CC BY
66
пес 1-11 типа — г=0,71 (р<0,001), ЭБВ — г=0,75 (р<0,001). Выявление антител класса М, которые говорят об активации внутриклеточных инфекций, имело такое же соотношение к возрасту, как и антитела класса G. У 10 (16,1%) детей с ХРБС наблюдалась одновременная реактивация двух возбудителей.
Определяли зависимость инфицированности вирусами семейства герпес от продолжительности ХРБС. Соотношение инфицированности ЦМВ у детей с ХРБС длительностью болезни более 5 лет и до 5 лет было 1,6, герпесом 1-11 типов — 1,4 и ЭБВ — 2,0, что может свидетельствовать об определенной зависимости инфициро-ванности вирусами от длительности болезни. Однако, в данном случае имел значение также возраст ребенка, так как с возрастом росла инфицированность. Зависимость инфицированности от длительности болезни не имела линейного характера, о чем говорят и установленные средней силы прямые корреляционные связи между длительностью болезни и инфицированностью ЦМВ (г=0,42, р=0,00065), вирусом герпеса 1-11 типа (г=0,59, р<0,001) и ЭБВ (г=0,47, р=0,00015). Реактивация герпетической и цитомегаловирусной инфекции мало зависела от продолжительности основного заболевания, однако реактивация хронической ЭБВ-инфекции вдвое чаще встречалась при длительности болезни более 5 лет. Установлено статистически значимую сильную прямую корреляционную зависимость между продолжительностью ХРБС и реактивацией хронической ВЭБ-инфекции (г=0,92, р<0,001). Выявление инфицирования одним или ассоциацией двух вирусов не зависело от длительности болезни, тогда как ассоциации трех возбудителей вдвое чаще наблюдались у детей с длительностью ХРБС более 5-ти лет.
Таким образом, наиболее часто наблюдали инфицированность вирусами семейства Herpesviridae у детей с ХРБС. Среди последних наиболее существенное значе-
ние имел ЭБВ. Литературные источники чаще указывают на роль вируса простого герпеса в возникновении ОРЛ и ХРБС [6, 9]. Данные исследователи сделали предположение, что стрептококковая инфекция может быть вторичной по отношению к герпетической, с локальными повреждениями тканей и цитокиновым воспалительным ответом на стрептококковую инфекцию, которая есть потенциальным фактором реактивации латентной герпетической инфекции. В другом исследовании ДНК ЭБВ было выявлено только у пациентов с ОРЛ и ХРБС, тогда как в контрольной группе не было виявлено ДНК ЭБВ, что побудило авторов к выводу о необходимости дальнейших исследований с увеличением количества пациентов [8].
Мы предполагаем двустороннее влияние персистен-ции и реактивации вирусов и основного заболевания, о чем свидетельствуют корреляционные святи между ин-фицированностью вирусами и возрастом детей и длительностью болезни. Безусловно, инфицированность и реактивация вирусов влияет на формирование болезни, но и длительное течение заболевания, частые стрептококковые инфекции ведут к сложным иммунологическим нарушениям, которые могут привести к реактивации вирусной инфекции и отяготить течение основного заболевания.
Выводы. Среди вирусов семейства Herpesviridae наибольшее значение у детей с ХРБС имеет ЭБВ, реактивация которого наблюдалась у 37,1% детей. Ассоциации вируса герпеса 1-11 типа и ЭБВ также чаще встречались у детей с ХРБС, чем у детей с ОРЛ, что может указывать на их более существенную роль в развитии именно ХРБС. Инфицированность вирусами семейства Herpesviridae у детей с ОРЛ и ХРБС коррелировала с возрастом детей и продолжительностью болезни, что свидетельствует о двустороннем влиянии персистен-ции и реактивации вирусов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белов Б.С., Насонова В.А., Кузьмина Н.Н. Острая ревматическая лихорадка: современные этиопатогенетические аспекты // Научно-практическая ревматология. — 2008. — №5. — С. 51-58.
2. Золотницкая О.Ю. Влияние препаратов с противовирусной активностью на клиническое течение и иммунологическую картину больных ревматоидным артритом с пер-систенцией вирусов семейства Herpesviridae // Український ревматологічний журнал. — 2005. — №4 (22). — С. 71-74.
3. Нагорная Н.В., Юлиш Е.И., Виноградов К.В., Пшеничная Е.В. Роль герпесвирусной инфекции в кардиальной патологии у детей // Современная педиатрия. — 2007. — №2 (15). — С. 115-118.
4. Юлиш Е.И. Парадигма формирования и развития хронических соматических заболеваний на фоне персистирую-щих инфекций // Здоровье ребенка. — 2010. — №6. — С. 97103.
5. Guilherme L., Kalil J. Rheumatic fever and rheumatic heart disease: cellular mechanisms leading autoimmune reactivity and disease // J. Clin. Immunol. — 2010. — N30. — P. 17-23.
6. Li Y., Pan Z., Ji Y., et al. Herpes simplex virus type 1 infection in rheumatic valvar disease // Heart. — 2005. — N91. — P. 87-88.
7. Mitrofanova L.B., Karev V.E., Shliakhto E.V, Kovalskii G.B. Mesenchymal dysplasia of heart valves, cystic medianecrosis of the aorta and herpetic infection // Arkh. Patol. — 2005. — N67(5). — P. 20-23.
8. Olgunturk R., Okur I., Cirak M.Y., et al. The role of viral agents in aetiopathogenesis of acute rheumatic fever // Clin. Rheumatol. — 2011. — N30. — P. 15-20.
9. Pan Z.G., Wang X.N., Li Y.W., et al. Detection of herpes simplex virus type 1 in rheumatic valvular tissue // Chin. Med. J. — 2005. — N118(5). — P. 360-361.
10. Seckeler M.D., Hoke T.R. The worldwide epidemiology of acute rteumatic fever and rheumatic heart disease // Clinical Epidemiology. — 2011. — N3. — P. 67-84.
Информация об авторах: 46011, Украина, г. Тернополь, майдан Воли, 1,
Тернопольский государственный медицинский университет, тел. +38 0352527855;
Боярчук Оксана Романовна — к.м.н., доцент кафедры, e-mail: boyarchuk_oksana@mail.ru; Банадыга Наталия Васильевна — д.м.н., профессор, заведующий кафедрой; Гариян Татьяна Викторовна — к.м.н., ассистент кафедры.
© СУСЛОВА М.Ю., КРАВЧЕНКО О.С., КОСТОРНОВА Т.Я., ПАРФЕНОВА В.В. — 2013 УДК 579.63
САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ВОД В МЕСТАХ ВЫХОДОВ МИНЕРАЛЬНЫХ ИСТОЧНИКОВ ДОЛИНЫ РЕКИ ШУМАК (ТУНКИНСКИЕ ГОЛЬЦЫ, ВОСТОЧНАЯ СИБИРЬ)
Мария Юрьевна Суслова, Ольга Сергеевна Кравченко, Татьяна Ярославовна Косторнова,
Валентина Владимировна Парфенова (Лимнологический институт Сибирского отделения Российской академии наук, директор — акад. РАН, д.б.н., проф. М.А. Грачев, отдел микробиологии, зав. — к.б.н., доц. — В.В. Парфенова)
Резюме. Впервые проведен анализ на наличие потенциально-патогенных бактерий природной воды в местах выходов минеральных источников долины реки Шумак (Тункинских гольцов) на основе которого дана реальная оценка качества данного водного ресурса. Согласно ГОСТу 13273-88 «Воды минеральные питьевые лечебные и лечебно-столовые» на момент отбора проб (сентябрь 2012 г.), из 44 исследуемых проб воды минеральных источников соответствовало требованиям только 4 источника — это № 58, 61, 63, 64, на левобережной части реки Шумак. При учёте дополнительного показателя свежего фекального загрязнения, как энтерококки, все исследуемые источники не рекомендуется употреблять для питьевых целей. Две стоковые минеральные ванны, расположенных на левом берегу в зоне А и В, могут использоваться по назначению, а третья — радоновая ванна содержала высокое число энтерококков.
Ключевые слова: Тункинские гольцы, минеральные источники долины р. Шумак, качество воды, общее микробное число, колиформные бактерии, энтерококки.
SANITARY-BACTERIOLOGICAL CONTROL OF QUALITY OF WATER IN EXIT POINT OF MINERAL SPRINGS OF VALLEY OF THE SHUMAK RIVER (THE TUNKINSKY RIDGE, EASTERN SIBERIA)
M.Yu. Suslova, O.S. Kravchenko, T.Ya. Kostornova, V.V. Parfenova (Limnological Institute, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences)
Summary. The first analysis of presence of potentially pathogenic bacteria in the natural mineral springs of valley of the Shumak River (the Tunkinsky Ridge) was investigated. The realistic evaluation of water quality was done taking account of the data obtained. 44 investigated water samples of mineral springs were taken in September 2012. According to the Russian national standard GOST № 13273-88 «Drinking medicinal and medicinal-table mineral waters» only 4 samples were satisfied the requirements of the standard. These were samples in the left area of the Shumak River with the numbers: 58, 61, 63, 64. Taking into account the additional marker of fecal contamination, bacteria of the group Enterococcus, all of these mineral sources are not recommend for drinking. Two runoff mineral balneums located in the left area in zone A and B can be used for the purpose intended, the third radon balneum was contaminated by high numbers of enterococci.
Key words: the Tunkinsky Ridge, the mineral springs of valley of the Shumak River, quality of water, total bacterial count, coliforming bacteria, bacteria of Enterococcus.
В высокогорной части Восточных Саян в долине р. Шумак расположены выходы уникальных минеральных термальных источников. Минеральные источники — это места активной деятельности микроорганизмов, которое осуществляют сложные геохимические преобразования. Особое значение принадлежит микробному сообществу в создании лечебного фактора минеральных вод. Шумакские минеральные источники остаются неизученной экосистемой в микробиологическом аспекте.
В 2004 г. О.Ф. Вятчиной представлено сообщение о гетеротрофных микроорганизмах почв, формирующихся в местах выхода минеральных источников долины р. Шумак [1]. В отделе микробиологии ЛИН СО РАН была проведена работа по подбору сред для культивирования органотрофных микроорганизмов, выделенных из проб воды Шумакских минеральных источников, и создана коллекция, которая храниться в лаборатории ^^^а, 2008) [6]. Полных и обобщающих данных по микробному сообществу минеральных вод, бактериальных матов и донных осадков Шумакских источников нет.
В связи с увеличением числа туристов в район Тункинских гольцов, становится актуальным проведение санитарно-бактериологической оценки вод, большинство из которых используются, как источники питьевой минеральной воды. Система эксплуатации источников без надлежащего контроля может привести к изменению биоценоза и состава вод. Одной из сторон пристального исследования состава и функционирования микробных сообществ термальных экосистем является изучение микроорганизмов, определяющих или влияющих на качество воды. В связи с этим, цель данного исследования провести оценку качества минеральных вод на наличие условно-патогенных микроорганизмов по ГОСТ 13273-88 «Воды минеральные питьевые лечебные и лечебно-столовые», которая даст возможность оценить и отследить происходящие изменения в термальных источниках.
Материалы и методы
В 2012 г. 28 сентября были отобраны 47 проб воды минеральных источников долины р. Шумак (рис.1А),
44 из которых используются туристами как источники питьевой минеральной воды и 3 пробы воды стоковых
минеральных ванн. Выходы минеральных источников регистрировали по обоим берегам р. Шумак, общее их число составляет более ста. Территория выходов минеральных источников делятся на три зоны: А, В и С. По правому берегу расположены источники зоны С, а по левому А и В (рис.1А). Температурный режим данных экосистем находится в пределах от 16 до 32°С, за исключением источник №64, где температура воды составила 10.3°С и источник №28, где температура равна 37.6°С (табл.1). Все пробы были отобраны и транспортированы на вертолете в лабораторию водной микробиологии ЛИН СО РАН, согласно ГОСТу 18963-73 [2].
Определение общего микробного числа (ОМЧ) — ме-зофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов проводили на мясопептонном агаре (МПА), посевы экспонировали при 37°С в течение 24 ч [3]. Результаты представляли числом колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл исследуемой пробы воды.
Определение общих колиформных бактерий (ОКБ). Метод основан на фильтрации трех объемов воды (25, 100 и 333 мл) через нитроцеллюлозные фильтры с диаметром 47 мм и диаметром пор 0.45 мкм. Фильтры помещали на среду Эндо. Чашки с фильтрами инкубировали в термостате при температуре 37±1°С в течение 24±2 ч. На фильтрах отмечали рост изолированных типичных лактозоположительных колоний — темно-красных, красных с металлическим блеском или без него, или других подобного типа колоний с отпечатком на обратной стороне фильтра. Подсчитывали число колоний каждого типа отдельно с подтверждением их принадлежности к ОКБ (грамотрицательные колонии, при отрицательном оксидазном тесте и ферментации лактозы при температуре 37°С с образованием кислоты и газа).
Для санитарно-бактериологической оценки минеральных вод мы использовали стандартные показатели: 1) общее микробное число (ОМЧ) — группа является чувствительным индикатором вторичного загрязнения; 2) общие колиформные бактерии (ОКБ) — показатель постоянного фекального загрязнения. Согласно ГОСТу 13273-88 «Воды минеральные питьевые лечебные и лечебно-столовые», число ОМЧ не должно превышать 100 колониеобразующих единиц (КОЕ) в мл, ОКБ не более 3 КОЕ в 1 л.
Таблица 1
Численность общего микробного числа (ОМЧ), колиформных бактерий (ОКБ) и бактерий рода Enterococcus в воде минеральных источников долины р. Шумак
Наименование источника Темпе- ратура, °С ОМЧ, КОЕ/ мл ОКБ, КОЕ/ 100мл Энтеро- кокки, КОЕ/ 100мл
Минеральные источники зоны С
«Глазной» 24.1 150 газон 4
№99 «Селен» 29.7 34 190 1
№100 «Радон» 32.5 14 4 1
№101 «Радон» 31.6 45 4 40
Радоновая ванна 22.4 960 47 133
Минеральные источники зоны А
№43 «Туберкулёз» 23.6 5 26 0
№37 «Похмелье» 32.2 248 95 36
№36 «Нервы» 22.5 7 308 1
№35 «Нервы» 26.1 48 400 8
№34«Кишечник» 26.7 9 216 3
№30 «Язва желудка» 27.6 32 58 1
№ 28 «Повышенная кислотность» 37.6 45 292 3
№25 «Нос» 21.6 761 42 70
№24 «Ангина» 23.8 4720 газон 664
№23 «Ухо, горло, нос» 25.4 54 342 9
Стоковая ванна 16.2 300 240 40
№23б «Зубы» 22.5 113 0 127
№22 «Ухо, горло, нос» 20.8 60 240 0
№23а «Зубы» 16.8 225 384 18
№15 «Кишечник» 30.4 1076 6 488
№9 19.4 25 40 50
№10 19.4 157 220 3
№8 «Повышенное давление» 22.8 407 76 129
№7 «Желудок» 17.6 1 75 33
№5 «Лёгкие» 27.5 3 140 2
№6 «Нервы» 22.2 46 360 10
№4 «Почки» 19.5 77 18 0
№21 «Порок сердца» 23.5 186 200 8
№18-19 «Желудок» 32.2 93 210 2
№02Е «Красота» 24.5 238 296 140
№1 «Рак» 21.2 216 412 2
№117 «Головная боль» 17.7 174 116 11
Минеральные источники зоны В
№46 «Желчь» 28.6 171 264 3
№44 «Мочевой пузырь» 29.8 104 240 50
№49 «Почки» 28.5 60 200 14
№118 29.5 217 0 19
№51 «Мужское упрямство» 29.9 216 160 37
№52 «Мужское упрямство» 28.7 388 290 0
№53 30.3 1256 0 920
№55 28.4 1328 296 17
№57 30.2 31 160 87
№58 31.9 15 0 19
№61 30.1 88 0 2
№63 «Бронхит» 29.8 91 0 56
№65 «Сердце» 27.7 1110 0 39
Стоковая ванна 18.8 216 50 13
№64 «Женские капризы» 10.3 0 0 2
Примечание: КОЕ — колониеобразующая единица, выделенный шрифт — данные превышающие нормы.
Определение бактерий рода Enterococcus. Метод основан на фильтрации трех объемов воды (25, 100 и 333 мл) через нитроцеллюлозные фильтры с диаметром 47 мм и диаметром пор 0.45 мкм. Фильтры с посевами
помещали на чашки с азидной средой Slanetz and Bartley и инкубировали при температуре 37±1°C в течение 48 ч. Фильтры с проросшими колониями перекладывали на чашки с эскули-ном на 2 часа в термостат при 44±1°С, колонии энтерококков детектировали по чёрному отпечатку на обратной стороне фильтра (рис. 1г) [3,5].
Результаты и обсуждение
При анализе полученных результатов только 50% проб воды минеральных источников по общему микробному числу (ОМЧ) соответствовало норме, в остальных — численность варьировала от 104 до 4720, с максимальным значением в пробе № 24 — 4720 КОЕ/мл (таб. 1).
Общие колиморфные бактерии (ОКБ) выделяли в большинстве исследуемых проб. Только восемь источников № 23б, 65, 118, 58, 53, 61, 63, 64, в которых исследуемая группа бактерий не обнаружена, по данному критерию соответствуют требованиям питьевой воды (табл. 1).
С учетом полученных показателей в качестве питьевой минеральной воды согласно требованиям ГОСТа 13273-88 можно использовать только четыре минеральных источника — № 58, 61, 63, 64, расположенных (в зоне В) на побережной части реки Шумак.
Дополнительным критерием оценки качества питьевой воды использовали бактерии рода Enterococcus. Это связано с тем, что Европейским Союзом (European Community, ЕС) нормы качества определяет директива «По качеству питьевой воды, предназначенной для потребления человеком» 98/83/ЕС, где отсутствие энтерококков — обязательное условие качества питьевой воды.
Бактерии рода Enterococcus выделяли из большинства проб, отрицательный результат наблюдали только в пробах № 43, 22, 4, 52. Минимальная численность 1 — 4 КОЕ/100 мл в четырнадцати пробах № 1, 5, 10, 18-19, 28, 30, 34, 36, 46, 61, 64, 99, 100, «Глазной», а максимальные значения: 488, 664 и 920 КОЕ/100 мл в пробах № 15, 24 и 53, соответственно.
Стоковые минеральные ванны, согласно СанПиН 2.1.5.980-00 — «Гигиенические требования к охране поверхностных вод» [4] были отнести к водам II категории водопользования — это водные объекты или их участки для использования в рекреационных целях. По требованиям данного СанПин, нормам соответствовали две стоковые ванны, расположенные в зоне А и В по левому берегу р. Шумак. Пробы воды, отобранные в радоновой ванне, превышали нормативы по количеству энтерококков (более 50 КОЕ/100 мл), а их численность составила 133 КОЕ/100мл.
Таким образом, по результатам анализа всех показателей загрязнения питьевой воды (общее микробное число, количество бактерий кишечной палочки и бактерий рода Enterococcus), исследуемые минеральные источники на момент отбора проб не рекомендуется применять в качестве питьевой воды. Две стоковые ванны в зоне А и В могут быть использованы по назначению; а вот радоновая ванна не соответствует требованиям СанПиН.
Рис. 1. А — схема отбора проб (1 — Дацан, 2 — дома и зимовья, 3 — мосты, 4 — заборы, 6 — тропинки, 7 — ванны, 8 — радоновые ванны, 9 — грязевая ванна, 10 — общеоздоровительная ванна, 11 — травертивные реки), Б — фото источника № 24, В — фото источника № 58, Г — идентификация энтерококков на среде с эску-лином). Масштаб: 5 см (Б, В).
ЛИТЕРАТУРА
Наличие постоянного и свежего фекального загрязнения, в данном водном ресурсе, скорей всего, связано с доступностью к минеральным источникам животных (лошадей), близостью наличия несанкционированных туалетов туристов. Кроме того, создание благоприятных температурных условий для существования условно-патогенных микроорганизмов в местах выхода воды из источников, способствует сохранению высокой жизнеспособности этих микроорганизмов. По нашему мнению, минеральные источники, используемые в лечебных целях, необходимо максимально оградить от возможного попадания условно-патогенных бактерий в местах выхода минеральных вод.
Следует отметить, что минеральные источники Тункинских гольцов отнесены к особо охраняемой природной территории. Результаты, полученные в данной работе, могут быть положены в основу информационной базы для принятия решений по реализации природоохранных мероприятий, направленных как на снижение влияния загрязнения этих уникальных водных объектов, так и организацию постоянного контроля над их качеством.
Данная работа выполнена в рамках бюджетного проекта № У1.51.1.9 при поддержке гранта РФФИ№12-04-31823мол_а.
1. Вятчина О.Ф., Лопатовская О.Г., Кирина А.А. Гетеротрофные микроорганизмы почв, формирующихся в местах выхода минеральных источников долины реки Шумак. // Биология микроорганизмов и их научно-практическое использование. — Иркутск, 2008. — С. 128.
2. ГОСТ 18963-73 «Вода питьевая. Методы санитарно-бактериологического анализа». // Государственный контроль качества воды. — М: ИПК Изд-во стандартов, 2003. — C. 641-655.
3. МУК 4.2.1884 — 04. Санитарно-микробиологический и санитарно-паразитологический анализ воды поверхностных
водных объектов. — М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005. — C. 25-58.
4. СанПиН 2.1.5.980-00 Гигиенические требования к охране поверхностных вод. — М.: Минздрав России, 2000.
5. EN ISO 7899-2: 2000. Detection and enumeration of intestinal enterococci. Part 2: Membran filtration method.
6. Suslova M.Yu., Parfenova V.V., Terkina I.A., et al. Bacillus in Ecosistems of Hot Springs of Pribaikalya and Zabaikalya. // Journal of International Scientific Publication: Ecology and Safety. — Bulgaria, 2008. — Part 2. — C. 54-60.
Информация об авторах: Суслова Мария Юрьевна — к.б.н., с.н.с. отдела микробиологии,
664033, г. Иркутск, ул. Улан-Баторская, 3, ЛИН СО РАН, тел. (3952) 425415, е-шаИ: msuslova1979@mail.ru: Кравченко Ольга Сергеевна — к.б.н., н.с. отдела микробиологии, е-шаП: ok.c@mail.ru:
Косторнова Татьяна Ярославовна — вед. спец. отдела микробиологии, е-шаП: kostornovat@lin.irk.ru: Парфенова Валентина Владимировна — к.б.н., доцент, заведующий отделом микробиологии, е-mail: parf@lin.irk.ru
© КАПУСТИНА Т.А., МАРКИНА А.Н., КИН Т.И., ПАРИЛОВА О.В., БЕЛОВА Е.В. — 2013 УДК 614.2:616.21:616.98
МЕРОПРИЯТИЯ ПО УЛУЧШЕНИЮ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ НАСЕЛЕНИЮ С ВЕРИФИЦИРОВАННОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ ВЕРХНЕГО ОТДЕЛА РЕСПИРАТОРНОГО ТРАКТА
Татьяна Анатольевна Капустина, Анжела Николаевна Маркина,
Татьяна Ильинична Кин, Ольга Владимировна Парилова, Елена Валентиновна Белова (НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярск, Россия, директор — чл.-корр. РАМН, д.м.н., проф. В.Т. Манчук, клиническое отделение патологии ЛОР-органов, зав. — д.м.н. Т.А. Капустина)
Резюме. Хламидийная инфекция в настоящее время является серьезной медицинской и социальной проблемой для здравоохранения многих стран мира. При этом в России организационные медицинские мероприятия, направленные на снижение заболеваемости хламидиозом, разработаны только для урогенитальной хламидийной инфекции. Основными обстоятельствами, являющимися предпосылками для научного обоснования представленных в статье мероприятий по оказанию медицинской помощи населению с респираторным хламидиозом, являются результаты обследований 1329 человек, показавшие его высокую распространенность, отрицательное влияние этой инфекции на состояние здоровья населения, а также наличие недостатков в работе амбулаторно-поликлинической службы по выявлению, лечению и профилактике хламидийной инфекции верхнего отдела респираторного тракта.
