CC BY
18
УДК 616.36-004.4: 616.36-002-09:546.23.002.234
СЕЛЕНОВЫЙ И СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЙ СТАТУС У ПАЦИЕНТОВ С ОБОСТРЕНИЕМ ХРОНИЧЕСКОЙ ПЕЧЕНОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ АЛКОГОЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ
Н.Г. Буякова1, С.С. Рудь2, Ю.Г. Ковальский2, О.А. Лебедько2
1МБУЗ ГКБ № 11 г. Хабаровск, Россия, 680015
2ГБОУ ВПО Дальневосточный государственный медицинский университет Минздрава России г. Хабаровск, Россия, 680000
Аннотация. Изучены концентрация селена и показатели процессов свободнорадикального окисления в сыворотке крови у пациентов с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии. У исследуемой группы пациентов выявлено дефицитное содержания селена (среднее содержание — 75,5 ± 20,1 мкг/л). С увеличением стадийности патологического процесса, глубина селенодефицита у больных увеличивается. Концентрация селена в плазме осталась практически неизменной после лечения. На фоне низкой концентрации селена наблюдается активация процессов свободнорадикального окисления в сыворотке крови у данной группы больных.
Ключевые слова: обострение хронической печеночной недостаточности, алкогольная болезнь печени, селен, сво-боднорадикальное окисление.
В зарубежной литературе встречается описание случаев, при которых наблюдают сочетание острого гепатита и существующего алкогольного цирроза печени, такой вариант патологии называют «обострение хронической печеночной недостаточности» («acute-on-chronic liver failure») [4]. Согласно данным проспективного многоцентрового исследования the CLIF Acute-on-Chronic Liver Failure in Cirrhosis (CANONIC) study наиболее частой причиной, приводящей к обострению хронической печеночной недостаточности, является активное употребление алкоголя в последние 3 месяца до обострения (42,9%), также у этих пациентов, преобладает алкогольный цирроз печени (58,4%) намного чаще, чем цирроз вирусной этиологии (14,8%) и смешанной (9,3%) [5].
В патогенезе такого обострения основополагающим является процесс свободнорадикального окисления, в противовес которому существует ан-тиоксидантная система, представленная, в первую очередь, селеносодержащими энзимами [7].
Затяжное течение поражений печени алкогольной этиологии с продолжительной утратой трудоспособности граждан и большой вероятностью летального исхода определяют данную патологию как социально значимое заболевание [6]. Изучение механизмов изменения свободнорадикального и селенового статусов сделало бы возможным представить дополнительные критерии диагностики заболевания и пути их медикаментозной коррекции.
Цель исследования. Изучить селеновый и свободнорадикальный статусы сыворотки крови пациентов с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии для оптимизации диагностики данной нозологии.
Материалы и методы исследования. Были обследованы 60 пациентов в возрасте от 23 до 74 лет (средний возраст 48,8 ± 11,2 лет) с обострением хронической печеночной недостаточности (ОХПечН) алкогольной этиологии 1—3-й стадий, выставлен-
----—
ных согласно критериям Американской ассоциации по изучению болезней печени.
Группу сравнения составил 21 человек (средний возраст — 47,6 ± 12,5 лет) без клинических проявлений патологии со стороны гепатобили-арной системы, проживающие совместно с пациентами и одинаково с ними питающиеся, для исключения разницы в экзогенном поступлении селена. Для выявления хронической алкогольной интоксикации были использованы опросник CAGE и тест ВОЗ «идентификация расстройств, связанных с употреблением алкоголя» AUDIT.
Содержание селена в сыворотке крови устанавливали флуориметрическим методом по методу Н.А. Голубкиной (1995) [3]. Для интегральной оценки процессов свободнорадикального окисления сыворотки крови использовали метод хеми-люминесценции (ХМЛ). Исследовали спонтанную и индуцированную Fe ХМЛ, определяя [1]: свето-сумму за 1 минуту спонтанной ХМЛ (Ssp); свето-сумму (Sind-1) за 2 минуты после «быстрой» вспышки; максимум быстрой вспышки (h) индуцированной ХМЛ. Кинетику ХМЛ, инициированную Н2О2
Обеспеченность свыше физиологического оптимума (>130 мкг/л)
Оптимальная обеспеченность (115-130 мкг/л)
Субоптимальная обеспеченность (90-115 мкг/л)
Легкий дефицит (70-90 мкг/л)
Тяжелый дефицит (<70 мкг/л)
в присутствии люминола [1], анализировали по следующим параметрам: светосумме за 2 минуты ХМЛ (Sind-2); максимуму свечения (Н). Интенсивность ХМЛ выражали в относительных единицах.
Полученные данные обрабатывались с использованием программы Microsoft Office Excel 2010, Statistica 6.03. Вычисляли: средний показатель (М), среднее квадратическое отклонение (SD), доверительный интервал (ДИ). Достоверность различий между средними величинами оценивали с помощью критерия Манна—Уитни, определение связи между непараметрическими величинами — методом корреляционного анализа по Спирмену. Критический уровень значимости при проверке гипотез — р < 0,05.
Результаты и обсуждение. Средний уровень селена в сыворотке крови в группе пациентов с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии составил 75,5 ± ± 20,1 мкг/л и был понижен по сравнению с контрольной группой 105,8 ± 13,6 мкг/л (р < 0,00001). Характер распределения обеспеченности селеном у обследованных пациентов отображен на рис. 1.
Группа контроля Основная группа
57%
10 20 30 40 50 60
Рис. 1. Обеспеченность селеном пациентов с ОХПечН алкогольной этиологии
Как видно из представленных данных, ни у одного пациента с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии не было выявлено оптимальной обеспеченности селеном в сыворотке крови (р<0,00001). Субопти-
мальное содержание селена было зафиксировано лишь у 28% пациентов, при этом доля пациентов с таковой концентрацией была статистически достоверно ниже, чем в группе контроля (р = 0,019). У большинства пациентов основной группы 72%,
0
Буякова Н.Г. и др. Селеновый и свободнорадикальный статус у пациентов с обострением хронической.
----—
концентрация селена в сыворотке крови составляла ниже 90 мкг/л, что квалифицируется как дефицитное состояние по микроэлементу (р < 0,05).
Значение содержание селена в сыворотке крови статистически значимо различалось по стадиям заболевания (р = 0,007). В группе больных с первой стадией содержание селена в сыворотке крови составило 89,1 ± 12,8 мкг/л, в группе пациентов со второй стадией — 76,8 ± 20,7 мкг/л. Обращает внимание то, что в группе пациентов с третьей стадией обострения хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии средняя концентрация селена в сыворотке крови достигала значения 63,4 ± 16,3 мкг/л, что является тяжелым дефицитом. По мере развития процесса, в условиях длительно текущего воспаления, по нашему мнению, происходит истощение запасов селена, что и приводит к их выраженному дефициту [2].
Параллельно с активацией процессов свобод-норадикального окисления отмечалось понижение активности антиоксидантной антирадикальной защиты, так показатель максимума свечения (8^-2) превышал в 1,9 раза показатель группы контроля. Также наблюдалось и превышение перекисной резистентности (Н) в 1,7 раз.
В результате корреляционного анализа у пациентов с ОХПечН алкогольной этиологии выявлена достоверная отрицательная связь средней силы между концентрацией селена в сыворотке крови и хемилюминесцентными показателями: 8§р (р = -0,407, р = 0,001), 8^-1 (р = -0,437, р = 0,005),
Нами был проведен корреляционный анализ между показателями селена и стадиями заболевания, который показал статистическую взаимосвязь умеренной силы (р = -0,413, р = 0,001).
На фоне лечения не отмечалось улучшение обеспеченности селеном. Так, в исследуемой группе средний уровень селена составил 81,9 ± 17,9 мкг/л (р > 0,05).
При анализе свободнорадикального окисления в сыворотке крови у больных с ОХПечН алкогольной этиологии были выявлены достоверные различия всех показателей с аналогичными показателями группы контроля, что отражено в табл. 1. Уровень генерации свободных радикалов (8§р) пациентов из основной группы превосходил уровень генерации группы контроля в 1,2 раза. Также отмечалось повышение степени продукции перекис-ных радикалов (8^-0 в 2,1 раза и гидроперекисей липидов (Ь) в 1,2 раза.
8^-2 (р = -0,422, р = 0,001) и Н (р = -0,458, р = 0,0002).
Анализ коэффициента ранговой корреляции Спирмена выявил, что у пациентов с ОХПечН имеется достоверная положительная связь средней силы между такими показателями оксидативного статуса 8Ф (р = 0,338, р = 0,008), 8^-1 (р = 0,300, р = 0,020), 8^-2 (р = 0,311, р = 0,016), Н (р = 0,348, р = 0,006) в сыворотке крови и стадией заболевания.
Выводы
1. В сыворотке крови больных с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии, отмечается инициация процес-
Таблица 1
Показатели хемилюминесценции (в относительных единицах) у пациентов с обострением хронической печеночной недостаточности алкогольной этиологии
Показатель Группа ОХПечН (п = 60) Группа контроль (п = 21) Достоверность различий р
8Ф (М ± 8Б) 0,145 ± 0,023 0,120 ± 0,021 0,000001
ДИ 0,139—0,151 0,111—0,129
8М-1 (М ± 8Б) 0,437 ± 0,092 0,202 ± 0,051 <0,000001
ДИ 0,413—0,461 0,179—0,226
Н (М ± 8Б) 0,183 ± 0,042 0,148 ± 0,0,42 0,003
ДИ 0,172—0,194 0,129—0,167
8^-2 (М ± 8Б) 0,439 ± 0,078 0,229 ± 0,049 <0,000001
ДИ 0,419—0,459 0,207—0,251
Н (М ± 8Б) 0,350 ± 0,084 0,209 ± 0,073 <0,000001
ДИ 0,329—0,372 0,175—0,242
са свободнорадикального окисления и подавление антиоксидантной антирадикальной защиты.
2. Исследуемые хемилюминесцентные показатели оксидативного и селенового статусов сыворотки крови могут быть рекомендованы в качестве дополнительных критериев оценки степени тяжести, а также эффективности терапии данного заболевания.
3. Между хемилюминесцентными параметрами свободнорадикального процесса сыворотки крови и содержанием селена существует прямая средняя корреляционная связь, сопоставимая со стадией заболевания. Наиболее активны процессы сво-боднорадикального окисления в группе больных с обострением хронической печеночной недостаточности третьей стадии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: мет. рек. СПб., 2000.
2. Буякова Н.Г., Рудь С.С., Ковальский Ю.Г., Ле-бедько О. А. и др. Содержание селена и состояние свободнорадикального окисления у больных с острым алкогольным гепатитом на фоне алкогольного цирроза печени // Дальневост. мед. журнал. 2015. № 3. С. 10—13.
3. Голубкина Н.А. Флуориметрический метод определения селена // Журнал аналитической химии. 1995. Т. 50. № 5. С. 492—497.
4. Arroyo V., Moreau R., Jalan R., Gines P. et al. Обострение хронической печеночной недостаточности: новый синдром и новое в классификации цирроз [перевод] // J. Hepatology. Русское издание. 2015. Т. 1. № 4. С. 66—80.
5. Jalan R., Gines P., Olson J.C., et al. Acute-on-chronic liver failure // J. Hepatol. 2012. № 57. Р. 1336—1348.
6. O'Shea R.S., Dasarathy S., McCullough A.J. Alcoholic Liver Disease // Am J Gastroenterol. 2010. № 105. Р. 14—32.
7. Thomson C.D. Assessment of requirements for selenium and adequacy of selenium status: a review // European Journal of Clinical Nutrition. 2004. Vol. 58. Р. 391— 402.
SELENIUM AND FREE RADICAL OXIDATION STATUS OF BLOOD IN PATIENTS WITH ACUTE-ON-CHRONIC LIVER FAILURE OF ALCOHOLIC ETIOLOGY
N.G. Buiakova1, S.S. Rud2, U.G. Kovalski2, O.A. Lebedko2
'City Clinical Hospital № 11 Khabarovsk, Russia, 680015 2Far Eastern State Medical University Khabarovsk, Russia, 680000
Annotation. The selenium concentration and free radical status in blood serum were studied in patients with acute-on-chronic liver failure of alcoholic etiology. This patient group had decreased selenium in blood serum (the average value 75,0 ± ± 20,1 mcg/l). With the increase of staging of the pathological process, the depth of selenium deficiency in patients increases. Plasma concentration of selenium remained unchanged after the treatment. Decrease of selenium is characterized by activation of free radical processes in blood serum of these patients.
Key words: acute-on-chronic liver failure, alcoholic liver disease, selenium, free radical oxidation.
REFERENCES
1. Arroyo V., Moreau R., Jalan R., Gines P. et al. Acute-on-chronic liver failure: A new syndrome that will reclassify cirrhosis. J. Hepatology, 2015, vol. 62, pp. 131—143.
2. Arutyunyan A.V., Dubinina E.E., Zybina N.N. Methods of evaluation of free radical oxidation and antioxidant system of organism: met. rec. St. Petersburg, 2000.
3. Buiakova N.G., Rud S.S., Kovalski U.G., Lebedko O.A. et al. Concentration of selenium and free radical oxidation of blood in patients with acute alcoholic hepatitis at the background of alcohol liver cirrhosis. Far East Medical J., 2015, no. 3, pp. 10—13 (In Russian).
4. Golubkina N.A. Fluorimetric method for the determination of selenium. J. of Analytical Chemistry, 1995, vol. 50, no. 5, pp. 492—497 (In Russian).
5. Jalan R., Gines P., Olson J.C. et al. Acute-on-chronic liver failure. J. Hepatol, 2012, no. 57, pp. 1336—1348.
6. O'Shea R.S., Dasarathy S., McCullough A.J. Alcoholic Liver Disease. Am J Gastroenterol, 2010, no. 105, pp. 14—32.
7. Thomson C.D. Assessment of requirements for selenium and adequacy of selenium status: a review. European Journal of Clinical Nutrition, 2004, vol. 58, pp. 391— 402.
