CC BY
29
РОЛЬ МЕТОДА XPERT/RIF В ВЫЯВЛЕНИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ
Малик А., Устиян А., Нигуляну А., Лесник Э.
Кафедра Пневмофтизиологии, Кишиневский Государственный Университет Медицины и Фармации
им. Н. Тестемицану, Республика Молдова
Актуальность. Приоритетным направлением в программе контроля туберкулеза (ТБ) является раннее и улучшенное выявление случаев ТВ, в том числе с отрицательным результатом микроскопии мокроты, часто ассоциирующихся с ВИЧ— инфекцией, а также оптимизация диагностики туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью (.'МЛУ-ТБ'),
Национальный институт медицины (NIH) и Фонд для новых инновационных диагностических средств (FIND) при сотрудничестве с компанией Cepheid, Inc. (Саннивейл, США) и с Университетом медицины и стоматологии штата Нью-Джерси (UMDNJ, Ньюарк, США) разработали автоматический тест амплификации нуклеиновых кислот для диагностики ТБ. Работа над системой GeneXpert была начата в 2004 г. Данная система основанна на полимераз-ной цепной реакции в режиме реального времени. Ее разработка была завершена в 2009 г. и на данный момент является важным событием в борьбе с ТБ. Благодаря системе GeneXpert на вооружении фтизиатрической службы появилось доступное и простое молекулярное исследование Xpert MTB/RIF, позволяющее выявлять микобак-терии туберкулеза, а также мутации, указывающие на устойчивость к рифампицину. В 85% случаев устойчивость к рифампицину ассоциируется с устойчивостью к изониа-зиду.
По данным результатов клинических исследований, с участием 1 730 человек с подозрением на ТБ или МЛУ-ТБ, с помощью однократного теста Xpert MTB/RIF было выявлено 92,2% пациентов с положительными результатами посевов. Результаты других клинических исследований, в которых приняли участие 6673 человек, продемонстрировали, что проведение однократного теста Xpert MTB/RIF непосредственно с мокротой позволило выявить 99% пациентов с положительным мазком и 80% пациентов с отрицательным мазком мокроты. Известно, Xpert MTB/RIF существенно не влияет на результат у пациентов с ВИЧ
— инфекцией, тогда как чувствительность микроскопии у данной категории больных снижается до 47%.
В Республике Молдова Xpert MTB/RIF в клиническую практику был внедрен в 2011 году, с 2014 года данный метод исследования включен в алгоритм диагностики ТВ и широко используется на различных уровнях контроля ТБ, что и стало причиной проведения настоящего исследования.
Цель исследования: оценка вклада модекулярно-генетического метода Xpert/RIF в диагностику ТБ в сравнении с микробиологическими методами выявления М. tuberculosis.
Задачи исследования. 1. Сравнительный анализ результатов методов Xpert/ RlF и микроскопии. 2. Сравнительный анализ результатов культурального метода и Xpert/RIF. 3. Оценка результатов лекарственной чувствительности. 4. Определение схемы лечения в зависимости от результатов исследования.
Материал и методы. В 2014 году в муниципии Кишинев были выявлены 413 новых случаев легочного туберкулеза. Методом Xpert/RIF обследовано 361 (87,4%) больных. Положительный результат теста установлен у 174 (48,2%) лиц, а отрицательный
- у 187 (51,8%). Чувствительный тест определен у 123 (70,7%), а устойчивый - у 51 (29,3%) больных.
Результаты. Микроскопия мокроты на КУБ была положительной у 103 (59,2%), а отрицательная - у 71 (40,8%) больных. Xpert/RIF чувствительный и положительный результат микроскопии установлен у 72 (58,5%), а с отрицательным результа-
том микроскопии - у 51 (41,5%). Xpert/RIF устойчивый и положительный результат микроскопии выявлен у 31 (60,8%) пациента, а отрицательный результат микроскопии - у 20 (39,2%) больных. Таким образом, первичная лекарственная устойчивость к рифампицину зарегистрирована более чем у 1/3 новых случаев легочного туберкулеза. Xpert/RIF совпал с положительной микроскопией только у половины больных, как с устойчивым, так и с чувствительным тестом. Положительный результат культуры зарегистрирован у 142 (81,6%) больных с положительным Xpert/RTF; у 26 (15%) культура была отрицательная, а у 6 (3,4%) случаев она была неизвестной. Xpert/RIF чувствительный совпал с чувствительным результатом культуры у 77 (62,6%) больных. Xpert/RIF устойчивый совпал с устойчивостью культуры у 37 (72,6%) больных. Только в 2 (3,9%) случаях с устойчивым Xpert/RIF культура была чувствительной, в 9 (17,6%) отрицательной, а у 3 (5,9%) - результат неизвестен. Анализ спектра устойчивости культуры показал, что из 37 (72,6%) случаев у которых устойчивость совпала и по культуре и по Xpert/RIF у 35 (94,6%) больных установлена множественно-лекарственная устойчивость (МЛУ), и по одному больному с моно- и поли - устойчивостью (5,4%). Все они были включены в схему лечения ДОТС Плюс. Комбинации устойчивости были следующими: у 19 (54,2%) больных - к HRES, к HRS - у 14 (40%), к HRE - у
1 (2,9%) и к HR - у 1 (2,9%) пациентов. В схему лечения ДОТС Плюс были включены
2 больных с моно-устойчивостью, так же 6 больных с устойчивым Xpert/RIF и отрицательной культурой и 2 пациента с неизвестными результатами исследования.
Один больной с МЛУ-ТБ умер, не начав лечения. По схеме ДОТС 5 больных лечились с устойчивым Xpert/RIF, у 3-х из них культура была отрицательная, а у 2-х - положительная чувствительная. В группе из 26 (21,1%) больных с чувствительным Xpert/ RIF и устойчивой культурой спектр устойчивости был следующим: преобладала мо-но-устойчивость - 17 (65,4%) больных (из которых у 13 больных - к стрептомицину и у 4-х - к изониазиду), с МЛУ - 3 (11,5%) больных, с поли-устойчивостыо - 6 (23,1%) пациентов. В группе (187) больных с отрицательным результатом Xpert/RIF микроскопия была положительной только у 8 (4,3%) больных, а культура - у 15 (8,9%). У 18 больных не было результата культуры. Чувствительность культуры сохранилась у 9 (5,3%), а устойчивость - у 6 (3,6%).
Выводы. 1. Положительный результат Xpert/RIF совпадает с положительным мазком только в 59,2%, тем самым, демонстрируя диагностическое превосходство над микроскопическим исследованием.2. Первичная лекарственная устойчивость к рифампицину по результатам Xpert/RIF установлена у 29,3% больных. 3. Положительные результаты Xpert/RIF и посевов отмечены в 81,6% случаев. Преимуществом молекулярно-генетического метода является быстрота результата и, как следствие, скорейшее начало лечения, а куль-турального метода - определение спектра лекарственной чувствительности с последующей коррекцией лечения. 4. Устойчивый результат Xpert/RIF совпадает с МЛУ результатами посевов в 94,6% случаев. Включение пациентов в лечение по схеме ДОТС Плюс идентичны с результатами культуры в 77,9% случаев.
Малик А., Устиян А., Нигуляну А., Лесник Э.
Кишиневский Государственный Университет Медицины и Фармации
им. Н. Тестемицану [email protected]. +37369043468.
