Роль регуляторных Т-клеток и эозинофилов в механизмах модуляции иммунного ответа при туберкулезе легких Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2012

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 616.24-002.5-092:612.017.1]-078.33

В. В. Новицкий, Е. Г Чурина, О. И. Уразова, Ю. В. Колобовникова,

Т. Е. Кононова, О. В. Воронкова

РОЛЬ РЕГУЛЯТОРНЫХ Т-КЛЕТОК И ЭОЗИНОФИЛОВ В МЕХАНИЗМАХ МОДУЛЯЦИИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ

Кафедра патофизиологии ГБОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Минздравсоцраз-вития РФ (634050, г Томск, Московский тракт, д. 2)

YбT-клетки и эозинофильные гранулоциты занимают промежуточное положение между врожденным и адаптивным иммунитетом и осуществляют иммунорегуляторные функции. В ходе проведенного исследования у пациентов с туберкулезом легких (ТБ) установлено снижение количества YST-лимфоцитов, что может свидетельствовать о неэффективности функционирования механизмов первой линии защиты на внедрение Mycobacterium tuberculosis. В свою очередь увеличение количества 11_-5Р-экспрессирующих эозинофилов при ТБ может иметь защитноприспособительное значение на фоне дефицита циркулирующих YST-клеток. Выявленное повышение содержания регуляторных Т-клеток с иммунофенотипом CD4+CD25+Foxp3+ характеризует смещение иммунного баланса в направлении иммуносупрессии. Показано также, что течение туберкулезной инфекции сопровождается угнетением Thl-иммунного ответа (что может быть как причиной, так и следствием дефицита продукции интерлейкина (IL)-2) и активацией Т1т2-пути (повышенная продукция IL-4 и IL-5) на фоне гиперсекреции цитокинов с иммуносупрессорной активностью (IL-10 и трансформирующий фактор роста в).

Ключевые слова: туберкулез легких, регуляторные Т-клетки, эозинофилы, цитокины

Novitskiy V.V., ChurinaE.G., Urazova O.I., Kolobovnikova U.V.,Kononova T.E., Voronkova O.V.

THE ROLE OF REGULATORY T-CELLS AND EOSINOPHILS IN THE MECHANISM OF MODULATION OF THE IMMUNE RESPONSE IN PULMONARY TUBERCULOSIS

yST-cells and eosinophilic granulocytes occupy an intermediate position between the innate and adaptive immunity and perform the immunoregulatory functions. In the course of the carried-out study, the reduction in number of yST-lymphocytes was determined in patients with pulmonary tuberculosis which may indicate a failure of the "first line of defense" functioning mechanisms for the implementation of Mycobacterium tuberculosis. In its turn, the increasing number of IL-5R-expressing eosinophils in pulmonary tuberculosis may have a protective and adaptive significance in conditions of circulating yST-cells deficit. The revealed elevated levels of regulatory T-cells with immunophenotype CD4+CD25+Foxр3+ characterizes the shift of immune balance towards the direction of immunosuppression. It is shown also that the course of tuberculosis infection is accompanied by inhibition of Th1-immune response (which can be both a cause and a consequence of the deficit in production of IL-2) and activation of Th2-path (increased production of IL-4 and IL-5) in the presence of hypersecretion of cytokines with immunosuppressive activity (IL-10 and TGFP).

Key words: pulmonary tuberculosis, regulatory T-cells, eosinophils, cytokines

Введение. Изучение иммунопатогенеза туберкулезной инфекции в аспекте взаимодействия врожденного и адаптивного иммунных ответов на Mycobacterium tuberculosis (МБТ) и феномена иммунной девиации представляется сегодня особенно актуальным. Известно, что ключевыми элементами врожденного иммунитета наряду с моно-цитами/макрофагами и дендритными клетками являются yST-лимфоциты — минорная МНС-нерестриктированная субпопуляция Т-лимфоцитов, играющая, по мнению ряда исследователей, решающую роль в распознавании МБТ, инициации и развитии противотуберкулезного иммунного ответа, а также эрадикации возбудителя [7, 18, 29, 31]. Вместе с тем в процессе распознавания антигена на первом этапе иммунной защиты могут участвовать эозинофильные гранулоциты, экспрессирующие TLR-2 и ySTCR, посредством которых они связывают небелковые микобактериальные антигены [21, 27]. В фокусе современных исследований находятся также регуляторные Т-клетки (Treg), главные функции которых заключаются в способности обеспечивать периферическую иммунологическую толерантность к аутоантигенам и супрессировать пролиферацию различных клонов Т-хелперов (Th): Th1, Th2, Th17, TFH [18].

Уникальность описанных выше популяций клеток заключается в том, что они занимают промежуточное

Новицкий Вячеслав Викторович — акад. РАМН, проф., зав. каф., тел. 8(3822)55-36-13, e-mail:[email protected]

положение между врожденным и адаптивным иммунитетом и осуществляют иммунорегуляторные функции. Показано, что Treg-клетки и эозинофилы способны продуцировать широкий спектр цитокинов, включая медиаторы с провоспалительной (интерлейкин(ГЬ)-2, IL-12, интерферон(№№)-у, фактор некроза опухолей (TNF) а), противовоспалительной (IL-4, IL-5, IL-13) и иммуносупрессорной (IL-10, трансформирующий фактор роста (TGF) в) активностью [11—13, 23, 25]. Это позволяет думать о том, что указанные популяции клеток за счет секреции иммунорегуляторных биомолекул способны активировать (или дезактивировать) эффекторные клоны CD4+ Т-лимфоцитов, направляя иммунный ответ по одному из вариантов его развития.

В связи с вышеизложенным целью настоящей работы стало исследование механизмов иммуномодулирующего действия Treg-клеток (Treg, yST-лимфоциты) и эозинофильных гранулоцитов при туберкулезе легких (ТБ).

Материалы и методы. Обследованы 46 пациентов (35 мужчин и 11 женщин в возрасте от 19 до 48 лет; средний возраст 38 ± 8 года) с впервые выявленным ТБ. Диагноз ТБ устанавливали на основании клинической картины заболевания, рентгенологического исследования легких, данных микроскопического и бактериологического исследования мокроты. Всех больных разделили на три группы в зависимости от клинической формы заболевания. В группу с инфильтративным ТБ (ИТБ) включили 28 пациентов, с дис-

- 184 -

ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ

семинированным ТБ (ДТБ) — 11, с фиброзно-кавернозным ТБ (ФКТБ) — 7.

В контрольную группу вошли 16 здоровых лиц с аналогичными характеристиками по полу и возрасту, не предъявлявших на момент обследования жалоб соматического характера.

Материалом исследования служила периферическая венозная кровь здоровых лиц и пациентов с ТБ, взятая до назначения им специфической химиотерапии.

Выделение мононуклеарных лейкоцитов и эозинофилов периферической крови осуществляли методом центрифугирования на градиентах плотности фиколл-урографина (р = 1077 г/л) ("MP Biomedical, LLC", США) и Percoll (р = 1,133 г/л) ("Sigma Life Science", США) соответственно [20, 22]. Для определения сочетанной экспрессии поверхностных CD4- и CD25-маркеров на лимфоцитах периферической крови и внутриклеточного маркера Foxp3, а также ySTCR на лимфоцитах и поверхностных рецепторов к IL-5 на эозинофильных грану-лоцитах применяли метод проточной лазерной трехцветной цитометрии с использованием специфических моноклональных антител (МАТ), меченных флюоресцентными метками (FITC, PE и PE-Cy5; "Becton Dickinson", США). Пробоподготовку проводили согласно протоколу фирмы-производителя ("Becton Dickinson", США). Образцы клеточных суспензий анализировали на проточном цитометре FACSCalibur ("Bec-ton Dickinson", США), укомплектованном аргоновым лазером длиной волны 488 нм и стандартными фильтрами.

Содержание IL-2, IL-5, IL-4, IL-10 и TGFp определяли, применяя твердофазный иммуноферментный сэндвичевый метод (ELISA) согласно инструкциям, предлагаемым производителями тест-систем ("Bender Medsystems", США; "Biosource", США; "Протеиновый контур", Санкт-Петербург). Для стимуляции цитокинпродуцирующей активности лимфоцитов и эозинофилов в пробы вносили вакцинный штамм BCG в дозе 50 мкг/мл (ФГУП "НПО Микроген", ). Оптическую плотность регистрировали на фотометре Multiscan EX (Финляндия) при длине волны 450 нм. Результаты исследования обрабатывали с использованием стандартного пакета программ SPSS v.11.0.

Результаты и обсуждение. С иммунологической точки зрения ТБ является классическим примером иммунопатологической реакции гиперчувствительности замедленного (IV) типа, т. е. клеточно-опосредованного иммунного ответа. Однако в зависимости от характера течения туберкулезного процесса выделяют несколько форм специфического иммунного ответа, при этом для ИТБ, как правило, характерен Thi-ответ. В случае ДТБ преобладает ThZ-ответ. Что касается ФКТБ, то у пациентов с данной патологией практически всегда специфический иммунный ответ выражен слабо (Т-клеточная анергия), либо, напротив, могут быть задействованы оба типа иммунного ответа с преобладанием Th2, характеризующегося усиленной антителопродукцией, массивной бактериемией и, как следствие, деструкцией легочной ткани и казеозным некрозом [5, 9, 15].

Основными клетками-регуляторами всех типов иммунного ответа являются различные субпопуляции Т-лимфоцитов-хелперов, в том числе естественные Treg-клетки с фенотипом CD4+CD25+, экспрессирующие внутриклеточный транскрипционный фактор Foxp3+ (маркер для идентификации Treg) [18].

Результаты анализа количества CD4+CD25+Foxp3+ Treg-лимфоцитов показали его повышение у всех пациентов с ТБ независимо от клинической формы относительно аналогичных параметров у здоровых лиц (табл. 1).

Установленное повышенное содержание Foxp3-позитивных регуляторных Т-лимфоцитов способствует формированию иммуносупрессии с целью предотвращения развития гиперергической иммунной реакции и повреждения ткани легких. Так, например, в исследованиях S. Raghvan (2005), D. Lee (2010) показана сдерживающая

роль Treg-клеток в развитии интенсивного иммунного воспаления и иммунопатологии, сопровождающей различные инфекционные процессы [26, 33]. Однако в некоторых случаях Treg-лимфоциты способны ослаблять эффективность иммунной защиты и тем самым способствовать генерализации и хронизации инфекции [37].

Еще одной популяцией клеток, сравнительно недавно отнесенной к естественным Treg-клеткам, являются убХ-клетки — минорная МНС-нерестриктированная субпопуляция Т-лимфоцитов, сочетающая свойства клеток как врожденного, так и приобретенного иммунитета [13]. Выделяют циркулирующие и резидентные y5T-лимфоциты. Циркулирующие yST-лимфоциты составляют в среднем 1—10% общего количества мононуклеаров периферической крови (МПК) и экспрессируют CD3+Vy9V52+TCR. На резидентных y5T-лимфоцитах, доминирующих в слизистых оболочках желудочно-кишечного, респираторного и урогенитального трактов, определяют CD3+V51+ или CD3+V53+TCR [7].

Анализируя содержание y5T- клеток в крови у больных ТБ в острую фазу инфекционного процесса и до назначения специфической химиотерапии, мы установили его снижение при ИТБ, ДТБ и ФКТБ в 1,5, 2 и 3 раза соответственно по сравнению с таковым в контрольной группе (см. табл. 1). Выявленный дефицит циркулирующих y5T-лимфоцитов, с одной стороны, может быть обусловлен пополнением пула резидентных yST-клеток в легочной ткани, с другой — активацией антигениндуцированного рецепторного апоптоза клеток при деструктивных формах ТБ, что способствует ослаблению первичного иммунного ответа на микобактериальную инфекцию.

Следует отметить, что особенностью yST-клеток является их способность к МНС-независимому распознаванию клеток-мишеней, инфицированных даже одной микобактерией на этапе первичного иммунного ответа. Сниженное количество убХ-лимфоцитов на фоне хронического деструктивного туберкулезного процесса может свидетельствовать о неэффективности функционирования механизмов первой линии защиты от патогена.

Согласно данным V. Driss и соавт. [2009], в процессе МНС-независимого распознавания антигена наряду с y5T- клетками могут участвовать эозинофильные гра-нулоциты, экспрессирующие TLR2 и yST-клеточный рецептор, посредством которых они связывают небелковые микобактериальные антигены. В ходе проведенного нами исследования установлено повышение уровня IL-5R-позитивных эозинофилов в крови у пациентов с диссеминированным вариантом туберкулезной инфекции по сравнению с соответствующими параметрами у здоровых лиц (см. табл. 1), что, на наш взгляд, может иметь позитивное значение на фоне выявленного дефицита циркулирующих y5T- клеток.

Регуляция дифференцировки Th0-лимфоцитов в Th1-либо ThZ-клетки и направление иммунного ответа по одному из вариантов его развития осуществляются за счет секреции широкого спектра медиаторов [2, 3, 10—13, 23, 25]. Важную роль в формировании противотуберкулезного иммунитета играет IL-2 — ростовой фактор Т-клеток. Основной биологической функцией IL-2 является стимуляция пролиферации лимфоцитов в ответ на антигенную стимуляцию. IL-2 обеспечивает в организме высокую активность вспомогательных клеток и эффекторных цитотоксических Т-лимфоцитов, поддерживая тем самым клеточный иммунный ответ, которому принадлежит основная роль в формировании адекватного противотуберкулезного иммунитета [2, 9].

При исследовании содержания IL-2 в супернатантах культуральных суспензий мононуклеарных лейкоцитов и эозинофилов периферической крови у больных ТБ установили тенденцию к снижению базальной продукции

- 185 -

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2012

Таблица 1

Содержание CD4+CD25+Foxp3+ Treg-клеток, yST-лимфоцитов и IL-SR-позитивных эозинофилов в периферической крови у больных ТБ (Me(Q-Q3>)

Группа обследованных CD4+CD25+Foxp3+ y5T- лимфоциты ^-5К.-позитивные эозинофилы

Здоровые лица 2,63 (2,00—3,29) 4,88 (4,12—6,26) 5,16 (3,7—6,45)

ИТБ 4,48 (3,10—6,00) р1 = 0,047 3,35 (2,86—4,15) р1 = 0,029 4,15 (3,81—11,52)

ДТБ 5,35 (3,75—7,14) р1 = 0,014 2,34 (2,11—3,06) р1 = 0,014, р2 = 0,046 8,22 (5,24—10,97) р1 = 0,034, р2 = 0,042

ФКТБ 4,80 (3,20—6,00) р, = 0,045 1,72 (1,2—2,21) р. = 0,012, р2 = 0,041, р3 = 0,044 5,98 (4,01—6,91) р3 = 0,005

Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: р1 — по сравнению с показателями у здоровых лиц; р2 — с показателями при ИТБ; р3 — с показателями при ДТБ.

данного медиатора. Наиболее выраженное угнетение базальной продукции IL-2 отметили при ФКТБ, в то время как снижение BCG-индуцированной секреции цитокина выявляли при всех клинических формах ТБ (табл. 2, 3).

Гипопродукция IL-2 в период активно развивающейся туберкулезной инфекции обусловлена, вероятно, непосредственным нарушением секреции исследуемого цитокина в результате токсического действия МБТ на процессы биосинтеза ДНК и белка в клетках [1—3, 11]. Кроме того, в основе иммунодепрессии при ТБ может лежать функциональная анергия Т-клеток, одним из проявлений которой является снижение продукции IL-2, что сопряжено с более тяжелым течением заболевания [8, 16]. Уникальная роль IL-2 в регуляции иммунитета связана также с контролем за гиперактивацией иммунной системы за счет пролиферации и дифференцировки Treg-лимфоцитов [28]. По данным A. Thronton, E. M. Shevach (2000), высокие дозы IL-2, усиливая пролиферацию самих Treg-клеток, подавляют их супрессорную активность, но после завершения экспансии медиатора супрессорная активность Treg-клеток оказывается выше в разы, чем до действия IL-2 [35, 36]. Вместе с тем имеются сведения о том, что IL-2, действуя на активированные Treg-лимфоциты, не влияет на их пролиферацию, повышая при этом выживаемость и объем популяции Treg-клеток [19]. Возможно, указанные разногласия обусловлены особенностями действия IL-2 на разные этапы диф-ференцировки, пролиферации и активации Treg-клеток, а также эффектами различных доз цитокина. Данным фактом можно объяснить и противоречие, установленное нами при проведении исследований, а именно повышение содержания CD4+CD25+Foxp3+ Treg-лимфоцитов в крови на фоне снижения секреции IL-2 in vitro при ТБ.

Как упоминалось ранее, в основе иммунопатогенеза различных клинических форм ТБ лежат разные варианты течения специфического иммунного ответа. Известно, что при распространенных остропрогрессирующих формах ТБ, к которым относится ДТБ, изначально происходит инициация Th2-зависимого ответа на фоне неэффективности клеточных механизмов протективного иммунитета. Ключевыми цитокинами-синергистами Th2-опосредованного иммунного ответа являются IL-4 и IL-5, принимающие участие в широком спектре иммунологических реакций: пролиферации лимфоцитов, поляризации дифференциров-ки Т-лимфоцитов в направлении Th2, стимуляции пролиферации В-лимфоцитов, активированных антигеном [2, 4, 6]. При исследовании уровня цитокинов TfrZ-профиля в супернатантах клеточных культуральных суспензий выявили увеличение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-4 и IL-5 in vitro только при диссеминированной клинической форме ТБ (см. табл. 2, 3). Основными клетками-продуцентами IL-4 и IL-5 принято считать активированные Th2-лимфоциты, эозинофилы и тучные клетки, однако факультативными продуцентами IL-4 могут быть CD8+ T- лимфоциты, базофилы, Treg- и y5T- клетки [4, 15, 17]. Это согласуется с установленным нами наиболее выраженным повышением численности эозинофильных гранулоцитов и Treg-клеток в крови при ДТБ.

Известно, что в ходе адаптивного иммунного ответа IL-4 может выступать в качестве синергиста IL-10 — ключевого цитокина с иммуносупрессивной активностью. К настоящему времени установлено, что IL-10 подавляет продукцию не только провоспалительных цитокинов, но и цитокинов, ассоциированных с Th2- и Th17-лимфоцитами. Кроме того, показана важная роль IL-10 в ограничении развития реакций врожденного и приобретенного противоинфекционного иммунитета, способных вызывать повреждение тканей организма [10, 17]. В связи с этим IL-10 представляется идеальным цитокином-супрессором иммунного ответа. В ходе проведенного нами исследования зарегистрировали повышение базальной и BCG-индуцированной продукции IL-10 in vitro у больных ИТБ. При корреляционном анализе установили наличие положительной взаимосвязи между секрецией IL-10 и IL-4 при ДТБ (r = 0,7; р < 0,001).

Наряду с IL-10 важнейшим медиатором, участвующим в реализации иммуносупрессорных потенций Treg-лимфоцитов, а также модулирующим их функциональную активность за счет повышения экспрессии гена FOXP3, является TGFP [32]. Последний обладает регенерирующим и противовоспалительным свойствами, оказывает антипролиферативное действие на CD4+ T-лимфоциты посредством угнетения синтеза IL-2 и усиления продукции ингибиторов клеточного цикла. Интересно отметить, что TGFP является также основным медиатором формирования фиброза [38]. TGFP играет важную роль в антимикобактериальной защите организма человека, а также имеет принципиальное значение для перехода острой воспалительной реакции в хроническую [24, 38].

Как показали результаты проведенных нами исследований, спонтанная и BCG-индуцированная продукция TGFP у пациентов с ИТБ была ниже, чем у здоровых лиц и больных ДТБ и ФКТБ. В последних случаях, напротив, отмечали повышение содержания медиатора, при этом при ФКТБ оно было наиболее высоким (см. табл. 2).

Основными клетками-продуцентами TGFP и IL-10 являются Treg-лимфоциты [10, 30]. Стоит заметить, что активированные Treg-клетки сами по себе анергичны: in vitro они слабо пролиферируют и слабо секретируют цитокины, и лишь IL-10 и TGFP секретируются Treg-клетками в значительном количестве [24, 32], что отчасти подтверждается положительной корреляцией между уровнем образования TGFP и содержанием в крови Treg-клеток с фенотипом CD4+CD25+Foxp3+ (r = 0,9; р < 0,01), а также концентрацией IL-10 и Treg-клеток с фенотипом CD4+CD25-Foxp3+ (r = 0,49; р < 0,05).

Заключение. Промежуточное положение между врожденным и адаптивным иммунитетом занимают y5T-клетки и эозинофильные гранулоциты. Установленное нами снижение количества yST-лимфоцитов у пациентов с ТБ может свидетельствовать о неэффективности функционирования механизмов первой линии защиты на внедрение МБТ. В свою очередь, повышение уровня IL-5R-позитивных эозинофилов при ТБ может иметь позитивное значение на фоне выявленного дефицита цир-

- 186 -

Таблица 2

ИНФЕКЦИОННАЯ ИММУНОЛОГИЯ

о,

а

а

—

н

х

2

я

я

§

V©

>>

S

н

Я

Я

о

-8-

ч

:=

а

>*

н

I

я-

Я'

§

"и

=

И

§

а.

к ^

э &

к w • ^

О к О S РР я

СО.

Ь

О

н

а.

я ^

KI

э &

К 5

I сз

О к О 3

РР я

а.

я ^

Kg

Э &

К «

I

о к

о 3

РР я

а.

я ^

Kg Э &

К «

I

о к о 3

РР я

с § с о

О

40

ГМ

О 6 —1 О

о

ГМ

К

in ®2

г- ^

ГМ О

40

in

04 С"- С"-nocm-н

f^hOO гм' I o' o'

o' ^ ro t> о

00 о о

о

гм

О 00 ГМ ^ -Н

г- О о

Г1Г 40 04 г ■ г ■ ГМО^^ГМ^-мэ ^ о о о о

—" I о" о" о" о"

5 CN......

^ =с =с =с =с

Г" 40 00 о , -н 04 С"- 00 in О О -н

* ГМ о о о

11С (929,80— ^ II 00 in _ с-- гм 4 II ^ сС in с-- ^ in II II II — in _ ^ т 'ф ^ го 04

ГМ гм o' чо ГМ | 1 ГМ гм 00 ^ in О in го II 40 _ гм" ГО~ <4 го ® § ^ Л —Г CiH гм o' Чосмо in in — in ■-'Л ГМ 0 0 0 'Г о" о" о" 2 о и и и ГМ _ го o' ^ ^ ^

о

00

in 2

40 О о

"Ло

04 ||

4 11

04. ^

И

о _ а я о я ч: я го я

гм гм гм ^ -4 ® го о о

I г—(' s—г

[Ч ^

гм

Ч0Л04 f-ГМ ГО

1 Tl- о о

: 1 °f °f

! ГО II II

in _ ^

04" ^ ^

I

гм ^

го оо -Н

- -н ГО

о о

40

ос

04 J,

5$

ГМ о

W

н

К

W

н

ч;

<4 00

in -н

ГО о

I о"

4" ^

'Ч ГО ГМ 04 40

_ 00 гм го 04 Т+ о о о о

[ о" о" о" о"

^ in II II II II

С1 гм о

Л1 00 ^ -н ГМ о о

^ ГО 04

с-- гм о 'Пгооо ^ | о©

40 1

гм

ci,

, 00 ,

с

с

>>

а

и

3S

о

я

g

К

а

н

£

И

а

о

н

а

г

&

го го X (

<n д 11 ^ и

С"- гм —' .; О го

a, о,

а

04

in

О о (N Ь

Ч ^ О -Н

I °„ ®

ГО О О О

*4 и и и

in _ Г4 ГО

X

in

04"

w

н

©

К

Он

с

кулирующих у5Т-клеток. Продемонстрированное нами повышение содержания Treg-клеток с иммунофенотипом CD4+CD25+Foxp3+ — основных клеток-супрессоров антигенспецифического иммунного ответа, свидетельствует о смещении баланса супрессия/активация при туберкулезной инфекции в направлении иммуносупрессии. Функциональная активность Treg-клеток и эозинофилов в определенной степени опосредована секрецией иммунорегуляторных цитокинов. Выявленные нами изменения цитокинового статуса у больных ТБ позволяют заключить, что течение туберкулезной инфекции сопровождается угнетением Thl-иммунного ответа (что может быть как причиной, так и следствием дефицита продукции IL-2) и активацией Th2-^ra (гиперпродукция IL-4 и IL-5), а это способствует формированию иммунной девиации. При этом продукция цитокинов Th2- и Treg-профиля с иммуносупрессорной активностью (IL-10, TFGP) зависит от клинической формы ТБ с наибольшим повышением секреции IL-10 при ИТБ, а TGFP при ДТБ и ФКТБ. Выявленные нами особенности цитокинового статуса у пациентов с ТБ свидетельствуют о неадекватности антигенспецифического иммунного ответа с активацией супрессорных механизмов, что впоследствии может способствовать хрони-зации туберкулезной инфекции и ослаблению иммунной защиты макроорганизма в целом.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ в рамках федеральной целевой программы "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технического комплекса России на 2007—2013 гг." (ГК № 16.512.11.2046 от 14.02.2011) и Российского фонда фундаментальных исследований "Конкурс инициативных научноисследовательских проектов 2012 г." (соглашение № 11-0607/21 от 11.03.2011).

ЛИТЕРАТУРА

1. Воронкова О. В., Уразова О. И., Новицкий В. В., Стрелис

А. К. Иммунопатология туберкулеза легких. — Томск, 2007.

2. Кашкин К. Е. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность // Клин. лаб. диагн. — 1998. — № 11. — С. 21—31.

3. Кетлинский С. А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета // Иммунология. — 2002. — Т. 23, № 2. — С. 77—79.

4. Кетлинский С. А., Симбирцев А. С. Цитокины. — СПб., 2008.

5. Левашов Ю. Н., Репин Ю. М. Руководство по легочному и внелегочному туберкулезу. — СПб., 2008.

6. Мордвинов В. А., Фурман Д. П. Цитокины: биологические свойства и регуляция экспрессии гена интерлейкина-5 человека // Вестн. Всерос. о-ва генет. и селекц. — 2009. — Т. 13, № 1. — С. 53—67.

7. Нижегородова Д. Б., Зафранская М. М. Гамма дельта Т-лимфоциты: общая характеристика, субпопуляционный состав, биологическая роль и функциональные особенности // Мед. иммунол. — 2009. — Т. 11, № 2/3. — С. 115—130.

8. СахноЛ. В., ТихоноваМ. А., КургановаЕ. В. и др. Т-клеточная анергия в патогенезе иммунной недостаточности при туберкулезе легких // Пробл. туб. и бол. легких. — 2004. — № 11. — С. 23—28.

9. Сахно Л. В., Тихонова М. А., Никонов С. Д. и др. Дисфункции макрофагов, генерированных из моноцитов крови больных туберкулезом легких // Бюл. СО РАМН. — 2010. — Т. 30, № 2. — С. 101—108.

10. Симбирцев А. С. Интерлейкин-1. Физиология. Патология. Клиника. — СПб., 2011.

11. Фрейдлин И. С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции // Иммунология. — 2001. — № 5. — С. 4—7.

12. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В., Ярилин А. А. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы: Руководство для врачей. — М., 2009.

- 187 -

ИММУНОЛОГИЯ № 4, 2012

Таблица 3 Содержание (в пг/мл) цитокинов в супернатантах культуральных суспензий эозинофильных гранулоцитов у больных ТБ (Me(Qt—Qj))

IL-2 IL-5

Группа обследованных интактная культура BCG-индуцированная культура интактная культура BCG-индуцированная культура

Здоровые лица 51,29 (20,45—60,50) 58,35 (30,70—65,76) 3,03 (2,13—4,75) 4,46 (3,51—6,62)

ИТБ 40,97 (26,03—56,95) pl = 0,049 42,25 (24,25—50,70) p1 = 0,050 2,29 (1,32—2,81) 1,51 (1,51—1,94) pl = 0,011

ДТБ 31,78 (22,40—47,90) p1 = 0,005 p2 = 0,035 51,90 (39,80—59,10) p2 = 0,047 p4 = 0,035 5,15 (4,42—6,56) p1 = 0,005 p2 = 0,041 4,79 (3,75—7,18) p2 = 0,048

ФКТБ 32,16 (19,46—48,27) p1 = 0,015 24,91 (20,50—38,32) p1 = 0,001 p2 = 0,028 p, = 0,019 3,89 (3,06—5,11) p2 = 0,032 p3 = 0,035 2,96 (2,19—4,59) pl = 0,049 p2 = 0,012 p, = 0,034

13. Хаитов Р. М., Ярилин А. А., Пинегин Б. В. Иммунология: Атлас. — М., 2011.

14. Хайдуков С. В., Зурочка А. В. Цитометрический анализ субпопуляций Т-хелперов (Th1, Th2, Treg, Th17, Т-хелперы активированные) // Мед. иммунол. — 2011. — Т 13, № 1. — С. 7—16.

15. Хонина Н. А., Дударева А. В., Тихонова М. А. и др. Нарушение механизмов активной иммуносупрессии при беременности, осложненной гестозом // Бюл. СО РАМН. — 2003. — № 3. — С. 73—76.

16. Черных Е. Р., Останин А. А., Кожевников В. С. и др. Субпопуляционная принадлежность Т-клеток, подверженных анергии и апоптозу у больных туберкулезом легких // Пробл. туб. и бол. легких. — 2002. — № 7. — С. 43—47.

17. Ярилин А. А. Иммунология: Учебник. — М., 2010.

18. Beissert S., Schwarz A., Schwarz T. Regulatory T cells // J. Invest. Dermatol. — 2006. — Vol. 126. — P. 15—24.

19. Bensinger S. J., Walsh P. T., Zhang J. et al. Distinct IL-2 receptor signaling pattern in CD4+CD25+ regulatory T cells // J. Immunol. — 2004. — Vol. 172, N 9. — P. 5287—5296.

20. Boyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood // Scand. J. Clin. Lab. Invest. — 1968. — Vol. 21, Suppl. 97. — P. 77.

21. Driss V., Legrand F., Hermann E. et al. TLR2-dependent eosinophil interactions with mycobacteria: role of a-defensins // Blood. — 2009. — Vol. 113, N 14. — P. 3235—3244.

22. Gartner I. Separation of human eosinophils in density gradients of polyvinylpyrrolidone-coated silica gel (Percoll) // Immunology. — 1980. — Vol. 40. — P. 133—136.

23. Hogan S. P., RosenbergH. F., MoqbelR. Eosinophils: Biological properties and role in health and disease // Clin. Exp. Allergy. — 2008. — Vol. 38. — P. 709—750.

24. Kuniyasu Y., Takahashi T., Itoh M. et al. Naturally anergic and suppressive CD25(+)CD4(+) T cells as a functionally and phenotypically distinct immunoregulatory T cell subpopulation // Int. Immunol. — 2000. — Vol. 12, N 8. — P. 1145—1155.

25. Lacy P., Moqbel R. Eosinophil cytokines // Chem. Immunol. — 2000. — Vol. 76. — P. 134—155.

26. Lee D. C., Harker J. A., Tregoning J. S. et al. CD25+ natural regulatory T cells are critical in limiting innate and adaptive immunity and resolving disease following respiratory syncy-

tial virus infection // J. Virol. — 2010. — Vol. 84, N 17. — P. 8790—8798.

27. LegrandF. A., Driss V., Woerly G. Functional ySTCR/CD3 Complex Distinct from yST Cells Is Expressed by Human Eosinophils // PLoS ONE. — 2009. — Vol. 4, N 6. — e5926. www.plosone. org.

28. Malek T. R., Bayer A. L. Tolerance, not immunity, crucially depends on IL-2 // Nature Rev. Immunol. — 2004. — Vol. 4, N 9. — P. 665—674.

29. Mincheva-Nilsson L. Pregnancy and gamma-delta T cells: taking on the hard questions // Science. — 2003. — Vol. 281. — P. 1191—1193.

30. Moore K., de WaalMalefit R., Coffman R. L. Interleukin-10 and interleukin-10 receptor // Annu. Rev. Immunol. — 2001. — Vol. 19. — P. 683—765.

31. Pennington D., Vermijlen D., Wise E. et al. The integration of conventional and unconventional T cells that characterizes cell-mediated responses // Adv. Immunol. — 2005. — Vol. 87. — P. 27—59.

32. Pop S. M., Wong C. P., Culton D. A. et al. Single cell analysis shows decreasing FoxP3 and TGFbeta1 coexpressing CD4+ CD25+ regulatory T cells during autoimmune diabetes // J. Exp. Med. — 2005. — Vol. 201, N 8. — P. 1333—1346.

33. Raghvan S., Holgren J. CD4+CD25+ suppressor T cells regulate pathogen induced inflammation and disease // FEMS Immunol. Med. Microbiol. — 2005. — Vol. 44. — P. 121—127.

34. Sheppard D. Transforming growth factor beta: a central modulator of pulmonary and airway inflammation and fibrosis // Proc. Am. Thorac. Soc. — 2006. — Vol. 3, N 5. — P. 413—417.

35. Thronton A. M., Shevach E. M. Suppressor effector function of CD4+CD25+ immunoregulatory T cells is antigen nonspecific // J. Immunol. — 2000. — Vol. 164, N 1. — P. 183—190.

36. Thornton A. M. Signal transduction in CD4+CD25+ regulatory T cells: CD25 and IL-2 // Front. Biosci. — 2006. — Vol. 11. — P. 921—927.

37. Vahlenamp T. W., Tompkins M. B., Tompkins W. A. The role of CD4+CD25+ reglatory T cells in viral infections // Vet. Immunol. Immunopathol. — 2005. — Vol. 108, N 1—2. — P. 219—225.

38. Wang X., Han G., Owens P. et al. Role of TGF beta-mediated inflammation in cutaneous wound healing // J. Invest. Dermatol. Symp. Proc. — 2006. — Vol. 11. — P. 112—117.

Поступила 01.12.11

- 188 -