CC BY
38
УДК 619:636.615.331.339 Спонсор рубрики группа компаний АКТАВИС
Случаи пролиферативной энтеропатии свиней в Болгарии и испытание ряда альтернативных
методов ее диагностики
И. Динев, М. Лютсканов, И. Никифоров, В. Урумова,
Тракийский университет (г. Стара Загора, Болгария)
Ключевые слова: бактерии, диагностика, свинья, энте-ропатия
Сокращения: Кш — кишка; ПЭС — пролиферативная энтеропатия свиней; СФ — свиноферма(ы)
Введение
ПЭС протекает остро или хронически, сопровождаясь размягчением фекалиев, кровянистой диареей и замедлением роста [15]. Она развивается у свиней после отъема в разном возрасте, но в первую очередь поражаются животные в периоды доращивания и откорма [7]. Заболевание проявляется рядом синдромов: кишечным аденоматозом, геморрагической энте-ропатией, некротическим энтеритом и региональным илеитом 112]. Каждый из них сопровождается характерными поражениями — утолщением слизистой оболочки тонкого отдела кишечника (преимущественно подвздошной Кш), слепой Кш и проксимальной части ободочной Кш.
При кишечном аденоматозе основные гистологические изменения проявляются аденоматозной гиперплазией клеток крипт Кш, вызванной пролиферацией зрелых эпителиальных клеток и сопровождающейся почти полным исчезновением чашевидных клеток [1]. Незрелые энтероциты в апикальной части цитоплазмы содержат большое количество внутриклеточных бактерий Lawsonia intracellularis [15]. Впервые о нескольких случаях ПЭС, сопровождавшихся характерными пролиферативными изменениями слизистой оболочки подвздошной и ободочной Кш, сообщили американские исследователи Л. Шварц и X. Бей Стар в 1931 г. В настоящее время заболевание регистрируют в различных странах, где оно приводит к значительному снижению продуктивности свиней [14J.
Возбудителем ПЭС является грамотрицательная бактерия Lawsonia intracellularis. Она проявляет значительное сходство по многим признакам с риккетсиями, хотя их таксономическое положение неодинаково [13]. L. intracellularis — облигатный внутриклеточный, некультнвируемып на питательных средах паразит. В 1993 г. бактерию удалось репродуцировать в культуре клеток и воспроизвести болезнь на свиньях в условиях экспериментального заражения суспензией инфицированной культуры клеток, что подтвердило этиологическую роль микроорганизма при ПЭС [10, 13].
Различные факторы, связанные с хозяйственной деятельностью на СФ (транспортировка, изменение режима кормления или рациона, неожиданные колебания температуры, размещение в свинарниках чрезмерно большого количества животных, несоблюдение санитарно-гигиенических
норм), иммунный статус, а также генетическая предрасположенность могут влиять на характер проявления, развитие и тяжесть ПЭС [2, 6].
11ЭС — широко распространенное заболевание. Его регистрируют во многих странах Европы, Северной и Южной Америки, а также в Новой Зеландии и Японии [19|. В ряде публикаций сообщается о низкой (0,7...2,0 %) частоте выявления патоморфологических изменений у пораженных животных |3, 9]. По данным других авторов, в некоторых стадах свиней этот показатель может достигать 40 % 118].
Вскоре после установления этиологии ПЭС из-за сложности культивирования Ь. ¡п1гасе11и1апх начались поиски альтернативных методов и способов ее обнаружения и идентификации [8]. Этот процесс продолжается и теперь с целью оптимизации и ускорения диагностики заболевания.
В настоящей публикации сообщаем о результатах испытаний пригодности нескольких альтернативных методов диагностики ПЭС и определения эпизоотической ситуации в ряде неблагополучных по этому заболеванию свиноводческих хозяйств Болгарии.
Материалы и методы
Эпизоотологическое и клинико-морфологическое исследования провели в 11 неблагополучных по ПЭС хозяйствах (пяти на севере и шести на юге Болгарии). Все СФ были промышленного типа: большая их часть рассчитана на содержание свыше 500 свиноматок, а 5 из них — на более чем 1000 свиноматок. Всего обследовали свыше 14 тыс. свиней на доращи-вании и откорме. Содержание животных на обследованных фермах осуществлялось по разным технологиям: на кирпичном, приподнятом решетчатом (по 8...15 свиней/бокс) и щелевом пластиковом (по 15...30 свиней/бокс) полах. Во,всех случаях кормление и поение животных было механизированным, а на некоторых свинофермах — автоматическим. Упомянутые различия технологии содержания свиней определяли неодинаковый гигиенический уровень обследованных СФ.
Эпизоотологическое исследование включало анализ особенностей восприимчивой популяции свиней и определение заболеваемости, смертности и летальности. Полученные данные регистрировали в учетных картах.
При осмотре и клиническом обследовании животных обращали внимание на их габитус, характер симптоматики, течение и исход болезни.
На каждой СФ от павших свиней брали по 5...6 проб подвздошной кишки для цитологического и гистологического исследований.
Мазки, сделанные со слизистой оболочки подвздошной кишки, перед цитологическим исследованием подсушивали на воздухе и окрашивали Дифф Квиком.
Пробы, предназначенные для гистологического исследования, фиксировали 10%-м нейтральным формалином и заливали парафином. Срезы проб толщиной 5 мкм импрегни-ровали нитратом серебра (метод Вартина-Старри) и окрашивали гематоксилином и эозином.
Результаты
Результаты эпизоотологического исследования показали, что на различных СФ заболеваемость ПЭС варьировала в пределах от 12,2 % до 26,5 %. Летальность тех поросят, которых не лечили, превышала 40 %, а кумулятивный уровень смертности варьировал от 2 до 6 %.
На всех обследованных СФ большинство поросят заболевало ПЭС в возрасте 50...80 дн (3.,.7-я неделя после отъема). На двух СФ наиболее высокую заболеваемость наблюдали в период сразу после перевода поросят-отъемышей на доращи-вание. Инцидентность болезни была максимальной в зимне-весенний период года.
При клиническом обследовании установили, что в период откорма более 80 % поросят отстают в росте по сравнению с остальной частью животных тех же групп, что обусловило неоднородность последних (рис. 1). Пораженные животные утрачивали интерес к корму или становились привередливыми. У части из них наблюдали рецидивирующую диарею.
Рис. 1. Отставание в росте (неодинаковые темпы роста) поросят на откорме
У 60...70 % пораженных животных через 6...7 нед после начала клинической стадии заболевания наступала ремиссия. Она характеризовалась постепенным восстановлением аппетита и медленным повышением упитанности до нормального уровня. У остальных 30...40 % свиней отметили перманентное необратимое отставание в росте — их средняя масса тела в конце откорма была приблизительно на 20 % ниже, чем у здоровых животных. У некоторых свиней выявили кахексию.
Рис. 2. Мелена при геморрагической энтеро-патии свиней
Почти 10 % клинически больных свиней из числа обследованных быстро и неожиданно погибало, в большинстве случаев после наступления выраженной анемии. Как правило, у этих животных масса тела не была пониженной. Иногда в боксах, в которых содержали таких животных, обнаруживали фекалии, имевшие из-за мелены темный цвет (рис. 2).
Основной патоморфологической находкой у отстававших в росте клинически больных животных было выраженное утолщение стенки подвздошной Кш, обусловленное значительным разрастанием слизистой оболочки, что вело к заметному сужению просвета Кш (рис.3). Поверхность слизистой оболочки казалась влажной, но слизь на ней отсутствовала. Иногда в ней находили отдельные очаги кровоизлияния (рис. 4). У некоторых свиней этой группы обнаружили коагуляционный некроз слизистой оболочки подвздошной Кш, которая в таких случаях была как будто покрыта серовато-желтой, похожей на сыр субстанцией (рис. 5).
Рис. 3. Почти полная непроходимость подвздошной Кш при кишечном аденоматозе (поперечные срезы Кш; боенский материал)
Рис. 4. Кишечный аденоматоз свиней — кровоизлияния в проли-ферирующей слизистой оболочке (боенский материал)
Рис. 5. Некротический энтерит — некроз слизистой оболочки подвздошной Кш (боенский материал)
У неожиданно и скоротечно павших свиней независимо от наличия признаков анемии обнаружили профузные кровотечения в дистальной части подвздошной и слепой Кш. Кровь обычно была свернута (рис. 6).
В гистологических препаратах отметили увеличение железистых клеток кишечных крипт, обусловленное их ростом. Обычно они располагались в несколько (5..6 или больше) слоев. В их цитоплазме локализовались микроорганизмы. В базальной мембране слизистой оболочки, выявили очаговую
Рис. 7. Пролиферация мононукле-арных клеток в базальной мембране слизистой оболочки, приведшая к интенсивному утолщению этого слоя при региональном илеи-те (окраска гематоксилином и эозином, шкала = 5 мкм)
Рис. 8. Внутриклеточные микроорганизмы в поверхностных эпителиальных клетках срезов слизистой оболочки, импрегнирован-ных серебром (окраска по Вартину-Старри, шкала = 3 мкм)
Рис. 9 Хроническая ПЭС. Мазок слизистой подвздошной кишки — внутриклеточные бактерии видны в цитоплазме клеток (окраска Дифф Квиком, шкала = 3 мкм)
или диффузную пролиферацию мононуклеарных клеток, которая вела к обширному утолщению этого слоя (рис. 7). В случаях длительного переболевания среди участков пролиферации отметили рост грануляционной ткани, гипертрофию мышечного слоя Кш и субсерозный отек.
В поверхностных эпителиальных клетках срезов слизистой оболочки Кш, импрегнированных серебром, присутствовало вариабельное количество (несколько или много) внутриклеточных микроорганизмов (рис. 8).
В мазках при цитологическом исследовании также обнаружили внутриклеточные микроорганизмы. Они имели вид прямых или слегка изогнутых палочек и локализовались в цитоплазме эпителиальных клеток кишечника (рис. 9).
Обсуждение
Результаты проведенных нами исследований показали, что заболеваемость свиней ПЭС в Болгарии (12,2...26,5 %) такая же, как и в других странах, в которых эта болезнь широко распространена [11, 16, 17]. Запоздалость изучения данной проблемы в Болгарии обусловлена тем, что здесь в последние 10...15 лет ПЭС не регистрировали. В начале 90-х годов в нашей стране наблюдали случаи ПЭС (неопубликованные результаты диагностических исследований И. Динева и соавт., 1995), но тогда их этиологическим агентом сочли Campylobacter spp. [18]. На самом деле кампилобактерии в таких случаях изолировать не удалось, и так же как в ряде других стран, об этой проблеме на время забыли [ 15]. Распространение ПЭС зимой и весной может быть связано, как отмечали другие авторы 115], с резкой сменой погоды, особенно значительной разницей дневной и ночной температуры, жарой или высокой влажностью.
Проводя исследования, мы наблюдали все известные клинико-морфологические формы ПЭС (геморрагическую энтеропатию, некротический энтерит, кишечный аденоматоз и региональный илеит), причем наиболее часто встречались последние две (>80 %). Такие наблюдения соответствуют данным большей части публикаций [15]. Превалирующая хроническая форма болезни, которую следует отличать от неспецифических энтеритов, проявляется умеренной диареей и замедленным ростом [4]. Принимая во внимание другие проблемы желудочно-кишечного тракта разводимых в Болгарии свиней, можно сказать, что ПЭС занимает все более важное место среди них.
Вскрытие трупов и обнаружение патологоанатомических поражений — чрезвычайно важные этапы диагностики ПЭС. По наличию типичных патологоанатомических изменений в ряде случаев удается поставить точный диагноз [5]. Цитологический анализ мазков-отпечатков — быстрый, простой и недорогой метод, позволяющий подтвердить первоначальный диагноз. Модифицированный метод Вартина-Старри импрегнации серебром срезов тканей можно применять для рутинного обнаружения возбудителя болезни. Гистологическое исследование
выявляет характерную морфологию пролиферативных поражений. Полученные нами результаты применения различных методов диагностики ПЭС согласуются с мнением ряда других исследователей относительно того, что комбинация цитологического и ряда модифицированных гистологических исследований (например, импрегнации серебром срезов тканей) может служить альтернативой прямого обнаружения L. intracellularis, культивировать которую сложно [5, 8, 151.
Благодарности
Авторы благодарят коллегу Вентнслава Милкова из CEVA Animal Health (Bulgaria) за помощь в сборе материалов, использованных при проведении исследований.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Barker I. К. The alimentary system. In: Jubb K.V.F. et al. (Eds). Pathology of Domestic Animals, 4th edn, v 2., Acad Press, NY, 1993, 229—234.
2. Bona В., Bilkei G. The effect of outdoor production on the seroprevalence of Lawsonia intracellularis in growingfinishing pigs in a large pig production unit infected with endemic porcine proliferative enteropathy. Deutsche Tier Woch, 2003, 110, 73—75.
3. Christensen N.H., Cullinane L.C. Monitoring of the health of pigs in New Zealand abattoirs. NZVet J, 1990, 38, 136—141.
4. Dufresne L. Alimentary tract disorders of growing pigs. In: Proc 15th IPVS Congress, Birmingham, 1998, 71—85.
5. Guerdes Ft., Gebhart C., Winkelman N. et al. Comparison of different methods for diagnosis of porcine proliferative enteropathy. Can J Vet Res, 2002, 66, 2, 99—107.
6. Hägen В., Bilkei G. Seroprevalence of Lawsonia intracellularis in large pig production units. Acta Vet Hung, 2003, 51, 65—170.
7. Jones G., Ward G., Murtaugh M. et al. Enhanced detection of the intracellular organism of swine proliferative enteritis ileal symbiont intracellularis in feces by polymerase chain reaction. J Clin Microbiol, 1993, 31, 2611—2615.
8. Jones G.F., Davies P.R., Rose R. et al. Comparison of techniques for diagnosis of proliferative enteritis of swine. Amer J Vet Res, 1993, 54, 12.
9. Kubo M., Ohya T.. Watase H. Proliferative hemorrhagic enteropathy detected at an abattoir in Kagoshima. Japan J Vet Sei, 1984. 46, 413—417.
10. Lawson G.H.K., McOrist S., Jasni S., Mackie R.A. Intracellular bacteria of porcine proliferative enteropathy: Cultivation and maintenance in vitro. J Clin Microbiol, 1993, 31, 1136—1142.
11. Lawson G.H.K., Gebhart C.J. Proliferative enteropathy. J Comp Pathol, 2000. 122, 77—100.
12. Love R.J., Love D.N., Edwards M.J. Proliferative haemorrhagic enteropathy in pigs. Vet Ree, 1977, 100, 65—68.
13. McOrist S., Gebhart C.J., Boid R. Characterization of Lawsonia intracellullaris gen. nov., sp. nov., the obligately intracellular bacterium of porcine proliferative enteropathy. Int J Syst Bacteriol, 1995, 45, 820—825.
14. McOrist S. Porcine proliferative enteropathies & ileitis. Pigs, 1996, May, 8—9.
15. McOrist S., Gebhart C.J. Porcine proliferative enteropathies. In: Straw B.E. et al. (Eds ). Diseases of Swine, 8th Edn, Iowa State Univ Press, Ames, IA, 1999, 521—534.
16. PejsakZ., Kneblewski P., Pawiowski R., Kozinski J. Cases of proliferative ileitis in pigs from Polish farms. Med Weter, 1997, 53, 30—32.
17. PejsakZ., QmudzkiJ., Stankevicius A. The prevalence of Lawsonia intracellularis in swine herds in Poland. Med Weter, 2001. 57, 887—889.
18. Poiton A.M. Campylobacter associated intestinal pathology in pigs. Austr Vet J, 1989, 66, 90—91.
19. Rowland A.C., Lawson G.H. Porcine proliferative enteropathies. In: Leman A.D. (Eds.). Diseases of Swine, 7th Edn, Ames: Iowa State Univ Press, 1992, 560—569.
20. Schwartz L., Beister H. Intestine adenoma in swine. Amer J Pathol, 1931, 7, 175.
SUMMARY
I. Dinev, M. Lyutskanov, I. Nikiforov, V. Urumova, Cases of porcine proliferative enteropathy in Bulgaria and testing of some alternative methods of diagnostics. Bulg J Vet Med, 2006, 9, 2, 133—139. Clinico-epidemiological investigations were performed in 11 affected pig farms in different regions of the country. The morbidity rate (12.2 % to 26.5 %) was evaluated on the basis of clinical signs, gross and slaughterhouse findings. Gross pathology, histological (specific stainings) and cytological studies were performed with a view to their application for detecting the disease. All known clinicomorphological forms of manifestation of porcine proliferative enteropathies (PPE) were observed throughout our inevstigations. The cases of porcine intestinal adenomatosis and regional ileitis predominated (over 80 %). Taking into consideration the totality of gastrointestinal problems faced by pig breeding in Bulgaria, it could be stated that the share of PPE was continuously increasing.
группа „ компании
Балканфарма
Balkanpharma
Использование микрогранулята тилозина тартрата с комбикормом позволяет эффективно и с минимальными затратами бороться с хроническими кишечными и респираторными инфекциями свиней бактериальной этиологии, обеспечивая повышение привесов и предотвращая потери продукции в свиноводстве. Для лечения нролиферативной энтеропатии микрогранулированный тилозин тартрат добавляют в корм в дозе 100 г на 1 т корма на протяжении 4 нед. Микрогранулят антибиотика равномерно смешивается с кормами, обеспечивая удобство применения такого лекарственного премикса в промышленных условиях.
Опорос
Свиноматкам 7 дней до и 7 дней после опороса
Отъем
Доращивание 2—4
Откорм
1 M 1
100 г/т 100 г/т 40 г/т
_J L
20 г/т
с 6-й по 9-ю неделю
РВЖ СХЖ №4-2006
23
