CC BY
51
УДК 577.175.824:613.81-06:616.
Л.М. ЯКОВЛЕВА, Н.В. НИКОЛАЕВА
СОДЕРЖАНИЕ ГИСТАМИНА В СТРУКТУРАХ КИШЕЧНИКА В УСЛОВИЯХ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Ключевые слова: кишечник, алкоголь, биоамины, гистамин.
Употребление больших доз алкоголя вызывает повреждение органов. Алкоголь в кишечнике при этом действует на энтерохромаффинные клетки, которые вырабатывают нейромедиаторы С помощью методов люминесцентной микроскопии и цитоспектрофлюориметрии дана количественная характеристика особенностей клеточных биоаминсодержащих элементов в различных отделах кишечника. Опыты, проведенные на крысах, показали, что при алкоголизации происходит увеличение биогенных аминов. В стенке кишечника повышается содержание гистамина. Длительная, хроническая интоксикация сопровождается стабилизацией гистамина на повышенном его уровне.
L.M. YAKOVLEVA, N.V. NIKOLAEVA THE HISAMINE CONTENTS IN THE INTESTINE STRUCTURES UNDER THE CONDITIONS OF THE ALCOHOLIC INTOXICATION
Key words: intestine, alcohol, biogenic amines histamines.
The use of alcohol in large doses causes organs injury. In this case alcohol influences intestine en-terochromaffin cells which produce neuromediators . The methods of luminescent microscopy and cytospectrofluorometry were applied to obtain the quantitative characteristics of bioamine-containing structures in different parts of the intestine. The experiments performed on rats showed an increase of biogenic amines formation of histamine on the intestinal wall. The long chronic intoxication is accompanied by histamine stabiliszation at their increased level.
Взаимодействие нервной и эндокринной систем на сегодняшний день не вызывает сомнения и позволяет рассматривать организм человека как единое целое. Причем в последние годы большое значение придается нейромедиа-торным биогенным аминам [2], которые насчитывают более тридцати веществ. Среди данных соединений гистамину уделяется большое внимание. Эндогенный гистамин синтезируется во многих клетках организма. Люминесцентно-гистохимическим методом доказано наличие гистамина в селезенке, тимусе, лимфатических узлах, желудке, матке, почках, в крови, плазме, поте, в наибольших концентрациях - в тучных клетках. В организме он содержится в различных видах: свободном, лабильно связанном, прочно связанном виде. Существуют две формы депонирования связанного гистамина: в тучных клетках соединительной ткани и в синтезируемых клетках тканей, бедных тучными клетками.
Гистамин нейрогуморальным путем влияет на функциональное состояние клеток [3]. Большинство клеточных мембран экспрессируют различные типы рецепторов для гистамина: Н1, Н2, Н3, Н4, при взаимодействии с которыми реализуется его эффективное действие [1]. В желудочно-кишечном тракте выделено достаточно большое количество гистаминовых рецепторов. Таким образом, современные сведения свидетельствуют о важнейшей роли гистамина в регуляции энтеральных процессов.
Цель исследования - изучение влияния длительной алкогольной интоксикации на содержание гистамина в различных структурах стенки тонкой и толстой кишок крыс.
Материалы и методы. Объектом исследования были белые беспородные крысы массой 190-210 г. Животные были разделены на две группы: контрольная (интактная) и опытная. Опытная группа в качестве единственного источника
питьевой воды получала 20%-ный раствор этилового спирта в течение 2, 4 и 6 месяцев, контрольная группа - воду. Все действия, предусматривавшие контакт с лабораторными животными, осуществляли с учетом требований «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». По окончании эксперимента животных под анестезией декапитировали. Забор кусочков тонкой и толстой кишок осуществляли в течение 4-6 мин после декапитации, которые замораживались в криостате при температуре -20°. Криостатные срезы обрабатывались люминесцентно-гистохимическим методом Кросса, Эвена, Роста для определения гистамина (Г). Количественное содержание оценивалось с помощью цитоспектрофлюориметрии на люминесцентном микроскопе ЛЮМАМ-4 с насадкой ФМЭЛ-1А. Для оценки интенсивности свечения гистамина использовали светофильтр № 7 (длина волны - 515 нм). В каждом срезе производили не менее 20 измерений интенсивности свечения, выражая результаты в условных единицах люминесценции (усл.ед.) по шкале регистрирующего прибора усилителя. Статистическую обработку данных проводили с помощью персонального компьютера с использованием стандартного пакета программ. Степень достоверности определяли по ^-критерию Стьюдента. Различия считали достоверными при p < 0,05.
Результаты исследования. При исследовании срезов тонкой кишки ин-тактных крыс с помощью люминесцентной микроскопии выявляется равномерная, но неодинаковая люминесценция эпителиального слоя в области ворсин. Здесь выделяются клетки с высоким содержанием биогенных аминов, в то время как в криптальных углублениях люминесцентное ярко-желтое свечение проявляется более выражено. Обнаруживаются гранулярные люминес-цирующие клетки (ГЛК), которых можно отнести к клеткам АПУД-серии, т.е. к клеткам диффузной эндокринной системы.
В подслизистой основе в большом количестве определяются тучные клетки, среди которых можно выделить клетки различной формы с плотно расположенными гранулами и дегранулированные.
Мышечная оболочка люминесцируют зеленоватым цветом, что указывает на небольшое содержание гистамина.
Количественная оценка содержания уровня гистамина подтверждает неоднородную люминесценцию оболочек кишечной стенки. На протяжении эксперимента во всех исследуемых структурах тонкой кишки показатели интенсивности свечения гистамина постепенно возрастают. В области эпителия кишечных ворсин его содержание увеличивается через 2 месяца в 1,1 раза по сравнению с интактными крысами, через 4 месяца в 1,4 раза и к 6 месяцам стабилизируется и составляет 1,8 раза от нормы (см. таблицу).
Следует отметить, что уровень гистамина в тучных клетках подслизи-стой оболочки и области крипт максимально возрастает к 4-му месяцу эксперимента, превышая в 1,5 раза норму. Замечено, что при дальнейшей алкоголизации его концентрация начинает снижаться и достигает того уровня, которая превышает в 1,4 раза норму.
Замечено, что гладкомышечная оболочка тонкой кишки обладает менее выраженным содержанием гистамина по сравнению с исследуемыми структу-
рами. Динамика изменений в данной оболочке отражена в таблице, здесь также наибольшее увеличение содержания данного биоамина в 1,6 раза по сравнению с интактными наблюдается к 6-му месяцу эксперимента (см. таблицу).
Интенсивность люминесценции гистамина в структурах кишечника у экспериментальных животных на разных сроках эксперимента (M±m)
Структуры Гиста- мин Интактные животные Опыт (2 месяца) Опыт (4 месяца) Опыт (6 месяца)
Эпителий слизистой тонкая кишка 20,28±1,41 22,88±1,49 28,51±3,86* 35,60±3,14 **
толстая кишка 19,91±2,52 21,47±1,8 31,01±3,01** 34,85±3,52***
ТК подслизистой, крипты тонкая кишка 21,96±1,82 27,79±2,21* 32,46±4,05*** 31,61±4,01*
толстая кишка 21,38±1,88 24,49±2,99 34,60±3,91** 35,07±4,03**
Мышечная оболочка тонкая кишка 9,83±0,79 11,6±0,59 14,91±0,98*** 15,77±1,17**
толстая кишка 9,71±0,87 11,34±0,95 15,27±1,57** 15,35±1,45***
Примечание. * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001.
При употреблении алкоголя, содержание этанола в энтеральном пространстве толстой кишки не обнаруживается. В связи с этим прямого воздействия на клеточные мембраны энтероцитов со стороны энтеральной полости не оказывается, так как процесс всасывания завершается в проксимальном отделе тонкой кишки. Однако дистально располагающийся отдел, толстая кишка, реагирует аналогично. Содержание гистамина здесь увеличивается во всех исследуемых структурах.
Спекрофлюориметрический анализ исследования уровня гистамина показал, что через 2 месяца после ежедневного приема алкоголя в эпителиальном слое слизистой он увеличивается в 1,1 раза по сравнению с нормой, в области тучных клеток подслизистой оболочки в 1,2 раза и в мышечной оболочке также в 1,2 раза (см. таблицу). Увеличение срока алкоголизации до 4 месяцев приводит к более значительному возрастанию концентрации гистамина в данных структурах по сравнению с аналогичным показателем у интактных животных. Так, в эпителиальном слое он увеличивается в 1,6 раза, в области тучных клеток подслизистой в 1,6 раза, аналогично и в мышечной оболочке. Следует отметить, что хроническая алкоголизация, составляющая 6 месяцев, способствует увеличению содержания гистамина в эпителиальном слое слизистой оболочки и тучных клетках подсли-зистой. В то время как в мышечной оболочке его содержание остается практически на том же уровне, что и ранее (см. таблицу).
Обсуждение результатов. Таким образом, полученные результаты подтверждают литературные данные о возрастании содержания гистамина в организме при употреблении алкоголя [5, 6]. Наибольшая концентрация исследуемого биогенного амина содержится в области тучных клеток подслизи-стой оболочки и в эпителиальном слое слизистой, где осуществляется основная пищеварительно-транспортная функция. Следовательно, это связано с изменением активности гистаминпозитивных структур в соединительной ткани: тучных клеток, макрофагов, а также энтероэндокриных клеток, находящихся в слизистой оболочке кишечника [4].
Нейромедиаторные биогенные амины при взаимодействии с клеточными рецепторами окружающих структур активизируют основные проявления жизнедеятельности клетки: функционирование, регенерацию, адаптацию, специализацию, при которых может проявиться адаптирующее или повреждающее их воздействие на ткани и органы. Принято считать, что гиперактивность клеток соединительной ткани, которая является важнейшей стратегической зоной как при патологии, так и в норме, сопровождается микрососу-дистым расстройством.
Возможно, что такие общеизвестные симптомы больных хроническим алкоголизмом, как дефицит массы тела, развивающийся гиповитаминоз, ос-теопороз, диспептические расстройства, связаны с интенсивным выбросом в окружающую ткань биоаминов, которые регулируют деятельность кишечника паракринным воздействием.
Литература
1. Бережная Н.М. Тучные клетки и гистамин: физиологическая роль / Н.М. Бережная, Р.И. Сепиа-швили // Аллергология и иммунология. 2003. Т. 4, № 3. С. 29-38.
2. ГоризонтовП.Д. Гомеостаз его механизмы и значение / П.Д.Горизонтов. М.: Медицина, 1981. С. 5-73.
3. КоганМ.З. Биологическое значение гистамина /М.З.Коган // Лаб. дело. 1987. № 9. С. 712-714.
4. Мулендеее С.В. Биологически активные вещества в структурах десны человека при периимплан-титах: автор. дис. ... канд. мед. наук / С.В. Мулендеев. Саранск, 2007. 18 с.
5. Островский Ю.М. Метаболические предпосылки и последствия потребления алкоголя / Ю.М. Островский, В.И. Сатановская, С.Ю. Островский и др. Минск: Наука и техника, 1988. 263 с.
6. Разводовский Ю.Е. Влияние таурина на содержание в ЦНС нейроактивных соединений при синдроме отмены этанола / Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко // Эксперим. и клин. фармакол. 2007. Т. 70, № 5. С. 38-43.
ЯКОВЛЕВА ЛЮБОВЬ МАКСИМОВНА - кандидат медицинских наук, доцент кафедры патофизиологии, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (28Lubov@mail.ru).
YAKOVLEVA LUBOV MAKSIMOVNA - candidate of medical sciences, associate professor of Pathological Physiology Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
НИКОЛАЕВА НАТАЛИЯ ВИТАЛЬЕВНА - старший преподаватель кафедры иностранных языков для медицинских и естественнонаучных специальностей, Чувашский государственный университет, Россия, Чебоксары (28Lubov@mail.ru).
NIKOLAEVA NATALIA VITALJEVNA - senior teacher of Foreign Languages for Medical and Natural Sciences Chair, Chuvash State University, Russia, Cheboksary.
