CC BY
66
УДК 619:619.98.578.8.-078
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ОТНОШЕНИИ ВИРУСОВ-ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ПНЕВМОЭНТЕРИТОВ ТЕЛЯТ
Л.С. КАШКО1, кандидат ветеринарных наук, зав. кафедрой
П.П. КРАСОЧКО2, кандидат ветеринарных наук, доцент
Смоленская ГСХА, ул. Ленина, 20, г. Смоленск, 214000, Россия
2Витебская ордена «Знак Почета» ГАВМ, ул. 1-я Доватора, 7/11, г. Витебск, 201026, Республика Беларусь
E-mail: l.kashko@yandex.ru
Резюме. Работа выполнена с целью мониторинга ситуации в отношении вирусов - возбудителей респираторных и желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота у импортных и отечественных животных в сравнительном аспекте. Исследования проводили в условиях кафедры биотехнологии и ветеринарной медицины Смоленской ГСХА, Института прикладной ветеринарной медицины и биотехнологии Витебской ордена «Знак Почета» ГАВМ и в животноводческих хозяйствах Смоленской области в 2013-2014 гг. В работе использовали сыворотки крови от 91 коров голштино-фризской породы и 75 телят, полученных отобследованныхживотных. Исследования выполнены с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с использованием эритроцитарных диагностикумов, представляющих собой стабилизированные 0,2%-ным акролеином или 0,3%-ным глютаровым альдегидом танизированные танином в концентрации 1:20000-1:50000эритроциты крупного рогатого скота, сенсибилизированные антигенами вирусов инфекционного ринотрахеита, диареи, парагриппа-3, рота-и коро-навирусов с помощью конъюгирующих веществ - 0,1% хлорида хрома с трипановым синим. При завозе на территорию Российской Федерации импортные животные отличались невысокими титрами антител против вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3, рота-и коронавирусов. В ходе дальнейшего содержания в хозяйствах их уровень возрос, что свидетельствует об инфицировании в новых местах обитания. Рожденные от импортных коров телята характеризовались очень низкой иммунной колостральной защитой, что приводило к85-90% заболеваемости и 30% гибели, тогда как у молодняка, полученного от местных животных, заболеваемость составила 25-35%, падеж - 7,5% от числа народившихся. Ключевые слова: серологический мониторинг, пневмо-энтериты, животные, телята, сыворотки крови, вирусы, инфекционный ринотрахеит, парагрипп-3, вирусная диарея, рота-, коронавирусы, реакция непрямой гемагглютинации, антитела.
Для цитирования: КашкоЛ.С., Красочко П.П. Серологический мониторинг крупного рогатого скота в отношении вирусов-возбудителей пневмоэнтеритов телят// Достижения науки и техники АПК. 2014. Т.28. №11. С. 66-68.
Государственной программой развития сельского хозяйства и регулирования рынков сельскохозяйственной продукции, сырья и продовольствия на 20132020 гг. намечено увеличение производства молока в Российской Федерации до 38,2 млн т, или на 19,9%.
Основной прирост необходимо обеспечить путем увеличения продуктивности животных в результате улучшения породного состава. Однако численность коров в племенных хозяйствах страны составляет немногим более 10,2% от их общего количества, что в 1,5 раза ниже необходимого уровня [1].
Устранить имеющийся дефицит племенных ресурсов планируется на основе собственного воспроизводства и использования импортного племенного материала. На сегодняшний день ввоз высокопро-
дуктивных животных осуществляется в соответствии с реализацией государственных и региональных программ поддержки молочного животноводства и племенного дела.
Необходимо отметить, что поставляемые высокопродуктивные животные голштинофризской породы подвержены отрицательному воздействию многих разнопричин-ных стресс-факторов (транспортного, травматического, алиментарного, технологического, родового и др.), что лежит в основе многочисленных патологических процессов, неадекватных гомеостатических реакций организма и снижения естественной резистентности [1, 2].
В таких условиях повсеместно возникают желудочно-кишечные и респираторные заболевания телят («пнев-моэнтериты»), которые носят, как правило, массовый характер. В отдельных хозяйствах ими переболевает до 100% народившегося молодняка, а выбытие достигает 50-60% [2, 3].
На основе результатов собственных исследований и литературных сведений мы установили, что в этиологической структуре упомянутых болезней основное место занимают вирусы инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, парагриппа-3, рота- и коронавирусы крупного рогатого скота [1, 4-7].
Высокие ветеринарные требования при импорте племенных животных снижают вероятность заноса возбудителей особо опасных инфекций, однако весьма актуальной остается проблема завоза скота со скрытым течением недостаточно регламентируемых нормативными документами инфекционных болезней.
Цель наших исследований - серологический мониторинг ситуации в отношении вирусов - возбудителей респираторных и желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота у импортных и отечественных животных в сравнительном аспекте.
Условия, материалы и методы. Исследования проводили в условиях кафедры биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Смоленская государственная сельскохозяйственная академия», Института прикладной ветеринарной медицины и биотехнологии УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» и в животноводческих хозяйствах Смоленской области в 2013-2014 гг. В работе использованы сыворотки крови от 91 коровы голштино-фризской породы и от 75 телят, полученных от обследованных животных.
Объектом исследований служили сыворотки крови от невакцинированных против вирусных инфекций импортных нетелей и отечественных коров, а также полученных от них телят в возрасте 5-15 дн.
В сыворотке крови определяли титры антител против вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, парагриппа-3, рота- и коронавирусов крупного рогатого скота.
Исследования проводили с помощью реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с использованием эритроцитарных диагностикумов, представляющих собой стабилизированные 0,2%-ным акролеином или 0,3%-ным глютаровым альдегидом танизированные танином в концентрации 1:20000-1:50000 эритроци-
Таблица 1. Серологический мониторинг в отношении вирусов - возбудителей пневмоэнтеритов у
коров
Вирус Импортный скот Отечественный скот
сразу после завоза через 6 мес.
средний титр антител, ^2 доля сероположительных, % средний титр антител, log2 доля серопо-ложите-льных, % средний титр антител, log2 доля серопо-ложите льных, %
ИРТ 2,44+0,77 34,7 5,26+0,69 93,8 5,93+0,92 100
ВД 2,17+0,23 31,1 3,47+0,46 46,7 6,13+0,46 100
ПГ-3 1,89+0,34 6,3 3,13+0,46 13,3 6,0+1,25 100
Ротавирус 1,2+0,12 0 1,8+0,23 0 2,4+0,46 31,3
Коронавирус 1,0+0,06 0 2,0+0,23 0 2,4+0,23 31,3
ты крупного рогатого скота, сенсибилизированные антигенами каждого из изучаемых вирусов с помощью конъюгирующих веществ - 0,1%-ного хлорида хрома с трипановым синим. Диагностикумы хранили в консерванте, представляющем собой 0,3%-ный феноли-зированный изотонический раствор натрия хлорида с 1%-ной нормальной кроличьей сывороткой в течение 1 года с даты изготовления [3, 4].
РНГА ставили путем разведения исследуемых сывороток крови в растворителе микротитраторе системы Такачи в объеме 0,025 мл в разведениях от 1:2 до 1:256. Раститровку сывороток осуществляли в растворителе (он же консервант для хранения диагностикумов). Для этого петлей микротитратора проводили последовательные двукратные разведения положительной и отрицательной сывороток 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и так далее до 1:256 (в 5 повторностях). После чего во все лунки добавляли по 0,025 мл жидкого эритроцитарного диагностикума с антигеном каждого вирусов в 1%-ной концентрации. Панели встряхивали и оставляли при комнатной температуре на 90-120 мин. Обязательные контроли: эритроцитарный диагностикум + положительная сыворотка; эритроцитарный диагностикум + отрицательная сыворотка; эритроциты стабилизированные + положительная сыворотка; эритроциты стабилизированные + отрицательная сыворотка; эритроциты стабилизированные + растворитель.
Учет РНГА осуществляли макроскопически на белом фоне. Реакцию оценивали по четырехбальной шкале: ++++ - хорошо выраженный «зонтик» с выгибающимися внутрь краями; +++ - хорошо выраженный «зонтик» с ровными краями; ++ - выраженный «зонтик» со слабо заметным кольцом в центре луночки; + - слабо выраженный «зонтик» с отчетливым кольцом из осадка эритроцитов в центре луночки; отрицательная - четкое кольцо или точка из осевших эритроцитов в центре луночки.
Положительной считали реакцию при титре исследуемой сыворотки 1:16 и выше при агглютинации жидкого эритроцитарного антигена на 4+-2+. Поэтому обнаружение антител при исследовании одиночных проб сывороток крови от невакцинированных нетелей и коров в титре 1:16 и выше указывало на циркуляцию вируса в стаде и его участие в патологическом процессе.
Наличие антител при исследовании одиночных проб сывороток крови телят 5-25-дневного возраста в титрах выше 1:32 свидетельствовало о напряженном колостральном иммунитете, а в титрах 1:16 и ниже - о низком его уровне и нарушении технологии выпойки молозива [1, 4].
Результаты и обсуждение. Среди отечественных коров больше всего было особей с антителами к вирусам инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3 - 100% обследованных животных,
антитела к рота- и коронавирусам отмечены только у 31,3% (табл. 1).
Среди импортных нетелей количество серополо-жительных в отношении вирусов диареи было ниже в 3,2 раза, парагриппа-3 - в 15,9 раза, инфекционного ринотрахеита - в 2,9 раза, носители рота- и коронави-русов не обнаружены. При этом средний титр антител у отечественных коров был выше, чем у импортных, на 0,4-2,87 1од2.
Через 6 мес. нахождения в условиях российских животноводческих комплексов доля животных серополо-жительных в отношении инфекционного ринотрахеита увеличилась в 2,7 раза, парагриппа-3 - в 2,1 раза, вирусной диареи - в 1,5 раза и достигла соответственно 93,8, 13,3 и 46,7%.
Уровень колостральных антител в отношении вирусов диареи, рота- и коронавирусов у телят, полученных от импортных коров, оказался значительно ниже, чем у потомства отечественных животных (табл. 2).
Таблица 2. Серологический мониторинг в отношении вирусов - возбудителей пневмоэнтеритов у новорожденных телят
Вирус Импортный скот Отечественный скот
средний титр антител, ^2 доля се-рополо-житель-ных, % средний титр антител, ^2 доля серопо-ложи-тельных, %
ИРТ 4,67+0,46 86,6 5,6+0,69 80 ВД 3,0+0,23 40 4,3+0,58 60 ПГ-3 2,53+0,23 6,7 5,2+0,69 100 Ротавирус 1,9+0,12 13,3 3,06+0,46 20 Коронавирус 1,9+0,11 0 2,6+0,23 20
При этом заболеваемость телят от импортных коров желудочно-кишечными болезнями составила 85-90%, а от отечественных - 25-35%, падеж - соответственно 30 и 7,5% от числа народившихся.
Выводы. Проведенный серологический мониторинг импортных нетелей и отечественных коров, а также полученных от них телят в отношении вирусов -возбудителей респираторных и желудочно-кишечных инфекций телят в сравнительном аспекте свидетельствует о более низкой доле сероположительных особей и среднем титре антител у завезенных животных.
При завозе импортные животные отличались невысокими титрами антител против вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и парагриппа-3, рота- и коронавирусов, но их уровень возрос при дальнейшем содержании в хозяйстве, что свидетельствует об инфицировании в новых местах обитания. Рожденные от импортных коров телята имели очень низкую иммунную колостральную защиту, что приводило к их 85-90% заболеваемости и 30% гибели, тогда как у потомства местных животных величины этих показателей в 3 раза меньше.
Литература.
1. Петкевич Н.С. [и др.] Система мероприятий по адаптации импортированного молочного скота в условиях Смоленской области. Смоленск, 2013. 63 с.
2. Зелютков, Ю.Г. Инфекционные энтериты новорожденных телят: монография. Витебск: Витебская государственная академия ветеринарной медицины, 2006. 188 с.
4. Красочко П.А., Якубовский М.В., Ятусевич А.И. и др. Болезни сельскохозяйственных животных / науч. ред. Красочко П.А. Минск: Бизнесофсет, 2005. 800 с.
3. Современная диагностика инфекционных заболеваний крупного рогатого скота. Под общей редакцией доктора ветеринарных наук, доктора биологических наук, профессора, академика РАЕН П.А. Красочко. Учебно-методическое пособие /А.Р. Камошенков, П.А. Красочко, Л.С. Кашко, С.М. Грибко, П.П. Красочко. Смоленск: Изд-во ФГБОУ ВПО «СмоленскаяГСХА», 2013. 84 с.
5. Kollannur J.D., Radhika Syam, Chauhan R.S. Epidemiological studies on infectious bovine rhinotracheitis (IBR) in different parts of India // International Journal of Livestock, Research. 2014. 4(5). рр. 21-27.
6. Szabara A, Majer J., Hornyak A. Bovine viral diarrhoea virus infection and diagnostic methods of BVDV-infection in Hungary// Magyar Allatorvosok Lapja. 2014. 136 (8). рр. 451-460.
7. Jarvinen J.A., O'Connor A.M. Seroprevalence of bovine viral diarrhea virus in alpacas in the United States and assessment of risk factors for exposure, 2006-2007. (English) // Journal Of The American Veterinary Medical Association [J Am Vet Med Assoc]. 2014. Vol. 245 (6). рр. 696-703.
SEROLOGICAL MONITORING OF CATTLE CONCERNING VIRUSES ACTIVATORS
PNEVMOENTERITOV OF CALFS
L.S. toshko1, P.P. toasochko2
'Smolensk State Agrarian Academy, Lenina Str., 20, Smolensk, 214000, Russia
2Vitebsk Order «Badge of Honor» State Academy of Veterinary Medicine, 1st Dovatora, 7/11, Vitebsk, 201026, Republic of Belarus Summary. The purpose of this study was to conduct a serological monitoring of cattle against viruses - pathogens of respiratory and gastrointestinal infections in cattle in the import and domestic animals in a comparative perspective. Studies were performed in the conditions of the Department of biotechnology and veterinary medicine Smolensk SAA, Institute of applied veterinary medicine and biotechnology of EE Vitebsk «Badge of Honor» state Academy of veterinary medicine and animal husbandry of the Smolensk region in 2013-2014. In the paper, we used serum from 91 cows of Holstein-Friesian breed and 75 calves obtained from the examined cows. Studies conducted using the indirect hemagglutination (IHA) using erythrocyte diagnostics, representing 0.2% stabilized acrolein or 0.3% glutaraldehyde for tanizirovannyh tannin concentration of 1: 20,000 - 1: 50000 bovine erythrocytes sensitized with antigens of each of virus - infectious bovine rhinotracheitis, diarrhea, parainfluenza-3, rotavirus and coronavirus using conjugating substances - 0.1% chromium chloride with trypan blue. Found that when the importation into the territory of the Russian Federation imported animals had low antibody titers against infectious rhinotracheitis virus, viral diarrhea and parainfluenza-3, rotavirus and coronavirus, but their level increased with further content in the farms, which testifies to their infection in new places habitat. Born to cows imported calves had a very low immune colostral protection, leading to their 85-90% morbidity and 30% mortality, whereas calves received from local cows had an incidence of 25-35% mortality of 7.5% of the number of people.
Keywords: serological monitoring, cattle, viruses, infectious bovine rhinotracheitis, viral diarrhea, parainfluenza-3-virus, rotavirus, koronavirus, antibodies.
Author Details: L.S. Kashko, Cand. Veterinary Sci., Head of Dept. (e-mail: l.kashko@yandex.ru); P.P. Krasochko, Cand. Veterinary Sci., Associate Prof.
For citation: Kashko L.S., Krasochko P.P. Serological monitoring of cattle concerning viruses activators pnevmoenteritov of calfs. Dostizheniya nauki i tekhnikiAPK. 2014. T.28. №11. pp. 66-68 (In Russ)
Требования к оформлению статей в журнале «Достижения науки и техники АПК»
В статье должно быть кратко изложено состояние дел по изучаемой проблеме со ссылками на публикации (желательно не менее трех ссылок). Затем указаны цели, задачи, условия и методы исследований. Подробно представлены результаты экспериментов и их анализ. Сделаны выводы и даны предложения производству. В статье следует по возможности выделять следующие блоки: введение; цель и задачи исследований; условия, материалы и методы исследований; результаты исследований; выводы.
Вместе со статьей должны быть представлены перевод названия на английский язык; аннотация (200-250 слов) на русском и английском языках; ключевые слова на русском и английском языках; полные почтовые адреса всех учреждений, в которых работают авторы, на русском и английском языке; ученые степени и должности авторов на русском и английском языке; код УДК; библиографический список на русском и английском языке.
В тексте ссылка на источник отмечается соответствующей цифрой в квадратных скобках в порядке цитирования. В списке литературы приводятся только те источники, на которые есть ссылка в тексте. Использование цитат без указания источника информации запрещается.
Материал для подачи в журнал набирается в текстовом редакторе Word версия не ниже 97 файл с расширением *.rtf.
Объем публикации 9-12 стр. машинописного текста набранного шрифтом Times New Roman, размер кегля 14 с полуторным интервалом. На 2,5 страницы текста допускается не более 1 рисунка или таблицы.
Статьи необходимо направлять с сопроводительным письмом с указанием сведений об авторах (фамилия, имя, отчество -полностью, ученая степень, место работы и занимаемая должность) на русском и английском языке, контактных телефонов и адреса электронной почты для обратной связи.
На публикацию представляемых материалов необходимо письменное разрешение и рекомендация руководства организации, на средства которой проводились исследования. Его вместе с одним экземпляром рукописи, подписанным авторами, и статьей в электронном виде нужно отправлять по адресу: 101000, г. Москва, Моспочтамт, а/я 166, ООО «Редакция журнала «Достижения науки и техники АПК». Для ускорения выхода в свет материалы в электронном виде можно направлять по адресу: agroapk@mail.ru.
Плата с аспирантов за публикацию рукописей не взимается.
Несоответствие статьи по одному из перечисленных пунктов может служить основанием для отказа в публикации.
Все рукописи, содержащие сведения о результатах научных исследований, рецензируются, по итогам рецензирования принимается решение о целесообразности опубликования материалов.
