CC BY
127
недифференцированными. Однако 11±3% клеток в полученных популяциях были положительны по НЬЛ-БЯ. Причем при культивировании без МСК положительными по НЬЛ-БЯ было 31,8±4% популяции. Благодаря проведению повторного этапа иммунномагнитной сепарации, после культивирования чистота СВ34+-клеток увеличивалась до 80-90% и на полученных клетках отсутствовал НЬЛ-БЯ маркер. При подобранных условиях культивирования количество ГСК ПК возросло в 100-200 раз. Учитывая общее количество ядросодержащих клеток (в пределах 1000х106) и среднее содержание CD34+ клеток в образце ПК, в результате применения метода культивирования из 1 образца ПК можно получить около 10-30х106 CD34+-клеток.
Таким образом, в результате работы удалось получить чистую популяцию недифференцированных CD34+ ГСК в достаточном количестве для терапевтического применения у взрослых пациентов.
М.А. Булатникова, М.А.Глебова, В.И. Ларионова,
А.Б. Смолянинов
СИНДРОМЫ ХРОМОСОМНЫХ МИКРОДЕЛЕЦИЙ И МИКРОДУПЛИКАЦИЙ
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; ООО «Покровский банк стволовых клеток» Санкт-Петербург, stemcellbank@inbox.ru
Синдромы хромосомных микроделеций и микродупликаций -многочисленная, клинически гетерогенная группа заболеваний, обусловленныых делециями или дупликациями участков хромосом протяженностью до 1-5 Мв, то есть делеций и дупликаций не выявляемых при стандартном исследовании кариотипа. Как правило это участки, захватывающие от нескольких генов до нескольких десятков генов.
На настоящий момент микроделеции и микродупликации рассматриваются как наиболее частая причина умственной отсталости у девочек, субтеломерные делеции по оценкам различных авторов обуславливают от 5 до 7% умственной отсталости у лиц обоих полов. Наиболее распространенная субтеломерная микроделеция 1р36 обуславливает до 1% случаев умственной отсталости и ее частота оценивается от 1 на 7000 живых новорожденных до 1 на 5000 живых нооворожденных, что превышает порог указанный в определении редких (орфанных) заболеваний принятый на территории РФ. Наиболее изученные микроделеции - синдромы Ангельмана и Прадера-Вилли, синдром Вильямса
также превышают этот порог, представляя, тем самым, социально-значимую проблему. С накоплением данных о частоте встречаемости других известных синдромов микроделеций, частота их выяления также возрастает. Одновременно возрастает количество известных форм микроделеций и микродупликаций. Самым частым проявлением синдромов микроделеций и микродупликаций является умственная отсталость, обычно сопровождаемая задержкой психомоторного развития на 1ом году жизни, мышечной гипотонией, элементами апраксии. Тяжесть этих проявленний варьирует в значительных пределах от тяжелых форм идиотии до субнормальных расстройств интеллекта и специфических когнитивных дисфункций. один из наиболее частых синдромов микроделеций синдром Вильямса является причиной легких форм умственной отсталости или специфических когнитивных нарушений. Растет количество публикаций, посвященных случаям с субнормальным характером расстройств когнитивный функциий при синдроме Вильямса. Разроботана специальная программа занятий, ориентированная на учет особенностей нарушения когнитивных функций присущих синдрому Вильямса. Предполагается возможность создания персонифцированных подходов для реабилитации больных с другими формами синдромов микроделеций и микродупликаций. Необходимой предпосылкой этого является создание системы диагностики микроделеций и микродупликаций, проведение исследований, напрвленных на изучение патопсихологии отдельных нозологических единиц. Характерными для широкого круга микроделеций и микродупликаций являются расстройства аутистического спектра. Наряду с умственной отсталостью и аутизмом различные формы микроделеций и микродупликаций могут проявляться изолированными и множественными пороками внутренних органов, головного мозга, аномалиями развития скелетно-мышечной системы и специфическими ортопедическими растройствами. одним из наиболее частых проявлений синдромов микроделеций и микродупликаций является дисплазия соединительной ткани. Растет количество форм синдромов с нарушениями слуха, болезнями глаз, симптоматической эпилепсией.
В настоящее время существует широкий спектр методов подтверждающий диагностики синдромов микроделеций, которые можно разделить на таргетные, то есть ориентированные на поиск известного предполагаемого врачом синдрома, и нетаргетные, позволяющие оценить генотип пациента на наличие любых микроделеций и миродупликаций. К основным таргетным методам диагностики относится FISH (флюоресцентная гибридизация in situ) и его модификации, MLPA (мультиплексная лигазная цепная реакция). Основным нетаргетным методом диагностики микроделеций является метод «arrayCGH». Существуют определенные особенности клинического этапа диагностики синдромов микроделеций и микродупликаций. Одной из основных трудностей клинического
824
этапа является широкий полиморфизм клинических проявлений, присущий синдромам микроделеций и микродупликаций. Одним из выходов из этой ситуации может стать широкое использзоование нетаргетных методов, однако в настоящее время нетаргетные методы остаются достаточно дорогими, не всегда и не везде доступными. В то же время существует большое количество работ посвященных клиническому анализу известных синдромов и попытке сформулировать надежные показания для использования таргетных методов. одним из таких подходов является ранжирование симптомов по их диагностической значимости с выделением групп постоянных, частых и ассоциированных симптомов. Еще одной особенностью клинической диагностики является высокое значение антропологических особенностей и осбенностей поведения больного, а не только аномалий и микроаномалий развития на преимущественном внимании к которым основана классическая генетическая синдромология. Микроаномалии могут быть немногочисленны и часто носят мягкий характер, в то же время особенности поведения и антропологические показатели могут выходить на первый план. Классическим примером такой переоценки роли отдельных симптомов могут служить синдромы Ангельмана, Вильямса, Смита-Магениса.
А.А. Василишина, Е.А Котелевская, М.А. Глебова, М.А. Булатникова, А.Б. Смолянинов
МУЛЬТИПЛЕКСНАЯ ЛИГАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ В ДИАГНОСТИКЕ НАСЛЕДСТВЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; ООО «Покровский банк стволовых клеток» Санкт-Петербург, vasilishina.a@gmail.com
Согласно мировой и российской статистике суммарная частота наследственных болезней составляет около 30-40 на 1000 новорожденных. Больные с генетическими нарушениями составляют до 50% пациентов детских стационаров. Наследственная патология составляет около 37% в структуре младенческой и детской смертности и около 40% инвалидности с детства. Более 50% умственной отсталости обусловлено генетическими причинами. Наследственные болезни включают в себя хромосомные, обусловленные изменением числа или структуры хромосом, и моногенные болезни, обусловленные мутациями в отдельном гене.
Хромосомные болезни проявляются пороками или множественными микроаномалиями развития, задержкой психомоторного и речевого развития, умствен-
