CC BY
22
обращается особое внимание на ускоренный апоптоз лимфоцитов крови больных СКВ при их культивации ex vivo, опосредованный через Fas/APO-l рецептор. Кроме того, покапана способность антифосфолиннд-ных антител опсопизировать апоптотические клетки для фагоцитоза клетками ретикулоэндотелиальпой системы.
Целыо нашего исследования было оценить протекание процессов апоптоза различных субпопуляций Т-лимфоцитов периферической крови больных СКВ и сопоставление процессов программированной клеточной смерти Т-лимфоцитов с титрами антикардиолипи-новых антител.
Материалы н методы: Были обследованы 11 больных в фазу активное™ СКВ, 10 больных в фазу ремиссии и 14 здоровых доноров. Клинически у больных оценивался индекс активности СКВ университета Торонто (SLEDAf). Определение основных популяций Т-лимфоцитов (CD4', CD8*) и маркеров активации (CD25*, HLA-DR') было проведено методом проточной цитометрии (Becton Dickinson). Для оценки апоптоза использовалась окраска ранних апоптотических клеток AnncxinV и анализ Fas (CD95’) экспрессии на субпопуляциях лимфоцитов. Антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM определялись ИФА-мето-дом (результат выражен в GPL и MPL соответственно).
Результаты: У больных СКВ, независимо от фазы заболевания, было выявлено достоверно сниженное количество CD8* клеток по сравнению с группой контроля. Достоверно повышенное число лимфоци тов в крови больных СКВ несло маркеры активации (CD25 \ HLA-DR'), по сравнению со здоровым контролем, что согласуется с литературными данными.
Общий процент апоптотических клеток был достоверно выше у больных СКВ по сравнению со здоровыми донорами. Средняя интенсивность флюоресценции CD47Ann была достоверно повышена у больных в фазе активности заболевания. Установлено достоверное увеличение интенсивности флюоресценции AnnexinV и на CD8* клетках в группе активной СКВ по сравнению с группой контроля (см. таблицу).
Общий процент AnnV’% лимфоцитов в группе активности прямо коррелировал (г=0,618, р<0,05) с расчетным индексом активности заболевания (SLEDAI).
Таблица
* достоверная корреляция р<0.05 по сравнению с группой здоровых.
Средняя интенсивность флюоресценции AnnV также была выше на клетках у больных в фазе ремиссии заболевания по сравнению с группой контроля.
Выявлена прямая корреляционная зависимость между общим процентом апоптотических клеток и CD4’% и CD8'% лимфоцитов во всех трех группах, однако средняя интенсивность флюоресценции AnnV на CD4’ и CD8’ клетках коррелировала с общим процентом AnnV' клеток только в группе ремиссии (г=0,.984, р<]О'7 и
1-0,967, р< 10"). В группе контроля клеток имелась прямая корреляционная зависимость между общим процентом AnnV' nCD4/CD95'% с CD8/CD95'%. Обнаружена обратная корреляционная связь средней интенсивности флюоресценции AnnV на CD4' лимфоцитах в группе активности и средней интенсивностью флюоресценции по CD25' (т=-0,317, р=0.01), в то время как на CD4' лимфоцитах в группах контроля и ремиссии наблюдалась достоверная прямая корреляция (г-0,517, р<0,0001 и 1=0,541,р<0,0001).
У больных в активную фазу СКВ, по сравнению с ремиссией, уровень антикардиолипиновых антител класса IgG, в отличие от IgM, был повышен и составил 22,27+/ -13,1 GPL, что достоверно больше (р<0,05) их титра при ремиссии заболевания 9,б+/-3,29 GPL. Кроме того, была выявлена обратная корреляция л ого показателя (г=-0,35, р=0,01) при активности процесса со средней интенсивностью флюоресценции AnnV па CD4' клетках. В группе ремиссии концентрация антикардиолипиновых антител обоих классов прямо коррелировала со средней интенсивностью флюоресценции AnnV на CDS’ лимфоцитах.
Выводы: СКВ сопровождается увеличением числа активированных Т-лимфоцитов. Наряду с этим, процент апоптотических 'Г-лимфоцитов в крови больных с СКВ выше, чем у здоровых людей и зависит от фазы активности заболевания. Титр антифосфолипидных антител, возможно, связан с количеством апоптотических Т-лимфоцитов и предположительно отражает клиренс апоптотических клеток.
Скрининг вторичных иммунодефицитов в ортопедии
Левин Ю.Г.
НИИ травматологии и ортопедии iV/З РФ Новосибирск, Россия
Прогноз, профилактика и лечение гнойно-воспалительных осложнений (ГВО ранние и поздние) и асептического воспаления (АВ) в хирургии позвоночника и тазобедренных суставов (ТБС), на фоне сложностей антибактериальной терапии, особенно актуальны для категорий больных из т.н. “групп риска” с отягощенным соматическим/иммунологическим анамнезом, в т.ч. с:
1) длительными дегенеративно-дистрофическими заболеваниями ТБС,
Субпопуляции Т-ЛИМфОЦИТОЕ CD4* CD8+ Интенсивность флюоресценции AnnV в группах обследованных:
здоровые 2,6 ± 0,5 2,9 ± 0.6 СКВ, активная фаза 6.3 ± 6,6* 10.3 ± 13,3* СКВ, фаза ремиссии 3.2 ± 1,1 4.2 ± 1,9*
2) остеоиорспом, влияющим н на отдаленные результаты эндопротезпровання (ЭГ1) ГБС и на “выживаемость” металлоимнлаптатов (МИ), эндокорректо-ров,
3) резким нарушением мнкробиоцеиоза у больных сколиозом, артритами и т.д.,
4) большом кровоиотерей, значительной травмати-зацией тканей в ходе продолжительного оперативног о вмешательства,
5) ревизионным ЭП 'ПЗС у больных с асептическим воспалением (АВ), индуцированным электрохимическими, биологическими и др. аспектами МИ, etc.
Нами разрабатывался алгоритм скрининга больных, при котором диагностика вторичных иммунодефицитов (ВИД) основывается на совокупности клинико-анамнестических и лабораторных — клинико-биохимических и бактериологических данных (КАЛД), в ряде случаев подтверждаемых нммупограммой. Это целиком согласуется с концепцией мобилен Р.В.Петрова и с развитым P.M. Хаитовым и др. представлением о важности выделения трех категорий обследуемых: 1) с клиническими проявлениями нарушений иммунной системы (КПН ИС) в сочетании с лабораторными признаками нарушений (ЛГ1Н) ИС, 2) с КПН ИС, но без ЛПН ИС, и 3) лица только с ЛПН ИС, без манифестации “болезней-масок” ВИД.
Исходя из нашего опыта 1985-88 гг. (1500 иммуно-грамм) и нынешнего (с 1996 г. около 1000 иммуно-грамм), наиболее часто с КПН ИС, КАЛД ВИД коррелируют и могут служить маркерами ВИД: снижение абсолютного числа 'Г-лимф, ниже 600-700/мкл, лейко-Т-клеточный индекс ЛТИ=8 и выше, показатель функции тимуса ПФТ ниже 0,75, нммунорегуляторный индекс ИРИ ниже 0,7, активность и индекс фагоцитоза ниже 40% и 4% соответственно, абс. лимфопения ниже 1400/мкл и другие.
Диаг ностическая значимость этих “стигм” ВИД различна и возрастает при их сочетаниях, особенно в совокупности с клиническими и лаб. симптомами: нарушений сосудисто-тромбоцитарного звена (коагулопатии), “метаболической анархии” синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ) и “сепсис-синдрома” (SIRS).
Из других критериев СЭИ наиболее информативно сопряжены, конкордаитны с иммунологическими при ВИД, показатели: ЛИИ (Кальф-Калифа) выше 2,0, ПСММ выше 0,3 у.е., мочевина плазмы больше 10 ммоль/л, СОЭ выше 20 мм/час, гемоглобин ниже 100 г/л, артериальная гипотония ниже 100 мм рт. ст. и другие.
В зависимости от принадлежности больного ктой или к иной “группе риска” (1-5, либо их сочетания и взаимное отягощение), и категории (I-III), с учетом КАЛД и исходной иммунограммы, мы имеем возможность прогнозировать некую вероятность, риск возникновения ВИД, ГВО и превентивными дифференцированными курсами иммуномодулирующей терапии с применением цитокинов купировать (или минимизировать) возможные осложнения.
Провоспалительные цитокины как возможные маркеры степени выраженности коронарного атеросклероза
Липецкая Н.Э.
Медицинских академия пис:іс()ип:іпміі<>го пора лтатш Сапкт-Пешероург, Россия
Введение. Определена важная роль иммунологических нарушений в патогенезе коронарного атеросклероза. В связи с этим представляется интересным оценить вклад цитокннового звена в л ог процесс. Имеющиеся данные о связи уровней провоеналительных цитокинов в сыворотке крови у больных И ПС со степенью аіероск-леротического поражения коронарного русла носят противоречивый характер.
Цель исследования. Выявить зависимость между степенью атеросклеротического поражения коронарных сосудов и уровнем циркулирующих провоеналительных цитокинов (ИЛ-113, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-сх).
Материалы н методы. Коронарография была выполнена 43 пациентам (38 мужчин, 5 женщин), средний возраст 55,3±2.6 лет со стабильной стенокардией напряжения
2-4 функциональных классов. При анализе коронарограмм стеноз просвета сосуда, превышающий 50%, рассматривался нами как гемодинамически значимый. По степени нарушения коронарного кровотока пациенты были разделены на 3 группы: 1 — пациенты без значимых стенозов, 2 — стеноз одного сосуда >50% (однососуднстыи характер поражения), 3 — стенозы 2-3 коронарных сосудов > 50% (множественный характер поражения). Концентрация сывороточных ИЛ-ф, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, ФІ 10-а измерялась методом иммунофермептного анализа с-использованием тест-систем (Amersham Life Science, Аі іглия).
Результаты. По нашим данным, достоверных различий уровней цитокинов в артериальной и в венозной крови не обнаружено, однако необходимо о тметить тенденцию к повышению уровней ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8 в веі юзиой крови.
Достоверных различий показателей уровней интерлейкинов в венозной крови в группах больных с различной степенью поражения коронарных артерии выявлено не было. При анализе показателей в группе больных с выраженными морфологическими проявлениями атеросклероза выявлено некоторое повышение уровней провоспа-лительных цитокинов по сравнению с группами больных с минимальными и/или отсутствием аигиографнческих данных за наличие атеросклероза (ИЛ-1 р: 0,47±0,14; 0,48±0,25; 0,35±0,1; ФНО-а: 0,34±0,2; 0,18±0,11: 0,17±0,07; ИЛ-8 102,6±36,5; 143,1 ±42; 54,8± 16,71 іг/мл сответственно). Выявлена тенденция к повышению уровня ИЛ-6 третьей группе по сравнению с первой (2,97+0,63; 2,0±0,4 пг/мл).
Вместе с тем, для ИЛ-2 отмечена обратная зависимость — его уровень оказался более низким у пациентов с двух/трехсосудистым характером атеросклеротического поражения по сравнению с двумя первыми группами (16,2±3,2; 10,8±3,5; 9,0±2,3 пг/мл сответственно).
