CC BY
19
висимости от направления продуктивности. Для исследования были генотипированы 258 коров-первотелок голштинской породы СХПК «Г13 им. Ленина» Атнинского района. Тестирование ДНК проб крови показало, что ген SCD1 полиморфен в исследуемой популяции. В ходе работы были идентифицированы следующие ашхельные варианты и генотипы: С - 0,61 и Т - 0,39; СС - 38,4% (99 гол.)., СТ - 45,7% (118 гол.), ТТ - 15,9% (41 гол.). Тестирование методом хи-квадрат между наблюдаемым и ожидаемым распределением генотипов свидетельствует о генетическом равновесии в исследуемой популяции. По всем группам крупного рогатого скота различного направления продуктивности идентифицировано преобладание аллеля С над аллелем Т.
CATTLE STEAROYL-COA DESATURASE GENE (SCD1) POLYMORPHIC VARIANTS MONITORING DEPENDING ON THE DIRECTION OF PRODUCTIVITY
Safina N.Yu., Yulmeteva Yu.R., Shakirov Sh.K.. Akhmetov T.M.
Summary
The present study is dedicated to genotyping of Holstein heifers whit using PCR-RLFP method and cattle Stearoyl-CoA Desaturase gene allele and genotype diversity monitoring was carried out depending on the productivity direction. 258 Holstein cow-heifers of Integrated Agricultural Production Centre «Stud farm named after Lenin» of Atninsky district of Republic of Ta-tarstan were genotyped lor the study. Blood sample DNA testing showed that the SCD1 gene is polymorphic for the population under the research. In the course of work the following allelic variants and genotypes were identified: С - 0.61 and T - 0.39; CC - 38.4% (99 animals), CT- 45.7% (118 animals). TT - 15.9% (41 animals). The chi-square method testing between the observed and expected genotype distribution indicates genetic equilibrium in the population under study. For all groups of cattle of different directions of productivity, the prevalence of the С allele over the T allele.
УДК 591.1:612.12
СОДЕРЖАНИЕ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА II (NO) В ПЛАЗМЕ КРОВИ У КРЫС В РАЗНЫЕ ФАЗЫ ПОЛОВОГО ЦИКЛА
Сибгатуллин И.Т. - аспирант, Каримова Р.Г. - д.б.н., профессор ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: оксид азота, плазма крови, крыса, течка, половой цикл Key words; nitric oxide, blood plasma, rat, estrus, sexual cycle.
Одним из значительных достижений ученых стало открытие биорегулятор-ных свойств эндогенного оксида азота (II)NO. Оно явилось революцией в биологии и медицине, так как стало известно о совершенно новом типе передачи информации в организме, появилась возможность инновационного подхода в лечении огромного количества заболеваний человека и животных. Выяснилось, что оксид азота (II) является универсальным биологическим регулятором множества процессов в организме, влияя иа тонус полых ор-
ганов брюншой полости, состояние бронхов и альвеол легких, реологические свойства крови, иммунные процессы, нервно-мышечную передачу. Оксид азота (II) проявляет противовоспалительную и антиопухолевую активность, влияет на репродуктивную систему и высшую нервную деятельность человека, и животных. Я. Р. Ршч^ои и I. V. Zowadcki в 1980 году выяснили, что оксид азота (II) содержится практически во всех тканях живого организма. Его свойства в настояшее время продолжают активно изучаться и получен-
ные сведения берутся на вооружение фармакологами и клиницистами различных специальностей. Также становится очевидным неоднозначность и разнонаправ-ленность влияния оксида азота (II). Эффект воздействия определяется концентрацией оксида азота (II) [1,8,11]. Ненадлежащая регуляция уровня оксида азота (II) приводит к проявлению патологий, таких как нарушение функций сердечно-сосудистой системы, нейродегенерация, артрит, астма и септический гпок и т. д.
Известно, что оксид азота (II) принимает участие в регуляции репродуктивной системы у самок и самцов. В гипофизе он активирует секрецию лютеинизирую-щего гормона [11]. В свою очередь половые гормоны, эстрогены и андрогены стимулируют продукцию оксида азота (II), а прогестерон через свои рецепторы снижает уровень экспрессии eNOS [9]. Оксид азота (II) также индуцирует овуляцию у крыс [13]. Ввиду его многогранной роли в регу-
ляции процессов размножения в организме он был назван половым газом [11].
Исходя из вышеизложенного вопрос изучения возможной роли оксида азота (II) в регуляции полового цикла млекопитающих остается актуальным.
Цель исследования - изучить содержание метаболитов N0 в плазме крови у крыс в разные фазы полового цикла.
Материал и методы исследований. Работа выполнена на базе кафедры физиологии ФБГОУ ВО Казанская ГАВМ. Объектом исследования служили самки крыс породы \Vistar массой тела 250-295 г. Были созданы 4 группы животных, У каждой определяли фазу полового цикла, исследуя влагалищные мазки. Ежедневно с 8 до 9 утра собирали вагинальные секреты пластиковой пипеткой заполненной физиологическим раствором (КаС1 0,9 %), вставив наконечник во влагалище крысы. Вагинальную жидкость помещали на предметное стекло. Окраску мазка производили по методу Романовского-Гимза.
Рисунок-1 Микрофотографии вагинального мазка крыс при: (А) проэструсе, преимущественно состоящей из зародышевых эпителиальных клеток; (Б) эструсе с явными поверхностными безъядерными клетками; (В) метазструсе, состоящей из трех типов клеток, лейкоцитов, зародышевых эпителиальных клеток; и (Г) диэструсе, состоящей преимущественно из лейкоцитов. Где, 1 - эпителиальные клетки, 2 - лейкоциты, 3 - поверхностные безъядерные клетки.
Мазок фиксировали этиловым спиртом в течение 5-15 мин. Готовый препарат рассматривали иод микроскопом при 10-и, 40-кратном увеличении. По картине влагалищного мазка определяли фазы полового цикла. Продолжительность полового цикла крыс делает их идеальным объектом для изучения изменений, происходящих в течении полового цикла. Цикл длится четыре дня и включает в себя фазы проэструса. эструса, метаэструса и диэструса.
Фаза проэструса, или подготовительная, характеризуется кровянистыми выделениями, иногда обильными. Картина влагалищного мазка в начале фазы характеризуется большим числом округлой формы эпителиальных клеток с довольно крупными ядрами (рисунок 1а). В фазу эструса выделения из влагалища почти бесцветны или бледно-розового цвета. На препарате влагалищного мазка подавляющее большинство клеточных элементов представлено чешуйками, плоскими поверхностными эпителиальными клетками. У них нет видимого ядра, цитоплазма является зернистой (рис 16). В фазу мэтаэст-руса выделения из влагалища еще могут быть, как правило, они бесцветны, но могут быть и бледно-розового цвета. Влагалищный мазок демонстрирует незначи-
тельное количество молодых эпителиальных клеток, округлых с крупными и преобладанием лейкоцитов (рис 1в). В фазу диэструса мазок состоит прсимуществепно из лейкоцитов (рис 1г).
После определения фазы полового цикла брали кровь. Взятие крови у крыс производили из хвостовой вены. Об уровне содержания оксида азота (П) в крови судили по суммарной концентрации нитрат- и нитрит-анионов в плазме крови, которую определяли путём восстановления нитратов до нитритов однократной навеской цинковой пыли, обработанной аммиачным комплексом сульфата меди, с последующим фотометрическим определением нитритов с помощью реактива Грисса при длине волны 520,0 им на КФК — 3-10 |3|. Статистическую обработку результатов эксперимента проводили с использованием критерия ьСтьюдента, статистически значимое считали различия при уровне (р<0,05).
Результаты исследований. Ранее было установлено, что содержание нитрат-и нитрит-анионов в плазме крови у самок крыс в среднем составляет 35,57±2,58 мкмоль/л. Было установлено, чго система N0 в разных фазах полового цикла в плазме крови у крыс имеет разную активность.
Таблица 1 - Содержание метаболитов оксида азота (II) в плазме крови крыс в зависи-
мости от фазы полового цикла
Фаза полового цикла Содержание метаболитов N0 (мкмоль/л) в плазме крови
Проэструс 36,03±0,87
Эструс 36,51±0,30
Мэтаэструс 34,38*±0,51
Д и эс трус 34,99*±0,63
Примечание: * - достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,05)
В фазах проэструса и эструса в плазме крови наблюдается повышение концентрации нитрат и нитрит анионов на 1,3 % и 2,6 % соответственно, тогда как в фазах мэтаэструса и диэструса наблюдается снижение концентрация этих же анионов.
Результаты наших исследований позволили сделать следующие выводы. Содержание метаболитов оксида азота (II) в плазме крови самок крыс зависит от фазы полового цикла. Данные литературы свидетельствуют о том, что в фазах эструс и проэструс происходят процессы с высоким влиянием оксида азота (II). Наличие
оксида азота (II) в фолликулярной жидкости подтверждено у нескольких видов жи-вотных[10]. Также оксид азота (II) участвует в контроле секреции гонадотропина. который, в свою очередь, известен как ключевой регулятор конечных стадий развития фолликулов [10]. В настоящий момент эстрогены считаются наиболее изученными регуляторами еМОЙ [9]. Кроме того, результаты недавних исследований свидетельствует о вовлеченности оксида азота (II) в овуляторный процесс. Местное применение ингибиторов еМ08 подавляет процесс овуляции у крыс, что объясняется его высоким содержанием [1]. У человека сК08 была обнаружена в эпителии эндометрия во время менструации. Исходя из этою можно предположить, что оксид азота (II) может участвовать в инициировании и поддержании менструального кровотечения и релаксации миометрия во время менструации [14]. В фазу метаэст-руса и диэструса на месте лопнувшего фолликула под влиянием ЛГ развивается желтое тело, которое начинает вырабатывать прогестерон. Прогестерон через рецепторы глюкокортикоидов снижает уровень экспрессии еМ08 [9]. Но, в отличие от эстрогена, его роль до конца не изучена. Многие факторы свидетельствуют об участии оксида азота (II) в регуляции разви тия и функционирования желтого тела, но эти данные не однозначны и противоречивы [1].
Заключение. Исходя из вышеизложенного следует: 1 .Изменения активности системы оксид азота (II) в плазме крови зависит от фазы полового цикла. 2.Максимальная активность системы оксида азота (II) отмечается в фазе проэструс и эструс. При глубоком исследовании, определение количества метаболитов оксида азота может способствовать созданию методов диагностики заболеваний половой системы, а также может быть применено в процессах воспроизводства для более точного определения времени оплодотворения.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Ванин, А. Ф. Оксид азота в биомедицинских исследованиях / А. Ф. Ванин // Вестник РАМН,- 2000. - № 4. - С. 3-5.
2. Зенкина, В.Г. Участие оксида азота овариатьном цикле / В.Г. Зенкина. О.А. Солодкова // Современные проблемы науки и образования. - 2015. - № 3. - С. 12-14.
3. Солодков. А. П. Фотометрический метод определения нитратов и нитритов в биологических жидкостях / А. П. Солодков, И. С. Веремей // Витебский государственный медицинский университет. — 2001. - №1. - С.32-35.
4. Каримова. Р.Г. Нитроксидергиче-ская система: влияние соединений фу-роксанового ряда / Р.Г. Каримова, Т.В. Га-рипов // Ветеринарная медицина домашних животных. Сборник статей. - Казань. 2009. - С. 85-88.
5. Каримова, Р.Г. Содержание оксида азота и нитрозотиолов в крови крыс под влиянием замещенного бензодифура-зана / Р.Г. Каримова /7 Вестник Ураньской медицинской академической науки. - 2009. -№2(25).-С. 231.
6. Каримова, Р.Г. Влияние различных факторов на продукцию оксида азота в организме крыс / Р.Г. Каримова, И.Н. Ъилатов, Т. В. Гарипов // Фундаменталь-ные исследования. - 2015. - № 2-1. - С. 53-57
7. Каримова. Р.Г. Полезный приспособительный эффект нитроксидергической системы / Р.Г. Каримова, Т.В. Гарипов // Известия Самарской сельскохозяйственной академии. - 2011. - № 1. - С. 42 - 46.
8. Кузнецова, B.J1. Оксид азота: свойства, биологическая роль, механизмы действия / B.JI. Кузнецова, А.Г. Соловьева /./ Современные проблемы науки и образования.-2015.-№ 4.
9. Duckies, S.P. Hormonal modulation of endothelial NO production / S.P. Duckies, V.M.Miller//-2010.
10. Francesca, G. Nitric oxide in follicle development and oocyte competence. / G. Francesca, B. Giuseppina // Via del Taglio. -V.I.-43126.
11. McCann, S.M. The role of nitric oxide in reproduction / S.M. McCann, V. Rettori // Proc Soc Exp Biol Med. - 1996.-P.7-15.
12. Marcondes, F.K. Determination of the estrous cycle phases of rats: some helpful
considerations / F.K. Marcondes, F. J. Bian-chi, A.P. Tanno // Braz. J. Biol. - 2002,-V.62.- No.4a.
13. Shukovski, L. The involvement of nitric oxide in the ovulatory process in the rat / L. Shukovski, A. Tsaliri // Endocrinology. -1994. - V.135, -P. 2287-2290.
14. Chwalisz, K. Role of nitric oxide in implantation and menstruation / K. Chwalisz, R.E. Garfield // Hum Reprod. -2000. -P.96-111.
15. Caligioni, C.S. Assessing reproductive status/stages in mice / C.S. Caligioni // Curr Protoc Neurosci. - 2009.
СОДЕРЖАНИЕ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА II (NO) В ПЛАЗМЕ КРОВИ У КРЫС В РАЗНЫЕ ФАЗЫ ПОЛОВОГО ЦИКЛА
Сибгатуллии И.Т.. Каримова Р.Г.
Резюме
В статье изложены результаты изучения содержания стабильных метаболитов оксида азота 11 (NO) в плазме крови у крыс в разные фазы полового цикла. Установлено, что система N0 в разных фазах полового цикла в плазме крови у крыс имеет разную активность. Макси-мальпая активность системы оксида азота (II) отмечается в фазе проэсгрус и эструс.
THE CONTENT OF METABOLITES OF NITRIC OXIDE И (NO) IN BLOOD PLASMA IN RA J'S AT DIFFERENT PHASES OF THE SEXUAL CYCLE
Sibgatullin I.T., Karimova R.G.
Summary
The results of studying the content of nitric oxide stable metabolites in rat blood plasma at different phases of the sexual cycle were presented. It was established that NO system at different phases of the sexual cycle in rat blood phases has different activity. The maximum activity of NO system is noted at the phase of the proestrus and estrus.
УДК 631.81:633
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БИОГУМУСА, ПРИРОДНЫХ АГРОМИНЕРАЛОВ И АНАЛОГИЧНЫХ НАНОКОМПОЗИТОВ ПРИ ВЫРАЩИВАНИИ ОВСА
Суханова И.М. - к.б.н., Алиев Ш.А.- д.с.-х.н., Газизов P.P.- к.с.-х.н.,
Ильясов М.М. - к с.-х.н.
ФГБНУ «Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения»
Ключевые слова: сапропель, глауконит, биогумус, наносуспензия, агроминералы, кормовая культура,урожайность, качество
Key words: sapropel, glauconite, biohumus, nanosuspension, agronomineral, fodder crop, yield, quality
Одно из решений проблемы обеспечения почвы и растений элементами питания мы видим в использовании удобрений созданных самой природой: глауконита, биогумуса и сапропеля, химический состав которых позволяет применять их в качестве удобрений [5].
Применение биогумуса и местных природных агроминералов для улучшения свойств почвы, в растениеводстве в качестве мелиорантов, удобрений и стимуляторов роста, в животноводстве в виде кормовых добавок сельскохозяйственным животным обусловлено наличием биогенных
