CC BY
301
Запрошен! стагл
Guest Articles
почки
НИРКИ
УДК 616-079.1-616.4
ЛУЦЕНКО Л.А.
Киевский городской клинический эндокринологический центр
РОЛЬ ГЛИКИРОВАННОГО ГЕМОГЛОБИНА В ДИАГНОСТИКЕ И МОНИТОРИНГЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА
Резюме. С учетом распространенности сахарного диабета, возможности раннего и быстрого развития его осложнений, большого количества недиагностированных случаев и неутешительных прогнозов ВОЗ относительно перспектив распространения сахарного диабета в мире важна своевременная и точная диагностика нарушений углеводного обмена. Гликированный гемоглобин — показатель, который при использовании стандартизованных методик дает интегрированное представление об уровне гликемии на протяжении длительного промежутка времени и помогает своевременно выявить нарушения углеводного обмена. При использовании гликированного гемоглобина в качестве диагностического критерия нарушений углеводного обмена или степени компенсации сахарного диабета важным является правильный подход к выбору метода определения данного показателя с учетом его аналитической надежности. Ключевые слова: сахарный диабет, гликированный гемоглобин, гликирование, гликемический контроль.
Сахарный диабет (СД) в настоящее время является серьезной медицинской и социальной проблемой. Согласно прогнозам ВОЗ, к 2030 году количество больных СД превысит 592 млн [1]. Но проблема состоит не только в распространенности СД, но и в быстром развитии осложнений, которые приводят к снижению качества жизни больного, инвалидиза-ции и смерти. Для больных СД характерны раннее развитие и высокая частота сосудистых осложнений: при 2-м типе — макроваскулярных (поражение церебральных, коронарных и периферических сосудов) и микроваскулярных (ретинопатия, нефропатия, ней-ропатия), при 1-м типе — микроваскулярных. Особенностью течения СД 2-го типа является наличие хронических осложнений на момент установления клинического диагноза, что усугубляет течение заболевания и затрудняет возможности компенсации.
В настоящее время в Украине зарегистрировано 1,3 млн больных СД. При этом данные эпидемиологических исследований указывают на то, что количество пациентов с недиагностированными случаями СД в 2—2,5 раза превышает количество выявленных пациентов. Таким образом, для эндокринологов, терапевтов, семейных врачей важна проблема скрининга латентного СД.
Одним из методов выявления нарушений углеводного обмена является определение уровня гликемии. При этом необходимо учитывать, что полученный результат отражает концентрацию глюкозы только
на момент взятия крови, а значения гликемии имеют значительные колебания в течение суток. Таким образом, корреляция между единично определенным уровнем глюкозы и реальным уровнем гликемии слабая, и поэтому сделать вывод о достоверном наличии или отсутствии нарушения углеводного обмена у пациента между измерениями не представляется возможным. В рекомендациях ВОЗ (2006 г.) указано, что в 30 % случаев не представляется возможным диагностировать СД, используя определение гликемии натощак.
Показателем, который дает интегрированное представление об уровне гликемии на протяжении длительного промежутка времени, является глики-рованный гемоглобин (ЫЪЛ1с). Многие исследования подтверждают взаимосвязь ЫъЛ1с и уровня гликемии пациента [2, 3].
В научной литературе в последние годы сложилось представление о двух, казалось бы, сходных процессах — гликозилировании и гликировании. Гликозилирование, а точнее, трансгликозилирова-ние — это перенос остатка моносахарида на другой моносахарид с образованием гликозидной связи, который является ферментативным процессом [4]. Гликирование (неферментативное гликозилиро-
© Луценко Л.А., 2014 © «Почки», 2014 © Заславский А.Ю., 2014
вание) — это неферментативное присоединение к аминогруппе белка (пептида или аминокислоты) моносахаридного остатка с образованием основания Шиффа, а затем кетамина. Для данного процесса необходимы следующие условия: 1) наличие свободных и неэкранированных МЫ2-групп у белка; 2) наличие альдегидов; 3) достаточное время контакта; 4) способность белка быстро менять конформацию и возвращаться в исходное состояние [4]. То есть термин «гликированный гемоглобин» более точно отражает процесс специфического соединения гемоглобина эритроцитов с глюкозой. Для обозначения неферментативного присоединения сахара к белку объединенная комиссия IUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry) по биохимической номенклатуре рекомендует использовать термин «гликирова-ние», который предпочтительнее, чем термин «неферментативное гликозилирование» [4]. Существуют разные варианты гликированных гемоглобинов: ЫЬА1а, HbA1b, HbA1c. Корреляцию со степенью выраженности СД дает только вариант HbA1c. Процесс гликирования необратим, его скорость (а также концентрация HbA1c) прямо пропорциональна уровню гликемии.
У здоровых людей концентрация HbA1c в крови колеблется от 4 до 5,9 %, у больных СД его уровень зависит от степени гипергликемии. Образовавшийся HbA1c аккумулируется внутри эритроцитов и сохраняется в течение всего срока жизни эритроцита. Поскольку эритроциты, циркулирующие в крови, имеют разный возраст, рекомендуется ориентироваться на полупериод жизни эритроцитов — 60 суток. Таким образом, концентрация HbAk отражает уровень гликемии пациента за 60 (до 90) дней до исследования [5]. Наибольшее влияние на уровень HbA1(, оказывают последние 30 дней перед взятием анализа. Уровнем гликемии за это время обусловлено 50 % величины HbA1(;. Таким образом, ценность определения HbA1(, в том, что он характеризует средний уровень глюкозы в крови на протяжении длительного промежутка времени, то есть состояние углеводного обмена на протяжении последних 2—3 месяцев.
С точки зрения клинической ценности определение HbA1c обладает рядом преимуществ в сравнении с определением гликемии:
— результат HbA1c не зависит от приема пищи (возможно определение не натощак), физических нагрузок, психоэмоционального состояния пациента;
— взятие крови может проводиться в любое время: HbA1c стабилен в широком диапазоне температур и временном интервале;
— возможность хранения образца крови для определения HbA1c при 2—8 °С до 7 суток;
— обладает существенно более низкой биологической вариабельностью.
Существует прямая зависимость между значениями HbA1c и уровнем гликемии (пре- и постпрандиаль-ным), которая представлена в табл. 1.
Интерпретация результатов HbA1c может быть затруднена. Разброс значений HbA1c у двух людей с одинаковым средним показателем уровня глюкозы в крови может достигать 1 %, что обусловлено наличием разницы в лабораторных технологиях и индивидуальными различиями пациентов. Это подтверждает важность стандартизации методов исследования
НЬА1с.
Стандартизация методов исследования гликированного гемоглобина
При исследовании HbA1c необходимо учитывать метод его определения и аналитическую надежность используемого способа. Еще несколько десятилетий назад отсутствовала стандартизация методов измерения HbA1c, что снижало клиническую эффективность использования данного теста. В 1993 году Американской ассоциацией клинической химии была разработана Национальная программа по стандартизации исследований HbA1c (NGSP — The National Glycohemoglobin Standardization Program). В настоящее время производители тест-систем для измерения HbA1c обязаны проходить проверку и получить сертификат соответствия DCCT (DCCT — Diabetes Control and Complications Trial). Американской диабетической ассоциацией (АДА) рекомендовано всем лабораториям использовать только тесты, сертифицированные NGSP [6, 7]. Основное требование, предъявляемое организацией NGSP к методам определения HbA1c, — воспроизводимость с коэффициентом вариации (CV) менее 4 %. К сожалению, методы, использующиеся в лабораториях, далеко не всегда отвечают этим требованиям. Низкий CV является критически важным, если уровень HbA1c в крови пациента близок к установленным границам компенсации СД. Значение CV выше 5 % не дает возможности использовать определение HbA1c с диагностической целью, поскольку приведет к постановке ложноотри-цательного диагноза.
На сегодняшний день известно более 20 методов определения HbA1c [1]. Условно их можно разделить на хроматографические (жидкостная хроматография, аффинная хроматография), электрофорети-ческие, иммунохимические, колориметрические. У каждого метода есть свои преимущества и недостатки (табл. 2).
Таблица 1. Соответствие целевых значений HbA1c
пре- и постпрандиальному уровню глюкозы плазмы
HbA1c, % Глюкоза плазмы натощак, ммоль/л Глюкоза плазмы через 2 часа после еды, ммоль/л
< 6,5 < 6,5 < 8,0
< 7,0 < 7,0 < 9,0
< 7,5 < 7,5 < 10,0
< 8,0 < 8,0 < 11,0
При всем многообразии методов, предлагаемых для определения HbA1c, наиболее полно соответствует современным требованиям метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), принятый NGCP как референсный метод [8], который используется в большинстве ведущих лабораторий мира. Суть метода состоит в сорбции всех вариантов гемоглобина на ионообменной смоле колонки с последующим их разделением по различным фракциям под действием градиента рН буфера и детектированием.
Таким образом, при выборе лабораторией анализатора для исследования HbA1c преимущество должно отдаваться анализаторам на основе референсного метода DCCT, каким является ВЭЖХ. Использование стандартизированных методов исследования дает лаборатории возможность получать максимально достоверные результаты исследований. Результатом отсутствия стандартизации лабораторного метода являются высокая ненадежность и разброс результатов HbA1c, что приводит к недооценке или переоценке диагностики СД. Поэтому в повседневной клинической практике при получении результата HbA1c врач должен задаться вопросом: исследование HbA1c проведено в стандартизированной лаборатории или нет? То есть чрезвычайно важно, чтобы врач использовал в своей работе результаты исследований, полученные только в тех лабораториях, которые проводят исследование HbA1c методами, сертифицированными NGSP.
Результаты измерения HbA1c должны быть выражены в предложенных IFCC (International Federation of Clinical Chemistry) единицах (ммоль/моль) и соответствующих показателях NGSP (%).
Роль HbA1c в оценке гликемического контроля у больных СД подтверждена результатами United Kingdom Prospective Diabetes Study (UKPDS) и
DCCT. ЫЪЛ1с — достоверный предиктор микро- и макрососудистых осложнений диабета, показатель рисков патологий беременности и плода. Согласно данным исследований, проводимых DCCT, риск развития и прогрессирования отдаленных осложнений СД 1-го типа коррелирует со степенью эффективности контроля уровня гликемии, выраженного в содержании ЫЪЛ1с в крови [9]. Достижение целевых показателей ЫЪЛ1с является ключевым моментом в предотвращении развития хронических осложнений [9—11].
Терапевтические цели при лечении сахарного диабета 2-го типа
Приказом МЗ Украины № 1118 от 21.12.2012 г. «Про затвердження та впровадження медико-технолопчних докуменпв зi стандартизацп медично! допомоги при цукровому дiабетi 2 типу» определены цели терапии, которые необходимо достичь при лечении СД 2-го типа (табл. 3).
АДА указывает на необходимость персонализированного подхода к определению целевых уровней ЫЪЛ1с и ведению пациентов с СД 2-го типа (табл. 4).
При выборе индивидуального целевого уровня ЫЪЛ1с следует учитывать:
1) возраст пациента. При этом необходимо понимать, что функциональное изнашивание органов и систем (биологический возраст) каждого человека строго индивидуально, в результате чего невозможно четко разграничить цели гликемического контроля;
2) ожидаемую продолжительность жизни (ОПЖ). Данное понятие позволяет оценить общее состояние пациента и вероятность развития у него сосудистых осложнений (даже в большей степени, чем возраст). Так, цели гликемического контроля могут быть менее строгими у пациентов с ОПЖ < 5 лет, поскольку про-
Таблица 2. Основные лабораторные методы определения HbA
Используемый метод Преимущества Недостатки
Ионообменная хроматография — Полностью автоматический — Высокая воспроизводимость — Результаты не требуют подтверждения — Необходимость использования специализированного оборудования
Аффинная хроматография — Сертифицированный метод — Возможность выполнения единичных исследований в кабинете врача — Высокая стоимость расходных материалов — Непрямое определение фракции HbA1c
Иммунотурбидиметрия — Сертифицированный метод — Возможность выполнения анализа на биохимическом анализаторе, установленном в лаборатории — Необходимость ручной пробоподготовки — Клинически значимая интерференция в присутствии гемоглобинов F (> 10 %), С и S
Ионообменная хроматография низкого давления — Хорошая корреляция с методом ВЭЖХ — Необходимость пробоподготовки — Низкая производительность, интерференция в присутствии HbF
Аффинная хроматография с использованием микроколонок — Относительно низкая стоимость — Не отвечает требованиям NGSP — Высокие трудозатраты
Таблица 3. Цели терапии при лечении СД 2-го типа
Параметры Цели терапии (результаты лабораторных исследований)
иьд,, % 1с' Общепринятый уровень для большинства пациентов составляет < 7 при референс-ных значениях, но может устанавливаться индивидуально, учитывая имеющиеся осложнения. Уровень < 6,5 устанавливается у пациентов с высокой ожидаемой продолжительностью жизни, без сердечно-сосудистых заболеваний, без риска развития гипогли-кемического состояния, у тех, у кого это достижимо. Уровень < 7,5 устанавливается у пациентов с низкой ожидаемой продолжительностью жизни, с сердечно-сосудистыми заболеваниями, с риском развития гипогли-кемического состояния, у тех, у кого это не представляется достижимым
Глюкоза плазмы капиллярной крови натощак, ммоль/л < 5,6
Глюкоза плазмы капиллярной крови после еды, ммоль/л < 10
гноз жизни такого пациента, как правило, определяется тяжелым основным заболеванием (например, онкологической патологией). У пациентов молодого и среднего возраста с высокой ОПЖ рекомендуется достижение более строгих целей контроля гликемии для предупреждения развития сосудистых осложнений СД;
3) наличие тяжелых осложнений. В исследовании ACCORD подтверждено, что при наличии у пациента сердечно-сосудистых осложнений при достижении нормогликемии возрастает частота развития гипо-гликемических состояний, которые влекут за собой кардио- и цереброваскулярные катастрофы;
4) риск развития тяжелых гипогликемий. Возможность строгого контроля гликемии ограничена, поскольку влечет за собой высокий риск сердечно-сосудистой смертности.
Терапевтические цели при лечении сахарного диабета 1-го типа
Согласно современным рекомендациям (АДА, 2013), значение HbA1c < 7,0 % является целевым для большинства пациентов с СД 1-го типа при условии отсутствия гипогликемических реакций. Таким образом, обеспечивается эффективная профилактика микрососудистых осложнений диабета. При этом у некоторых пациентов (небольшой стаж диабета, отсутствие осложнений СД и сопутствующих заболеваний) рекомендуется рассматривать более жесткие целевые значения HbA1c < 6,5 %, если они могут быть достигнуты при отсутствии гипогликемических состояний. У пациентов с тяжелыми гипогликемиями в анамнезе, тяжелыми диабетическими осложнениями или сопутствующими заболеваниями рекомендуется установить менее жесткие цели — HbA1c < 8 %.
Таблица 4. Индивидуальные целевые значения HbA1c при СД 2-го типа (АДА, 2010)
Возраст
Молодой Средний Пожилой и/или ОПЖ < 5 лет
HbA1c, % 6-6,5 6,5-7,0 7-7,5
У детей, подростков целевые значения НЬА1с могут колебаться от 7 до 8,5 % в зависимости от возраста, наличия гипогликемических эпизодов, физической активности, возможности контроля приема углеводов (табл. 5).
Учитывая возможности высокой стандартизации исследования НЬА1с, в настоящее время АДА (2010 г.) предлагает использовать НЬА1с не только как критерий компенсации СД, но и с целью ранней диагностики нарушений углеводного обмена (табл. 6). Пороговым предложено считать значение НЬА1 , равное 6,5 %. 1с
С 2012 г. использование НЬА1с для диагностики СД одобрено и в Украине (приказ МЗ Украины № 1118 от 21.12.2012 г. «Про затвердження та впровадження медико-технолопчних докуменпв зi стандартизаци медично! допомоги при цукровому дiабетi 2 типу»).
Таким образом, если учесть последние рекомендации диабетологических организаций, то показаниями к определению НЬА1с являются:
— скрининг и диагностика СД;
— мониторинг течения и контроля проводимого лечения больных СД, определение степени компенсации СД;
Таблица 5. Индивидуальные целевые значения НЬА при СД 1-го типа у детей (АДА)
Возраст, лет HbA1c, % HbA1c (при отсутствии серьезных эпизодов гипогликемий), %
0-6 < 8,5 < 8
6-12 < 8 < 7,5
13-19 < 7,5 < 7
Таблица 6. Интерпретация результатов HbA1 (АДА, 2010)
Уровень HbA1c, % Интерпретация результата
< 5,7 Отсутствие СД
5,7-6,4 Повышенный риск диабета (пре-диабет)
6,5 и выше СД
Таблица 7. Факторы, влияющие на уровень HbA
Повышающие уровень ИЬД1с Понижающие уровень НЬД1с
— Дефицит витамина В12 и железа — Угнетение эритропоэза — Алкоголизм — Хроническая почечная недостаточность — Увеличение сроков жизни эритроцитов (спленэкто-мия) — Гипербилирубинемия — Лекарственные препараты (гидрохлортиазид, индапа-мид, пропранолол, морфин) — Ретикулоцитоз — Хронические заболевания печени — Снижение сроков жизни эритроцитов (гемоглобинопатии, спленомегалия, ревматоидный, артрит) — Гипертриглицеридемия — Лекарственные препараты (препараты эритропоэти-на, железа; витамины В12, С, Е; аспирин; противовирусные)
— обследование беременных женщин с целью диагностики гестационного диабета, оценки риска врожденных патологий плода;
— оценка рисков общей смертности, инфарктов миокарда, ишемических инсультов, диабетической ретинопатии, нефропатии, нейропатии, колорек-тального рака.
При интерпретации результата HbA1c необходимо учитывать наличие факторов, влияющих на уровень данного показателя (табл. 7).
Таким образом, использование уровня гликиро-ванного гемоглобина рекомендовано в качестве критериев компенсации СД и диагностики нарушений углеводного обмена. При этом врач должен остановить свой выбор на стандартизированном методе исследования, а также учесть наличие различных факторов, влияющих на уровень HbA1c.
Список литературы
1. International Diabetes Federation, diabetes alas. — 6h ed. //International Diabetes Federation. — 2013. — 159р.
2. Gonen B.A. Hemoglobin A1: An indicator of the metabolic control of diabetic patients /B.A. Gonen, A..H. Rubinstein, H. Rochman et al. // The Lancet. — 1977. — Vol. 310. — P. 734-737.
3. Koenig R.J. Correlation of glucose regulation and hemoglobin Ac in diabetes mellitus / R.J. Koenig, C.M. Peterson, R.L. Jones et al. //
New England Journal ofMedicine. —1976. — Vol. 295, № 8. — Р. 417420.
4. Королев В.А. Метод изоэлектрофокусирования и фотоколориметрия для определения гемоглобина А1с/ В.А. Королев,
B.И. Молчанов//Биомедицинская химия. — 2006. — Т. 52, № 2. —
C. 200-210.
5. Питерс-Хармел Э. Сахарный диабет: диагностика и лечение / Э. Питерс-Хармел, Р. Матур: Пер. с англ. — М.: Практика, 2008. — 496 с.
6. American Diabetes Association Standards ofMedical Care in Diabetes — 2010//Diabetes Care. — 2010. — Vol. 33(1). — P. 511-561.
7. International expert committee report on the role of the Ac assay in the diagnosis of diabetes // Diabetes Care. — 2009. — Vol. 32(7). — P. 1327-1334.
8. Approved IFCC reference method for the measurement of HbAlc in human blood // Clin. Chem. Lab. Med. — 2002. — Vol. 40(1). — Р. 78-89.
9. DCCT. The relationship of glycemic exposure (HbAlc) to the risk of development and progression of retinopathy in the diabetes control and complications trial// Diabetes. — 1995. — Vol. 44(8). — P. 968-983.
10. Stratton J.M. Association of glycaemia with macrovascular and microvascular complications of type 2 diabetes (UKPDS 35): prospective, observational study / J.M. Stratton, A.I. Adler, A.W. Neil et al. // BMJ. — 2000. — Vol. 321. — P. 405-412.
11. Гнуди Л. Результаты и влияние исследований ACCORD и ADVANCE/Л. Гнуди//Diabetes voice. — 2009. — Vol. 54, № 1. — С. 29-32.
Получено 03.11.14 ■
Луценко Л.А.
Кивський мський 1^мчний ендокринолопчний центр
РОЛЬ ГЛкОВАНОГО ГЕМОГЛОБШУ В ДiАГНОСТИЦi ТА МОЫТОРИНГУ ЦУКРОВОГО ДiАБЕТУ
Резюме. З урахуванням поширеносп цукрового дiабету, можливосп раннього та швидкого розвитку його усклад-нень, велико! юлькосп недiагностованих випадшв i не-впшних прогнозiв ВООЗ щодо перспектив поширення цукрового дiабету у свт важливою е своечасна та точна дiагностика порушень вуглеводного обмшу. Глшований гемоглобш — показник, що при використанш стандартизо-ваних методик дае штегроване уявлення про рiвень глшеми впродовж значного промгжку часу та дозволяе своечасно виявити порушення вуглеводного обмшу. При використанш глтзваного гемоглобшу як дiагностичного критерш порушень вуглеводного обмшу або ступеня компенсацй цукрового дiабету важливим е правильний шдхщ до вибору методу визначення даного показника з урахуванням його аналогично! надшносп.
Ключовi слова: цукровий дiабет, глшэваний гемоглобш, гль кування, глiкемiчний контроль.
Lutsenko L.A.
Kyiv Municipal Clinical Endocrinological Center, Kyiv, Ukraine
THE ROLE OF GLYCATED HEMOGLOBIN IN THE DIAGNOSIS AND MONITORING OF DIABETES MELLITUS
Summary. Considering the prevalence of diabetes mellitus, the possibility of early and rapid progression of its complications, a large number of undiagnosed cases and disappointing prognosis of the World Health Organization on the prospects of diabetes mellitus spreading in the world, timely and accurate diagnosis of carbohydrate metabolism disorders is important. The glycated hemoglobin is an indicator that, while using the standardized methods, provides an integrated view of the glycemia level during a long period of time and helps to detect timely the carbohydrate metabolism disorders. While using the glycated hemoglobin as a diagnostic criterion of carbohydrate metabolism disorders or degree of diabetes mellitus compensation, the correct approach to the choice of the method of this index determination, considering its analytical reliability, is important.
Key words: diabetes mellitus, glycated hemoglobin, glycation, glycemic control.
