CC BY
30
Проблемы здоровья и экологии
62
sis / J. C. Barton [et al.] // Blood Cells Mol. Dis. — 1997. — Vol. 23. — P. 135-145.
8. Deugnier, Y. Pathology ofhepatic iron overload /Y. Deugnier,
B. Turlin // World J. Gastroenterol.— 2007. — Vol. 13, N 35. — P. 4755-4760.
9. Frequency of primary iron overload and HFE gene mutations (C282Y, H63D and S65C) in chronic liver disease patients in north India / B. K. Dhillon [et al.] // World J. Gastroenterol. — 2007. — Vol. 13, N 21. — P. 2956-2959.
10. Harrison-Findik, D. D. Role of alcohol in the regulation of iron metabolism / D. D. Harrison-Findik // World J. Gastroenterol. — 2007. — Vol. 13, N 37. — P. 4925-4930.
11. Iron overload and cofactors with special reference to alcohol, hepatitis C virus infection and steatosis/insulin resistance / Y. Kohgo [et al.] // World J. Gastroenterol. — 2007. — Vol. 13, N 35. — P. 4699^706.
12. Liver iron accumulation in patients with chronic active hepatitis C: prevalence and role of hemochromatosis gene mutations and relationship with hepatic histological lesions / C. Hezode [et al.] // J. Hepatology. — 1999. — Vol. 31. — P. 979-984.
13. Piperno, A. Classification and diagnosis of iron overload / A. Piperno // Haematologica. — 1998. — Vol. 83. — P. 447^55.
14. Relative contribution of iron genes, dysmetabolism and hepatitis C virus (HCV) in the pathogenesis of altered iron regulation in HCV chronic hepatitis / L. Valenti [et al.] // Haematologica. — 2007. — Vol. 92. — P. 1037-1042.
15. Sebastiani, G. HFE gene in primary and secondary hepatic iron overload / G. Sebastiani, A. P. Walker // World J. Gastroenterol. — 2007. — Vol. 13, N 35. — P. 4673^689.
Поступила 01.04.2008
УДК 615.277:616-002
РОЛЬ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА В ПОВРЕЖДЕНИИ ГЕПАТОЦИТОВ ПРИ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССАХ
О. Л. Палковский
Гомельский государственный медицинский университет
При инфекционно-воспалительной патологии наблюдается повышение активности свободнорадикальных процессов. Помимо активных форм кислорода в окислительных процессах участвуют также и метаболиты оксида азота, образование которых зависит от перекисных процессов. В работе изучается выраженность свободнорадикальных процессов при инфекционно-воспалительной патологии и изменения некоторых параметров гомеостаза на фоне окислительного стресса. Исследование показало наличие биохимических признаков повреждения клеток печени на фоне инфекционно-воспалителной патологии, непосредственно не затрагивающей печень.
Ключевые слова: активные формы кислорода, оксид азота, инфекционно-воспалительные процессы, гомеостаз, гепатоциты.
ROLE OF ACTIVE FORMS OF OXYGEN IN DAMAGE HEPATOCYTES AT INFECTIOUS-INFLAMMATORY PROCESSES
O. L. Palkovsky Gomel State Medical University
At an infectious-inflammatory pathology increase of activity free-radical processes is observed. Besides active forms of oxygen in oxidizing processes participate as well metabolites of oxide nitrogen which formation depends from перекисных processes. In work expressiveness free-radical processes is investigated at an infectious-inflammatory pathology and changes of some parameters of a homeostasis on a background of oxidizing stress. Research has shown presence of biochemical attributes of damage of cells of a liver, on a background infectious-inflammatory to a pathology which are directly not mentioning a liver.
Key words: active forms of oxygen, oxide nitrogen, infectious-inflammatory processes, a homeostasis, hepatocytes.
В случае тяжелой инфекционно-воспалительной патологии ряд процессов приводит к так называемой «метаболической анархии» [1, 2]. Эндотоксины Гр-отрицательных и комплекс пепти-догликан-тейхоевая кислота Гр-положительных микроорганизмов активируют множество биологических систем: кининовую, систему коагуляции, клеток периферической крови (нейтрофилы, эозинофилы, моноциты), эндотелио-
циты. «Метаболическая анархия» проявляется повышением уровня лактата, общих липосахаридов, простациклинов, ростом активности циклооксигеназы, коагулопатией, низким уровнем циркулирующих антител. Стимуляция фагоцитов вызывает высвобождение активных форм кислорода, усиление свободнорадикальных процессов, в частности, перекисного окисления липидов [3, 4, 5]. Взаимодействие NO с активны-
Проблемы здоровья и экологии
63
ми формами кислорода носит сложный характер. Прооксидантное действие оксида азота связано с его способностью реагировать с супероксидным анион-радикалом О2и образовывать пероксинитрит: NO+O2^ONOO.
Скорость образования пероксинитрита может доходить до 0,11 нмоль/106 клеток в минуту, скорость накопления при этом нитрата и нитрита составляет 0,1 и 0,001 нмоль/106 клеток в минуту соответственно. Пероксинитрит при физиологических значениях рН живет 1-2 секунды, оказывая сильнейшее окислительное действие на внутриклеточные мишени, вызывая гибель клеток и тканей по типу апоптоза и некроза. Таким образом, образование пероксинитрита является связующим звеном между оксидом азота и системой образования в клетках и тканях активных форм кислорода [6].
Целью данной работы являлось определение выраженности свободнорадикальных процессов при инфекционно-воспалительной патологии и выявление изменений некоторых параметров гомеостаза на фоне окислительного стресса.
Материал и методы
Первая контрольная группа (n = 28) включала пациентов с хирургической патологией, не носящей инфекционно-септического характера (хронический калькулезный холецистит, оперированные в плановом порядке), средний возраст (Ме) — 43,0 лет (интерквантильный размах от 33 лет до 49 лет), индекс массы тела (Ме) — 22,5 (интерквантильный размах от 19,5 до 24,8). Первую исследуемую группу составили пациенты с инфекционно-воспалительной патологией (n = 26) с хроническим калькулез-ным холециститом или флегмонозным аппендицитом, осложнившимся абсцессом в брюшной полости, средний возраст (Ме) — 40,5 лет (интерквантильный размах от 32 лет до 51 года), индекс массы тела (Ме) — 22,5 (интерквантильный размах от 20,9 до 23,8) В 1 исследуемой группе сумма баллов по шкале APACHE-II (Acute Physiology And Chronic Health Evaluation) составила 12-14 баллов (n = 26).
Вторую контрольную группу составили пациенты с ЧМТ средней степени тяжести с оценкой степени тяжести состояния при поступлении по шкале APACHE-II 10-12 баллов
Таблица 1
(n = 24), средний возраст (Ме) — 41,5 лет (интерквантильный размах от 35 лет до 55 лет), индекс массы тела (Ме) — 24,8 (интерквантильный размах от 21,5 до 24,0). Вторую исследуемую группу составили пациенты с ЧМТ средней степени тяжести и внебольничными пневмониями с оценкой степени тяжести состояния при поступлении по шкале APACHE-II 12-14, средний возраст (Ме) — 47,5 лет (интерквантильный размах от 40 лет до 51 года), индекс массы тела (Ме) — 23,5 (интерквантильный размах от 20,5 до 24,6). Группы статистически не различались по возрасту и индексу массы тела (р > 0,05). Определяли уровень активности свободнорадикальных процессов по общей антиоксидантной активность плазмы крови [7]. Активность метаболизма оксида азота оценивали по концентрации нитратионов [8]. Определение лабораторных показателей (АЧТВ, протромбиновый индекс, концентрация фибриногена, АСТ, АЛТ, концентрация фракций билирубина, альбумина крови) проводилось общепринятыми методами. Статистическая обработка полученных данных проводилась пакетом «Statistica» 6.0, с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни, определение медианы (Ме), интерквантильного размаха (значения 25-го и 75-го процентная).
Результаты и обсуждения
Показатели общей антиоксидантной активности плазмы крови пациентов контрольных и исследуемых групп приведены в таблице 1. Об уровне активации свободнорадикальных реакций при инфекционно-воспалительных процессах можно судить, рассматривая показатели общей антиоксидантной активности плазмы крови в исследуемых группах на начальном этапе. Исходный уровень антиоксидантной защиты в 1 исследуемой группе составлял в среднем около 7,9% от значений в контрольной группе (р = 0,002), во 2 исследуемой группе — в среднем 27,4% от контроля (р = 0,002). В последующем интенсивность перекисного окисления снизилась, но не достигла значений контрольных групп и общая антиоксидантная активность на 3 сутки в 1 и 2 исследуемых группах составила в среднем 30,4% (р < 0,001) и 60,2% (р < 0,001) от контроля соответственно.
— Общая антиоксидантная активность плазмы крови
Группа Антиоксидантная активность (ед. акт.) Ме (25-й и 75-й процентиль)
исходный уровень 1 сутки 3 сутки
1 контрольная 7,85 (7,3-8,3) 9,15 (8,7-9,6) 17,25 (16,4-18,2)
1 исследуемая 0,65* (0,4-1,2) 2,2* (1,2-3,6) 4,85* (3,9-7,5)
2 контрольная 3,95 (3,7-4,5) 5,45 (4,8-5,8) 8,75 (8,5-10,4)
2 исследуемая 1,4* (0,8-1,8) 3,5* (1,9—5,1) 5,7* (4,1-7,2)
* р < 0,05 по сравнению с контролем
Проблемы здоровья и экологии
64
Учитывая роль оксида азота в патогенезе инфекционно-воспалительных процессов и возможность взаимодействия с кислородными радикалами с образованием высокореактогенных активных форм кислорода, было проведено определение продуктов метаболизма оксида азота (таблица 2). Исходный уровень концентрации продуктов метаболизма оксида азота в 1 исследуемой группе превышал показатели
1 контрольной группы в среднем на 36,6% (р < 0,001), во 2 исследуемой группе — на 32,8% (р < 0,001) по сравнению с контролем. В последующем наблюдалась положительная динамика с уменьшением концентрации нитрат-ионов, однако превышение значений на 3 сутки по сравнению с 1 и 2 контрольными группами составляло в среднем 38,7% (р < 0,001) и 31,2% (р < 0,001) соответственно.
Таблица 2 — Активность метаболизма оксида азота
Группа Концентрация нитрат-ионов (мкмоль/л) Ме (25-й и 75-й процентиль)
исходный уровень 1 сутки 3 сутки
1 контрольная 70,7 (68,4-72,5) 81,9 (72,7-87,5) 53,9 (49,1-61,5)
1 исследуемая 106,05* (91,8-121,5) 102,7* (84,9-112,6) 83,9* (68,6-94,1)
2 контрольная 80,9 (72,5-85,7) 74,25 (64,6-78,6) 64,0 (53,5-68,3)
2 исследуемая 122,95* (98,4-129,8) 100,1* (91,6-118,9) 91,6* (81,2-99,6)
* р < 0,05 по сравнению с контролем
При изучении уровня аланинаминтрансфе-разы отмечается значительное превышение концентрации АЛТ в 1 и 2 исследуемых группах по сравнению с контрольными группами: в 1 — в среднем на 53,6% (р < 0,001), во 2 — на 36,7% (р < 0,001). В дальнейшем отмечалось снижение концентрации фермента, но на 3 сутки активность АЛТ у пациентов с инфекционно-воспалительной патологией оставалась
достаточно высокой по сравнению с контрольными группами: в 1 исследуемой группе активность АЛТ превышала показатели контрольной группы в среднем на 53,4% (р < 0,001), во 2 исследуемой группе — на 34,1% (р<0,001). Между показателями общей антиоксидантной защиты и активностью АЛТ в контрольных и исследуемых группах имелась сильная обратная корреляционная зависимость (г = -0,8872, р < 0,001).
Таблица 3 — Динамика биохимических маркеров повреждения гепатоцитов
Параметры 1 контрольная группа Ме (25-й и 75-й процентиль) 1 исследуемая группа Ме (25-й и 75-й процентиль) 2 контрольная группа Ме (25-й и 75-й процентиль) 2 исследуемая группа Ме (25-й и 75-й процентиль)
АЛТ (Ед/л) Исходный уровень 23,1 (21,7-26,8) 52,3* (48,2-54,2) 30,2 (28,7-32,9) 48,8* (45,5-51,3)
1 сутки 20,5 (18,7-25,1) 44,6* (40,9-48,7) 28,3 (27,1-29,9) 40,6* (38,7-43,6)
3 сутки 17,1 (15,3-22,1) 39,7* (36,5-41,9) 23,8 (22,1-26,5) 37,9* (35,9-42,1)
АСТ (Ед/л) Исходный уровень 31,6 (29,6-32,8) 68,5* (38,6-78,5) 35,4 (33,1-37,4) 55,7* (51,2-60,5)
1 сутки 29,8 (28,1-31,8) 64,4* (34,1-72,5) 33,2 (30,2-36,1) 51,6* (47,9-57,6)
3 сутки 27,8 (26,4-29,9) 59,9* (32,1-65,9) 31,4 (28,8-32,8) 47,5* (43,6-53,5)
Билирубин общий (мкмоль/л) Исходный уровень 12,3 (9,8-13,3)) 19,0* (10,95-21,8) 8,4 (7,6-11,3) 15,8* (15,2-18,95)
1 сутки 10,3 (8,4-12,2) 15,2* (8,9-19,1) 8,0 (6,7-10,3) 14,4* (12,5-16,7)
3 сутки 8,7 (7,1-9,9) 12,8 (6,7-16,8) 7,0 (5,8-9,1) 13,1* (11,6-14,6)
* р < 0,05 по сравнению с контролем.
Активность аспартатаминотрансферазы у больных контрольных и исследуемых групп дает схожую картину, как и в предыдущем случае с аланинаминотрансферазой. Исходные уровни активности АСТ в исследуемых группах значительно превосходят показатели кон-
трольных групп: в 1 исследуемой группе в среднем на 49,4% (р = 0,002), во 2 — на 40,4% (р < 0,001). На последующих этапах определения активность АСТ в группах снижалась, но по сравнению с контрольными группами в исследуемых цифры оставались достаточно вы-
Проблемы здоровья и экологии
65
сокими: на 3 сутки в 1 исследуемой группе активность АСТ превышала значения контрольной группы в среднем на 46,8% (р = 0,01), во 2 — на 38,7% (р < 0,001). При исследовании зависимости между общей антиоксидантной активностью и концентрацией аспартатами-нотрансферазы крови также выявлена выраженная обратная взаимосвязь с коэффициентом корреляции г = -0,7221, р < 0,001. При оценке концентрации общего билирубина выявлено некоторое превышение значений в исследуемых группах по сравнению с контролем. Исходный уровень концентрации общего билирубина в 1 исследуемой группе в среднем на 38,7% (р = 0,04) превышал его концентрацию в контроле, во 2 исследуемой — на 43,1% (р < 0,001). В последующем наблюдалась тенденция к снижению концентрации общего билирубина во всех группах, на 3 сутки его концентрация во 2 исследуемой группе была в среднем на 42,2% выше, чем в контрольной группе (р = 0,001), в 1 исследуемой группе разница статистически незначима по сравнению с контрольной группой (р = 0,0821). Изучение корреляционной связи между параметрами общей антиоксидантной активности и концентрацией общего билирубина выявило наличие невыраженной обратной связи с коэффициентом корреляции г = -0,4745 (р < 0,001).
Выводы
1. Исследование показало наличие биохимических признаков повреждения клеток печени (усиление активности аминотрансфераз, повышение концентрации общего билирубина) на фоне инфекционно-септической патологии, непосредственно не затрагивающей печень (отсутствие гепатита, цирроза печени, клинических признаков печеночной недостаточности).
2. Установлено наличие сильной обратной связи между общей антиоксидантной активностью плазмы крови и уровнем трансаминаз (ала-нинаминотрансферазы и аспартатаминотрансфе-разы) в течение инфекционно-воспалительной
патологии (абсцессы брюшной полости, внегоспитальные пневмонии).
3. Невыраженная связь между интенсивностью антиоксидантной защиты и концентрацией общего билирубина может быть объяснена двойственностью данного показателя пигментного обмена: с одной стороны, он характеризует степень повреждения гепатоцитов и их метаболическую (детоксикационную) функцию, с другой — билирубин сам по себе обладает антиоксидантной активностью, что и приводит к изменению линейности корреляционной взаимосвязи.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Владимиров // Вестник РАМН. — 1998. — № 7. — С. 43-51.
2. Зенков, Н. К. Окислительный стресс / Н. К. Зенков, В. З. Ланкин, Е. Б. Земщиков, под. ред. Н. К. Зенкова. — М., 2001. — 343 с.
3. Некоторые механизмы депримирующего влияния бактериального эндотоксина на метаболизм лекарственных веществ / А. А. Пентюк [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2001. — Т. 64, № 5. — С. 56-59.
4. Дудник, Л. Б. Пероксидное окисление липидов и его связь с изменением состава и антиокислительных свойств липидов при коматогенных формах острого вирусного гепатита В / Л. Б. Дудник // Вопросы медицинской химии. — 2000. — Т. 46, № 6. — С. 597-609.
5. Солонина, Н. В. Изучение гепатопротекторной активности некоторых антиоксидантов при экспериментальной свинцовой интоксикации / Н. В. Солонина// Сбор. тезисов 2-го Съезда Рос. науч. общ. фармакологов. — 2003. — С. 183-187.
6. Реутов В. П. Медико-биологические аспекты циклов оксида азота и супероксидного анион-радикала // Вестник РАМН. — 2000. — № 3. — С. 35-40.
7. Сирота, Т. В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности суперооксиддисмутазы / Т. В. Сирота // Вопросы мед. химии. — 1999. — № 3. — С. 263-268.
8. Борисюк, М. В. Модифицированный метод определения нитритов и нитратов в биологических средах / М. В. Борисюк,
О. В. Борисова // Здравоохранение. — 1999. — № 6. — С. 47-49.
Поступила 19.02.2008
УДК 616.24-002.5:]616.98:578.828HIV
МЕДИКО-СОЦИАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ С ВИЧ-АССОЦИИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ
В. Н. Бондаренко
Гомельский государственный медицинский университет
В работе изучен социальный и медицинский статус больных с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом, выделены группы риска развития двойной инфекции. В них входят одинокие молодые мужчины 30-40 лет, со средним образованием, проживающие в городе, инъекционные наркоманы, злоупотребляющие алкоголем, находившиеся в ИТУ, больные хроническим вирусным гепатитом С.
Ключевые слова: ВИЧ-инфекция, ВИЧ-ассоциированный туберкулез, туберкулез, факторы риска.
