CC BY
29
УДК 616.12-008.331.1:616.155.34-018.74-07
Е. А. Васькина, Д. Д. Цырендоржиев, Л. М. Дёмина, М. Г. Пустоветова,
О. М. Рожнова, Д. С. Ефремов
РОЛЬ НЕЙТР0ФИЛ0В И ПР00КСИДАНТН0Г0 ПОТЕНЦИАЛА КРОВИ В РАЗВИТИИ ЭНД0ТЕЛИАЛЬН0Й ДИСФУНКЦИИ ПРИ АРТЕРИАЛЬН0Й ГИПЕРТЕНЗИИ
ГУ Новосибирская государственная медицинская академия М3 РФ
ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
В работе проведено обследование 146 больных артериальной гипертензией (АГ) различной степени тяжести (классификация ЖС V) с целью изучения окислительно-метаболической (ОМ) функции нейтрофилов (Нф) и прооксидантного потенциала крови и их влияния на функциональное состояние эндотелия сосудов при данной патологии. Было показано, что в патогенезе АГ и развития эндотелиальной дисфункции (ЭД) при данной патологии существенное значение имеет нарушение баланса в системе “оксидант-антиоксидант” в сторону повышения прооксидантного потенциала. Кроме того, показано, что прооксидантный потенциал крови в сосудистом русле при АГ определяется ростом активности ОМ функции Нф крови, повышением уровня цитокинов (ИЛ-1 и ФНО-а) и его преобладание над антиоксидантной активностью приводит к развитию окислительного стресса с повреждением эндотелия сосудов и, в конечном итоге, нарушению баланса вазоконстрикторов и вазодилятаторов, что ведет к развитию ЭД. На основании результатов исследования предлагается перспективный план исследований в плане фармакокоррекции Нф-зависимых повреждений сосудистого эндотелия у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями.
Ключевые слова: артериальная гипертензия, эндотелиальная дисфункция, прооксидантная активность сыворотки, антиоксидантная активность сыворотки
Среди ключевых аспектов патогенеза артериальной гипертензии (АГ) особый интерес вызывает механизм развития эндотелиальной дисфункции (ЭД) сосудов, под которой понимают дисбаланс между факторами, обеспечивающими поддержание нормального сосудистого тонуса [17, 18]. Согласно современным представлениям о многоступенчатой системе регуляции сосудистого тонуса, в которой активно задействованы липоксины, цитокины, вазоактивные пептиды, нейромедиаторы и гормоны, в качестве важнейших регуляторов локального и системного кровообращения признаны активные метаболиты кислорода (АМК) [4, 23]. Последние являются одними из важных посредников лейкоцитарно-эндотелиального взаимодействия [13]. Доказано, что помимо лейкоцитов крови АМК продуцируются клетками сосудистой стенки (эндотелий, адвентиций, гладкомышечные клетки) и через внутриклеточные посредники (фосфоли-паза А2 и С, протеинкиназы и др.) они способны изменять тонус гладких мышц сосудов, продукцию эндотелием адгезивных молекул, липокси-нов, хемокинов и цитокинов [19].
Известно, что активированные нейтрофилы (Нф) повреждают окружающие ткани, в том числе и эндотелий сосудов выделением АМК. При этом степень повреждения ткани, в частности со-
судистой стенки, при разных патологических процессах во многом зависит от баланса окислительно-метаболической (ОМ) функции Нф крови и активности антиоксидантной системы защиты (АО3) [3, 6, 16, 21]. В связи с этим многие авторы отмечают, что в патогенезе ЭД важное значение имеет нарушение метаболизма в резистивных сосудах, в частности недостаточность антиоксидантных ферментов, инактивирующих АМК [7, 23, 25].
Однако в настоящее время молекулярные механизмы действия АМК, липопероксидов и ли-попротеинов низкой плотности (ЛПНП) на тонус сосудов изучены недостаточно, но бурный рост исследований этого аспекта патогенеза ги-пертензивного синдрома заставляет менять
Таблица 1
Сравнение средних показателей ОМ функции Нф крови по параметрам ХЛ исследования при различных степенях тяжести АГ с контрольной группой
Степень тяжести АГ
I II III IV
Не изменен Повышение Повышение Повышение
в 2,2 раза* в 2,7 раза* в 4,7 раза*
Примечание. * - достоверность различия с контролем; р<0,05.
взгляд на патогенез АГ в целом [13]. В этом плане известно лишь то, что у больных АГ, особенно при кризовом течении болезни, обнаружено достоверное снижение ферментов, утилизирующих АМК и липопероксиды - СОД и ОБН-пе-роксидаза [7]. Накапливающиеся при развитии АГ АМК и окисленные ЛПНП снижают синтез оксида азота (N0), идентифицированного как эндотелий, расслабляющий фактор, тем самым уменьшают эндотелий-зависимую вазодилята-цию [5].
Таким образом, в настоящей работе исследовали ОМ функцию Нф и прооксидантный потенциал крови и их влияние на функциональное состояние эндотелия сосудов у больных АГ различной степени тяжести.
Методика. Обследовано 146 больных; среди них было 77 мужчин и 69 женщин в возрасте от 35 до 60 лет (средний возраст 52,7±4,1) с АГ (гипертоническая болезнь, нефрогенная АГ без признаков нефритического синдрома) и 21 здоровый донор в качестве контрольной группы (средний возраст 48,4±2,7). У 16 больных была мягкая АГ (I ст.: САД -140-159 мм рт. ст.; ДАД -90-99 мм рт. ст.), у 53 - умеренная (II ст.: САД -160-179 мм рт. ст.; ДАД -100-109 мм рт. ст.), у 52
- тяжелая (III ст.: САД -180-209 мм рт. ст.; ДАД
- 110-119 мм рт. ст.) и у 25 - очень тяжелая АГ (IV ст.: САД - >210 мм рт. ст.; ДАД - >120 мм рт. ст.). При распределении больных по группам пользовались классификацией Объединенного национального комитета США по выявлению, оценке и лечению высокого кровяного давления (ЖС V). Больных включали в исследование при наличии диагностируемой АГ (по данным измерения АД, ЭКГ, офтальмоскопии, У3И сердца, анализов крови, мочи, определения креатинина, мочевины крови и др.) без антигипертензивной терапии в течение последних 2-х недель до поступления в стационар. Критерием не включения больных в исследование было наличие со-
Таблица 2
Показатели ПОА и АОА сыворотки крови и их соотношение у больных АГ различной степени тяжести (М+т)
Степень тяжести АГ Показатели
ПОА (имп/Нф/мин) АОА (у. е.) ПОА/АОА (у.е.)
Контроль (21) 0,90± 0,01 8,31± 0,40 0,11± 0,03
I (15) 1,45± 0,11* 7,94± 1,38 0,18± 0,05
II (42) 1,32± 0,10* 5,53± 1,98* 0,24± 0,04*
III (37) 1,17± 0,09* 5,32± 1,71* 0,22± 0,03*
IV (20) 1,37± 0,11* 4,45± 1,32* 0,31± 0,06*
Примечание. В скобках-количество обследованных лиц в группе; * - р<0,05 по сравнению с контрольной группой.
путствующего заболевания в стадии обострения, которое могло бы влиять на ОМ функцию Нф, - воспалительные заболевания легких, желудочно-кишечного тракта, печени, почек, суставов; сахарный диабет, ожирение, выраженная гиперхолестеринемия, диффузные болезни соединительной ткани, алкоголизм и наркомания. Все исследования проводили в момент поступления больных на стационарное лечение в Муниципальную клиническую больницу № 34 Новосибирска. ОМ функцию Нф крови оценивали с помощью люминол-зависимого хемилюминес-центного (ХЛ) метода исследования [9, 26]. Результаты ХЛ исследования ОМ функции Нф крови выражали в импульсах, генерируемых одним Нф в течение минуты (имп/Нф/мин). Антиоксидантную активность (АОА) сыворотки крови определяли биохемилюминесцентным методом с 3% перекисью водорода по А.И. Журавлеву и А.И. Журавлевой [8]. Прооксидантную активность (ПОА) сыворотки крови оценивали по методике, предложенной Д.Н. Маянским и др. [15]; по степени тестируемых сывороток модулировали
ИЛ-1
120
100
80 -I 60
с
40 20 -
Контроль | || ||| IV
Группы больных АГ ФНО-а
180 160 140 120 I 100
с 80 60 40 20 0
Контроль | || ||| IV
Г руппы больных АГ
Рис. Содержание ИЛ-1 и ФНО-а в сыворотке крови больных АГ различной степени тяжести; * - р<0,05 по сравнению с контролем
Таблица 3
Содержание ФВ и N0 в крови и их соотношение у больных АГ различной степени тяжести (М±т)
Степень тяжести АГ Показатели
ФВ (%) КО (мМ/мл) ФВ/КО (у.е.)
Контроль (21) 102,9± 1,28 11,9± 0,33 9,1± 0,4
I (12) 124+66,56 10,7± 0,37 11,9± 0,64
II (36) 131,4± 8,18* 7,9± 0,20* 17,9± 1,92*
III (31) 139,9± 7,57* 7,01± 0,23* 20,12± 1,64*
IV (19) 136,4± 6,12* 6,7± 0,17* 20,35± 1,06*
Примечание. В скобках - количество обследованных лиц в группе; * - р<0,05 по сравнению с контрольной группой.
ОМ функцию Нф стандартных пулированных лейкоконцентратов здоровых доноров. Все измерения проводились с помощью биохемилю-минометра СКИФ-0301 (СКТБ ’’Наука", Красноярск). С помощью иммуноферментного метода в сыворотке крови определяли интерлейкин-1 (ИЛ-1) и фактор некроза опухоли-а (ФНО-а) (стандартные наборы “Протеиновый контур -РгоСоп”, Санкт-Петербург). Количественное определение фактора Виллебранда (ФВ) проводили с помощью фотоэлектроколориметриче-ского метода, предложенного 3.С. Баркаганом и А.П. Мамот [2], а содержание N0 в сыворотке крови - согласно методу ^пагго ЬЛ. е1 а1. [20] с использованием реактива Грисса. Результаты исследования были подвергнуты статистической обработке с применением корреляционного анализа и 1-критерия Стьюдента.
Результаты. Как видно из табл. 1, средние значения исходного состояния ОМ функции Нф крови больных при мягкой АГ не отличались от таковых в группе контроля. Повышенные показатели ОМ функции Нф крови отмечались у 40% больных этой группы (от 0,055 до 0,077 имп/Нф/мин при максимальных значениях 0,032 имп/Нф/мин в контроле), среди остальных 60% больных этой группы - у 40% показатели были как в контрольной группе, а у 20% - ниже минимальных значений группы контроля (0,017 имп/Нф/мин). При умеренной, тяжелой и очень тяжелой АГ отмечаются более высокие показатели ОМ функции Нф по результатам ХЛ исследования по сравнению со здоровыми донорами. Эти показатели увеличиваются по мере утяжеления степени АГ. При АГ II ст. тяжести повышенные показатели ХЛ исследования были у 83% больных, при АГ III ст. тяжести - 88,4% и при IV ст. тяжести - у 100% больных.
Известно, что на циркулирующие Нф действуют многочисленные плазменные факторы и меняют их функциональное состояние, в частности ОМ функцию. К числу потенциальных про-
оксидантных факторов сыворотки крови, которые “подготавливают или запускают” Нф к “респираторному взрыву” в ответ на стимул, относят активные фракции комплемента - С3а и С5а, эйкозаноиды (прежде всего лейкотриены), кинины, фактор активации тромбоцитов и фло-гогенные медиаторы, такие, как ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8 и ФНО-а [14]. Изучение ОМ функции Нф невозможно без исследования уровня ПОА сыворотки, а по существу, провоспалительных медиаторов в крови. При этом степень активации Нф зависит от уровня активности этих медиаторов в кровеносном русле и, наоборот, чем больше функционально активных Нф в крови, тем выше в ней концентрация цитокинов [10], особенно таких, как ИЛ-1, ФНО-а, лейкотриены, простагландины и многие другие, источником которых являются и Нф. Под влиянием этих и других медиаторов Нф начинают в большом количестве вырабатывать АМК, инициируя тем самым повреждение тканей [12]. Этому процессу противостоят эндогенные механизмы антиок-сидантной защиты, в которую входят такие антиоксиданты, как СОД, каталаза или глютати-онпероксидаза [11]. В дальнейшем, учитывая эти предпосылки в работе, определяли ПОА и АОА и уровень ИЛ-1 и ФНО-а в сыворотке крови больных АГ различной степени тяжести.
Результаты исследования ПОА и АОА сыворотки крови и их соотношение у больных АГ различной степени тяжести представлены в табл. 2. Как видно из таблицы, ПОА сыворотки крови во всех группах больных АГ достоверно превышали контрольные значения (р<0,05). Примечательно, то, что у больных АГ I и IV ст. тяжести показатели ПОА сыворотки крови были наиболее выраженными. Исследование АОА сыворотки крови выявили, что у больных мягкой АГ ее средние значения практически не отличались от таковых в группе контроля. При умеренной, тяжелой и очень тяжелой АГ отмечаются более низкие показатели АОА сыворотки крови по сравнению со здоровыми донорами. Эти показатели снижаются по мере утяжеления степени АГ. При умеренной АГ (II ст. тяжести) снижение показателя АОА сыворотки крови было отмечено у 72% больных, при АГ III ст. тяжести-у 73,4% и при IVст. тяжести-у 91%больных. В целом, за счет снижения АОА сыворотки крови у этих больных средние значения данного показателя соответственно были в 1,5, 1,6 и 1,9 раза ниже, чем в контроле (во всех случаях р<0,05).
Расчет индекса соотношения между показателями ПОА и АОА сыворотки крови дает возможность охарактеризовать баланс в системе “оксидант-антиоксидант” и отразить степень
окислительного стресса. Результаты расчета показали, что средние значения индекса соотношения ПОА и АОА сыворотки крови больных при мягкой АГ не отличались от такового в группе контроля. При умеренной, тяжелой и очень тяжелой АГ отмечаются более высокие и достоверные (р<0,05) показатели индекса соотношения по сравнению со здоровыми донорами, что свидетельствует о развитии дисбаланса в системе “оксидант-антиоксидант” за счет повышения ПОА и снижения АОА сыворотки крови у больных умеренной, тяжелой и очень тяжелой АГ (табл. 2).
На рисунке представлены результаты определения содержания ИЛ-1 и ФНО-а в сыворотке крови больных АГ различной степени тяжести. Как видно из рисунка, характер изменения содержания как ИЛ-1, так и ФНО-а в сыворотке крови больных АГ различной степени тяжести в целом совпадает с динамикой показателей ПОА и ОМ функции Нф крови. Так, при мягкой АГ содержание ИЛ-1 и ФНО-а практически не отличалось от контрольных значений (соответственно 56,4±3,7 пкг/мл и 49,3±2,03 пкг/мл) и соответственно в среднем составило 61,2±4,5 пкг/мл и 51,12±2,7 пкг/мл. При умеренной, тяжелой и очень тяжелой степенях тяжести АГ отмечается достоверный (р<0,05) рост уровня ИЛ-1 и ФНО-а. Так, при умеренной, тяжелой и очень тяжелой АГ уровень ИЛ-1 соответственно в 1,74; 1,4 и 1,64 раза был выше среднего значения в контроле, а уровень ФНО-а - соответственно в
3,1; 2,5 и 2,9 раза (во всех случаях р<0,05).
Для оценки функционального состояния эндотелия сосудов существует достаточно много подходов, включая инструментальные методы (измерение тонуса сосудов, общей сопротивляемости сосудов и др.) и определение продуцируемых медиаторов клеток эндотелия, таких, как простациклин, ФВ, N0 и т. д. [2, 22, 24, 27].
В настоящей работе осуществлялось количественное определение ФВ и содержание N0 в сыворотке крови. Кроме того, основываясь на содержании N0 и ФВ у больных АГ различной степени тяжести и учитывая тесную взаимосвязь между ними, мы рассчитали коэффициент -ФВ^0, который является, на наш взгляд, индексом, отражающим функциональное состояние эндотелия сосудов. Результаты этих исследований представлены в табл. 3.
Анализ результатов исследования показал, что у больных АГ наблюдается снижение содержания N0 в сыворотке крови. Так, в отличие от контрольных значений у больных АГ I ст. тяжести выявлено недостоверное снижение N0, тогда как у больных АГ со II ст. тяжести этот показатель был меньше контроля в 1,5 раза (р<0,05).
Еще большее снижение содержания N0 в сыворотке крови (в 1,7-1,8 раза; р<0,05) было отмечено у больных АГ с III- IV ст. тяжести. Скорее всего, у больных АГ I ст. тяжести это связано с недостаточным количеством свободного N0, т.к. его основная часть содержится в субэндоте-лиальном слое сосудистой стенки и в условиях развития АГ начинает нарастать синтез вазоконстрикторов, которые способны ингибировать синтез N0. У больных АГ со П-Ш ст. тяжести концентрация N0, вероятно, уменьшается за счет уменьшения его синтеза в целом, а также из-за того, что Нф, находящиеся в условии “метаболического взрыва”, усиленно метаболизи-руют N0. Вырабатываемые в процессе окислительного стресса АМК вступают в реакцию с N0, что приводит к образованию пероксинит-рита - очень мощного окислителя, уменьшая тем самым содержание свободного N0. Не следует забывать о морфологических изменениях сосудистой стенки, которые наблюдаются у больных с АГ при тяжелом течении. Морфологически измененный эндотелиоцит не в состоянии нормально синтезировать вазодилятаторы [1].
Одновременно с этим, в проведенных исследованиях был выявлен повышенный уровень ФВ в плазме крови у больных АГ, который также зависел от степени тяжести. Если у больных АГ I ст. тяжести уровень ФВ был выше максимального значения в контроле у 57%, то у больных со II степенью тяжести - у 72,7%, а у больных с Ш-^ степенью тяжести - у 87,5% и 90,2% случаев соответственно. Повышение уровня ФВ в плазме крови у больных АГ косвенно может быть маркером повреждения эндотелия сосудов. Это связано с тем, что усиление выброса ФВ из гранул хранения в эндотелиоцитах происходит под действием множества факторов: во первых, при воздействии на сосудистую стенку механических факторов; во-вторых, при повреждении эндотелия АМК, вырабатываемых Нф крови в условиях окислительного стресса; в-третьих, при увеличении синтеза вазопрессина, который имеет место при активации ренин-ангиотензин-альдосте-роновой системы. Наличие всех этих компонентов в патогенезе АГ ведет к выбросу ФВ в значительных концентрациях.
Корреляционный анализ результатов исследования у больных АГ различной степени тяжести выявил следующие взаимосвязи: у больных АГ I ст. тяжести обнаружена слабая прямая связь между ОМ функцией Нф крови и уровнем N0 в сыворотке крови и отрицательная с ФВ. В то же время у больных АГ со II ст. тяжести была выявлена более сильная положительная связь с N0 (г=+0,42; р<0,05) и ослабление отрицательной связи с ФВ, а у лиц, страдающих АГ Ш-^
ст. тяжести, - в обоих случаях положительная корреляционная связь (p<0,05). Отсюда можно утверждать, что при относительно “спокойном” функциональном состоянии Нф у больных АГ I ст. тяжести уровни NO и ФВ в крови остаются в пределах контрольных значений, а при активации этих клеток, особенно у больных АГ III-IV ст. тяжести, эти показатели значительно меняются и отражают степень тяжести ЭД.
Заключение. Таким образом, данное исследование показало, что в патогенезе АГ и развития ЭД при данной патологии существенное значение имеет нарушение баланса в системе “оксидант-антиоксидант” в сторону повышения про-оксидантного потенциала. Кроме того, показано, что прооксидантный потенциал крови в сосудистом русле при АГ определяется ростом активности ОМ функции Нф крови, повышением уровня цитокинов и его преобладание над АОА приводит к развитию окислительного стресса
и, в конечном итоге, к нарушению баланса вазоконстрикторов и вазодилятаторов, что ведет к развитию ЭД. Отсюда, на основании результатов исследования представляются интересными перспективы дальнейших исследований. Это -фармакокоррекция Нф-зависимых повреждений сосудистого эндотелия у больных с высокой активностью ОМ функции Нф крови на начальных стадиях АГ, когда поражение сосудов еще обратимо; фармакопрофилактика Нф-зависи-мой ЭД при повышенной ОМ функции Нф крови с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний (АГ, гиперхолестеринемия, сахарный диабет и др.); экспериментальный отбор и клинические испытания перспективных антигипер-тензивных средств, способных восстанавливать ЭД, опираясь на показатели ОМ функции Нф крови, ПОА и АОА сыворотки и уровня цитокинов.
THE ROLE OF NEUTROPHILS AND PROOXYDANT BLOOD POTENTIAL IN THE DEVELOPMENT OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION IN ARTTERIAL HYPERTENSION
E.A.Vaskina, D.D. Tsyrendorjiev, L.M. Demina, M.G. Pus-tovetova, O.M. Rozhnova, D.S. Efremov
During this research 146 patients with different severity of arterial hypertension (AH) were examined to investigate the oxidant-metabolic (OM) function of neutrophils and prooxidant blood potential and their influence on functional state of vessels endothelium. The indexes of OM function of neutrophils increase depending on the severity of AH according to the results ofresearch. On the whole the levels of cytokines - Interleukin-1? and Tumor necrosis factor-? coincide with the dynamic prooxidant activity indexes and OM function of blood neutrophils, i.e. there is reliable level of growth in moderate, severe and grave degree of AH.
To estimate the functional vessels state there was quan-titave determination of Willebrand factor and nitric oxide
content in blood serum. The analysis of the received findings showed the decrease ofnitric oxide content in the patients with AH. Simultaneously the level of Willebrand factor in blood plasma is increasing with ultimately high indexes in patients with AH of the III-IV-th severity degree that reflects the endothelial dysfunction.
ЛИТЕРАТУРА
1. Банин B.B., Алимов Г.А. Эндотелий как метаболически активная ткань: синтетические и регуляторные функции // Морфология. 1992. Т. 102. № 2. С. 10-35.
2. Баркаган З.С. МамотА.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. М., 1999. С. 8-14; 58-60.
3. Васькина Е.А., Демина Л.М., Пустоветова М.Г., Ефремов Д.С., Ефремова Г.И., Демина Н.А. Коррекция окислительного метаболизма лейкоцитов на фоне лечения тяжелой нефрогенной гипертензии антагонистами рецепторов антгиотензина II // Научные труды НГМА. Новосибирск, 2001. С. 165-167.
4. Гогин Е.Е. Гипертоническая болезнь. М., 1997. 400 с.
5. Гранцианский Н.А. Предупреждение обострений коронарной болезни сердца. Вмешательства с недоказанным клиническим эффектом: ингибиторы ан-гиотензин-превращающего фермента и антиоксиданты // Кардиология. 1998. Т. 38(6). С. 4-19.
6. Демина Л.М. Значение окислительного метаболизма лейкоцитов крови при артериальной гипертензии. Дис. канд. Новосибирск, 2000. 114 с.
7. Ельчанинова С.А., Галактионова Л.П., Толмачев Н.В., Варшавский Б.Я. Активность внутриклеточных антиоксидантных энзимов у больных гипертонической болезнью // Тер. архив. 2000. № 4. С. 51-53.
8. Журавлев А.И., Журавлева А.И. Сверхслабое свечение сыворотки крови и его значение в комплексной диагностике. М.: Медицина, 1975. 185 с.
9. Зенков Н.К., Меньщикова Е.Б., Шергин С.М. Окислительный стресс. Диагностика, терапия, профилактика. СО РАМН, Новосибирск, 1993. 181 с.
10. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины моно-нуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета // Иммунология. 1995. №3. С. 30-44.
11. Клебанов Г.И., Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Лю-бицкий О.Б., Владимиров Ю.А. Антиоксидантная активность сыворотки крови // Вест. РАМН. 1999. №2. С. 15-22.
12. Коган А.Х., Ершов В.И., Соколова И.Я. О механизмах усиления свободно-радикальных процессов у больных ИБС стенокардией в зависимости от ее тяжести // Тер. архив. 1994. № 4. С. 32-36.
13. Ланкин В.З., Тихадзе А.К., Беленков Ю.А. Свободнорадикальные процессы в норме и при заболеваниях сердечно-сосудистой системы// М., 2000. 69 с.
14. МаянскийА.Н., МаянскийД.Н. Очерки о нейтрофи-леи макрофаге. 2-е изд. Новосибирск: Наука, 1989. 344 с.
15. МаянскийД.Н., ЦырендоржиевД.Д., Макарова О.П. и др. Диагностическая ценность лейкоцитарных тестов. 4.2. Определение биоцидности лейкоцитов //
Методические рекомендации. Новосибирск, 1996. 47 с.
16. Рожнова О.М., Пустоветова М.Г., Ефремов Д.С., Васькина Е.А. Роль окислительного стресса в патогенезе артериальной гипертензии различной степени тяжести // Научные труды НГМА. Новосибирск, 2001. С. 80-82.
17. Шулутко Б.И. Артериальная гипертензия - СПб.: Ренкор, 2001. 382 с.
18. Cooke J.P. Flow activates an endothelial potassium channel to release an endogenous nitrovasodilator / J. Clin. Investig. 1991. Vol. 88. P. 1663-1671.
19. Groves J.T. Role of endogenous bradikinin in human coronary vasomotor control // Circulation. 1995. Vol. 92. P. 3424-3430.
20. Ignarro L.J., Buga G.M., Wood K.S., Byrns R.E. and Chaudhuri G. Home treatment of exacerbation of COPD by an acute respiratry assessment service. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987. № 84. P. 9265-9269.
21. Kristal B., Shurtz S.R., Chezar J. et al. Participation of peripheral polymorphonuclear leukocytes in the oxidative stress and inflammation in patients with essential hypertension // J.Hypertens. 1998. Vol. 11(8). P. 921-928.
22. Lefer D.J., Ma X. - L. and Lefer A.M. Randomised controlled trial of nasal ventilation in acute ventilatory failure due to chronic obstructive airways disease // Meth Findings Exp. Clin. Pharmacol., 1993. № 15. P. 617-622.
23. Luscher T.F. Endothelial dysfunction in hypertension// J. Hypertens. 1996. Vol. 14(5). P. 383-393.
24. Palmer R.M.J., Ashton D.S., Moncada S. Vascular endothelial cells synthesize nitric oxide from L-arginine // Nature. 1988. Vol. 333. P. 664-666.
25. Sidorenkova N., Warshavsky B., Eltchaniova S. Oxidant and antioxidant status in patient with essential hypertension // Hypertension. 1998. Vol. 16. S. 2. P. 211-212.
26. Tono-oka T., Ueno N., Matsumoto T.Chemilumines-cence of whole blood. 1. A simple and rapid method for the estimation of phagocytic function of granulocytes and opsonic activity in whole blood // Clin. Immunol. and Immunopathol. 1983. Vol. 26. № 1. P. 66-75.
27. Zimmerman T.S., Rattnoff O.D., PowellA.E. Immunologic differentiation of classic Hemopilia and von Wil-lebrand,s disease//J. Clin. Invest. 1971. Vol. 50. №1. P. 244-249.
