Роль количественной оценки содержания CD34 +-клеток крови в дифференциальной диагностике клональных и неклональных миелопролиферативных заболеваний (предварительные результаты) Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3

Роль количественной оценки содержания CD34+-^eTOK крови в дифференциальной диагностике клональных и неклональных миелопролиферативных заболеваний (предварительные результаты)

В.Г. Потапенко, А.В. Климович, Э.Н. Шейдаева, Л.А. Щекина, Г.И. Улейская, И.А. Лисуков, Н.В. Медведева ГБУЗ Городская клиническая больница №31, Санкт-Петербург

Введение. Проведение дифференциального диагноза между вторичным эритроцитозом (ВЭ) и миелопролиферативным (МПЗ) заболеванием, прежде всего, истинной полицитемией (ИП) и идиопатическим миелофиброзом (ИМФ) - в некоторых случаях является сложным, особенно если гиперплазия ростков кроветворения является вторичной, не связанной с наличием гемобластоза. По данным Barosi et al. (2001), у больных хроническими миелопролиферативными заболеваниями (ХМПЗ) отмечено увеличение количества 0О34+-клеток в периферической крови, наиболее значимо - у больных ИМФ.

Материалы и методы. В исследование в период 20102012 г. включены 12 больных; у 8 критериально было доказано наличие МПЗ, из них ИП - у 2, ИМФ - у 5, эссенциальная тромбоцитемия - у 1; у 4 пациентов, в связи с отсутствием диагностических критериев, МПЗ было исключено. С помощью проточной цитофлюориметрии произведен подсчет относительного и абсолютно числа СБ34+-клеток.

Результаты и обсуждение. У больных ИМФ содержание СБ34+-клеток оказались значимо выше (от 14 х 106/л до 486 х

106/л, в среднем 82,07 х 106/л), чем у пациентов с вторичными эритроцитозами (от 1,51 х 106/л до 7,44 х 106/л, в среднем 5 х 106/л), при сравнении средних р = 0,16. У 7 из 8 пациентов с верифицированным МПЗ содержание СБ34+-клеток превысило 10 х 106/л, в то время как у всех 4 пациентов с ВЭ содержание СБ34+-клеток оказалось существенно ниже 10 х 106/л (р = 0,01, Fisher). У всех 5 пациентов с ИМФ содержание CD34+-клеток превышало 10 х 106/л, содержание CD34+-клеток у всех 4 пациентов с ВЭ не достигало 10 х 106/л (р = 0,0079, Fisher).

Заключение. Приведенные предварительные данные согласуются с ранее опубликованными, а исследование количества CD34+-клеток в периферической крови пациентов может оказаться значимым вспомогательным критерием при проведении дифференциального диагноза между клональной и неклональной гиперплазией ростков кроветворения. Отсутствие достоверных различий средних уровней CD34+-клеток очевидно объясняется малым числом наблюдений. Для оценки значимости, чувствительности и специфичности указанного критерия необходимы дальнейшие наблюдения.

Влияние фармакогенетического тестирования на адекватность и безопасность терапии непрямыми антикоагулянтами у жителей Северо-Западного региона

А.С. Рогозина2, Н.А. Воробьева1, П.А. Лавринов2, А.И. Воробьева2 1ФБГУ Северный филиал Гематологического научного центра Минздравсоцразвития России; 2 ГБОУ ВПО Северный государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, Архангельск

Введение. В клиническую практику внедрен фармакогенетический анализ и фармакогенетический алгоритм подбора дозы непрямых антикоагулянтов для оптимизации терапии данными препаратами. Цель работы - оценка влияния фармакогенетического тестирования на адекватность и безопасность терапии непрямыми антикоагулянтами у жителей Северо-Западного региона.

Материалы и методы. Проспективное нерандомизированное когортное исследование. Фармакогенетический анализ (ФГА) проведен у 100 пациентов, принимающих варфа-рин. Срок наблюдения за пациентами 6 мес. ФГА проведен с использованием мультиплексной полимеразной цепной реакции и рестрикционного анализа (ПЦР/ПДРФ) в режиме реального времени. Забор крови на фармакогенетическое исследование осуществлялся в вакутейнеры на 5 мл.

Результаты и обсуждение. Оптимальная гипокоагуляция была достигнута у 58% пациентов в среднем за 6 ± 4,2 дня, (критерий эффективности уровень международного норма-

лизованного отношения - МНО 1,8-3,0). Среднее значение МНО составило 2,2 ± 0,5. По результатам ФГА нормальный генотип (CYP2C9, VKORC1-1639 G >A) был выявлен у 25% пациентов, из них у 70% возникали эпизоды кровотечений, у 20% - выявленный генотип определял склонность к избыточной гипокоагуляции, кровотечения возникали в 44% случаях. Поддерживающая доза, рассчитанная по Gage et al. у всех пациентов составила 5,3 ±1,2 мг, реальная доза, назначенная в антикоагулянтной клинике - 5,4 ± 0,9 мг (р = 0,3).

Заключение. Терапевтические дозировки непрямых антикоагулянтов, рассчитанные при стандартном и фармакогенетическом подходах, статистически значимо не различались. На развитие геморрагических осложнений влияли другие внешние факторы, в большей степени, чем определенная фармакочувствительность. Фармакогенетический анализ не заменит адекватного лабораторного мониторинга показателя МНО, отражающего безопасность терапии непрямыми антикоагулянтами.

Динамика NK-, NKT-клеток и основных оппозитных цитокинов у больных апластической анемией в различные фазы заболевания: в рецидиве и ремиссии

О.Е. Розанова, Т.В. Глазанова, И.Е. Павлова, Ж.В. Чубукина, Е.Р. Шилова ФГБУ Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург

Введение. Известно, что основой патогенеза апластической анемии (АА) в большинстве случаев является иммунологически опосредованное нарушение гемопоэза, связанное с дисбалансом синтеза цитокинов, продуцируемых клетками иммунной системы больных, в том числе, NK- и NKT-клетками. Возможная роль последних в развитии аплазии кроветворения при АА активно изучается в настоящее время. Однако их уровень и, особенно, динамика в процессе заболевания окончательно не изучены. Учитывая, что кроветворение в норме обеспечивается сбалансированным комплексом как позитивных, так и негативных цитокиновых сигналов, в задачу настоящего исследования входило определение соотношения основных оппозитных цитокинов, продуцируемых мононуклеарами больных АА, и их связь с уровнем NK- и NKT-клеток в разные фазы заболевания: в рецидиве и ремиссии.

Материалы и методы. Количество NK- и NKT-клеток определяли методом проточной цитометрии (Beckman Coulter FS500) с помощью моноклональных антител "Beckman

Coulter" (США). Продукцию цитокинов исследовали с помощью стандартного метода иммуноферментного анализа (ИФА) в супернатантах мононуклеарных клеток периферической крови после их 24-часового культивирования при 37С. В работе использовали диагностикумы фирмы "Протеиновый контур" (Санкт-Петербург). Исследовали следующие цитокины: ИЛ-1р, ИЛ-6 - позитивные факторы, ФНОа - негативный регулятор гемопоэза, ИЛ-4 - антагонист ФНОа и ИЛ-2 - фактор роста Т-лимфоцитов.

Результаты и обсуждение. Уровень натуральных киллеров в периферической крови первичных больных составил

9,78 ± 1,9% и был ниже нормы (13,7 ± 1,0%), а уровень NKT-клеток, составляя 11,1 ± 2,1%, был в 2 раза выше нормы (5,5 ± 0,7%). Рецидив заболевания был отмечен статистически значимым снижением уровня натуральных киллеров до 4,98 ± 1,2% и повышением уровня NKT-клеток до 10,1 ± 2,3%. В ремиссии количество натуральных киллеров увеличивалось до 12,40 ± 0,9%, а уровень NKT-клеток снижался до 9,15 ±

132