CC BY
1
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Экспериментальная онкология
синтеза IL10. При анализе обогащения среди высоко-экспрессируемых генов в ткани ПРГШ после протонного облучения были активированы процессы ороговения и биологического окисления. Обращает на себя внимание преобладающее количество подавленных сигнальных путей над активированными.
Заключение: Подавленные сигнальные пути соответствуют нормальному функциональному состоянию клеток. Очевидно, что клетки ткани опухоли в месте облучения готовятся к апоптозу и, вероятно, это объясняет тот факт, что большинство из обнаруженных путей подавлены, а не активированы.
ВЛИЯНИЕ МЕТАБОЛИТОВ РАЗНЫХ ШТАММОВ E. COLI НА МИГРАЦИОННУЮ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА
Н.И. Игнатова, М.И. Пряжникова, И.Н. Дружкова, М.В. Ширманова
Место работы: ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
Эл. почта: n.i.evteeva@gmail.com
Цель: Оценить миграционную активность линий КРР под влиянием метаболитов различных штаммов E. coli. Материалы и методы: Материалом для исследования послужили линии КРР НСТ116, НТ29, SW480, SW837, а также метаболиты различных штаммов E. coli, в том числе, представители нормобиоты и полученные от пациентов с КРР. Линии КРР были охарактеризованы по морфологии, экспрессии Е-кадгерина, исходному уровню миграционной активности. Для получения метаболитов бактерии культивировали в жидкой среде ДМЕМ в течение 24ч, затем фильтровали и использовали для экспериментов в разведении 1:1,5. Воздействие метаболитов проводили на моделях 2D культуры и сфероидов (3D). Пролиферацию оценивали по измерению площади сфероидов. Миграцию оценивали путем измерения зоны мигрирующих из сфероида клеток и в эксперименте «заживление раны». Для определения молекулярных изменений в клетках КРР под действием метаболитов было проведено иммуно-цитохимическое исследование экспрессии E-кадгерина. Полученные данные анализировали с помощью методов непараметрической статистики в программе Statistica 10.0. Результаты: Линии КРР отличались по уровню экспрессии Е-кадгерина и исходному уровню миграционной активности. Наименее чувствительными к действиям метаболитов оказались линии НТ29 и SW837, их исходный уровень миграции был низким и не изменился в эксперименте. В то время каклинии НСТ116 и SW480 показали увеличение мобильности под действием метаболитов опухоль-ассоциированных штаммов E. coli. Показано статистически значимое увеличение миграции клеток КРР в присутствии
метаболитов бактерий кишечной флоры по сравнению с контролем (p < 0,05). По сравнению с пробиотическими штаммами метаболиты бактерий, полученных от пациентов, активнее стимулировали миграцию КРР. Заключение: Метаболиты представителей микробиома кишечника онкобольных могут усиливать миграционную активность клеток КРР, однако вытеснение агрессивных штаммов пробиотическими может быть использовано при поддерживающей терапии в послеоперационный период и в процессе химиотерапии. Исследование выполнено при поддержке РНФ 23-74-00045.
РОЛЬ ДЛИННЫХ НЕКОДИРУЮЩИХ РНК В ФОРМИРОВАНИИ УСТОЙЧИВОСТИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК К ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МАКРОФАГОВ
О.В. Ковалева, П.А. Подлесная, М.А. Сорокин, А.Н. Грачев
Место работы: ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия Эл. почта: ovkovaleva@gmail.com
Цель: Целью данного исследования является изучение роли длинных некодирующих РНК (днРНК) в формировании устойчивости опухолевых клеток различных нозологий к цитотоксической активности макрофагов. Материалы и методы: В качестве биологической модели использовали производные клеточных линий рака легкого (H1975, H292), рака предстательной железы (DU145 и РС3) и рака молочной железы (SKBR3), устойчивые к цитотоксической активности макрофагов, полученные ранее в лаборатории. Приготовление кДНК библиотек и секвенирование проводили на платформе Illumina HiSeq 2000 в соответствии с протоколами Illumina для RNA-seq. Функциональная аннотация генов проводилась с использованием пакета R Homo. sapiens, Team BC (2015) и базы данных Ensembl. Анализ насыщенности метаболических путей проводили для достоверно дифференциально экс-прессирующихся генов с использованием пакета R fgsea. Функциональная аннотация дифференциально экспрес-сирующихся генов была проведена с использованием базы данных кластеров ортологичных групп генов (COG). Результаты: В результате секвенирования транскриптома устойчивых производных клеточных линий Н1975 и РС3 были выявлены 7днРНК с достоверной дифференциальной экспрессией по отношению к контрольным клеткам. Экспрессия днРНК LINC01508 и OLMALINC понижалась относительно контроля, в то время как экспрессия PSMB8-AS1, MBNL1-AS1, LCAL1, IGFL2-AS1 и LINC02301 повышалась. Для выявления универсальных механизмов приобретения устойчивости опухолевых клеток к цитотоксической активности макрофагов экспрессия данных днРНК была исследована в опухолевых клетках различных нозологий.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11VII ШГРЕСС 2D23 АЛ I II
Экспериментальная онкология
Экспрессия днРНК IGFL2-AS1 и MBNL-AS1 повышалась во всех исследованных клеточных линиях, за исключением Н292, в которой было выявлено снижение ее экспрессии. В свою очередь LCAL1 и OLMALINC были подвержены негативной регуляции во всех исследуемых клеточных моделях, кроме SKBR3. Для днРНК □ N^2301 и □ N^1508 полученные результаты оказались противоречивыми. Отдельно стоит отметить днРНК PSMB8-AS1, для которой наблюдалось повышение экспрессии во всех исследованных устойчивых производных, что говорит о наличии универсальных механизмов регуляции приобретения устойчивости. Заключение: Однонаправленное изменение экспрессии изученных днРНК в устойчивых клетках различных нозо-логий может указывать на их значимую регуляторную роль при формировании устойчивости к цитотоксической активности макрофагов. Необходимо дальнейшее изучение влияния данных днРНК на опухолевый фенотип, так как это позволит повысить эффективность иммунотерапии, основанной на стимуляции цитотоксической активности макрофагов.
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22-15-00291, https://rscf.ru/project/ 22-15-00291.
АЛКАЛИЗАЦИЯ МИКРООКРУЖЕНИЯ ОПУХОЛИ: МНОГООБЕЩАЮЩАЯ СТРАТЕГИЯ В ПАЛЛИАТИВНОМ ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО АСЦИТА
A.А. Богданов, Ан.А. Богданов, В.С. Бурдаков, Н.А. Верлов,
B.М. Моисеенко
Место работы: ГБУЗ «Санкт-Петербургский клинический научно-практический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический) им. Н.П. Напалкова», Санкт-Петербург, Россия Эл. почта: a.bogdanov@oncocentre.ru
Цель: Закисленное микроокружение опухоли является одним изпризнаков рака и способствует прогрессированию и устойчивости к лечению. Падение значения рН микроокружения связано с метаболическим перепрограммированием клеток опухоли и использованием ими гликолиза в качестве основного пути синтеза АТФ, что приводит к образованию молочной кислоты и ее выбросу во внеклеточное пространство. Подщелачивание опухоли буферными растворами, например, гидрокарбоната натрия (NaHCO3), может быть многообещающей противоопухолевой стратегией и многочисленные предклинические исследования продемонстрировали противоопухолевые и антиметастатические эффекты перорального применения NaHCO3. Однако вопрос олокально изолированном или системном применении NaHCO3 в терапии рака остается неясным несмотря на то, что буферная терапия не препятствует стандартным методам лечения и может быть использо-
вана в комбинации для повышения эффективности. Более того, при некоторых проявлениях опухолевого процесса, например, злокачественном асците, клиницисты могли бы быстро перевести изолированное применение NaHCO3 из доклинических исследований в клинику. Целью настоящей работы являлось получение данных о противоопухолевой эффективности процедуры внутрибрюшин-ной перфузии щелочным раствором NaHCO3 при злокачественном асците.
Материалы и методы: Мы впервые применили процедуру внутрибрюшинной перфузии раствором №НС03/хлорида натрия (NaCl) у мышей ICR (CD-1) сасцитной карциномой Эрлиха через неделю после инъекции опухолевых клеток (12х105). Процедура перфузии состояла их следующих этапов: эвакуация асцита, двукратное внутрибрюшинное введение 10 (2x5) мл 0,9% раствора NaCl (рН ~5,5, группа рН-, n = 14) или 10 мл 1% раствора NaHCO3 — 0,675% раствора NaCl (рН ~ 8,2, группа рН + , n =14) с 10-минутной инкубацией и последующей эвакуацией,внутрибрюшинное промывание 5 мл 0,9% раствора NaCl. Мыши контрольной группы (n = 14) были интактными. Результаты: Измеренные значения pH асцита составили 6,9 ± 0,1 во всех группах. Проточная цитометрия показала, что способность к пролиферции карциномы Эрлиха была снижена в группе pH+ на 11 день после процедуры перфузии. Процент апоптотических и мертвых клеток был одинаковым во всех группах. Однако существовала разница в процентном соотношении клеток в G2/M, G0/G1 и S-фазах: 24,1 ±3,1%, 30,6 ±3,5%, 45,3 ±5,4% в группе pH+против 43,6 ±7,1%, 20,9 ±3,4%, 35,5 ±9,5% в группе pH- соответственно. Анализ выживаемости показал, что в группе pH+ медиана выживаемости мышей после инъекции опухолевых клеток составляла 30 дней, что значительно отличалось от медианы выживаемости 18 дней в группе pH- и 14 дней в контрольной группе (p < 0,05). Заключение: Внутрибрюшинная перфузия щелочным раствором NaHCO3 у мышей с асцитной формой карциномы Эрлиха приводит к значимому увеличению медианы выживаемости. Можно предположить, что такое применение NaHCO3 может быть эффективной альтернативой лапаро-центезу или дополнением к химиотерапии при паллиативном лечении злокачественного асцита. Работа выполнена в рамках государственного задания Комитета по здравоохранению Санкт-Петербурга для ГБУЗ «Санкт-Петербургский клинический научно-практический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический) имени Н.П. Напалкова».
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
