Научная статья на тему 'Роль протеиназ-ингибиторной системы сыворотки крови в формировании синдрома полиорганной недостаточности'

Роль протеиназ-ингибиторной системы сыворотки крови в формировании синдрома полиорганной недостаточности Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
116
30
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
полєорганная недостаточность / протеєнаѓ-єнгєбєторная сєстема / патогенеѓ. / multiple organ dysfunction / proteinase-inhibitory system / pathogenesis.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Л.В. Анисимова

Эксперєментальные єсследованєя, проведенные на 34 белых крысах-самцах лєнєє "Wistar" массоѕ 180-210 г. выявєлє, что прє формєрованєє СПОН раѓвєвается дєсбаланс в протеєнаѓ-єнгєбєторноѕ сєстеме, характерєѓующєѕся ростом актєвностє протеєнаѓ є угнетенєем єнгєбєторного потенцєала. Сопоставленєе реѓультатов состоянєя протеєнаѓєнгєбєторноѕ сєстемы у эксперєментальных ђєвотных покаѓало, что ємеется одєнаковая дєнамєка єѓмененєѕ актєвностє протеєнаѓ є єх єнгєбєторов неѓавєсємо от первєчноѕ патологєє, прєведшеѕ к формєрованєю СПОН. Увелєченєе уровня протеєнаѓ свєдетельствует об усєленєє деструктєвных процессов в органєѓме, а снєђенєе актєвностє єнгєбєторного потенцєала говорєт об угнетенєє протекторных своѕств органєѓма.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Л.В. Анисимова

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE ROLE OF PROTEINASE-INHIBITORY SYSTEM OF BLOOD SERUM IN FORMATION OF THE SYNDROME OF POLYORGAN INSUFFICIENCY

One of the fatal complications at critical states is the combination of insufficiency of organs and systems – the multiple organ dysfunction syndrome (MODS), which is the more severe phase of the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). One of the promising directions of looking for the markers of tissue’s injury and consequently for the development of MODS is the detection of nonspecific proteinases and their inhibitors as a factors, which reflect the grade of destruction at different pathological processes. Our work aimed to reveal the possibility to use the rates of proteinase-inhibitory activity as markers for estimation of development of the critical states, which customary lead to MODS -appearance. The experimental research made on 34 white male rats “Wistar” with mass of 180-210 g. has revealed, that during MODS formation the disbalance in the proteinase-inhibitory system appears; it is characterized by rise of the proteinase activity. The comparison of proteinase-inhibitory system’s rates has shown that there is the same evolution of proteinase activity’s indices and their inhibitors regardless of the primary pathology, which caused MODS. The rise of the proteinase content indicates the strengthening of destructive processes in the organism, while the reduction of inhibitory potential’s activity indicates the suppression of the protective abilities of the organism.

Текст научной работы на тему «Роль протеиназ-ингибиторной системы сыворотки крови в формировании синдрома полиорганной недостаточности»

ЭДЕБИЕТТЕР Т1З1М1

1 Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., Белоцерковцева Л.Д., Игнатько И.В. Физиологиё и патологиё плода //В сб. М.:Медицина. - 2004. - С. 180-240.

2 Чувакова Т.К., Джаксылыкова К.К. Проблемы новорожденных с низкой массой тела при рождении //Педиатриё и детскаё хирургиё Казахстана. - 2000. - № 3. - С. 12-14.

3 Romo A., Carceller R., Tobajas J. Intrauterine growth retardation (IUGR): epidemiology and etiology //Pediatr. Endocrinol. Rev. -2009. - Vol. 6. - Suppl. 3. - P. 332-6.

4 Karowicz-Bilinska A., Pajszczyk-Kieszkiewicz T., Suzin J., Sieroszewski P. Products of lipid degradation and intrauterine growth restriction //Prenatal and Neonatal Medicine. - 2000. - Vol 5. - Issue 4. - P. 216 - 222.

5 Флоренсов В.В., Протопопова Н.В., Колесникова А.И. Состоёние перекисного окислениё липидов и антиокислительной системы у беременных с неосложненным течением беременности и плацентарной недостаточности //Акушерство и женские болезни. - 2005. - № 2. - С. 44-49.

6 Доброхотова Я.Э., Иванова Т.А., Гулёева Н.В., Онуфриев М.В. Окислительный стресс в плаценте при физиологической и патологически протекаящей беременности //Российский вестник акушера-гинеколога. - 2008. - № 6. - 33-36.

7 Микашинович З.И., Олемпиева Е.В. Состоёние антиоксидантного статуса крови женщин при физиологическом и осложненном течении беременности //Бяллетень Сибирской медицины. - 2008. - № 2. - С. 101-104.

8 Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. - 1991. Москва «Мир», 544 с.

9 Утешева Ж.А. Особенности интегральной регулёции гормонального гомеостаза у беременных женщин с эндемическим зобом: автореф. дис. докт. мед. наук . 03.00.04 - биохимиё. - Алматы, 2005. - 41 с.

10 Волчегорский И.А. Анализ свободных радикалов липидов крови спектрофотометрическим методом //Вопросы медицинской химии - 1989. - №1. - С.127-131.

11 Андреева Л.И., Кожемёкина Л.А., Кишкун А.А. Модификациё метода определениё перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой //Лабораторное дело. - 1988. - №11. - С.41-43.

12 Переслегина И.А. Активность антиокислительных ферментов сляны здоровых детей //Лабораторное дело. - 1989. -№10. - С.20-23.

13 Чевари С., Андёл Т. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностические значениё в пожилом возрасте // Лаб. дело. - 1991. - № 10. - С. 9-13.

М.Т. АЙХОЖАЕВА, З.С. АБИШЕВА, Т.А. ЖУМАКОВА

Казахский Национальный медицинский университет имени С.Д.Асфендиярова, Алматы, Казахстан

АКТИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АНТИОКСИДАТНОЙ СИСТЕМЫ В ПЛАЦЕНТАРНОЙ ТКАНИ ЖЕНЩИН С ЗАДЕРЖКОЙ ВНУТРИУТРОБНОГО РАЗВИТИЯ ПЛОДА И В ПУПОВИННОЙ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ

Резюме: При задержке внутриутробного развитие плода происходит усиление свободнорадикального окисление пуповинной крови новорожденных, что свидетельствует о напреженности и внутриутробном страдании плода. На фоне активации перексисного окисление липидов в материнской части плаценты отмечаетсе нормальный уровень перексисного окисление липидов с усилением ферментативной активности в плодовой части плаценты, что предохранеет плод от отрицательного действие свободных радикалов.

Ключевые слова: синдром задержки внутриутробного плода, пуповиннае кровь, плацента, перекисное окисление липидов и антиоксидантнае система

M.T. AIKHOZHAEVA, Z.S. ABISHEVA, T.A. ZHUMAKOVA

Kazakh National Medical University after S.D. Asphendiyarov, Almaty, Kazakhstan

ACTIVITY OF PEROXIDE PROCESSES OF LIPID OXIDATION AND ANTIOXIDANT SYSTEMS THE PLACENTARY TISSUE OF WOMEN WITH INTRAUTERINE GROWTH RETARDATION OF FETUS AND I N FUNIC BLOOD OF NEWBORNS

Resume: Activity of lipid peroxidation processes and antioxidant systems in a placentary tissue of women with intrauterine growth retardation of fetus and in funic blood of newborns was investigated it has been shown activation of free radical oxidations in funic blood of newborns on a background of insufficiency antioxidant systems. In a fetal part of a placenta a level of functioning of system the LPO-AOS doesn't change.

Keywords: intrauterine growth retardation of fetus, funic blood, placenta, peroxide processes of lipid oxidation, antioxidant systems

УДК: 616-092:616.15:616-008.64

Л.В. АНИСИМОВА

ГУ «Крымский государственный медицинский университет имени С.И. Гергиевского МОЗ Украины», г. Симферополь, Украина

РОЛЬ ПРОТЕИНАЗ-ИНГИБИТОРНОЙ СИСТЕМЫ СЫВОРОТКИ КРОВИ В ФОРМИРОВАНИИ СИНДРОМА ПОЛИОРГАННОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ

Экспериментальные исследования, проведенные на 34 белых крысах-самцах линии "М/^аг" массой 180-210 г. выявили, что при формировании СПОН развивается дисбаланс в протеиназ-ингибиторной системе, характеризующийся ростом активности протеиназ и угнетением ингибиторного потенциала. Сопоставление результатов состояния протеиназ-ингибиторной системы у экспериментальных животных показало, что имеется одинаковая динамика изменений активности протеиназ и их ингибиторов независимо от первичной патологии, приведшей к формированию СПОН. Увеличение уровня протеиназ свидетельствует об усилении деструктивных процессов в организме, а снижение активности ингибиторного потенциала говорит об угнетении протекторных свойств организма. Ключевые слова: полиорганная недостаточность, протеиназ-ингибиторная система, патогенез.

Одним из фатальных осложнений при критических состоениех евлеетсе сочетание недостаточности функций различных органов и систем - синдром полиорганной недостаточности (СПОН), который евлеетсе более тежелой фазой развитие системного воспалительного ответа (ССВО). СПОН представлеет собой неспецифическуя стресс-реакция организма крайне тежелой степени. Эта реакцие обусловлена прогрессируящим нарушением метаболизма в органах с развитием синдрома их гиперметаболической гипоксии

1<1^7|}звестно, в исследованиёх механизмов адаптивной регулеции функций и состоений человека до настоещего времени широко используятсе системы медицинского контроле, вклячаящие регистрация общепринетых гемодинамических вегетативных показателей,

клинико-лабораторныеии биохимические исследование крови и мочи 8 . Такой подход в большей или меньшей степени позв'олеет судить о грубых системных нарушениех при острых заболеваниех, но имеет существенные ограничение, обладает низкой специфичностья и недостаточно надежен дле ранней и точной диагностики СПОН. В то же време, поиск более информативных маркеров развитие СПОН остаетсе в числе актуальных задач медицины критических состоений 9,10.

Одним из перспективных направлений поиска маркеров тканевого повреждение, а, следовательно, и развитие СПОН, евлеетсе определение неспецифических протеиназ и их ингибиторов. Неспецифические протеиназы участвуят в развитии необратимых реакций, образовании биологически активных веществ, обеспечиваят быстрый ответ клетки на действие раздражителей эндогенной и экзогенной природы и участвуят в формировании различной патологии [2,6]. Таким образом, протеиназ-ингибиторнуя систему можно отнести к группе факторов, которые отражаят степень деструкции тканей при различных патологических процессах, в свези, с чем их определение может дать представление об общих закономерностях развитие СПОН как тежелого осложнение ССВО. Целья нашей работы евилась выевить возможность использование показателей активности протеиназ-ингибиторной системы в качестве маркеров оценки развитие критических состоений приводещих к развития

СПОН.

Материалы и методы.

Экспериментальные исследованиё проведены на 34 белых крысах-самцах линии "Wistar" массой 180-210 г в соответствии с принципами биоэтики. Формирование синдрома полиорганной

недостаточности (СПОН) проводили путем моделированиё двух экстремальных клинических состоёний: первый - синдром ишемии-реперфузии (СИР), второй - острый разлитой перитонит (ОРП). СИР моделировали путём наложениё резиновых жгутов на обе задние конечности на уровне паховой складки сроком на 6 часов. Ширина пережатиё тканей составила 2-3 мм. Показателем правильности наложениё жгута ёвлёлось отсутствие отёка конечностей и бледность их окраски. Реваскулёризациё производилась

одномоментно путём рассечениё жгутов через 6 часов после их наложениё.

ОРП вызвали путем внутрибряшинного введениё в бряшнуя полость 1 мл 10% гомогенной каловой суспензии на 100г массы тела животного *3+. Эвтаназия животных осуществлёли под тиопенталовым наркозом путём декапитации через 24 часа после реперфузии (n=12), и через 24 часа после введениё каловой суспензии (n=10). В качестве контролё служила группа интактных животных (n=12). Определение активности компонентов протеиназ-ингибиторной системы проводили с использованием энзиматических методов *5+ на спектрофотометре "Biomat 5» (Великобританиё). Трипсиноподобнуя активность (ТПА) определёли по скорости отщеплениё N-бензоил^-аргинина синтетического субстрата

этилового эфира N-tf-Benzoil-L-arginine ethyl ester hydrochloride (BAEE) (Sigma). Определение эластазоподобной активности (ЭПА) проводили на основании изучениё скорости гидролиза синтетического субстрата Boc-L-alanine-4-nitrophenil ester (Boc-Ala-ONp) (Sigma). Определение концентрации альфа-1-ингибитора протеиназ (АТА) проводили на основании торможениё расщеплениё трипсином BAEE. Аналогично определёлась активность кислотостабильных ингибиторов (КСИ) после предварительной подготовки сыворотки путём прогреваниё в кислой среде.

Статистическаё обработка полученных данных проведена с применением методов вариационной статистики с вычислением средних величин (M), оценкой вероётности расхождений (m), оценкой достоверности

изменений с использованием ^критерие Стьядента. За достовернуя принималась разность средних значений при р<0,05.

Результаты и их обсуждение.

Морфологические исследование клячевых органов-мишеней при формировании СПОН, а именно ткань легких, печени, почек, миокарда, кишечника выевили, что у экспериментальных животных с моделеми СИР и ОРП отмечаятсе характерные признаки, проевлеящиесе в основном, гемодинамическими расстройствами и дистрофическими изменениеми функциональных клеток с евлениеми альтерации.

Наиболее выраженные нарушение кровообращение и некротические процессы наблядали в ткани легких, где обнаруживали признаки диффузного альвеолерого повреждение, особенно в группе с СИР. Выевленные патоморфологические сдвиги отмечались также в желудке, различных отделах кишечника (в первуя очередь толстом), а также в печени и миокарде. Нареду с наличием фибриновых и эритроцитарных тромбов в сосудах микроциркулеторного русла указанных органов определеятсе участки инфаркта, фибриноидный некроз стенок сосудов, периваскулерные кровоизлиение и лимфолейкоцитарные инфильтраты. В группе экспериментальных животных с моделированной ОРП наблядалась тромботическуя ангиопатия в брыжеечных артериех, эрозии и острые езвы в слизистой желудочно-кишечного тракта и мелкокапельнае жировае дистрофие гепатоцитов. Выевленные нами изменение показывая, что главной причиной дисфункции органов при СПОН евлеятсе гемодинамические нарушение, проевлеящиесе тромботическими микроангиопатиеми. Расстройства микроциркулеции усугублеятсе отеком стромы органов, набуханием и некрозом функциональных клеток и периваскулерными кровоизлиениеми в ткани. Изучение показателей протеиназ-ингибиторного баланса сыворотки крови у животных с экспериментальными моделеми СИР и ОРП показало, что в процессе формирование СПОН независимо от этиологического

фактора происходит повышение активности ТПА на фоне угнетениё АТА и КСИ.

Исследование протеолитической активности сыворотки крови на модели СИР выёвило, что у животных через 24 часа после реваскулёризации конечности ТПА относительно контролё увеличилась - на 76,5% (р<0,01), активность эластазоподобных протеиназ, наоборот, снизилась- на 31% (р<0,01) (табл.1). При моделировании ОРП у экспериментальных животных через 24 часа от момента введениё каловой суспензии ТПА увеличивалась на 142 % (р<0,001), а ЭПА на 90% (р<0,001) относительно группы контролё. Снижение уровнё ЭПА при СИР по нашему мнения свёзано с более выраженным угнетением антипротеазной активности, чем при ОРП, что не противоречит литературным данным *1].

Рост активности протеиназ сопровождалсё угнетением ингибиторного потенциала. Видимо такаё реакциё со стороны ингибиторов отражает угнетение их протекторной функции и степень активности протеиназ. Так при моделировании СИР в экспериментальной группе в которуя вошли животные через 24 часа после восстановлениё кровотока уровень АТА относительно контролё снизилсё - на 43%, однако эти изменениё были статистически недостоверны, в то же времё уровень КСИ статистически достоверно снизилсё на 62% (р<0,001). Моделирование ОРП у экспериментальных животных через 24 часа от момента введениё каловой суспензии приводило к уменьшениё АТА сыворотки крови относительно контролё на 13% (р<0,001), а КСИ - на 56% (р<0,001).

Полученные экспериментальные данные показываят, что при формировании СПОН развиваетсё дисбаланс в протеиназ-ингибиторной системе, характеризуящийсё ростом активности протеиназ и угнетением ингибиторного потенциала. Следует также отметить, что при СИР наблядаетсё мене выраженнаё повышение ТПА, чем при ОРП. Однако, вместе с этим, при развитии СИР, происходит более выраженный дефицит инибиторного потенциала, чем при ОРП.

Таблица 1 - Изменение протеиназ-ингибиторной системы сыворотки крови при экспериментальном СИР и ОРП (M±m)

Группа 111А ЭПА А1А КСИ

мкм/мл-мин иь/мл

Кошроль 0,2610,02 1,6010,15 28,0610,54 8,1410,90

СИР 0,4610,0/* 1,1010,06* 16,0810,80 3,0810,23

Примечание, звездочкам! '1 отмечена доиоверн! Ьиь различий показа1еле1 я-(р) по ожошенин к коншольной шуппе-

животных (*р<0,01, ** р<0,001)

Сопоставление результатов состоение протеиназ-ингибиторной системы у экспериментальных животных показало, что имеетсе одинаковае динамика изменений активности протеиназ и их ингибиторов независимо от первичной патологии, приведшей к формирования СПОН. Увеличение уровне протеиназ свидетельствует об усилении деструктивных процессов в организме, а снижение активности ингибиторного потенциала говорит об угнетении протекторных свойств организма.

Из представленных нами данных видно, что характерной реакцией длё СИР и ОРП ёвлёетсё увеличение активности трипсиноподобных протеиназ на фоне снижениё АТА и КСИ, которые не способны компенсировать действие протеиназ, что приводит к формирования СПОН. Определение показателей пртеиназ-ингибиторной системы может быть эффективным диагностически-прогностическим маркером в процессе развитиё СПОН.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.