СКАНИРУЮЩАЯ ЗОНДОВАЯ МИКРОСКОПИЯ В РЕШЕНИИ ЗАДАЧ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

270

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

образом, AAV9.DYSF обеспечивает продукцию дисфер-лина de novo, характеризующегося мембранным и цито-плазматическим расположением в инфицированных МВ, что соответствует локализации этого белка в МВ здоровых мышей. Результаты морфометрического исследования в группе 1 показали, что введение AAV9.DYSF проявляется статистически значимым уменьшением доли некротизированных МВ и повышением регенераторной функции скелетных мышц (увеличением доли ЦЯМВ, снижением средней площади поперечного сечения).

AAV9.DYSF может рассматриваться как кандидат в препараты для лечения дисферлинопатии. Проводятся расширенные исследования для оценки влияния AAV9. DYSF на физиологические показатели, оценки биобезопасности препарата. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования РФ, Соглашение № 075-15-2021-1346.

СКАНИРУЮЩАЯ ЗОНДОВАЯ МИКРОСКОПИЯ В РЕШЕНИИ ЗАДАЧ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ

И.В. Яминский1' 2

1 Физический и химический факультеты МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия

2 Центр перспективных технологий, Москва, Россия

e-mail: YaminskY@nanoscopy.ru

Ключевые слова: атомно-силовая микроскопия, сканирующая капиллярная микроскопия, опухолевые клетки, клетки крови, нейроны, 3D визуализация.

Методы сканирующей зондовой микроскопии — атом-но-силовая микроскопия и сканирующая капиллярная микроскопия — превратились в информативный инструмент, позволяющий получать трехмерные изображения клеток и клеточных структур с точностью до единиц нанометра и измерять локальные механические, физико-химические и электрофизиологические свойства клеток [1,2].

На примере наблюдений клеток крови, нейронов, эпителиальных клеток, опухолевых клеток продемонстрированы возможности атомно-силовой и капиллярной микроскопии при детальном исследовании морфологии и локальных свойств образцов. Показано, что сканирующая капиллярная микроскопия позволяет с помощью химически модифицированного капилляра реализовать биохимический наносенсор на активные формы кислорода и провести измерения их концентрации как вблизи мембраны клетки, так и внутри её. Рассмотрены возможные решения биосенсора на различные мишени при анализе единичных живых клеток. Представлен краткий обзор по использованию сканирующей капиллярной микроскопии для 3D печати биологическими молекулами.

Детально рассмотрены новые режимы сканирующей зондовой микроскопии, позволяющие максимально уменьшить воздействие на клетку при измерениях, как на воздухе, так и в жидкости. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ и Лондонского Королевского Общества (проект № 21-58-10005), Фонда содействия инноваций (проект № 71108).

Литература:

1. Akhmetova A.I., Gukasov V.M., Rybakov Y.L., Yaminsky I.V. BioMedical Engineering. 2021. N 54(6). P. 434.

2. Яминский И.В. Наноиндустрия. 2021. Т. 14. № 2. С. 136.

НАРУШЕНИЕ КЛЕТОЧНОЙ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ПРИ АПЛАЗИИ МАТКИ И ПОИСК ПУТЕЙ ИХ КОРРЕКЦИИ МЕТОДАМИ РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ

Н.К. Ярыгина1' 3, В.В. Бурунова1, А.М. Гисина1, К.К. Сухинич1' 2, З.Н. Макиян3

1 ФГБНУ НИИ биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича, Москва, Россия

2 ФГБУН Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН, Москва, Россия

3 ФГБУ НМИЦ акушерства, гинекологии

и перинатологии им. академика В.И. Кулакова, Москва, Россия

e-mail: n.yarygina17@yandex.ru

Ключевые слова: клеточная дифференцировка, маркеры эмбриональных клеток, врожденные дефекты развития, Oct-4, Nanog, SSEA-4.

Врожденные дефекты развития представляют собой серьезную медицинскую проблему, которую современная медицина пытается решить хирургическими методами. Одним из ключевых элементов патогенеза врожденных дефектов является аномальное поведение стволовых (СК) и прогениторных (ПК) клеток, что приводит к дефектному гистогенезу и морфогенезу. В нормальном пренатальном онтогенезе зачатки органов содержат большое количество плюрипотентных СК, экспрессирующих Oct-4, Nanog и другие транскрипционные факторы, активно экспрессируемые эмбриональными стволовыми клетками (ЭСК), а также другие характерные для ЭСК белки, в частности, мембранный белок SSEA-4. Позже количество таких клеток сокращается и взрослая ткань состоит в основном из паренхимы, стромы и небольшого количества мультипотентных «региональных», не экспрессирующих эмбриональные белки СК, находящихся в специальном тканевом компартменте, «стволовой нише», и обеспечивающих регенерацию ткани. Несколько исследовательских групп обнаружили во взрослых тканях небольшое количество плюрипотентных клеток, экспрессирующих эти белки и способных к триплобласт-ной дифференцировке, но эти результаты пока не получили единодушного признания. Логично предположить, что зачатки органов, обнаруживаемые при их врожденном недоразвитии, могут содержать клетки, остановившиеся на каком-то этапе их нормального онтогенеза, в частности, плюрипотентные клетки, экспрессирующие эмбриональные маркеры. Действительно, проведенное нами исследование биопсийного материала взрослых пациенток с неполной аплазией матки показало, что зачатки эндометрия и миометрия содержат большое количество таких клеток, значительно превосходящее их количество во взрослых тканях. При культивировании в обычных условиях эти клетки вступали в дифференцировку с образованием клеток подобных клеткам эндометрия и миометрия. Ткань зачатков матки содержала также уже полностью дифференцированные клетки эндометрия и миометрия, причем в части биопсий клетки экспрессировали, а в части биопсий не экс-прессировали рецепторы эстрогенов и рецепторы прогестерона. Таким образом, в зачатках матки мы наблюдали замедление или остановку дифференцировки клеток. Для лечения подобных состояний разрабатываются методы их ранней диагностики и in situ терапии путем местного введения стимулирующих дифференцировку и нормальный гистогенез агентов. Работа выполнена в рамках Программы фундаментальных научных исследований в Российской Федерации на долгосрочный период (2021-2030 годы) (№ 122022800499-5).

Гены & Клетки XVII, №3, 2022