CC BY
84
УДК 616.314.18-002.4-031.81-018.74-008.64:612.017 С.П. Ярова, А.Д. Желдакова
РОЛЬ ПОРУШЕНЬ ЦИТОК1НОВО1 РЕГУЛЯЦП В РОЗВИТКУ ЕНДОТЕЛ1АЛЬНО1 ДИСФУНКЦП ПРИ ГЕНЕРАЛ1ЗОВАНОМУ ПАРОДОНТИТ1
Донецький нацiональний медичний уыверситет iM. М. Горького
Сучаснi принципи лкування генералiзованого пародонтиту базуються на знанн основних ланок його патогенезу [1, 2]. Вщомо, що в першу чергу розвиток дистро^чно-запального процесу пов'я-зують iз судинними порушеннями тканин пародо-нта [3, 4]. Доведено, що провщну роль у регуляци судинного тонусу, пiдтриманнi структури судинноТ стiнки, судинноТ проникностi, регуляцiТ адгези тромбоцитiв вiдiграe ендотелiй [5]. Ендотелш - це основний компонент штими судин, який мае висо-ку метаболiчну i секреторну активнiсть. У нормi на будь-який вплив ендотелш вщповщае ушверсаль-ною реакцiею - продукуванням N0. Дисфунк^я ендотелiю е обов'язковим компонентом патогенезу практично будь-якого запального процесу, включаючи хроычний генералiзований пародон-тит. Установлено, що при ендотелiальнiй дисфун-кцiТ формуеться дисбаланс пперпродукцп факто-рiв, як сприяють вазоконстрикцiТ, над факторами, як iнiцiюють вазодилатацiю. Така дисфункцiя по-тенцiюе вазоспазм, тромбоз, пенетрацiю макро-фагiв та клiтинну пролiферацiю, що по сут е за-пальним процесом i призводить до розвитку атеросклерозу [6, 7]. З шшого боку, встановлено, що морфофункцюнальна дезоргашза^я ендотелiю i серйознi розлади мiкроциркуляцiТ при запальному процесi, в тому чи^ в тканинах пародонта, пов'я-занi з дiею цитокшв [8]. Цитокiни секретуються в основному кл^инами кровi та iмунноТ системи (полiморфноядерними лейкоцитами, макрофагами, лiмфоцитами) i виконують аутокринну (на клн тини, що Тх продукують), паракринну (на кл^ини в мiкрооточеннi) та ендокринну (на вщдалеш ^ти-ни) дю При цьому вони взаемодшть один з одним за антагонютичним i агонiстичним принципами i формують у органiзмi цитокiнову сiтку [9]. Цитокiни контролюють процес анпогенезу, проце-си регенерацiТ, метаболiчнi та iн. В останнi деся-тирiччя встановлена роль цитокiнiв у розвитку iмунологiчних i запальних реакцш при пародонтитi [10-14]. Неадекватний локальний викид прозапа-льних цитокiнiв перетворюе захисн механiзми в патологiчнi, некероваш, що викликае ушкодження тканин пародонта i резорбцiю кiстки [15].
Ураховуючи вищесказане, метою нашого до-слщження стало встановлення ролi порушень ци-токiновоТ регуляцiТ в розвитку ендотелiальноТ ди-сфункцiТ у хворих на генералiзований пародонтит шляхом вивчення взаемозв'язку про- i протизапа-льних цитокыв iз показниками системи окису азоту.
Об'ект i методи дослiдження.
Для вирiшення поставлених у po6oTi завдань обстежено 124 па^енти вiком вiд 25 до 40 рош i3 дiагнозом генералiзованого пародонтиту I i II сту-пенiв тяжкостi, хронiчного переб^у. З метою порiв-няння дослщжуваних параметрiв було обстежено 28 па^ен^в того ж вiку без соматично'Т та пародо-нтолопчно'Т патологiТ (здоров^. Остаточний дiагноз хвороби встановлювали на пiдставi даних кл^ч-ного огляду, рентгенографи, визначення об'ективних пародонтальних проб за систематикою хвороб пародонта М.Ф. Данилевського (1994). Кл^чне обстеження i комплексне лкування хворих проводили в стоматолопчному вiддiленнi на-вчально-науково-лiкувального комплексу „Ушвер-ситетська клшка" Донецького нацiонального ме-дичного уыверситету iм. М. Горького.
Забiр ротовоТ рiдини (РР) для лабораторних дослщжень проводили вранцi натщесерце шляхом спльовування в мiрнi центрифужнi пробiрки об'емом 5 мл.
Стан цитокшово'Т регуляцiТ визначали за вмю-том у ротовш рiдинi ряду штерлейкыв (Ш-1р, 1Л-6, ФНОа, 1Л-4) методом твердофазного iмунофер-ментного аналiзу (1ФА) з використанням комер-цiйних наборiв реагентiв «ProCon 1Л-1р», «ProCon 1Л-6», «ProCon ФНОа», «ProCon 1Л-4» (ООО „Протеиновый контур", С.-Петербург). За допомогою спектрофотометра вимiрювали оптичну щтьнють за заданою довжиною хвилi. На пiдставi отрима-них даних будували калiбрувальнi кривi для вщ-повщних цитокiнiв i обчислювали результати за допомогою аналiзатора «ELx800 Universal Microplate Reader» («BIO-TEK INSTRUMENTS.INC»).
Стан системи NО оцiнювали за вмютом кшце-вих продуктiв його метаболiзму - нiтритiв (NО2) iз застосуванням реактиву Гриса. Рiвень сечовини (продукт розщеплення арпншу, що е попередни-ком NО) в РР визначали за допомогою комерцш-ного набору «Бю-Ла-Тест» (Брно, Чехiя) iз застосуванням спектрофотометра «Specord 200 РС» при довжинi хвилi 540 нм. Рад^мунним методом у ротовiй рщиш визначали вмiст продукту мета-болiзму NО - циклiчного гуанiнмонофосфату (cGMP) за допомогою стандартних комерцiйних наборiв реактивiв фiрми «Amersham Biosciences» (Великобриташя).
Отриманi цифровi данi обробляли варiацiйно-статистичними методами аналiзу на персональ-
ному KOMn^Tepi «IBM PC» (лiцензiйнi программ «Microsoft Excel» i «Statistica 5.5A»). Для кожноТ BM6ipKOBOi cyKynHOCTi спостережень (n) обчислю-вали середне арифметичне значення (М), серед-не квадратичне (стандартне) вщхилення (S), се-редню квадратичну похибку середнього значення (m), 95% довipчивий iнтepвал iстинного середнього значення, використовуючи t-кpитepiй Ст'юдента. Обчислювали piвeнь значимостi вщ-мiнностeй середшх значень показника в незалеж-них вибipках (р) за функцiею розподту t-кpитepiю Ст'юдента: при р<0,05 - вщмшносп значимi; при
р>0,05 - вщмшносп нeзначимi. Лiнiйний зв'язок мiж двома змiнними оцiнювали за допомогою од-нофакторного коpeляцiйного аналiзу з пщрахун-ком коeфiцiента парно' кореляци Пipсона.
Результати дослiдження.
Результати дослщження стану цитокшовоТ регуляци за вмютом ряду iнтepлeйкiнiв - 1Л-1р, 1Л-6, ФНОа, 1Л-4 - у ротовш piдинi пaцiентiв з штактним пародонтом та у хворих на ГП I i II ступеыв тяжко-стi пpeдстaвлeнi в табл. 1
Таблиця 1
Показники стану цитотновоГрегуляци в ротов1й рЮиш обстежених пац1ент1в (М±т)
Групи Показники Здоров1 пац1енти (n=28) Хвор1 на ГП (n=124) Хвор1 на ГП
I ст. тяжкост1 (n=46) Ист. тяжкост1 (n=78)
!Л-1 в (пкг/мл) 184,8±10,4 311,6±12,6* 266,8±11,0* 356,5±9,8*л
!Л-6 (пкг/мл) 6,2±0,6 18,6±2,8* 16,6±1,7* 20,5±2,0*л
ФНПа (пкг/мл) 56,8±4,3 145,9±11,0* 121,4±16, 3* 170,5±14,0*л
Ш-4 (пкг/мл) 18,9±1,2 5,6±0,3* 6,8±0,9* 4,4±0,8*л
Примтка: * - р<0,05 проти в 'дпов 'дних значень показника в здорових пац1ент1в;
а - р<0,05 при пор1внянн1 в1дпов1дних значень показника залежно eid ступеня тяжкостк
Як видно з таблица вмют уах дослщжуваних пapaмeтpiв вipогiдно в^зняеться в здорових па-^ен^в та у хворих на ГП (р<0,05). При цьому значення 1Л-1 в, 1Л-6, ФНОа перевищували вiдповiднi значення в па^ен^в з iнтaктним пародонтом; значення 1Л-4 було вipогiдно меншим у поpiвняннi з таким у здорових оаб (р<0,05). Так, piвeнь у рото-вiй piдинi хворих на ГП прозапального 1Л-1р пере-вищував такий у гpупi поpiвняння (здоpовi па^ен-ти), в 1,7 раз (р<0,05), що свiдчить про ^^ацш цитокiнового каскаду в тканинах пародонта при дистpофiчно-зaпaльному пpоцeсi. Пщтверджен-ням цього е значне зростання вмюту в РР хворих на ГП шших прозапальних цитокiнiв - 1Л-6 та ФНПа вiдповiдно в 3,0 i 2,57 рази в поpiвняннi з такими в па^ен^в з iнтaктним пародонтом (р<0,05). Слщ зазначити, що вмiст 1Л-1р, 1Л-6 та ФНПа вipогiдно вiдpiзняеться залежно вщ ступеня тяжкостi патолопчного процесу (р<0,05). При цьому, чим значышими були дистpофiчно-зaпaльнi порушення в пapодонтi, тим знaчнiшими були пщвищення прозапальних цитокiнiв, а саме: при II ступен тяжкостi ГП Т'х умiст у pотовiй рщиш, в середньому, в 1,3 раз перевищував вщповщы значення при I ступен тяжкостi захворювання (pL0,05).
Рiзнонaпpaвлeною була динaмiкa протизапа-льного цитокшу - IЛ-4- у бiк вipогiдно нижчих значень у хворих на ГП у поpiвняннi з такими в пацн ентiв з штактним пародонтом, що е несприятли-вою ознакою, бо призводить до неконтрольовано-го продукування прозапальних цитоюшв. Так, у хворих на ГП цей показник був нижчим за такий у здорових у 3,4 рази (р<0,05). Це свщчить про по-
№ 4 2013 р.
рушення в систeмi цитокшовоТ регуляци при дис-тpофiчно-зaпaльному пpоцeсi в тканинах пародонта. Слщ зазначити, що вмют Ш-4 вipогiдно в^з-няеться залежно вiд ступеня тяжкост патолопчно-го процесу (р<0,05). При цьому, чим бтьш знач-ними були дистpофiчно-зaпaльнi порушення в пародонта тим бiльш значними були порушення цього показника, а саме: при II ступен тяжкост ГП умют IЛ-4 в ротовш рщиы був нижчим за такий при I ступен тяжкостi захворювання в 1,5 рази (р<0,05).
Отже, поpiвняльний aнaлiз умiсту в ротовш pi-динi про- (Ш-1в, Ш-6 та ФНПа) i протизапального (Ш-4) цитоюыв у пaцiентiв з штактним пародонтом та у хворих на ГП I i II ступеыв тяжкост вказуе на порушення системи цитокшовоТ регуляци за рахунок недостатньоТ функцiТ протизапальних ш-терлейюшв при дистpофiчно-зaпaльному пpоцeсi в пародонта що призводить до неконтрольованоТ продукци IЛ-1 в, IЛ-6 i ФНПа та шших прозапальних цитоюыв.
Результати дослщження стану системи NO за piвнeм у ротовш рщиы окису азоту (NO2), сечови-ни i циклiчного гуaнiнмонофосфaту (сGMP) у пацн ентiв з iнтaктним пародонтом та у хворих на ГП I i II ступешв тяжкост пpeдстaвлeнi в табл. 2. Як видно з таблица вмют уах дослщжуваних продук^в мeтaболiзму NO вipогiдно вiдpiзняеться в здорових па^етчв та у хворих на ГП (р<0,05). Так, pi-вень у ротовш рщиы окису азоту NO2 перевищуе такий у груш поpiвняння в 1,3 раз, piвeнь сечовини та сGMP - в 1,2 раз (р<0,05), що свщчить про порушення стану системи NO при дистpофiчно-запальному процеа в тканинах пародонта. ^м
30
того, слщ зазначити, що дослiджуванi параметри вiрогiдно вiдрiзняються залежно вiд ступеня тяж-костi патологiчного процесу (р<0,05). При цьому, чим бтьш значнi порушення в пародонтi, тим зна-чнш порушення показникiв системи NO, а саме:
при II ступен тяжкост ГП рiвень NO2, сечовини та ци^чного гуанiнмонофосфату в ротовiй рщиж, в середньому, в 1,2 раз вищий вщповщного значен-ня при I ступен тяжкостi захворювання.
Таблиця 2
Показники системи окису азоту в ротов1й piduHi обстежених пац1ент1в (М±т)
^^ Групи Показники Здоровi па^енти (n=28) Хворi на ГП (n=124) Хворi на ГП
I ст. тяжкост1 (n=46) II ст. тяжкост1 (n=78)
NO2 (мкмоль/л) 4,8±0,11 6,1±0,07* 5,6±0,10* 6,5±0,09*л
Сечовина (пмоль/л) 50,1±1,21 60,3±0,62* 55,4±1, 14* 65,1±1,19*А
сGMP (мкмоль/л) 4,5±0,09 5,4±0,05* 4,8±0,07* 5,9±0,06*л
Прим1тка: * - р<0,05 проти вiдповiдних значень показника в здорових na^eHmie;
а - р<0,05 при порiвняннi вiдповiдних значень показника залежно eid ступеня тяжкой.
Кореляцшний аналiз, що включае коефiцiенти кореляци Прсона (г) та рiвнi Тх значимост (р) для вах пар змшних, указуе на те, що мiж показниками системи N0 (окисом азоту (N02), сечовиною та ци^чним гуаншмонофосфатом (сGMP) i показниками системи регуляцiТ про- (1Л-1р, 1Л-6, ФНПа) та протизапальних (1Л-4) цитокiнiв у дослщжува-них групах визначаеться прямий i зворотний кореляцшний зв'язок вiд помiрного (рiвень сечовини та сGMP з 1Л-1 р) до сильного ^вень N02 з проза-пальними цитокшами 1Л-1р, 1Л-6, ФНПа). Нaйсильнiший зворотний кореляцшний зв'язок установлений мiж окисом азоту (N0^ i рiвнем протизапального цитокшу 1Л-4 (г=-0,889 при р<0,05).
Отже, виявленi зaкономiрностi пiдтверджують роль цитокiнiв у розвитку судинних порушень при дистрофiчно-зaпaльному процесi в пародонт та вказують на перспективнiсть розробки методiв вiдновлення повноцiнноТ функцiТ протизапальних цитомшв у комплексному лiкувaннi хворих на ге-нерaлiзовaний пародонтит.
Лтература
1. Данилевский Н. Ф. Заболевания пародонта / Н. Ф. Данилевский, А. В. Борисенко. - К. : Здоров'я, 2000. - 141 с.
2. Косенко К. М. Епщемюлопя основних стоматолоп-чних захворювань у населення УкраТни I шляхи Тх профилактики : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня доктора мед. наук : спец. 14.00.21 «Сто-матолопя» / К. М. Косенко. - К., 1994. - 45 с.
3. Грудянов А. И. Поддерживающая терапия. Её роль при лечении заболеваний пародонта (обзор литературы) / А. И. Грудянов, Н. А. Стариков, С. Ф. Бякова // Пародонтология. - 2001. - № 1-2 (1920). - С. 24 - 27.
4. Мельничук Г. М. Сучасн пщходи до лкування I ви-бору медикаментозноТ терапп при хворобах паро-донту / Г. М. Мельничук // Галицький лкарський вюник. - 2004. - № 1. - С. 8 - 12.
5
6
7.
8
9.
10
Новикова Н. Дисфункция эндотелия - новая мишень медикаментозного воздействия при сердечно-сосудистых заболеваниях / Н. Новикова // Новое в медицине. - 2005. - № 8.- С. 51 - 53. Endothelian dysfunctionin patients with chronic periodontitis and its improvement after initial periodontal therapy / F. Mercanoglu [et al.] // J. Periodontol. - 2004. - Vol. 75, N 12. - P. 1694 - 1700. Periodontal treatment improves endothelian dysfunction in patients with periodontitis / G. Seinost [et al.] // Am. Heart J. - 2005. - Vol. 149, N 6.- P. 1050 - 1054.
Ярилин А. А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии / А. А. Ярилин // Иммунология. - 1997. - № 5. - С. 7 - 14. Ковальчук Л.В. Иммуноцитокины и локальная им-мунокоррекция / Л. В. Ковальчук, Л.В. Ганковская // Иммунология. - 2005. - № 1. -С.4- 7. Самойленко А. В. Дисбаланс в системе цитокинов больных генерализованным пародонтитом и его коррекция цитокинотерапией / А. В. Самойленко, И. С. Мащенко, А. Ю. Макаревич // Современная стоматология. - 2001. - № 1. - С. 41 - 43.
11. Delaleu N. Interleukin-1 р and of interleukin-18 regulation and activity in local inflammation / N. Delaleu, M. Bickel // Periodontol. - 2004. - Vol. 35. - P. 42 - 52.
12. Okada H. Cytokine expression in periodontal health and disease / H. Okada, S. Murakami // Crit. Rev. Oral Biol. Med. - 2008. - Vol. 9, № 3. - P. 248 - 266.
13. Seumour G. J. Cytokines in periodontal disease where to from here? / G. J. Seumour, E. Gemmell // Acta Odontol.Scand. - 2001.- Vol. 59. - P. 167 - 173. The relationship between concentration of proinflammatory cytokines with in gingiva and the adjacent sulcular depth / S. M. McGree [et al.] // J. Periodontol. - 2008. - Vol. 69, № 8. - P. 865 - 871 . Gemmell E. Cytokine profiles of cells extracted from humans with periodontal diseases / E. Gemmell, G. J. Seymour // J. Dent. Res. - 2008. - Vol. 77. - P. 16 -26.
Стаття надшшла 29.05.2013 р.
14
15
© укратнський стоматолопчний альманах
Резюме
Дослiджeно роль цитокiнiв у розвитку судинних порушень при пapодонтитi. Доведена перспективнють розробки мeтодiв вiдновлeння повноцшноТ функци протизапальних цитокiнiв у комплексному лкуванш хворих на гeнepaлiзовaний пародонтит.
Ключовi слова: цитокiни, eндотeлiaльнa дисфункцiя, гeнepaлiзовaний пародонтит.
Резюме
Изучено роль цитокинов в развитии сосудистых нарушений при пародонтите. Доказана перспективность разработки методов восстановления полноценной функции противовоспалительных цитокинов в комплексном лечении больных генерализованным пародонтитом.
Ключевые слова: цитокины, эндотелиальная дисфункция, генерализованный пародонтит.
Summary
The role of cytokines in the development of vascular disorders in periodontitisare has been studied. The promising outlook of developing the methods for restoring full function of anti-inflammatory cytokines in the complex treatment of patients with generalized periodontitis has been proved.
Key words: cytokines, endothelial dysfunction, generalized periodontitis.
№ 4 2013 p.
32
