CC BY
30
© БОЛЬШАКОВА ЕВ.
РОЛЬ ЭКСПРЕССИИ СБ38 В ФОРМИРОВАНИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПРИ ОСТРОМ ИНФАРКТЕ МИОКАРДА
Е.В. Большакова
Красноярская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. И.П. Артюхов; кафедра биохимии с курсами медицинской, фармацевтической и токсикологической химии,
зав. - д.м.н., проф. А.Б. Салмина; кафедра поликлинической и семейной медицины, зав. - д.м.н., проф. М.М. Петрова.
Научные руководители: проф. А.Б. Салмина, проф. М.М. Петрова, асп. О. С. Бахметьева.
Резюме. В статье рассматривается эндотелиальная дисфункция в качестве основного патогенетического фактора острого инфаркта миокарда. Исследовали экспрессию фермента С038 нейтрофилами периферической крови и его роль в развитии эндотелиальной дисфункции при остром инфаркте миокарда. Обнаружили увеличение экспрессии €038 нейтрофилами периферической крови у пациентов с острым инфарктом миокарда. Динамика изменения экспрессии €038 нейтрофилами отражает характер течения и развития дисфункции эндотелия при остром инфаркте миокарда.
Ключевые слова: нейтрофил, эндотелиальная дисфункция, €038, острый инфаркт миокарда.
В настоящее время ключевое значение в формировании заболеваний сердечно-сосудистой системы отводится нарушениям функции эндотелия -эндотелиальной дисфункции. В основе развития ИБС лежит хроническая воспалительная реакция [1,3]. Об этом свидетельствует волнообразный характер ее течения со сменой фаз обострения - острого коронарного синдрома и инфаркта миокарда и ремиссии, когда состояние пациента относительно стабильное. В фазу обострения наблюдается резкое повышение уровня плазменных медиаторов воспаления в сосудистом русле, прогрессирование дисфункции эндотелия, мощная активация клеток-эффекторов, ускорение
тромбогенеза и, как следствие этого, деструкция сосудистой стенки, а затем и ткани миокарда.
Одним из клеточных механизмов обострения ИБС является активация лейкоцитов периферической крови, приводящая к их миграции через эндотелий [2,3], в связи с чем в последние годы стал активно изучаться механизм взаимодействия нейтрофилов периферической крови и клеток эндотелия. Однако неизученной остается роль неклассических молекул клеточной адгезии в реализации взаимодействия «нейтрофил-эндотелиоцит», в частности, CD38 (НАД+-гликогидролазы) - бифункционального фермента и рецептора, экспрессируемого на клетках различной природы, в том числе лейкоцитах периферической крови. Естественным лигандом CD38, по данным ряда авторов [5,6], является CD31, экспрессируемый преимущественно клетками эндотелия. Показана важная роль CD38 - CD31 взаимодействий в развитии эндотелиальной дисфункции у больных, длительно принимающие препараты ретиноевой кислоты, являющейся индуктором экспрессии CD38 [7,8]. Мы предположили, что формирование эндотелиальной дисфункции у больных острым инфарктом миокарда может быть связано с изменением взаимодействия «нейтрофил-эндотелиоцит», обусловленным нарушением экспрессии CD38 на лейкоцитах периферической крови.
Целью настоящего исследования явилась оценка роли CD38 нейтрофилов периферической крови в формировании эндотелиальной дисфункции у больных с острым инфарктом миокарда.
Материалы и методы
Объектом исследования явились пациенты с острым инфарктом миокарда (ОИМ) в период госпитализации. Первая группа включала 35 пациентов обоего пола с ОИМ, в клинике которых не наблюдалось выраженного болевого синдрома. Из них -27 мужчин и 8 - женщин. Средний возраст больных составлял 57 лет. Критерии включения: наличие гипертонической болезни 3 стадии, возраст от 40-60 лет, отсутствие коронарного анамнеза и тяжелой сопутствующей патологии (исключались БА, ХОБЛ, ХПН, системные
заболевания). Вторую группу составили 6 пациентов с ОИМ, в клинике которых доминировал болевой синдром, для купирования которого потребовалось дополнительное введение наркотических анальгетиков. Контрольную группу составили 10 практически здоровых человек обоего пола, соответствующего возраста.
Забор венозной крови производился натощак на первые и 14 сутки госпитализации. Нейтрофилы выделяли из цельной гепаринизированной периферической крови с использованием многоступенчатого градиента плотности фиколл-верографин. Плотности верхнего и нижнего градиентов составляли 1,142 и 1,062 г/см , соответственно. Экспрессию CD38 на нейтрофилах периферической крови определяли иммуноцитохимическим методом, путем инкубации фиксированного препарата, содержащего 100 мкл суспензии нейтрофилов в концентрации 1х106 клеток/мл, с моноклональными Е1ТС-мечеными антителами (anti-CD38, Caltag, США). Визуализация
осуществлялась методом флуоресцентной микроскопии, определяли
относительное количество CD38+ клеток в препарате. Выраженность эндотелиальной дисфункции оценивалась по количеству слущенных
эндотелиоцитов. Они были выделены вместе с нейтрофильной фракцией периферической крови, количество слущенных эндотелиоцитов определяли из расчета на 100 клеток крови методом фазово-контрастной микроскопии.
Статистический анализ полученных результатов включал методы статистического описания и проверки статистических гипотез. Производим проверку нормальности, при условии соответствия нормальному закону распределения оценку достоверности различий осуществляли с использованием /-критерия Стьюдента. Статистическая обработка результатов произведена с помощью пакетов прикладных программ 8ТЛТ18Т1СЛ V. 6.0 ^Зой-Я^а, 1999] и БЮЗТЛШТГСЛ.
Результаты и обсуждение
Мы обнаружили, что количество нейтрофилов периферической крови, экспрессирующих CD38, было достоверно выше в группах с ОИМ в первые и
на 14 сутки госпитализации (25,2% и 17,8%, соответственно) относительно контрольной группы (6,5%); (р<0,001)
Также мы наблюдали динамику изменения экспрессии СБ38 нейтрофилами у пациентов с ОИМ, в клинике которых доминировал болевой синдром. У этих пациентов экспрессия СБ38 нейтрофилами в первые сутки и 14 сутки составила, соответственно, 30,8% и 21,3%. Полученные результаты достоверно выше в сравнении с первой группой пациентов, течение ОИМ у которых не требовало введения наркотических анальгетиков: 25,4% и 18,5 % на первые и четырнадцатые сутки госпитализации, (р<0,001) (табл.1).
Таблица 1
Экспрессия С038+ нейтрофилов у пациентов с ОИМ при разной
выраженности болевого синдрома
Группа Количество СБ38+нейтрофилов (%)
1 сутки 14 сутки
Контроль 6,5±0,11 6,5±0,11
ОИМ без выраженного болевого синдрома 25,4±0,49* ** 18,5±0,69* **
ОИМ с выраженным болевым синдромом 30,8±2,62* ** 21,3±2,65* **
Примечание: * - р<0,01 при сравнении с контрольной группой; ** - р<0,01 -ОИМ без выраженного болевого синдрома с пациентами с выраженным болевым синдромом.
Количество слущенных эндотелиоцитов в периферической крови в группах инфарктных больных на первые и 14 сутки госпитализации (6,0% и 3,3 % соответственно) было достоверно выше в сравнении с группой контроля (1,3%) (р<0,001).
В группе пациентов с выраженным болевым синдромом количество слущенных эндотелиоцитов на первые (6,1%) и четырнадцатые сутки (2,8%) не
имело достоверных отличий в сравнении с пациентами ОИМ без болевого синдрома (табл.2).
Таблица 2
Количество слущенных эндотелиоцитов у пациентов с ОИМ при разной
выраженности болевого синдрома
Группа Относительное количество слущенных эндотелиоцитов (%)
1 сутки 14 сутки
Контроль 1,30±0,01 б,50±0,11
ОИМ без выраженного болевого синдрома б,10±0,30* 3,20±0,4S*
ОИМ с выраженным болевым синдромом б,10±0,70* 2,S0±0,4S*
Примечание: * - p<0,01 при сравнении с контрольной группой
Мы предполагаем, что одним из механизмов активации нейтрофилов периферической крови у больных с острым инфарктом миокарда является увеличение экспрессии CD3S, что, вероятно, обусловлено изменениями цитокинового спектра плазмы крови. Известно, что модуляторами экспрессии CD3S в клетках различной природы являются цитокины с провоспалительной активностью [9]. Увеличение экспрессии фермента, в свою очередь, вызывает изменение межклеточных взаимодействий в системе «нейтрофил-эндотелиоцит», с последующим повреждением и нарушением функции эндотелия, проявляющимся увеличением количества слущенных эндотелиоцитов. Степень экспрессии CD3S нейтрофилами периферической крови имеет прямую зависимость от выраженности болевого синдрома (что требует дальнейшего изучения с целью установления патогенетических механизмов этого феномена), и уменьшается в течение заболевания. Динамика изменения экспрессии CD3S нейтрофилами отражает характер течения и развития дисфункции эндотелия при остром инфаркте миокарда.
Таким образом, изменение экспрессии CD3S нейтрофилами периферической крови является одним из возможных механизмов формирования дисфункции эндотелия при остром инфаркте миокарда.
ROLE OF CD38 EXPRESSION СD38 IN DEVELOPMENT OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION IN ACUTE MYOCARDIAL INFRACTION
E.V. Bolshakova
Krasnoyarsk state medical academy
The paper describes endothelial dysfunction as the basic pathogenetic factor in development of myocardial infarction (MI). We assessed expression of enzyme CD3S on peripheral blood neutrophiles in patients with MI in order to elucidate its role in progression of endothelial dysfunction. We found elevation of CD3S expression related to development of clinical manifestations and signs of endothelial dysfunction in the patients.
Литература
1. Белоусов Ю.Б. Роль воспаления в клинике внутренних болезней. Проблемы и перспективы // РМЖ. - 2001. - Т.9, №12. - C4S7-503.
2. Петрищева Н.Н. Дисфункция эндотелия. Причины, механизмы, фармакологическая коррекция. - СПб.: СПбГМУ, 2003. - С. 124-131.
3. Бодрова О.В., Ларионова Г.П. Атеросклероз. - М.:КРОН-Пресс, 2000. - 40б с.
4. Казачкина С.С., Лупанов В.П., Балахонова Т.В. Функция эндотелия при ишемической болезни сердца и атеросклерозе и влияние на нее различных сердечно сосудистых препаратов // Сердечная недостаточность. - 2004. -Т.б, №1. - С.315-31б.
5. Dignat-Georgea F., Sampola J., Lipb G. Circulating Endothelial Cells: Realities and Promises in Vascular Disorders // Pathophysiol Haemost Thromb. - 2004. - № 33. - P. 495-499.
6. Ferrero E., Saccucci F., Malavasi F. The making of a leukocyte receptor: origin, genes and regulation of human CD3S and related molecules // Chem. Immunol. -2000. - Vol. 75. - P. 1-19.
7. Jones S.P., Trocha S.D. Strange M.B. Leukocyte and endothelial cell adhesion molecules in a chronic murinemodel of myocardial reperfusion injury / S.P. Jones,
S.D. Trocha, M.B. Strange et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. - 2000. -Vol. 279. - Р. 2196-2201.
8. Lee H.C. Enzymatic functions and structures of CD38 and horologes // Chem. Immunol. - 2000. - Vol .75. - Р. 39-59.
9 Wall K.A., Kilis M., Komett J. et al. Inhibition of the intrinsic NAD+ glycohydrolase activity of CD38 by carbocyclic NAD analogues // Biochem. 1. -1998. - Vol. 335. - P. 631-636.
