Синтез конъюгатов 2-аминопурина с RGD-пептидом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



74 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

ких режимах и путях введения. ГМДП-А оказывала моди- муксола и осцилолла. Содержание комплекса в спирулине фицирующее (усиливающее) действие в отношении тера- достигает G,76 % на сухую массу. Соотношение муксола певтической эффективности цисплатина, выраженность и осцилолла при этом составляет б2,7 %:27,2 %. Данные которого зависела от гистологической формы опухоли каротиноиды охарактеризованы UV—VIS FABMS HPLS (Р388 > B^ > S37 > РШМ 5), варианта роста опухоли, пу- и NMR. Комплекс получен без использования хроматогра-ти введения (эффективна при подкожном введении и со- фических методов и, по данным японских исследований, лидной опухоли, неэффективна при внутрибрюшинном обладает высокой противоопухолевой активностью. введении и асцитной опухоли) и длительности курса (эф- Заключение. Получили кристаллический ФК из диато-фективен более длительный курс). ГМДП-А проявляла мовой водоросли C. closterium и комплекс из Spirulina pla-выраженный модифицирующий эффект по ТРО и уровню tensis, состоящий из 2 каротиноидов (муксола и осцилолла) продолжительности жизни на модели Р388 в отношении и белка. гемзара и циклофосфана. Выявлено дистантное действие ГМДП-А, которое косвенно подтверждает иммунный ме- И.А. Низова, А.Ю. Вигоров, Г.Л. Левит, В.П. Краснов ханизм воздействия. СИНТЕЗ КОНЪЮГАТОВ 2-АМИНОПУРИНА Заключение. ГМДП-А не обладает противоопухолевой С RGD-ПЕПТИДОМ активностью по критериям, принятым для оценки эффек- ФГБУН«ИОС им. И.Я. Постовского УрО РАН», Екатеринбург тивности цитостатических препаратов. ГМДП-А проявляет Введение. Пептиды, содержащие аминокислотную модифицирующие свойства в отношении ряда цитостати- последовательность ^)-аргинил-глицил-^)-аспараги-ческих препаратов: цисплатина, гемзара и циклофосфана, новая кислота (RGD-пептиды), проявляют специфиче-что подтверждает его потенциал как модификатора биоло- ское взаимодействие с интегринами определенных гических реакций. Препарат ГМДП-А может быть реко- классов — поверхностными рецепторами опухолевых мендован для клинических испытаний при химиотерапии клеток. Поэтому представляет интерес синтез соедине-пациентов с онкогематологическими заболеваниями. ний, содержащих фрагмент модифицированного азотистого основания и RGD-пептида в качестве молекуляр-М.В. Нехорошев, В.И. Рябушко, ного вектора как потенциальных противоопухолевых С.Н. Железнова, Р.Г. Геворгиз веществ. КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ ВОДОРОСЛИ - Цель исследования - разработка метода синтеза N-КОММЕРЧЕСКИЙ ИСТОЧНИК (2-аминопурин-б-ил)глицил-(^)-аргинил-глицил-(^)-АНТИОКСИДАНТОВ аспаргиновой кислоты. ФГБУН «ИМБИ им. А. О. Ковалевского», Севастополь Материалы и методы. Получены исходные соединения — Введение. Микроводоросли являются перспективным диметиловый эфир (№-2,2,4,б,7-пентаметилдигидробензо-источником биологически активных веществ, таких как фуран-5-сульфонил)-(5)-аргинил-глицил-(5)-аспарагиновой полиненасыщенные жирные кислоты, полисахариды, ви- кислоты (Nm-Pbf-Arg-Gly-Asp-(OMe)2) и ^(2-ацетиламино-тамины, каротиноиды и др. пурин-б-ил) глицин. Строение и чистота целевых соедине-Материалы и методы. Среди многих видов водорослей ний подтверждены данными 'Н ядерной магнитно-резо-особый интерес представляет C. closterium (Ehrenberg) Rei- нансной спектроскопии (Bruker Avance 5GG), элементного mann & Lewin и Spirulina (Arthrospira)platensis (Nordst.) Geitl, анализа (Perkin Elmer РЕ 24GG), HRMS (LCMS-2G1G фирмы поскольку обладают рядом уникальных свойств. Shimadzu) и обращенно-фазовой высокоэффективной Результаты. Содержание фукоксантина (ФК) у C. clos- жидкостной хроматографии (Agilent 11GG, колонка Pheno-terium достигает 78 % от общего количества каротиноидов, menex Luna C-18). что в пересчете на сухую массу составляет 1,7 %; содержа- Результаты. Исследована реакция конденсации Nm-Pbf-ние жирных кислот достигает 4G %, из них 22 % от общего Arg-Gly-Asp-(OMe)2 и ^(2-ацетамидопурин-б-ил) глици-содержания жирных кислот — полиненасыщенные жирные на в различных условиях. Установлено, что оптимальными кислоты. Наибольшего внимания заслуживает ФК, кото- условиями, позволяющими получать конъюгат N-^-аце-рый приводит к снижению уровня глюкозы в крови за счет тамидопурин-б-ил)глицина с умеренными выходами, участия в формировании докозагексаеновой кислоты. являются использование смеси растворителей диметил-Большое количество публикаций посвящено исследова- сульфоксида — диметилформамида в присутствии тетра-нию ФК в области онкологии. Он значительно подавляет фторобората О-(бензотриазол-1-ил)-^^^^-тетраме-рост клеток лейкоза человека, рака предстательной железы тилурония (TBTU) в качестве конденсирующего агента и молочной железы. ФК получили в кристаллической фор- и ^^диизопропилэтиламина в качестве третичного осно-ме из диатомовой водоросли C. closterium и затем охаракте- вания. Удаление защитных групп в полученном конъюгате ризовали методами масс- и ядерной магнитно-резонанс- осуществляли путем последовательных превращений: ще-ной спектроскопии. Соотношение транс- и цисизомеров лочного гидролиза (1М NaOH комнатной температуры) ФК, полученное после перекристаллизации из диэтилово- для удаления сложноэфирных и ацетильной защитных го эфира, составляло 95:4. В то же время после перекри- групп и обработки водным раствором трифторуксусной сталлизации ФК из хлористого метилена соотношение кислоты для удаления Pbf-защитной группы. В результате изомеров составляет 99:G,5. целевое соединение получено в виде трифторацетата. Из филаментной планктонной цианобактерии Spirulina Заключение. Разработан метод синтеза N-^-амино-platensis выделен комплекс, состоящий из 2 каротиноидов: пурин-б-ил)глицил-(5)-аргинил-глицил-(5)-аспаргино-

№1 I том 15 I 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

75

вой кислоты, потенциального противоопухолевого соединения.

Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ (грант № 14-13-01077).

Л. Л. Николаева1, А.В Ланцова1, Е.В. Санарова1, И.Д. Гулякин1, Н.А. Оборотова1,2, Е.В. Игнатьева1, Н.А. Дмитричева1, И. В. Ярцева1, Н.Д. Бунятян2, В. В. Мусияк3, Г. Л. Левит3, В. П. Краснов3 КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ОРМУСТИНА В ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва;

2ГБОУ ВПО «Первый МГМУим. И.М. Сеченова»

Минздрава России, Москва;

3ФГБУН «ИОС им. И. Я. Постовского УрО РАН»,

Екатеринбург

Введение. Тонкослойная хроматография (ТСХ) является одним из основных методов в таких фармацевтических исследованиях, как установление подлинности препаратов, определение количественного содержания действующего вещества и посторонних нелетучих примесей, контроль высвобождения и т. п. В РОНЦ им. Н.Н. Блохина была разработана лиофилизированная лекарственная форма препарата из класса нитрозомочевин — Ормустин. Для идентификации активного вещества в лекарственной форме возможно использование ТСХ-анализа.

Цель исследования — подбор системы растворителей для определения Ормустина в лиофилизированной лекарственной форме методом ТСХ.

Материалы и методы. Ормустин, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 125 мг (РОНЦ им. Н.Н. Блохина), субстанция Ормустина (ИОС им. И.Я. Постовского УрО РАН), различные органические растворители: этанол, пропанол-2, бутанол, аммиак водный, ледяная уксусная кислота, этилацетат, этиловый эфир, хлороформ. Хроматографическое разделение компонентов проводили на пластинках "8огЬШ" 10 х 15 см (Россия). Лиофилизат Ормустина регидратировали водой для инъекций. Стандартный раствор Ормустина получали растворением субстанции Ормустина водой для инъекций. На линию старта наносили раствор препарата и стандарта. После достижения фронтом растворителей линии финиша пластинку вынимали из камеры, подсушивали на воздухе и проявляли раствором нингидрина.

Результаты. В ходе проведенного эксперимента изучены значения величины подвижной фазы в 12 различных системах растворителей. Наиболее четкая идентификация субстанции Ормустина получена в 3 системах: 1) н-бутанол— ледяная уксусная кислота—вода (12:3:5), 2) пропанол-2— аммиак водный (6:4), 3) этанол—аммиак водный (6:4).

Заключение. Проведен подбор систем растворителей для идентификации Ормустина в лекарственной форме. Полученные результаты указывают на возможность применения ТСХ-анализа для идентификации Ормустина в лио-филизате.

Работа выполнена в рамках Государственного контракта № 13411.1008799.13.163 «Доклинические исследования противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин».

Л. Л. Николаева1, И. Д. Гулякин1, А. В Ланцова1, Е.В. Санарова1, Н.А. Оборотова1,2, Е.В. Игнатьева1, Н.А. Дмитричева1, И. В. Ярцева1, Н.Д. Бунятян2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ KOLLIDON 17 PF В ЛИОФИЛИЗИРОВАННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ГБОУВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва

Введение. Kollidon 17 PF относится к водорастворимым поливинилпирролидонам, по своим физиологическим свойствам он аналогичен альбумину крови и при введении в кровеносное русло оказывает благоприятное воздействие на системную гемодинимику и микроциркуляцию. Его используют при производстве таблеток, для повышения растворимости активных фармацевтических субстанций, а также при создании инъекционных лекарственных форм, для формирования структуры лиофилиза-та в процессе сублимационной сушки, и в других областях фармацевтической промышленности. Поскольку Kollidon 17 PF входит в состав множества современных лиофили-зированных лекарственных форм, то разработка метода его идентификации является актуальной задачей. Метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) достаточно прост в применении, обеспечивает быстрое разделение компонентов, поэтому его применяли для определения Kollidon 17 PF.

Материалы и методы. Kollidon 17 PF (BASF, Германия), ЛХС-1208, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 9 мг (РОНЦ им. Н.Н. Блохина), Ормустин, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 125 мг (РОНЦ им. Н.Н. Блохина), органические растворители: этанол, пропанол-2, бутанол, аммиак водный, ледяная уксусная кислота, этилацетат, этиловый эфир, хлороформ, н-гексан, бензол, ацетон, метанол. В качестве неподвижной фазы использовали пластинки "Sorbfil" 10 х 15 см (Россия). Хроматографирование проводили восходящим способом. Когда расстояние фронта растворителей достигало 12 см, пластинку вынимали из камеры и подсушивали на воздухе. Идентифицировали парами йода (желтое пятно).

Результаты. В ходе эксперимента использованы несколько различных систем растворителей. В 28 случаях Kollidon 17 PF проявлялся на линии старта. Только в 2 системах удалось оторвать исследуемый компонент от стартовой линии — пропанол-2: аммиак водный (6:4) и этанол: аммиак водный (6:4).

Заключение. Подобраны системы растворителей для идентификации Kollidon 17 PF в составе лекарственных форм.

Л.Н. Николаевич, О.И. Голубович, К.Н. Саунина СИНЕРГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ АГОНИСТОВ ГЛУТАМАТА И ЦИТОСТАТИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

ГНУ «Институт физиологии НАН Беларуси», Минск, Республика Беларусь

Введение. В клинической практике для лечения злокачественных заболеваний применяют агонисты глутамата в комбинации с существующими химиотерапевтическими препаратами. Это позволяет достичь большего цитостати-ческого эффекта по сравнению с применением только од-

№1 / том 15 / 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ