усиливается, то в нейронах паравертебрадь ных ганглнев аналогичный показатель уменьшается, что отражает различный способ регуляции /тих от делов вегетативной нервной системы. Сулн по ко эффиииентам ДНК. можно предположить уведиче ние ее содержания в ядрах нейронов. Возможное объяснение этому усиление репарации ЛНК как ответ на повреждение токсическими продуктами обмена, выявляемыми при х|хэническом ЭТ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1 Изменение вегетативной регуляции как ответ на развитие хронического ЭТ проявляется и изменениях содержания и тканевого [йспределе I !ия нуклеиновых кислот в тканях периферических парасимпатических и паравертебральных симпати ческих ганглиев вегетативной нервной системы,
2. Изменения содержания РНК и ЛНК в неиро нах вегетативных ганглиев при хроническом ЭТ от ража ют различия участия симпатического и пара симпатического отделов в механизмах повреждения И зашиты от эндогенных токсических соединений.
3 Ради&чьный njxxtinib интенсивности окрас ки иерикарионов на РНК и осевые профили os раски в масштабах ганглия информативны в план, оценки их морфофункпионалъных изменений пр» хроническом ЭТ
ЛИТЕРАТУРА
1 Автан/мюв Г.Г. Основы хо/шчесгеенной гшалоги ческой анатомии. NJ Медицин,». 2002. 240 с
2 АкмлчИЛ //Пег </v физиология 2001 N4 С. 3^0
3 Иивача.юв В В Паг< wrvtn липиднгко обмена пр» >нлотоксико*'. Автореферат дна доктора мед. наук Волгоград. 2001 35 с
'I Ноаамалая ЬВ. Ц Успехи современного «лист» катя - 20М - N3 - С 24
5 ПаяочлтвВ.В // Фундаментальные исслелованкм-2004 -N1. С 113 114
6. Поиоч.аон В В. Писарев ВЕ, ФръювВ И. //Вл тннх Вол1'МУ 2004 N10 С. 8 И.
7 !\%мп>н В П. ¿гкаргмн О А Чеnuiffm ИЛ и лр /
П.1ГОГИ1Г-!н nirn rtWHWH .амтомии крш>гihcxhx. I^WKHAIS. них и нгллреаннмипионнмх согтоиний: Maipp симп M 11ИИОР РАМ» \, 2003 С 93 %
Я ФратяВИ. Нотплмм ВВ. // Успехи > оирем»ч-ного есгнспмшииин 2003 N5 С 94 %
9 (¿mi .'V Slern EL Kristensson К . et al.//
.1 Ne.m»r»miiiol 21Ю2 VoJ. 131 N1 2 P, 83 91.
10. ТалдХ. HecMND Schnumil.P //Hrairi Rev 2003 1» 97b. N2 P 185 193
©Коллектив авторов 2004
УДК 611 01Я 541 251
СРАВНИТЕЛЬНАЯ МОРФОСТЕРЕОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТКАНИ 14- И 21-ЛНЕВНЫХ ДИСТРАКШОННЫХ РЕГЕНЕРАТОВ
ГЛ. Сии|-ур
От)ея общей и чксперимеитачыти патологии ВИЦ РАМП и Аомштст/чгичи На uwptMK-mii <ю ии ти
В опытах in vivo показано, что ткань дистрак пионных регенератов яатяегсн источником мало дифференцированных клеток, обладающих способностью к хонл{югенной лифференцировке Клеточные элементы 14-дневных дистракшонных регенератов, пересаженных в область полнослой-ного повреждения суставного хряша, оказывают индуцируюшее влияние на иролиферативную ак тивногть клеток хряша и могут выступать в роли потенциального материала для восстановления де фектов хрящевой поверхности методами клеточ ной хирургии.
Малолифференцированные мезенхимальные клетки, по современным представлениям, могут являться погенииальным материалом для пластического восстановления дефектов суставного хряша методами клеточной хирургии [2. 3. 5. 6| □елью исследования явилось выявление морфо стереогистохимических критериев хонлрогенной дифференпировки клеток 14 и 21 дневных ди стракиионных регенератов трансплантированных
в зону полнослойных повреждений суставного хряша.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Матс1>иалом для исследования послужили образ пы тканей листракиионных регенератов и покров ного хряша коленных суставов собак после гтлас тики проникающих в субхондральную кость дефектов хряща
Животным производили остеотомию костей голени с последующей фиксацией и дистракцией в ап парате Илимрова до 14 или 21 дня. Затем моделировали полносдонный дефект суставного хряша и осуществляли его пластику тканью регенератов.
Исследовали ткань листракциоиных регенера тов а также при повторных артротомиях произво лили забор костно<уставных блоков ИЗ области пластики в сроки 4. 8. 16 и 24 недели. Ьиоптаты фиксировали, лекальиинировали и заливали в па рафии по общепринятым методикам Иэготавлива ли серийные срезы толщиной 3-5 микрон, кото
ф 20
