CC BY
9УДК: 618.19-006.03-089-07:547.96
СИСТЕМА ПРОТЕОЛИЗА В ТКАНЯХ ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ УЗЛОВЫХ ОБРАЗОВАНИЙ МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗ С РАЗЛИЧНОЙ ЭКСПРЕССИЕЙ ОБЩЕГО ЛЕЙКОЦИТАРНОГО АНТИГЕНА CD45
Усманова Т. Э.1, Ильченко Ф. Н.1, Кубышкин А. В.2, Филатов А. С.1, Алиев Л. Л.2
'Кафедра хирургии № 2
2кафедра общей и клинической патофизиологии, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В. И. Вернадского», 295051, бул. Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Усманова Тамила Эскандеровна, кандидат медицинских наук, ассистент кафедры хирургии № 2 Медицинской академии им. С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В. И. Вернадского», е-mail: tamila.asp.doc@mail.ru
For correspondence: Tamila Usmanova, Cand. Sci. Medicine, Assistent of the Department of surgery № 2, at the Medical Academy named after S.I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia, e-mail: tamila.asp.doc@mail.ru
Information about authors:
Usmanova T. E., http://orcid.org/0000-0001-5050-9487 Ilchenko F. N., http://orcid.org/0000-0003-3703-6595 Kubishkin A. V., http://orcid.org/0000-0002-1309-4005 Filatov A. S., http://orcid.org/0000-0001-7131-4152 Aliev L. L., http://orcid.org/0000-0001-9401-4398
РЕЗЮМЕ
В работе представлены результаты изучения маркеров воспаления - общего лейкоцитарного антигена CD45 и неспецифических протеиназ в тканях доброкачественных узловых образований молочных желез у 38 больных репродуктивного возраста. Выявлено, что в группе с высоким уровнем экспрессии общего лейкоцитарного антигена CD45 наблюдается прямо пропорциональный рост активности неспецифических протеиназ при параллельном снижении выраженности ингибиторного потенциала.
Ключевые слова: доброкачественные узловые образования молочных желез, общий лейкоцитарный антиген, неспецифические протеиназы, воспаление.
SYSTEM OF PROTEOLISIS IN TISSUES OF BENIGNE BREST TUMORS WITH VARIOUS EXPRESSION OF COMMON LEUKOCYTE ANTIGEN CD45
Usmanova T. E., Ilchenko F. N., Kubishkin A. V., Filatov A. S., Aliev L. L.
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
The results of the study of markers of inflammation - the general leukocyte antigen CD45 and nonspecific proteinases in the tissues of benign breast tumors in 38 patients of reproductive age are presented. It was found that in a group with a high level of expression of the general leukocyte antigen CD45, a directly proportional increase in the activity of nonspecific proteinases was observed with a parallel decrease in the inhibitory potential.
Keywords: benign breast tumors, general leukocyte antigen CD45, nonspecific proteinases, inflammation.
Современная концепция формирования дисгормональной патологии молочных желез (МЖ) в качестве основного фактора выделяет нарушение гормонального равновесия в организме женщины. Однако следует отметить, что, по результатам некоторых исследователей, у больных с доброкачественными узловыми образованиями молочных желез (ДУОМЖ) или диффузным узлообразованием в МЖ в плазме крови и моче определяются нормальные уровни эстрадиола. В данном случае решающая роль в возникновении патологии отводится не абсолютной гиперэстрогении в плазме крови,
а состоянию рецепторов половых стероидов в тканях МЖ [1, 2]. Известно, что уровень рецепторов к стероидным гормонам у больных с пролиферативной формой патологии значительно выше, чем у пациенток без пролифера-тивных процессов в МЖ [3]. Поэтому можно предположить, что существуют и другие механизмы и факторы, лежащие в основе патогенеза формирования и прогрессирования ДУОМЖ.
В последние годы продолжается активный поиск диагностических методик, связанных с изучением особенностей локальных молеку-лярно-биологических механизмов формиро-
вания дисгормональных гиперпластических изменений в тканях МЖ [4-8]. Одним из факторов формирования патологии в МЖ можно рассматривать степень воспалительных изменений в её тканях [9]. Большинство авторов указывает на то, что воспаление, ассоциированное с опухолевым ростом, является важным фактором промоции и прогрессии патологии, повышающим риск возможной малигнизации. Воспаление, ассоциированное с опухолевым процессом, инициирует последний, благодаря тому, что, во-первых, медиаторы воспаления, как наиболее важный фактор роста, стимулируют жизнедеятельность и пролиферацию предопухолевых клеток, во-вторых, воспалительный процесс способствует переходу опухолевых специфических иммунных клеток из противоопухолевых в проонкогенные [10-12].
В ряде современных зарубежных работ была доказана роль протеиназ в опухолевой инвазии и прогрессии [13-16]. Известно, что в организме существует равновесие между системой проте-иназ и их ингибиторов, которое имеет большое значение для регуляции системы гомеостаза. Так, определяемые биохимическим методом протеолитические ферменты в зоне воспаления нарушают гистоархитектонику тканей в результате разрушения ими соединительной ткани и базальной мембраны, что в дальнейшем способствует нарушению процессов пролиферации [17-20]. Протеиназы регулируют метаболизм клетки путем активации протеиназоактивиру-емых ферментов, связанных с G-белками, передающих сигнал внутрь клетки, приводящих к быстрой транскрипции генов медиаторов воспаления [21]. Протеиназы в настоящее время рассматриваются как один из основных модуляторов биологических функций клетки [21].
Цель исследования - изучить уровень активности неспецифических протеиназ в тканях доброкачественных узловых образований молочных желез во взаимосвязи с выраженностью экспрессии общего лейкоцитарного антигена CD45.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследовано 38 больных репродуктивного возраста с ДУОМЖ (фиброаденома, узловая фиброзно-кистозная мастопатия).
Во всех случаях с 5-го по 10-й день менструального цикла под ультразвуковой навигацией выполнена трепан-биопсия с помощью биопсийного пистолета Bard Magnum.
Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование в трепан-биоптатах ДУОМЖ проводили по стандартизованной методике с использованием серийных парафиновых срезов толщиной 4-5 мкм, помещенных на адгезивные
стёкла, покрытые полизином («Menzel-Glaser», Германия). ИГХ-исследование осуществлялось с помощью системы визуализации EnVision™ FLEX+, High pH (Dako Autostainer/Autostainer Plus), Code K8024, предназначенной для работы на автостейнере (Dako Autostainer Instruments). Демаскировку антигенов выполняли в камере Паскаля в течение 3-х минут с нарастающей температурой до 115 °С и последующим постепенным снижением температуры.
С целью идентификации клеток лимфоид-ного ряда проводили ИГХ-исследование с использованием мышиного моноклонального антитела к рецепторам общего лейкоцитарного антигена CD45 (Clone 2B11 + PD7/26), согласно протоколу исследования фирмы Dako. Результаты ИГХ оценивали с учётом распределения и количества клеток с трансмембранной экспрессией позитивных CD45+ клеток в строме МЖ. В качестве позитивного контроля использовали ткань миндалин, в качестве негативного контроля - ткань мозга.
Неспецифические протеиназы и их ингибиторы определяли в гомогенатах тканей трепан-биоптатов ДУОМЖ, исследование выполняли по разработанным методикам в ЦНИЛ Медицинской академии имени С. И. Георгиевского, в отделе экспериментальной патологической физиологии [22]. Для приготовления гомогена-тов проводили растирание тканевого материала (трепан-биоптатов МЖ) стеклом с дальнейшим центрифугированием с 0,9 % раствором NaCl. Полученный материал (расчет на массу полученного сухого вещества) - гомогенат помещали в пробирки с 0,9 % раствором NaCl в соотношении 1:10, замораживали и хранили в морозильной камере. Перед проведением исследования гомогенаты размораживали. Биохимические определения проводили в надосадочной жидкости - супернатанте. Результаты пересчитывали на 1 мг белка гомогенатов, что позволяло стандартизировать полученные данные.
Определение трипсиноподобной активности (ТПА) проводили с помощью метода, основанного на спектрофотометрическом измерении скорости отщепления N-бензоил-L-аргинина (БА) от синтетического субстрата N-бензоил^-аргинина этилового эфира (БАЭЭ), эластазоподобной активности (ЭПА) - на основе регистрации скорости прироста оптической плотности при длине волны 347,5 нм за счёт ферментативного гидролиза синтетического субстрата N-t-BOC-аланил-р-нитрофинилового эфира (БАНФЭ), антитрип-тической активности (АТА) - по степени торможения ферментативного гидролиза БАЭЭ [22].
Все полученные результаты были подвергнуты статистической обработке для параметрических и непараметрических критериев с использованием программы «MedStat» (серийный № МБ0011) ДНПП ООО «Альфа». При анализе проверки распределения на нормальность использовали Хи-квадрат и критерий W Шапиро -Уилка. Сравнение центральных тенденций двух независимых выборок выполнили с использованием W-критерия Вилкоксона, сравнение средних двух независимых выборок - по критерию Стьюдента. Для множественного сравнения данных ИГХ-исследования и определения ком-понетов ПИС использовали ранговый однофак-торный анализ Крускала - Уоллиса и критерий Дана, метод множественных сравнений Шеффе, критерий Даннета при сравнении со значениями в контрольной группе (материал аутопсии).
РЕЗУЛЬТАТЫ
По результатам только гистологического исследования сложно судить о выраженности хронического воспаления в тканях МЖ. Поэтому для изучения выраженности воспалительных изменений в тканях ДУОМЖ проводили ИГХ-определение уровня экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45. Для оценки патогенетического значения воспаления в тканях МЖ в прогрессировании па-
тологии выполнили исследование уровня протеиназ (ЭПА, ТПА) и их ингибиторов в группах с выраженной и слабой экспрессией общего лейкоцитарного антигена СБ 45.
Анализ экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45 в тканях трепан-биоптатов МЖ позволил выделить 2 группы больных. 1 группа (п=23) - ДУОМЖ с воспалением - характеризовалась наличием позитивной реакции общего лейкоцитарного антигена СБ45, экспрессия которого визуализировалась в клетках воспалительного инфильтрата - лейкоцитах и лимфоцитах. Воспалительный инфильтрат в большей степени располагался вокруг железистых структур и в строме. Экспрессия СБ45 составила (134,3±8,4) % клеток лимфоидного ряда в исследуемых полях зрения при увеличении микроскопа 200 (табл. 1).
Во 2-й группе (п=15) - ДУОМЖ без воспаления - определялись единичные клетки воспалительного ряда, что составило (9,5±1,5) % позитивных СБ45+ клеток. Показатели были достоверны относительно значений в группе контроля и между группами (р<0,05) (табл. 1). В группе контроля, которая при проведении ИГХ и биохимического исследования была представлена материалом аутопсии (п=10) женщин, умерших от другой патологии, уровень позитивных СБ45+ клеток составил (2,0±0,3) %.
Таблица 1
Уровень экспрессии общего лейкоцитарного антигена CD45 в трепан-биоптатах ДУОМЖ (M±m), (%)
№ Группа больных CD45
1 ДУОМЖ с воспалением (n=23) 134,3±8,4 */***
2 ДУОМЖ без воспаления (n=15) 9,5±1,5*
3 Контроль(n=10) 2,0±0,3
достоверность различий по отношению к контролю; *** - между группами (р<0,05).
Примечание: * -
Таким образом, по уровню экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45 были определены группы больных: 1 группа - ДУОМЖ с воспалением; 2 группа - ДУОМЖ без воспаления; контроль - материал аутопсии (ткань МЖ без патологических изменений).
Вторым этапом в исследовании было определение в тканях МЖ компонентов системы протеолиза. При изучении компонентов системы протеолиза в трепан-биоптатах ДУ-ОМЖ выявили значительный рост уровня местных неспецифических протеиназ (ЭПА, ТПА), что в большей степени было характерным для 1-й группы. Так, ЭПА в 1-й группе в ДУОМЖ, ассоциированных с воспалением, составила (7,72±0,35) мкМ/мл»мин., что пре-
высило на 64,2 % её значение в гомогенатах 2-й группы - (2,76±0,37) мкМ/мл»мин. - и на 66,3 % было больше показателя в группе контроля - (2,60±0,29) мкМ/мл*мин. (р<0,05).
ТПА в 1-й группе достигла значения (6,81±0,39) мкМ/мл»мин., которое на 44,1 % превысило уровень трипсиноподобной протеи-назы во 2-й группе - (3,81±0,39) мкМ/мл»мин. - и на 70,2 % было больше показателя в группе контроля - (2,03±0,22) мкМ/мл»мин. (р<0,05).
Изучение ингибиторов протеолитических ферментов в обеих группах показало, что анти-триптическая активность (АТА) в 1-й группе при ДУОМЖ с воспалительным компонентом, составив (18,88±0,76) мкМ/мл»мин., оказалась на 35,1 % больше показателя во 2-й группе -
(12,25±0,56) мкМ/мл»мин. - и на 38,9 % превысила значение в группе контроля - (11,54±0,93) мкМ/мл»мин. (р<0,05). В то же время кис-лотостабильные ингибиторы (КСИ) показали тенденцию к повышению во 2-й группе до
Насыщенность гомогенатов трепан-биоптатов ДУ
стемы (M±m)
(5,43±0,43) мкМ/мл.мин. и в группе контроля -(11,68±0,74) мкМ/мл.мин., что на 35,9 % и 70,2 % соответственно превысило значение указанного компонента системы протеолиза в 1-й группе - (3,48±0,29) мкМ/мл.мин. (р<0,05) (табл. 2).
Таблица 2
ЭМЖ компонентами протеиназ-ингибиторной си-мкМ/мл«мин.
Группа больных Компоненты протеиназ-ингибиторной системы в гомогенате доброкачественных узловых образований молочной железы
ТПА, мкМ/ мл»мин ЭПА, мкМ/ мл»мин АТА, мкМ/ мл*мин КСИ, мкМ/ мл*мин
1 ДУОМЖ с воспалением (n=23) 6,81±0,39*/** 7,72±0,35*/** 18,88±0,76*/** 3,48±0,29*/**
2 ДУОМЖ без воспаления (n=15) 3,81±0,39* 2,76± 0,37 12,25±0,56 5,43±0,43*
3 Контроль(n=10) 2,03±0,22 2,60±0,29 11,54±0,93 11,68±0,74
Примечание: * - достоверность различий по отношению к контролю (р<0,05); ** - между исследуемыми группами в трепан-биоптатах.
ОБСУЖДЕНИЕ
Между уровнем экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45 и протеиназной активностью в тканях трепан-биоптатов ДУОМЖ в
исследуемых группах установили прямую пропорциональную связь, тогда как между уровнем экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45 и выраженностью ингибиторного потенциала - обратно пропорциональную (рис. 1).
Рис. 1. Уровень протеиназ (ЭПА, ТПА) и КСИ (мкМ/мл«мин.) во взаимосвязи с уровнем экспрессии общего лейкоцитарного антигена CD45 (%) в группах исследования
Полученные результаты свидетельствуют о том, что при солидных ДУОМЖ на местном уровне происходит нарушение баланса в проте-иназ-ингибиторной системе в сторону превалирования протеиназной активности, что наиболее ярко выражено на фоне воспалительной реакции в тканях (в группе с выраженной экспрессией общего лейкоцитарного антигена СБ45). При этом наблюдается дефицит местного инги-биторного потенциала (КСИ), который не может подавить протеиназную активность (ЭПА, ТПА) и сдерживать в равновесии протеиназ-ингиби-торную систему. Протеиназная активность, не
сдерживаемая КСИ, приводит к прогрессиро-ванию воспалительных изменений в тканях ДУОМЖ, ассоциированных с воспалением, что, в свою очередь, способствует дальнейшему прогрессивному росту уровня протеиназ и т. д.
ВЫВОДЫ
1. В тканях ДУОМЖ рост уровня протеиназной активности происходит параллельно повышению экспрессии общего лейкоцитарного антигена СБ45.
2. Определение уровня общего лейкоцитарного антигена СБ45 и неспецифических протеи-
наз (ЭПА, ТПА) можно включать в диагностическую программу для больных с ДУОМЖ в качестве маркеров воспалительной реакции в тканях.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Коган И. Ю. Фиброзно-кистозные изменения молочных желез (мастопатия) и гормональная контрацепция. Российский вестник акушера- гинеколога. 2009; 3:35-40.
2. Mansel R. E., Webster D. J. T., Sweetland H. M. Benign disorders and diseases of the breast. Elsevier, 2009.
3. Тагиева Т. Т. Факторы риска развития заболеваний молочных желез. Вестник РОНЦ им Н. Н. Блохина РАМН. 2007; 3:68-72.
4. Боженко В. К., Кудинова Е. А., Мельникова Н. В., Близнюков О. П. Анализ пролиферативной активности и апопто-за при гиперпластических процессах молочной железы. Вестник РНЦЦР. 2010; 10.
5. Дубшша В.Г., Четвержов С.Г., Заволока О.В., Морозюк О.М., Сажиенко В.В., Вододюк В.Ю. Бюмаркери пролiферащi при доброяюсних пухлинах молочно'1 залози. Актуальш питан-ня педiатрп, акушерства та гшекологп. 2012; 1:106-108. DOI: 10.11603/24116-4944.2012.1
6. Боженко В. К., Васкевич Е. Ф., Чазова Н. Л., Берщанская А. М., Мельникова Н. В., Та-щян А. А., Слонов А. В. Возможности оценки экспрессии маммаглобина при различной патологии молочной железы. Литературный обзор. Вестник РНЦРР. 2010; 9:35-43. Доступно по: http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v10/papers/ bozhe_v10.htm. Ссылка активна на 12.04.2010.
7. Цой Л. К., Богатырев В. Н., Летягин В. П., Вишневская Я. В., Платова А. М. Клиническое значение p53 и показателей ДНК-проточной цитофлуорометрии в сочетании с клинико-морфологическими факторами прогноза при раке молочной железы. Опухоли репродуктивной женской системы. 2010; 2:44-46. DOI: 10.17659/1994-4098-2010-0-2
8. Масленникова А. В., Голубятников Г. Ю., Орлова А. Г., Плеханов В. И., Артифек-сова А. А., Шахова Н. М., Каменский В. А., Турчин И. В. Неинвазивный оптический метод оценки кислородного статуса новообразований молочной железы. Опухоли репродуктивной женской системы. 2010; 1:510. DOI:10.17650/1994-4098-2010-0-1-5-10
9. Усманова Т. Э., Ильченко Ф. Н., Филатов А. С., Кубышкин А. В. Оптимизация алгоритма диагностики доброкачественных узловых образований молочных желез. Опухо-
ли женской репродуктивной системы. 2016; 12(1):32-36. D01:10.17650/1994-4098-2016-12-1
10. Mantovani A., Allavena P., Sica A., Balkwill F. Cancer-related inflammation. Nature. 2008; 454:436-444. D0I:10.1038/nature07205
11. Grivennikov S. I., Karin М. Inflammation and oncogenesis: a vicious connection. Curr. Opin. Genet. Dev. 2010; 20(1):65. D0I:10.1016/j.gde.2009.11.004
12. Yu H., Kortylewski М., Pardoll D. Crosstalk between cancer and immune cells: role of STAT 3 in the tumor microenvironment. Nat. Rev. Immunol. 2007; 7:41-51. D0I:10.1038/nri1995
13. Chua F., Laurent G. J. Neutrophil elastase: mediator of extracellular matrix destruction and accumulation. Proc. Am Thorac Soc. 2006;3(5):424-427. DOI: 1 0.15 13/pats.200603-078AW
14. Flores-Reséndiz D., Castellanos-Juárez Е., Benítez-Bribiesca L. Proteases in cancer progression. Gac. Med. Mex. 2009;145(2):131-142.
15. Amálinei C., Cáruntu I. D., Giucá S. E., Bálan R.A. Matrix metalloproteinases involvement in pathologic conditions. Rom. J. Morphol. Embryol. 2010; 51(2):215-228.
16. Noemí Eiró, Francisco J. Vizoso. Inflammation and cancer. World J. Gastrointest Surg. 2012; 4(3):62-72. D0I:10.4240/wjgs.v4.i3.62
17. Коваленко Е. П., Татарчук В. Ф., Литвинова С. В., Кубышкин А. В. Изменения показателей активности местных неспецифических протеи-наз и их ингибиторов при гиперплазиях эндометрия. Здоровье женщины. 2011; 9(65):118-123.
18. Литвинова С. В., Коваленко Е. П., Фо-мочкина И. И., Кубышкин А. В. Сравнительная эффективность использования протеиназ и цитокинов для определения выраженности воспалительного процесса при гиперплазиях эндометрия. Таврический медико-биологический вестник. 2012; 15(3), Ч. 2(59):153-157.
19. Усманова Т. Э. Активность протеи-наз и их ингибиторов в содержимом кист молочной железы. Таврический медико-биологический вестник. 2007; 10( 1 ):105-107.
20. Усманова Т. Э. Роль изучения протеиназ-ингибиторной системы в определении тактики лечения при доброкачественных узловых образованиях молочной железы. Таврический медико-биологический вестник. 2012; 15(4):365-367.
21. Акбашева О. Е. Показатели про-теолиза плазмы крови и фенотипы а1-протеиназного ингибитора при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у детей. Биомедицинская химия. 2007;53(3):338-3 44. D 01: 1 0. 1134/s1990750807040130
22. Кубышкин А. В., Фомочкина И. И. Эласто-литическая активность бронхоальвеолярного ла-важа при моделировании воспалительного процесса в легких. Укр. бiохiм. журн. 2008; 80 (1): 89-95.
REFERENCES
1. Kogan I.Yu. Brest fibrocystic changes (mastopathy) and hormonal contraception. Russian bulletin of the obstetrician-gynecologist. 2009; 3:35-40. (In Russ).
2. Mansel R. E., Webster D. J. T., Sweetland H. M. Benign disorders and diseases of the breast. Elsevier, 2009.
3. Tagieva T.T. Risk factors of brest lesion development. Bulletin of RNTS named after N.N. Blokhin RAMS. 2007; 3:68-72. (In Russ).
4. Bozhenko V.K., Kudinova E.A., Melnikova N.V., Bliznyukov O.P. Analysis of proliferative activity and apoptosis in hyperplastic processes of the brest. Vestnik RNCRR. 2010; 10. Available at: http://www.Vestnik/v10/papers/bozhe1_v10. htm. The link is active until 18.06.2012. (In Russ).
5. Dubinina V.G., Chetverikov S.G., Zavoloka O.V., Morozyuk O.M., Sazhiyenko V.V., Vodyodyuk V.Yu. Biomarker of proliferation in benign breast tumors. Actual issues of pediatrics, obstetrics and gynecology. 2012; 1:106-108. DOI: 10.11603/24116-4944.2012.1. (In Russ).
6. Bozhenko V.K., Vaskevich E.F., Chazova N.L., Bershchanskaya A.M., Melnikova N.V., Tashchyan A.A., Slonov A.V. The potential of mammaglobin expression analysis in various brest diseases. Literature survey. Vestnik RNCRR. 2010; 9:35-43. Available at: http://vestnik. rncrr.ru/vestnik/v10/papers/bozhe_v10.htm. The link is active until 12.04.2010. (In Russ).
7. Tsoy L.K., Bogatyrev V.N., Letyagin V.P., Vishnevskaya Ya.V., Platova A.M. The clinical value of p53 and the parameters of DNA-flow cytofluorometry in combination with clinical and morphological predictors in brest cancer. Women Reproductive System Tumors. 2010; 2:44-46. DOI:10.17659/1994-4098-2010-0-2. (In Russ).
8. Maslennikova A.V., Golubyatnikov G.Y., Orlova A.G., Plekhanov V.I., Artifeksova A.A., Shakhova N.M., Kamensky V.A., Turchin I.V. Non-invasive optical method for evaluating the oxygen status in breast neoplasms. Women Reproductive System Tumors. 2010;(1):5-10. DOI:10.17650/1994-4098-2010-0-1-5-10. (In Russ).
9. Usmanova T.E., Il'chenko F.N., Filatov A.S., Kubyshkin A.V. Optimization of a diagnostic algorithm for benign breast nodules. Women Reproductive System Tumors. 2016;12(1):32-36. DOI:10.17650/1994-4098-2016-12-1 . (In Russ).
10. Mantovani A., Allavena P., Sica A., Balkwill F. Cancer-related inflammation. Nature. 2008; 454:436-444. DOI:10.1038/nature07205
11. Grivennikov S. I., Karin M. Inflammation and oncogenesis: a vicious connection. Curr. Opin. Genet. Dev. 2010; 20(1):65. D01:10.1016/j.gde.2009.11.004
12. Yu H., Kortylewski M., Pardoll D. Crosstalk between cancer and immune cells: role of STAT 3 in the tumor microenvironment. Nat. Rev. Immunol. 2007;7:41-51. D0I:10.1038/nri1995
13. Chua F., Laurent G. J. Neutrophil elastase: mediator of extracellular matrix destruction and accumulation. Proc. Am Thorac Soc. 2006;3(5):424-427. DOI: 1 0.151 3/pats.200603-078 AW
14. Flores-Reséndiz D., Castellanos-Juárez E., Benítez-Bribiesca L. Proteases in cancer progression. Gac. Med. Mex. 2009;145(2):131-142.
15. Amálinei C., Cáruntu I. D., Giucá S. E., Bálan R.A. Matrix metalloproteinases involvement in pathologic conditions. Rom. J. Morphol. Embryol. 2010; 51(2):215-228.
16. Noemí Eiró, Francisco J. Vizoso. Inflammation and cancer. World J. Gastrointest Surg. 2012; 4(3):62-72. DOI:10.4240/wjgs.v4.i3.62
17. Kovalenko E.P., Tatarchuk V.F., Litvinova S.V., Kubyshkin A.V. Changes in the activity of local non-specific proteases and their inhibitors in endometrial hyperplasia. Women's health. 2011; 9 (65):118-123. (In Russ).
18. Litvinova S.V., Kovalenko E.P., Fomochkina I.I., Kubyshkin A.V. The comparative efficiency of the proteinase-inhibitor activity and cytokines for determination of inflammation's expression under endometrial hiperplasia. Tavrichesky mediko-biologichesky vestnik. 2012; 15(3):153-157. (In Russ).
19. Usmanova T.E The activity of proteinases and their inhibitors in the contents of the mammary gland cysts. Tavrichesky mediko-biologichesky vestnik. 2007; 10( 1): 105-107. (In Russ).
20. Usmanova T.E. Role of studies of proteinase-inhibitor systems in establishing treatment tactics for benign nodular formations in the mammary gland. Tavrichesky mediko-biologichesky vestnik. 2012; 15(4):365-367. (In Russ).
21. Akbasheva O.E. Parameters of plasma blood proteolysis and phenotypes of a1-proteinase inhibitor in children with duodenal ulcer. Biomedical chemistry. 2007; 53(3):338-344. D0I:10.1134/s1990750807040130. (In Russ).
22. Kubyshkin A.V., Fomochkina I.I Elastoliticheskayaaktivnost' bronkhoal'veolarnogo lavazha pri modelirovanii vospalitel'nogo protsessa v legkikh [Elastolytic activity of bronchoalveolar lavage in modeling of the inflammatory process in lungs]. Ucr. biokhim. zhurnal - Ucrainian Biochemical Journal, 2008; 80 (1): 89-95 (In Russ).
