CC BY
69
Инфекционные болезни, иммунология
и иммунотерапия
УДК 616.441 - 002 : 612.017.1 Н.Н. Цибиков', А.А. Зуева3, Е.Б. Жигжитова2, Е.В. Пруткина1
СОДЕРЖАНИЕ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ, ЭНДОТЕЛИНА-1 И АУТОАНТИТЕЛ К НИМ ПРИ АУТОИММУННОМ ТИРЕОИДИТЕ
Читинская государственная медицинская академия1, 672090, ул. Горького, 39 а; 672038, ул. Коханского, 7, кафедра терапии ФПК и ППС2; 672038, ГУЗ ККБ3, ул. Коханского, 7, г. Чита
Аутоиммунный тиреоидит (АИТ) относится к орга-носпецифическим аутоиммунным заболеваниям на основании обнаружения в сыворотке крови антитиреоидных аутоантител [2]. В качестве антигенов при АИТ выступают компоненты щитовидной железы — тиреоидная пероксидаза, тиреоглобулин, ТТГ, компоненты цитозоля тиреоцитов и др. [6]. Кроме этого, заболевание сопровождается лимфоидной инфильтрацией щитовидной железы (Т-хелперы 1 типа), инвазией макрофагов, приводящей к деструкции ткани железы [1]. Многими авторами отмечено, что при АИТ значительно меняется содержание провоспалительных цитокинов в сыворотке крови, но в то же время результаты исследований противоречивы [3, 5, 8, 9].
В литературе имеются указания на усиление экспрессии генов, контролирующих синтез эндотелина-1, рецепторов к эндотелину, а также эндотелин-превраща-ющего фермента при экспериментальной патологии щитовидной железы, в частности развитии зоба, вызванного тиоурацилом и диетой с низким содержанием йода [10]. Синтез эндотелина-1 усиливается под влиянием многих факторов, в том числе цитокинов [4, 7].
В связи со сказанным, нами предпринята попытка определения в сыворотке крови у больных АИТ с различным функциональным состоянием щитовидной железы концентрации цитокинов, эндотелина-1 и аутоантител к ним.
Материалы и методы
Нами обследовано 30 больных АИТ (3 мужчин и 27 женщин) в возрасте от 28 до 58 лет (47,42±1,29) и 10 больных ДТЗ (10 женщин) в возрасте от 28 до 58 лет (44,45±1,63), проходивших стационарное лечение в условиях Эндокринологического центра Краевой клиничес-
кой больницы г. Читы. Среди пациентов с АИТ было 10 чел. в состоянии эутиреоза, 10 чел. — с субклиническим гипотиреозом и 10 чел. — с манифестным гипотиреозом. В группу ДТЗ входили пациенты с манифестным тиреотоксикозом.
Контрольную группу составили 20 практически здоровых доноров в возрасте от 26 до 58 лет (45,64±2,43) с доказанным, в результате клинико-лабораторного исследования, отсутствием тиреоидной патологии.
Уровень эндотелина-1 определяли методом твердофазного ИФА наборами фирмы «BIOMEDICA GROUP» (Германия), а концентрацию цитокинов — реактивами фирмы «Вектор-Бест», г. Новосибирск.
Уровень аутоантител к эндотелину и ИЛ-8 оценивали по оригинальной методике. Лунки полистероловых планшетов сенсибилизировали эндотелином-1 («Biomedica Group») (Германия) и ИЛ-8 («Вектор-Бест», г. Новосибирск) в количестве 100 мкг в 200 мкл забуференного физиологического раствора. После 30-минутной инкубации при комнатной температуре планшет трижды отмывали дистиллированной водой, затем вводили 200 мкл исследуемой сыворотки, разведенной в соотношении 1:100 забуфе-ренным физиологическим раствором, и после инкубации вновь трижды отмывали. Аутоантитела к эндотелину выявляли анти-IgG-человеческими антителами («Вектор-Бест», г. Новосибирск) по стандартной методике. Полученные результаты выражали в единицах оптической плотности.
Статистическая обработка проводилась при помощи пакета программ Biostat 3.03. При сравнении групп использовался критерий Манна-Уитни (Z), различия считали значимыми при р<0,05. Данные представлены в виде: Me — медианы, ДИ — интерквартильного (процентиль-ный) интервала (указан в скобках).
Результаты и обсуждение
Оказалось, что во всех группах больных АИТ наблюдалось повышение концентрации ИФ-у, причем максимальное увеличение содержания ИФ-у выявлено в группе пациентов АИТ с манифестным гипотиреозом — в 36,6 раза (р=0,004) (табл. 1). Кроме этого во всех группах возрастала концентрация ФНО-а, наиболее значимая в группе больных АИТ с эутиреодным состоянием щитовидной железы (р<0,001).
В то же время уровень ИФ-у увеличивался у больных АИТ с субклиническим и манифестным гипотиреозом и не менялся в группе пациентов АИТ с эутиреозом. Помимо этого наблюдалось увеличение концентрации ИЛ-8 и ИЛ-6 во всех группах больных, а рост уровня аутоантител к ИЛ-8 зарегистрирован в группах с субклиническим и манифестным гипотиреозом и не менялся у больных с эутиреоидным состоянием щитовидной железы.
Таким образом, полученные данные подтверждают теорию аутоиммунного воспаления в щитовидной железе. Следует обратить внимание на резкий рост провоспали-тельного цитокина ИЛ-8, обладающего хемоаттрактны-ми свойствами. Максимальный уровень этого цитокина зарегистрирован у больных АИТ манифестным гипотиреозом, но параллельно с этим наблюдается уменьшение концентрации аутоантител к ИЛ-8, по сравнению с исходными данными. Вероятно, полученные результаты свидетельствуют об истощении компенсаторного механизма, ограничивающего уровень ИЛ-8, что сопровождается рекрутацией нейтрофилов и окончательной деструкцией щитовидной железы.
Таблица 1
Уровень цитокинов и аутоантител к ИЛ-8 при аутоиммунном тиреоидите с различным функциональным состоянием щитовидной железы (Me (25-й; 75-й)
Параметры Здоровые, n=12 АИТ, эутиреоз, n=10 АИТ, субклинический гипотиреоз, n=10 АИТ, манифестный гипотиреоз, n=10
ИФ-у, пг/мл 0,41 (0,28; 0,42) 5,77 (5,57; 5,98) Z=2,104; p=0,035 2,89 (2,06; 4,12) Z=2,809; p=0,005 15,05 (11,65; 18,66) Z=2,853; p=0,004
ИФ-а, пг/мл 1,32 (0,00; 2,63) 1,1 (0,0; 11,51) Z=0,199; p=0,842 7,90 (7,90; 22,81) Z=2,284; p=0,022 7,34 (0,09; 11,85) Z=2,847; p=0,004
ФНО-а, пг/мл 0,00 (0,00; 0,00) 15,74 (4,49; 24,09) Z=3,298; p<0,001 0,00 (0,00; 0,96) Z=2,190; p=0,028 0,00 (0,00; 0,83) Z=2,024; p=0,043
ИЛ-8, пг/мл 17,96 (16,62; 35,50) 49,99 (16,24; 84,72) Z=2,014; p=0,004 61,54 (14,69; 102,54) Z=2,144; p=0,032 78,97 (19,93; 125,05) Z=2,853; p=0,004
AT к ИЛ-8, ext 0,20 (0,16; 0,24) 0,14 (0,11; 0,18) Z=0,366; p=0,714 0,15 (0,15; 0,15) Z=2,852; p=0,004 0,16 (0,15; 0,16) Z=2,853; p=0,004
ИЛ-6, пг/мл 0,93 (0,31; 1,58) 5,83 (1,61; 13,52) Z=2,665; p=0,008 3,16 (1,57; 6,55) Z=2,128; p=0,033 1,44 (1,05; 2,03) Z=2,245; p=0,025
Примечание. Z — коэффициент Манна-Уитни; р различий по сравнению с контролем.
достоверность
Резюме
Исследовали уровень цитокинов, эндотелина-1 и аутоантител к ним у больных аутоиммунным тиреоидитом (АИТ). Выявлено значительное увеличение содержания ИФ-у, ИЛ-8, ФНО-а, более выраженное у больных АИТ с манифестным гипотиреозом. Также обнаружено увеличение концентрации эндотелина-1 у больных АИТ с субклиническим гипотиреозом, при этом уровень эндотелина в остальных исследуемых группах не претерпевал изменений. Содержание аутоантител к эндотелину не менялось в группе пациентов АИТ с субклиническим гипотиреозом и снижалось в группах больных АИТ с эутиреозом и манифестным гипотиреозом.
Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит, цитокины, эндотелин-1.
N.N. Thybikov, A.A. Zueva, E.B. Zhigzhitova, E.V. Prutkina
THE LEVEL OF CYTOKINES, ENDOTHELINE-1 AND ITS AUTOANTIBODIES IN PATIENTS WITH AUTOIMMUNE THYROIDITIS
Chita State Medical Academy, Department pathophysiology, 672090, Gorkogo, 39a; Department therapy FPK and PPS, 672038, Kochanskogo, 7;
Region Clinical Hospital, 672038, Kochanskogo, 7, Chita
Summary
The level of cytokines, endotheline-1 and its autoantibod-ies in patients with autoimmune thyroidisms was studied. The noticeable increase of IFN-y, IL-8, TNF-а was detected. AIT manifestation is more expressed in patients with thyroid hypo function. Consequently, increase of the endotheline's concentration in patients with AIT subclinical thyroid hypofunction was observed; hereby in the other groups endotheline level was not changed. The content of the endotheline's autoantibodies in the groups with AIT sub clinical thyroid hypo function was not changed and it decreased in the group of patients with AIT with auto thyroidisms and manifested hypothyroidisms.
Key words: auto thyroidisms, cytokines, endotheline-1.
Возможно, максимальное увеличение ИФ-у и достаточно высокий уровень ИФ-а свидетельствуют о выраженности деструктивного процесса в щитовидной железе. Высокий уровень ФНО-а был зарегистрирован у больных АИТ с эутиреоидной функцией щитовидной желез. Данный факт, вероятно, свидетельствует о начальных стадиях заболевания и недостаточной степени компенсации, что приводит к усиленной продукции ФНО-а.
Так же нами выявлено, что концентрация эндотели-на-1 у пациентов с АИТ с субклиническим гипотиреозом увеличивалась в 3,4 раза и не изменялась у больных АИТ с эутиреозом и манифестным гипотиреозом (табл. 2). Увеличение содержания эндотелина-1 при АИТ с субклиническим гипотиреозом, вероятно, связано с активацией эндотелиальных клеток ИЛ-1, секретируемым макрофагами и Т-хелперами 1 типа, инфильтрировавшими щитовидную железу [9].
Уровень аутоантител к эндотелину не изменялся в группе больных АИТ с эутиреоидной функцией, но умень-
Таблица 2
Уровень эндотелина-1 и аутоантител к нему при аутоиммунном тиреоидите с различным функциональным состоянием щитовидной железы (Ме (25-й; 75-й)
Параметры Здоровые, n=12 АИТ, эутиреоз, n=10 АИТ, субклинический гипотиреоз, n=10 АИТ, манифестный гипотиреоз, n=10
Эндотелин-1, мг/мл 0,53 (0,16; 1,74) 0,39 (0,3; 1,39) Z=0,326; р=0,744 1,84 (1,43; 2,01) Z=2,126; р=0,034 0,70 (0,00; 0,79) Z=1,527; р=0,127
Аутоантитела к эндотелин-1, ext 0,2 (0,18; 0,31) 0,19 (0,19; 0,2) Z=0,366; p=0,714 0,18 (0,16; 0,19) Z=2,759; p=0,035 0,15 (0,15; 0,15) Z=2,852; p=0,004
Примечание. Z — коэффициент Манна-Уитни; р — достоверность различий по сравнению с контролем.
шался при АИТ с субклиническим гипотиреозом (2=2,759; р=0,035) и при АИТ с манифестным гипотиреозом (2=2,852; р=0,004). Таким образом, нами показано, что уровень эн-дотелина и содержание аутоантител к нему возрастает у больных АИТ с субклиническим гипотиреозом. Вместе с тем, ожидаемого увеличения содержания эндотелина-1 при АИТ с манифестным гипотиреозом не отмечено.
Литература
1. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Креминская В.М. Фундаментальная и клиническая тиреоидология: учеб. пос. - М.: Медицина, 2007.
2. Велданова М.В. Уроки тиреоидологии. - Петрозаводск, 2005. - 397 с.
3. Глазанова Т.В., Бубнова Л.Н., Трунин Е.М. Продукция некоторых цитокинов у больных с аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы // Проблемы эндокринологии. - 2005. - №3. - С. 29-32.
4. Гомазков О. А. Эндотелий — «эндокринное дерево» // Природа. - 2000. - № 5. - С. 5-7.
5. Зорин Н.А., Аппельганс Т.В. Сравнительное изучение уровней некоторых цитокинов, белков острой фазы, тиреотропного гормона и антител к тиреопероксидазе при лечении аутоиммунного тиреоидита // Цитокины и воспаление. - 2006. - Т.5, № 3. - С. 46-48.
6. Исаева М.А., Богатырева З.И. Аутоантитела различных уровней специфичности и функциональности в патогенезе и диагностике аутоиммунных заболеваний щитовидной железы // Клиническая и экспериментальная тиреоидология. - 2007. - Т.3. - С. 27-34.
7. Лупинская З.А. Эндотелий сосудов - основной регулятор местного кровотока // Вестник КРСУ. - 2003. -№7. - С. 23-24.
8. Маркелова Е.В., Лазанович В.В. Исследование сывороточного ИЛ-8 при диффузном токсическом зобе // Медицинская иммунология. - 2002. - Т.4, №2. - С. 204.
9. Уразова О.И., Кравец Е.Б. Апоптоз нейтрофилов и иммунорегуляторные цитокины при аутоиммунных ти-реопатиях // Клиническая и экспериментальная тиреои-дология. - 2007. - Т.3, №4. - С. 49-53.
10. Colin I.M., Nava E. Expression of nitric oxide synthase isoforms in the thyroid gland: evidence for a role of nitric oxide in vascular control during goiter formation // Endocrinology. - 1995. - Vol. 136. - P. 9860-9986.
Координаты для связи с авторами: Цыбиков На-мжил Нанзатович — зав. кафедрой патофизиологии, доктор мед. наук, профессор, тел.: 8-(3022)-35-43-24; Зуева Анна Анатольевна — аспирант кафедры патофизиологии, врач ГУЗ ККБ, e-mail: [email protected]; Жигжитова Евгения Батуевна — ассистент кафедры терапии, канд. мед. наук; Пруткина Елена Владимировна — ассистент кафедры патофизиологии, канд. мед. наук.
□□□
