CC BY
61
УДК 543.226+541.632
Ф. С. Ахатова, З. А. Бредихина, Д. В. Захарычев,
Л. В. Коношенко, А. А. Бредихин
СИНТЕЗ И ОСОБЕННОСТИ КРИСТАЛЛИЗАЦИИ
ЦИКЛИЧЕСКИХ СУЛЬФАТОВ
Ключевые слова: циклические сульфаты, конгломерат, ароматические эфиры глицерина.
Циклические сульфаты 3 были получены в энантичистом виде, исходя из энантичистых орто-циано-, метил- и метоксифениловых эфиров глицерина 1, легко доступных при разделении методом вовлечения. Показана возможность синтеза сульфатов путем прямого взаимодействия сульфурилхлорида с соответствующим диолом. Термохимические исследования свидетельствуют
о том, что 4-(2-цианофеноксиметил)-1,3,2-диоксотиолан-2,2-диоксид 3а является
конгломератом, способным к спонтанному расщеплению на энантиомеры, в то время как 3Ь,с являются стабильными рацемическими соединениями.
The cyclic sulfates 3 have been prepared in the enantiopure form by starting from enantiopure ortho-cyano-, methyl- and methoxyphenyl glycerol ethers 1, easily available by an entrainment resolution procedure. The opportunity of synthesis of sulfates from diols by direct treatment with sulfuryl chloride is analyzed. Thermal investigations reveal that 4-(2-cyanophenoxymethyl)-1,3,2-dioxathiolane-2,2-dioxide 3a is conglomerate forming substance potentially capable to entrainment resolution, whereas 3b,c forms stable racemic compounds.
Замещенные ароматические эфиры глицерина и глицидола используются в качестве предшественников в синтезе хиральных лекарственных средств [1,2]. Поэтому очень важно иметь доступные методы получения этих соединений в энантиочистом виде. Одним из наиболее доступных методов получения энантиомеров является расщепление рацематов [3].
К настоящему времени установлено, что орто-циан-, метил- и метоксизамещенные ароматические эфиры глицерина 1а-с являются конгломератами, то есть кристаллизуются из рацемической смеси в виде отдельных энантиомеров, что делает возможным их препаративное разделение [4-5]. Для орто-циан- и метоксизамещенных ароматических эфиров глицидола 2а,с (орто-метилзамещенный оксиран 2 Ь при комнатной температуре является жидким веществом) эта интересная особенность кристаллизации также сохраняется [7,8].
В данной работе нами исследованы особенности кристаллизации других производных выше перечисленных диолов, а именно циклических сульфатов 3, которые также как и оксираны являются высоко реакционноспособными соединениями [9]. Для синтеза объектов исследования использованы два подхода: известный ранее 2-х стадийный процесс - синтез циклического сульфита 4 и его окисление, а также новый прямой метод - взаимодействие диола с хлористым сульфурилом.
Keywords: cyclic sulfates, conglomerate, aromatic esters of glycerol.
Введение
R=CN(a), CH3 (b), 0CH3(c)
Результаты и их обсуждение
Циклические сульфиты и сульфаты широко используются в современном органическом синтезе. Химия и многочисленные применения этих соединений обобщены в обзоре [10]. Обычно циклические сульфаты получаются окислением соответствующих сульфитов периодатом натрия в присутствии небольших количеств треххлористого рутения или диоксида рутения [10]. Этим методом нами синтезированы сульфаты 3а-с (рис. 1, метод А). Синтез рацемических и энантиочистых диолов 1а-с приведен в опубликованных нами ранее работах [4-6]. При получении энантиочистых диолов мы использовали спонтанное расщепление рацемического диола методом вовлечения в кристаллизацию.
(8)-1а-с !*=СМ(а), СН3 (Ь), 0СН3(с)
Рис. 1 - Схема синтеза циклических сульфатов 3а-с
Более экономичным представляется альтернативный подход к циклическим сульфатам, который состоит в прямом действии хлористого сульфурила на соответствующий диол. Обычно эта реакция сопровождается образованием побочных продуктов, и циклические сульфаты получаются с плохими выходами [10]. Недавно Алонсо и Риера более подробно изучили эту реакцию [11]. Следуя их рекомендациям (сильное разбавление, медленное добавление 802012, 0^) нам удалось получить рацемические и энантиочистые сульфаты 3а-с с умеренными и хорошими выходами (рис. 1, метод Б). Наилучший выход наблюдается при наличии в ароматическом кольце исходного диола электроноакцепторной циано группы.
Методом ДСК нами изучены особенности кристаллизации сульфатов 3а-с. Образцы сульфатов были получены нами в энантиочистом виде и в виде рацематов, каждый из которых был исследован дифференциальной сканирующей калориметрией (ДСК). Сведения о полученных таким образом температурах Т и энтальпиях плавления АН рацемических и энантиочистых образцов (нижние индексы и А, соответственно), а также рассчитанных на
экспериментальной основе изменениях свободной энергии образования АО0 рацемического соединения в твердой фазе и энтропии смешения энантиомеров в жидкой фазе АБ™! приведены в таблице 1.
Как видно из табл. 1, для орто-цианозамещенного сульфата 3а энергия Гиббса практически нулевая, энтропия смешения энантиомеров близка к идеальному значению Rln2, а эвтектика плавится там же, где и рацемат; орто-метилзамещенное соединение 3Ь характеризуется значительной отрицательной свободной энергией образования рацемического соединения, при этом температура плавления рацемического и энантиочистого соединения очень близки; орто-метоксипроизводное также характеризуется значительным, но меньшим значением свободной энергией образования рацемического соединения. Все это свидетельствует об образовании рацемического конгломерата в первом случае, стабильного рацемического соединения во втором случае, умеренно стабильного рацемического соединения в третьем. Эти выводы полностью подтверждаются фазовыми диаграммами
циклических сульфатов, приведенными на рисунке 2. Из рисунка видно, что в то время как орто-метил- и метоксипроизводные характеризуются W-образной кривой, типичной для рацемического соединения, у орто-циано производного средняя часть сжимается до нулевой ширины, кривая вырождается в V-образную диаграмму рацемического конгломерата.
Таблица 1 - Измеренные и вычисленные термодинамические параметры циклических сульфатов 3а-с__________________________________________________________________
б £ к £ К '■С - 4 | £ Ї 1 С ч. * § а: * § '■г . -1 1 ■ ^ *
3а 118.6 87.4 26.3 22.2 5.33 15.2
3Ь 49.3 51.2 20.7 23.1 -0.39 -1991
3с 61.0 45.7 25.8 23.1 3.5 -662
а Ь с
Мольная доля (К) - энантиомера
Рис. 2 - Двойные фазовые диаграммы плавления соединений 3а (а), 3Ь (Ь), 3с (с)
Обнаружив спонтанное расщепление 4-(2-циано-феноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксида 3а, мы показали принципиальную возможность его разделения (см. табл. 2 и эксп. часть).
Таблица 2 - Результаты разделения методом вовлечения гас-3а (19 мл этанола, 2 мг затравки на каждый прогон, температура кристаллизации 11-12°С)
№ Вес гас-3а, мг Вес (^)-3а, мг Время, (Я)-3а (Э)-3а ее, %
опер. мин Выход, мг Выход, мг
1 660 34 60 52 84
2 50 85 40 67
Заключение
Впервые для синтеза энантиочистых циклических сульфатов использована методика спонтанного расщепления исходных рацемических арилоксипропандиолов с последующим прямым взаимодействием энатиочистого диола с хлористым сульфурилом.
Методом ДСК изучены особенности кристаллизации выделенных сульфатов и показано, что 4-(2-цианофеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид За кристалли-зуется в виде конгломерата, так же как и исходный диол. Осуществлено практическое расщепление рацемического сульфата За.
Экспериментальная часть
1 13 1 13
Спектры ЯМР Н, C были зарегистрированы на спектрометре Avance-600 ( Н-600.00 МГц, C -150.864 МГц) в CDCI3. Химические сдвиги протонов указаны относительно ТМС. Оптическое вращение измеряли на поляриметре Perkin Elmer 341. Температуру плавления определяли на нагревательном столике Воёйш с визуальным контролем.
Кривые плавления образцов регистрировали на дифференциальном сканирующем калориметре Perkin-Elmer Diamond DSC в алюминиевой ячейке со скоростью нагрева 10оС мин-1. Масса образцов в среднем приблизительно 2.5 мг.
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) проводилась на хроматографе Shimadzu LC-20AD с УФ детектором (^=275 нм). Использовались Daicel, Inc. Chiralcel OD (0.46x25 см) колонки. Все эксперименты проводились при 29оС со скоростью элюирования 1.0 мл/мин.
Синтез циклических сульфатов
Метод A. Общая методика. Сульфаты За-с получали катализируемым рутением окислением соответствующих сульфитов 4а-с согласно методике, описанной в [9,12]. К раствору соответствующего ^-диола 1 (0.01 моль) в 25 мл CH2CI2 прибавляют по каплям раствор SOCI2 (1.31 мл, 0.011 моль) в 10 мл CH2CI2 при 0oC в течение 30 мин., перемешивают ещё 1 ч. и убирают охлаждение. Перемешивание продолжается в течение 3-х часов. После концентрирования смеси в вакууме выделяют вязкое светло-желтое масло, представляющее по данным ЯМР спектроскопии смесь цис/транс изомеров сульфитов (4R)-4. К полученному сырому сульфиту (2RS,4R)-4 для удаления образовавшегося газообразного HCI добавляют 31 мл CCI4 и перемешивают в течение 180 минут при комнатной температуре, а затем удаляют CCI4 при кипячении в течение 30 мин. После охлаждения до 0oC к смеси добавляют ацетонитрил (11 мл), RuCl3xH2O (4 мг, 0.017 ммоль), NaJO4 (3.2 г, 0.015 моль) и 1.3 мл Н2О. Реакционную смесь перемешивают в течение 5-6 ч. до исчезновения сульфита (контроль методом ТСХ). Затем отгоняют часть CH3CN при 50oC, приливают 2 мл Н2О и переливают в делительную воронку. Приливают 70 мл этилацетата и удаляют черный водный слой. К органическому слою снова приливают 2 мл Н2О, и промывают насыщенным раствором NaHCO3 (2x2 мл) и рассолом NaCI (4 мл). Органический слой сушат над MgSO4, отфильтровывают через слой силикагеля. После удаления этилацетата образовавшийся осадок промывают гексаном и получают белые кристаллы. Характеристики полученных сульфатов приведены ниже.
(Л)-4-(2-Цианофеноксиметил)-1,З,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-За. После перекристал-лизации из CCI4 получают 2.2 г (86%). Т. пл. 118-120oC (CCI4); [a]D20 = +17.0 (с 0.6, EtOH); {Ср. лит.[13], масло [a]D20 = +8.6 (с 2.0, EtOH)}. 99.9% ее [ВЭЖХ анализ; элюент: гексан/изопропанол = 60/40; tR = 13.0 мин (основной), tR = 14.6 мин (минорн.).] ИК (KBr, см-1): 3074, 3044 (CAr-H); 2947 (C-H); 2233 (CN); 1581, 1600, 1494 (Ar); 1375, 1206 [S(=O^]; 1060, 977,834, 756 (S-O-C). 1H ЯМР, 8 = 4.39 (дд, J = 10.2, 6.8 Гц; 1H, OCH2), 4.48 (дд, J = 10.2, 5.0 Гц; 1H, ОСН2), 4.82 (дд, J = 9.0, 5.7 Гц; 1H, CH2OS), 4.93 (дд, J = 9.0, 6.4 Гц; 1H, CH2OS) 5.29-5.33 (м, 1H, CHOS), 7.02 (д, J = 8.32 Гц, 1Н, C6ArH), 7.13 (дд, J = 7.4, 7.6 Гц; 1Н, C4ArH), 7.6 (м, 2Н, C3,5ArH). 13C ЯМР, 8 = 66.8 (CH2OS), 69.7 (ОСН2), 77.8 (CHOS), 102.9 (С2аг),
113.0 (C6Ar), 115.5 (CN), 122.7 (С4*), 134.0 (C3Ar), 134.6 (C5Ar), 158.8 (C1Ar). Найдено (%): C, 47.14; H, 3.48; N, 5.56; S, 12.54. C10H9NSO5. Вычислено (%): C, 47.05; H, 3.55; N, 5.48; S, 12.55. гас-4-(2-Цианофеноксиметил)-1,З,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, rac-3a получают аналогично вышеупомянутой методике (метод A) из гас-1а (1.5 г, 7.8 ммоль). Выход: 1.69 г (85%); белые кристаллы; Т. пл. 87-89oC (CCI4). Найдено (%): C, 47.38; H, 3.44; N, 5.40; S, 12.41. C10H9NSO5. Вычислено (%): C, 47.05; H, 3.55; N, 5.48; S, 12.55.
(Л)-4-(2-Метилфеноксиметил)-1,З,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (R)-3b. Выход: 2.7 г (92.7%); Т. пл. = 48-49oC (гексан); [ab2° = +15.3 (с 0.5, EtOH); 99.1% ее [ВЭЖХ анализ; элюент: гексан/изопропанол = 3/2; tR = 15.1 мин (основн.), tR = 18.5 мин (минорн.).] :H ЯМР, 8= 2.21 (c, 3H, CH3), 4.30 (д, J = 4.8 Гц; 2H, ОСН2), 4.76 (дд, J = 8.85, 6.3 Гц; 1H, CH2OS), 4.85 (дд, J = 8.85, 6.6 Гц; 1H, CH2OS) 5.20-5.31 (м,
1H, CHOS), 6.75 (д, J = 8.11 Гц, 1Н, C6ArH), 6.95 (т, J = 7.4, Гц; 1Н, C4ArH), 7.2 (м, 2Н, C3,5ArH).
гас-4-(2-Метилфеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-3Ь получают аналогично
вышеупомянутой методике (метод А) из гас-1с. Выход: 2.6 г (90%); Т. пл. 51-530С (гексан). 13С ЯМР (150.9 МГц, CDClз): 8 = 15.9 (^3), 65.8 (СН2ОS), 69.4 (ОСН2), 76.6 (СНOS), 111.1 (С6аг), 122.0 (С^), 126.9 (С2Ar), 127.1 (С5Ar), 131.2 (С^г), 155.5 (С1Ar).
(Л)-4-(2-Метоксифеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-3с. После пере-
кристаллизации из С^4 получают 2.2 г (86%) (К)-3с. Т. пл. = 61-630С; [а]020 = +22.7 (с 0.6, EtOH) {Ср. лит.[13], для (5)-3с: масло, [а]020 = +20.12 (с 1, EtОН)}. 99.2% єє [ВЭЖХ анализ; элюент: гексан/изопропанол = 3/2; ^ = 15.2 мин (мажорн.), ^ = 18.8 мин (минор).] 'И ЯМР, 8 = 3.88 (с, 3Н, OCHз), 4.31 (дд, J = 11.0, 6.4 Гц; 1Н, ОСН2), 4.39 (дд, J = 11.0, 4.7 Гц; 1Н, ОСН2), 4.82-4.89 (м, 2Н, CH2ОS), 5.23-5.29 (м, 1Н, CHOS), 6.91-6.95 (м, 2Н, С3,5ArH), 6.98-7.00 (м, 1Н, С4ArH), 7.05-7.09 (м, С6ArH). 13С ЯМР, 8= 55.8 (OCHз), 68.5 (СН2ОS), 70.0 (ОСН2), 78.7 (СНOS), 112.5 (С2аг), 117.3 (С6Ar),
121.1 (С\г), 123.9 (С3Ar), 147.1 (С^г), 150.5 (С1Ar).
гас-4-(2-Метоксифеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, гас-3с получают аналогично вышеупомянутой методике в виде масла (0.63 г, 72%) (метод А) из гас-1с. Продукт кристаллизуют высаживанием гексаном из раствора хлористого метилена. Т. пл. 44-460С (гексан).
Метод Б. Общая методика. Сульфаты (К) -3 получают из диолов («^ -1 и SO2Cl2 по методике, приведенной в работе [11], с некоторыми изменениями. Диол (5)-1 (3 ммоль) растворяют в 120 мл этилацетата в атмосфере сухого азота и к полученному раствору добавляют NEt3 (4.8 мл, 36 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до 0-20С и добавляют медленно по каплям SO2Cl2 (1.2 мл, 15 ммоль) в этилацетате (1 мл) в течение 3 ч. Реакционную смесь перемешивают при этой температуре еще 30 мин. и добавляют воду (45 мл). Органический слой отделяют, промывают его дважды водой и рассолом, затем сушат над MgSO4 и пропускают через слой силикагеля. Затем фильтрат концентрируют на роторном испарителе (для удаления остатков воды добавляют /-PrOH и вновь досушивают), промывают эфиром и выделяют сульфат (К)-3 в сыром виде. Ниже приведены характеристики выделенных продуктов.
(Л)-4-(2-Цианофеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-3а. Выход сырого продукта 87%, после перекристаллизации из получают чистый (К)-3а; Т. пл. 118-1200С; [а]020 = +16.5 (с 0.6,
EtOH).
гас-4-(2-Цианофеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, гас-3а получают аналогично методу Б из 0.58 г гас-1а. Выход 0.56 г (73%). Т. пл. 86-880С.
(Л)-4-(2-Метилфеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-3Ь. Сырой продукт (0.45 г) в виде масла очищают колоночной хроматографией (силикагель, петролейный эфир/этилацетат). Т. пл. 47-490С.
(Л)-4-(2-Метоксифеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (Л)-3с. Сырой продукт (0.8 г) в виде масла очищают колоночной хроматографией (силикагель, петролейный эфир/этилацетат) и перекристаллизацией из смеси пентан/CCl4 получают 0.4 г (52%) чистого (К)-3с; Т.пл. 61-630С, [а]в2° = +23.0 (с 0.6, EtOH).
гас-4-(2-Метоксифеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диоксид, (К)-3с получают аналогично
методу Б из 0.6 г гас-1с. Сырой продукт (0.7 г) в виде масла очищают колоночной хроматографией (силикагель, петролейный эфир/этилацетат) и получают 0.28 г (36 %) чистого гас-3с; Т. пл. 45-470С.
Разделение рацемического 4-(2-цианофеноксиметил)-1,3,2-диоксатиолан-2,2-диок-сида 3а.
Рацемический сульфат 3а (660 мг) и (К)-3а (34 мг) растворяют в 19 мл EtOH при 500С. Затем раствор охлаждают до 150С и добавляют мелко измельченную затравку (К)-3а (2 мг). Затем перемешивают смесь в течение 60 минут при 11-120С, образовавшийся осадок (К)-3а отфильтровывают {52 мг после сушки; [а]020 = +14.5 (с 0.5, EtOH), 84% ор}. К маточному раствору добавляют гас-3а (50 мг) и нагревают смесь до 500С; затем, полученный раствор охлаждают до 150С и добавляют мелко измельченную затравку (5)-3а (2 мг), перемешивают раствор в течение 85 мин при 10-110С и отфильтровывают (5)-3а {40 мг после сушки; [а]020 = -11.6 (с 0.5, EtOH), 67% ор}.
Благодарность
Авторы выражают благодарность Российскому фонду фундаментальных исследований за финансовую поддержку (грант 09-03-00308) и А.В. Пашагину за анализ продуктов методом ВЭЖХ.
Работа выполняется по государственному контракту между Федеральным агентством по науке и инновациям и государственным образовательным учреждением Казанским государственным технологическим университетом на 2011 год№16.552.11.7012.
Литература
1. Hanson, R.M. The synthetic methodology of nonracemic glycidol and related 2,3-epoxy alcohols / R.M. Hanson // Chemical Reviews. -1991. - Vol. 91. - N. 4. - P. 437-475.
2. Грибова, Я. В. Особенности прогнозирования потребности в лекарственных средствах / Я. В. Грибова // Вестник Казан. технол. ун-та. - 2011. - Т. 14, №1. - С. 171-178.
3. Jacques, J. Enantiomers, racemates, and resolutions / J. Jacques, A. Collet, S.H. Wilen // Malabar FL: Krieger Publishing Co. - 1994. - 447 p.
4. Bredikhina ,Z.A. Spontaneous resolution among chiral ortho-cyanophenyl glycerol derivatives. An effective preferential crystallization approach to single enantiomer p-adrenoblocker bunitrolol / Z.A. Bredikhina, F.S. Akhatova, D.V. Zakharychev, A.A. Bredikhin // Tetrahedron: Asymmetry. - 2008. - Vol. 19. - N. 12. - P. 1429-1434.
5. Bredikhin, A.A. Three different types of chirality driven crystallization within the series of uniformly substituted phenyl glycerol ethers / A.A. Bredikhin, Z.A. Bredikhina, V.G. Novikova, A.V. Pashagin, D.V. Zakharychev, A.T. Gubaidullin // Chirality. - 2008. - Vol. 20. - N 10. - P. 1092-1103.
6. Bredikhina, Z.A. Solid state properties and effective resolution procedure for guaifenesin, 3-(2-metoxyphenoxy)-1,2-propanediol / Z.A. Bredikhina, V.G. Novikova, D.V. Zakharychev, A.A. Bredikhin // Tetrahedron: Asymmetry. - 2006. - Vol. 17. - N. 21. - P. 3015-3020.
7. Bredikhin, A.A. Solid state properties of 1,2-epoxy-3-(2-cyanophenoxy)-propane - conglomerate forming chiral drugs precursor / A.A. Bredikhin, Z.A. Bredikhina, D.V. Zakharychev, F.S. Akhatova, D.B. Krivolapov, I.A. Litvinov // Mendeleev Commun. - 2006. - N. 22. - P. 245-247.
8. Bredikhin, A.A. Solid state properties of 1,2-epoxy-3-(2-methoxyphenyloxy)-propane - valuable intermediate in chiral drug synthesis / A.A. Bredikhin, E.I. Strunskaya, D.V. Zakharychev, D.B. Krivolapov, I.A. Litvinov, Z.A. Bredikhina // Tetrahedron: Asymmetry. - 2005. - Vol. 16. - N. 20. - P. 3361-3366.
9. Gao, Y. Vicinal diol cyclic sulfates: Like epoxides only more reactive / Y.Gao, K.B. Sharpless // J. Am. Chem. Soc. - 1988. - N. 110. - P. 7538-7539.
10.Lohray, B.B. 1,3,2-Dioxathiolane oxides: epoxide equivalents and versatile synthons / B.B. Lohray, V. Bhushan // Adv. Heterocycl. Chem. - 1997. - Vol. 68. - P. 89-180.
11.Alonso, M. Improved preparation of P-hydroxy-a-amino asids: direct formation of sulfates by sulfuryl chloride / M. Alonso, A. Riera // Tetrahedron: Asymmetry. - 2005. - Vol. 16. - P. 3908-3912.
12.He, L. A new synthetic route to chiral glicerolipid precursors using a cyclic sulfate synthon: Preparation of 1-O-hexadecyl-3-O-(4-metoxyphenil)-sn-glycerol and its 1- thio and 1-aza analogues / L. He, H-S Byun, R. Bittman // J. Org. Chem. - 1998. - N. 68. - P. 5606-5699.
13. Sayyed, I.A. Asymmetric synthesis of aryloxypropalamines via OsO4-catalyzed asymmetric dihydroxylation / I.A. Sayyed, V.V. Thakur, M.D. Nikalje, G.K. Dewkar, S.P. Kotkar, A. Sudalai // Tetrahedron. - 2005. - Vol. 61. - P. 2831-2838.
© Ф. С. Ахатова - канд. хим. наук, асс. каф. физики КНИТУ, [email protected]; З. А. Бредихина -д-р хим. наук, доц., вед. науч. сотр. лаб. стереохимии ИОФХ им. А.Е. Арбузова КНЦ РАН, [email protected]; Д. В. Захарычев - науч. сотр. той же лаборатории, [email protected]; Л. В. Коношенко - мл. науч. сотр. той же лаборатории, [email protected]; А. А. Бредихин - д-р хим. наук, проф., зав. лаб. стереохимии ИОФХ им. А.Е. Арбузова КНЦ РАН, [email protected].
