CC BY
15
I
Орипнальы дозддження
Original Researches
Травма
УДК616.72-002.77-085-092:547.857]-07-092 DOI: https://doi.Org/10.22141/1608-1706.6.21.2020.223884
Синяченко О.В., Ермолаева М.В., AAieBa Т.Ю., Лiвенцова К.В., Верзлов С.М., Синяченко Т.Ю.
Донецький нац/ональний медичний ун1верситет, м. Лиман, Укра/на
PiBeHb молекул середньо! маси в ^HOBi^brnn рiдинi хворих на ревматоТдний артрит
Резюме. Актуальнсть. Завдяки прямому контакту синовИ з хрящем, поверхнею юстки i синовюцитами до-сл1д>кення суглобового лквору при ревмато/дному артрит (РА) мае велике дагностичне значення, причо-му змни показниюв чтко корелюють i3 даними морфолопчного дослдкення уражених суглобових тканин. У синовИ хворих на РА накопичуються блков'! речовини р'зно/' молекулярно/ маси i ферменти, що беруть участь у процесах деструкцП хряща, сухожиль та зв'язок. Разом i3 тим наДйних диференцально-Дагнос-тичних бiомaркерiв синов'юльно/' рдини при патологи сугловв поки не '¡снуе. Мета i задач'1 дослдження: встановити клiнiко-пaтогенетичну значущсть середньомолекулярних сполукр'знихфрак^й у суглобовй рi-дин хворих на РА, '¡х зв'язок iз порушеннями фiзико-хiмiчного характеру синовИ i зi складом у нй поверхнево-активних речовин (сурфактанти). Матерали та методи. Синов'юльну рдину, отриману з кол/'нних, л/'ктьових
i плечових сугловв, вивчали у 21 хворого на РА (середнй вк становив 50 роюв, спвв'дношення чоловiкiв i жiнок — 1: 2), серед якихпом'рний та високий ступнь активност захворювання встановлено у вах випад-
ках, III i IV стадИ патолопчного процесу — у 61,9 %, позасуглобова форма хвороби — у 61,9 %, системний остеопороз — у 95,2 %, серопозитивнсть за ревмато/дним фактором (RF) — у 90,5 %, за антитлами до ци-кл/'чного цитрул/'нового пептиду (aCCP) — у 95,2 %. Для визначення молекул середньо/ маси в синов'юль-ному лiкворi та сироватц кров'1 застосовували скриннговий метод з осадженням бiлкiв трихлороцтовою кислотою та визначенням спектр'в поглинання свтла кислоторозчинною фрак^ею. Бiлковi i неблковi азо-тист сурфактанти вивчали за допомогою боана^затора Olympus AU640 (Японя), а м'жфазну тензiометрiю
з п/'драхунком сп'вв'дношення поверхневого натягу при несюнченому час життя поверхн для високомоле-кулярних речовин i при чаа, що дор'внюе 0,01 с, для низькомолекулярних сполук (STm/001 %) здiйснювaли з використанням комп'ютерного апарата ADSA-Toronto (Нмеччина, Канада). Результати. !нтегральний склад середньомолекулярних сполук у синовИ залежить вд сироваткових р'вн'в RF i aCCP, а з темпами прогре-сування артикулярного синдрому пов'язан показники нуклеотидно/ (NF) та хроматофорно/ фрак^й (CF) молекул середньо/ маси, як разом з ам/'нопептидною (AF) й пептидною фрак^ями (PF) визначають високу активнсть захворювання, кiстково-деструктивнi змни сугловв (AF), мнеральну щiльнiсть юстки (AF, PF, CF), формування остеоузур (AF) i внутршньосуглобових хондромних тл (NF, CF), прямо корелюють iз вм/'стом у суглобовомулiкворi iмуноглобулiну G (NF, CF), причому CFпрямо сп'вв'дноситься з наявнстю артрокальци-налв i тл Гоффа. Висновки. При РА молекули середньо/ маси р'зних фрак^й у синов'юльнй рiдини беруть участь упатогенетичнихпобудовахзахворювання, залежать вд клiнiчних, рентгенолог'чнихiсонограф'чних ознак захворювання, можуть бути використан для прогнозування перевгу патолопчного процесу. Ключовi слова: артритревмато/'дний; перебiг; патогенез; синов'я; молекули середньо/ маси
Вступ
^HOBiH — це багата бтком pi3Hoi' молекулярно! маси рщина, що продукуеться в артикулярну порож-нину клгтинами суглобово! мембрани [1, 2], а завдяки прямому контакту рщини з хрящем, поверхнями ыстки й синовюцитами дослщження цього лшвору при ревмато!дному артрит (РА) мае велике дiагнос-
тичне значення [3—5]. Змши показниыв суглобово! рщини чгтко корелюють i3 даними морфолопчного дослщження уражених суглобових тканин [6, 7] i 3i ступенем апоптозу штраартикулярних клгтин [8]. Разом i3 тим надшних диференщально^агностичних бiомаркерiв синови при патологи суглобiв поки не ю-нуе [9-11].
© «Травма» / «Травма» / «Trauma» («Travma»), 2020
© Видавець Заславський О.Ю. / Издатель Заславский А.Ю. / Publisher Zaslavsky O.Yu., 2020
Для кореспонденци: Синяченко Олег Володимирович, доктор медичних наук, професор, член-кореспондент НАМН Укра'1'ни, Донецький нацюнальний медичний ушверситет, вул. Привок-зальна, 27, м. Лиман, Донецька обл., 84404, Укра'на, е-mail: synyachenko@ukr.net; контактний тел.: +38 (050) 471-47-58.
For correspondence: Oleh Syniachenko, Corresponding member of the NAMS of Ukraine, MD, PhD, Professor, Donetsk National Medical University, Privokzalna st., 27, Lyman, Donetsk region, 84404,Ukraine; e-mail: synyachenko@ukr.net; phone: +38 (050) 471-47-58.
Бюмаркерами артритiв e píbhí в синовiальнiй pi-динi понад 300 метаболтв амiнокислотного, бшко-вого, лiпiдного й вуглеводного походження, у тому чи^ середньомолекулярних сполук [12—14], але останш вивчено зовам недостатньо, а даш супереч-ливi [15].
Мета i задачi дослщження: встановити клшшэ-патогенетичну значущють молекул середньо!' маси (МСМ) piзних фpакцiй у суглобовiй рщиш хворих на РА, !'х зв'язок i3 порушеннями фiзико-хiмiчного характеру синовй' i 3i складом у не!' поверхнево-активних ре-човин (сурфактанти).
Матерiали та методи
Обстежено 21 хворого на РА вшом 22—65 ро-кiв (у середньому — 50,10 ± 2,13 року), серед яких сшввщношення чоловiкiв i жшок становило 1 : 2. Тривалють вiд пеpшоi манiфестацii захворювання становила 2—25 рошв (у середньому —8,50 ± 1,48 року). Сеpопозитивнiсть РА за ревмато'дним фактором (RF) установлена в 90,5 % вщ числа хворих, а за антитшами до цикшчного цитpулiнового пептиду (аССР) — у 95,2 %; I—III ступеш загально!' актив-ностi РА (AAG) констатованi вщповщно у 23,8; 33,3 i 42,9 % випадшв, а III та IV стади патологiчного процесу (ARS) встановлеш в 61,9 % хворих. Сис-темний остеопороз дiагностований у 95,2 % спосте-режень.
Шдекс активност артриту (DAS) становив 5,50 ± ± 0,25 вiдн.од., iндекс прогресування суглобового синдрому (PAI) — 2,90 ± 0,82 вiдн.од., шдекс Лансбуpi (IL) — 179,90 ± 20,51 бала, iндекс тяжкостi перебпу РА (SAI) — 104,40 ± 5,52 вiдн.од., остеопорозний pентгенологiчний шдекс Барнетта — Нордша (BNI) — 39,20 ± 0,84 х х 102 вiдн.од., мiнеpальна щiльнiсть истки (BMD) — 1,80 ± 0,19 -SD, показник RF у кpовi — 16,20 ± ± 2,73 мМО/мл, аССР — 31,60 ± 3,19 О/мл, С-реактивного протешу (CRP) — 20,60 ± 1,35 мг/л, фь бриногену (FG) — 10,10 ± 0,87 г/л.
При pентгеносоногpафiчному дослiдженнi сугло-бiв епiфiзаpний остеопороз вiдмiчався в 90,5 % спо-стережень, остеокiстоз — у 81,0 %, змши менiскiв — у 71,4 %, субхондральний склероз — у 61,9 %, остеоузу-ри — у 52,4 %, лтаментоз — у 47,6 %, артрокальцинати та исти Бейкера — вщповщно в 42,9 %, штраартику-лярш xондpомнi тiла — у 33,3 %, внутpiшньосуглобовi тiла Гоффа — у 14,3 %, тта ^TOra^i — у 9,5 %, асептич-ний остеонекроз — у 4,8 %. Тендовагшгги вiдзначено в 61,9 % вщ числа обстежених хворих, ентезопати — у 42,9 %, ураження периферично!' нервово!' системи (по-лiнейpопатiя, синдром Гieна — Барре) — у 38,1 %, дип-тальний артерй'т — у 14,3 %.
Уам хворим виконували рентгенолопчне до-слiдження периферичних суглобiв, крижово-клу-бових i хребцевих зчленувань (апарат Multix-Compact-Siеmens, Нiмеччина), ультразвукове обстеження (Envisor-Philips, Нiдеpланди), двох-енергетичну рентгешвську остеоденситометpiю проксимального вiддiлу стегново!' шстки (QDR-
4500-Delphi-Hologic, США). Показник DAS ви-значали за формулою:
DAS = [CRx 0,54) + (J x 0,065) + (lnQ x 0,33) + + 0,224] x 1,072 + 0,94,
де RI — шдекс Рiчi, J — число болюних суглобiв, Q — швидкiсть осщання еритроцитiв. Параметр SAI вира-ховували за формулою:
SAI = Vlix DAS,
а PAI визначали за формулою:
PAI = [(ARS)2 + X] : d,
де X — сума рентгеносонографiчниx ознак РА, d — три-валють клЩчно1 манiфестацiï захворювання.
У синовй' та сироватщ кровi спектрофотометрично («СФ-46», Росiя) дослщжували вмют окремих фракцiй МСМ при довжиш xвилi 238 нм (амiнопептидна фрак-цiя — AF), 254 нм (пептидна — PF), 260 нм (нуклеотид-на — NF) i 280 нм (хроматофорна — CF). Шдраховували показник усереднено!' фракци МСМ (IF) Застосовували скринiнговий метод, заснований на осадженш бiлкiв 10% розчином трихлороцтово!' кислоти з подальшим центрифугуванням i визначенням спектрiв поглинання свила кислоторозчинною фракцieю. За допомогою бю-аналiзатора Olympus AU640 (Японiя) визначали в сиро-ватцi кровi показники RF, CRP i FG, а в синовiальному лiкворi — рiвнi CRP, загального бiлка, iмуноглобулiнiв (Ig) G та М, ß2-мiкроглобулiну, ß2-макроглобулiну й се-чово1 кислоти. З використанням комп'ютерного тензь ометра PAT2-Sinterface (Нiмеччина) у суглобовому лш-ворi дослщжували параметри поверхневого натягу (ST) при чаш життя поверxнi, що дорiвнюe 1 с (ST1) i 100 с (ST100), яи вщображають показники МСМ. 1мунофер-ментним методом визначали вмют у сироватщ кровi аССР (ридер PR2100-Sanofi diagnostic pasteur, Франщя). Пщраховували iндекс iнтегрального ступеня тяжкостi накопичення в суглобах МСМ (II) за формулою:
II = IF : (ST, - ST100).
Статистичну обробку отриманих результат досль джень проведено за допомогою комп'ютерного варь ацiйного, непараметричного, кореляцiйного, одно-(ANOVA) i багатофакторного (ANOVA/MANOVA) дисперсшного аналiзу (програми Microsoft Excel i Statistica StatSoft, США). Оцшювали середш значення (M), ix стандартш похибки (SE) та вiдxилення (SD), коефiцieнти параметрично!' кореляцй' Пiрсона (r) i не-параметрично!' Кендалла (т), критерй' дисперсй' (D), однородной! дисперсй' Брауна — Форсайта (BF), Вткок-сона — Рао (WR) i вщмшностей Стьюдента (t), а також вiрогiднiсть статистичних показникiв (р). Шдраховували стушнь прогнозування пропонованого результату моделi (PPV).
Результати
У хворих на РА показник AF у синовiальнiй рiдинi становив 406,00 ± 4,39 Од/л, PF — 101,20 ± 3,05 Од/л, NF — 38,80 ± 1,32 Од/л, CF — 13,9 ± 1,2 Од/л, IF —
Орипнальы дослiдження / Ог1д1па! РезеагсИез |
139,90 ± 2,23 Од/л, AFs/b — 47,2 ± 1,6 %, PFs/b — 12,90 ± 1,28 %, NFs/b — 14,60 ± 1,21 %, SFs/b — 4,00 ± 0,47 %, ST — 86,20 ± 1,61 %, II — 76,00 ± ± 10,53 вщн.од., IIs/b — 30,90 ± 1,46 %. Як видно з рис. 1, статевий диморфiзм проявлявся бтьшим (на 55,9 %) показником СFs/b у чоловiкiв (1 = 2,13, р = 0,047). За даними багатофакторного ан^зу Вт-коксона — Рао, на штегральний рiвень МСМ у синови хворих на РА впливають серопозитивнiсть захворю-вання за RF (WR = 4,14, р = 0,002) й аССР (WR = 6,29, р < 0,001).
Як свщчить однофакторний дисперсшний аналiз, темпи прогресування суглобового синдрому впливають на параметри NF (D = 13,39, р = 0,011), CF (D = 4,54, р = 0,020), PFs/b ф = 8,72, р = 0,001), NFs/b (D = 3,43, р = 0,029) i IIs/b ф = 19,69, р < 0,001). Зi свого боку, показники AFs/b та IIs/b визначають сту-тнь тяжкостi кютково-деструктивних змiн суглобiв (вщповщно D = 4,05, р = 0,024 i D = 3,64, р = 0,034), рiвнi CF, PFs/b та CFs/b — тяжкють перебiгу артриту (D = 13,45, р = 0,011; D = 7,41, р = 0,033; D = 8,17, р = 0,028), AFs/b — мшеральну щiльнiсть истки ф = 3,87, р = 0,049).
1снуе прямий кореляцiйний зв'язок показника Шр-сона PFs/b з вмютом у кровi RF (г = +0,518, р = 0,016), тодi як вiрогiднi оберненi сшввщношення PF i CF стосуються CRP (вiдповiдно г = —0,513, р = 0,021 i г = —0,471 , р = 0,037), а NF — рiвня сироваткового FG (г = -0,535, р = 0,012).
Обговорення
У суглобовому лiкворi концентрацiя загально-го бтка становила 31,50 ± 1,68 г/л, СКР — 11,70 ± ± 0,93 мг/л, IgG — 17,40 ± 0,26 ммоль/л, IgM — 3,00 ± ± 0,18 ммоль/л, Р2-мк:роглобулшу — 3,8 ± 0,2 нг/мл, а2-макроглобулшу — 1,10 ± 0,06 г/л, сечово! кислоти — 27,30 ± 0,98 мкмоль/л. У хворих на РА вмют у синови МСМ усiх фракцiй прямо корелюе з рiвнем у цш бю-логiчнiй рiдинi високомолекулярного IgG (молекуляр-на маса становить ~150 кД), що вiдображено на рис. 2.
Рисунок 1. Вщмнност показниюв МСМ р!зних фракцй у синовИ хворих на РА чолов!к!в та ж!нок (останн! прийнято за 100 %)
Наведене вище стосуеться AF (г = +0,451, р = 0,040), PF (г = +0,518, р = 0,016), ОТ (г = +0,435, р = 0,049), CF (г = +0,501, р = 0,021), № (г = +0,521, р = 0,015), NFs/b (г = +0,516, р = 0,017), CFs/b (г = +0,525, р = 0,015), Ш/э (г = +0,532, р = 0,013).
У синовiальнiй рщиш хворих на РА накопичуються бiлковi речовини рiзноl молекулярно! маси, яи беруть участь у процесах деструкци хряща, сухожиль i зв'язок [16, 17]. Насамперед у формуванш суглобово! патологи значення надаеться або високо-, або низькомолекуляр-ним сполукам, вмют яких у синови корелюе з рiвнями в сироватщ кровi [18]. На моделях захворювань суглобiв в експериментальних тварин продемонстровано значу-щiсть виключно iнтраартикулярних сполук iз високою молекулярною масою [19]. Палуронова кислота (НА) iз високою молекулярною масою бтьшою мiрою пригш-
| г - 4-0,4508, р >0,0403 |
—>
7 \
/ I
1 у
У /
V г
1 г = 4-0,5184, р = 0,0160 |
/II
/ >
Г
1 1 у 1
/
У у
| г = +0,4353, р = 0,0486 |
1 XI
/ \
7
I У Г
г
= -И),5008, р 0,0208 |
\ж \ \
15 16 17 18 19 20
ДО, ММОЛЬ/Л
ДО, ммоль/л
ДО, ммоль/л
1дС, ммоль/л
Рисунок 2. Прям! кореляц!йн! зв'язки показник'/в П'/рсона в синовИ МСМ р'/зних фракцй ¡з рвнем lgG
чуе локальний синтез прозапальних ферментiв, низь-комолекулярна НА активуе регуляцiю affraKaTa6oni4-них ферментiв (тканиннi iнгiбiтори металопроте!наз 1 i 2) та пригноблюе активнiсть катаболiчноl матриксно! металопроте!нази 3, тодi як дiя НА середньо! маси за-лишаеться невивченою [20].
Дисперсшний аналiз продемонстрував вплив на по-казники в синовiальнiй рщиш NF (D = 2,89, p = 0,047), CF (D = 2,99, p = 0,043), IF (D = 2,86, p = 0,048), NFs/b (D = 3,24, p = 0,035), CFs/b (D = 3,73, p = 0,021) та Ils/b (D = 4,30, p = 0,013). З урахуванням виконаного варiацiйного, дисперсшного i кореляцшного аналь зу зроблено висновок, що мае практичну спрямова-нiсть: рiвень у синовiальному лiкворi хворих на РА IgG > 17 ммоль/л (> M + SD хворих) свщчить про накопи-чення в цш бюлопчно! рiдини МСМ рiзних фракцiй (PPV = 88,2 %).
Ми видтили тi показники МСМ у синови, як! од-ночасно мали в!ропдш дисперсiйнi зв'язки Брауна — Форсайта й кореляцшш Кендалла з рентгеносоногра-Ф!чними ознаками суглобового синдрому. Виявилося, що наявнiсть у хворих на РА артрокальцинатав безпо-середньо впливае на показник CF (BF = 3,97, p = 0,046; т = +0,316, p = 0,045), а жирових тл Гоффа — на рiвень IF (BF = 4,39, p = 0,049; т = +0,379, p = 0,016). 3i сво-го боку, вщ р!вшв в артикулярнш рщиш AFs/b та IIs/b залежить формування остеоузур (вщповщно BF = 9,02, p = 0,007; т = +0,340, p = 0,031 i BF = 5,52, p = 0,030; т = +0,311, p = 0,047), а в!д NFs/b та DFs/b — внутрш-ньосуглобових хондромних тт (BF = 8,45, p = 0,009; т = +0,382, p = 0,014 i BF = 5,84, p = 0,026; т = +0,433, p = 0,008).
Висновки
1нтегральний склад середньомолекулярних сполук у синови залежить вщ сироваткових р1вшв RF та aCCP, а з темпами прогресування артикулярного синдрому пов'язанi показники NF i CF МСМ, яю разом !з AF та PF визначають високу активнiсть захворювання, юст-ково-деструктивнi змши сугло6!в, мiнеральну щть-шсть ыстки, формування остеоузур й внутршньосу-глобових хондромних тл, прямо корелюють !з вмютом у суглобовому лквор1 IgG, причому CF прямо сшввщ-носиться з наявнiстю артрокальцинапв i тл Гоффа.
Конфлжт штереав. Автори заявляють про вщсут-нють конфлшту iнтересiв та власно! фшансово! защ-кавленостi при шдготовщ дано! статл.
Список лiтератури
1. Dotsenko T.G., Shlikova G.I., Teplyakova O.V. The analysis of synovial fluid: clinical significance of derived results. Klin. Lab. Diagn. 2016. 61(8). 478-484. PMID: 30601639.
2. Oliviero F., Galozzi P, Ramonda R., de Oliveira F.L., Schiavon F, Scanu A. et al. Unusual findings in synovial fluid analysis: a review. Ann. Clin. Lab. Sci. 2017. 47(3). 253-259. PMID: 28667024.
3. Awisat A., Slobodin G., Jiries N, Rozenbaum M., Rimar D, Boulman N. et al. Pseudoseptic Arthritis with low sy-
novial fluid glucose in familial mediterranean fever. Isr. Med. Assoc. J. 2017. 19(7). 461-462. PMID: 28786265.
4. Mahendran S.M., Oikonomopoulou K, Diamandis E.P., Chandran V. Synovial fluid proteomics in the pursuit of arthritis mediators: An evolving field of novel biomarker discovery. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 2017. 54(7-8). 495-505. doi: 10.1080/10408363.2017.1408561.
5. Baillet A., Trocme C., Romand X, Nguyen C.M.V., Courtier A, Toussaint B. et al. Calprotectin discriminates septic arthritis from pseudogout and rheumatoid arthritis. Rheumatology. 2019. 58(9). 1644-1648. doi: 10.1093/rheumatology/ kez098.
6. Coiffier G, Ferreyra M, Albert J.D., Stock N, Jolivet-Gougeon A., Perdriger A. et al. Ultrasound-guided synovial biopsy improves diagnosis of septic arthritis in acute arthritis without enough analyzable synovial fluid: a retrospective analysis of 176 arthritis from a French rheumatology department. Clin. Rheumatol. 2018. 37(8). 2241-2249. doi: 10.1007/ s10067-018-4160-9.
7. Manzo A, Bugatti S, Caporali R, Montecucco C. His-topathology of the synovial tissue: perspectives for biomarker development in chronic inflammatory arthritides. Reumatismo. 2018. 70(3). 121-132. doi: 10.4081/reumatismo.2018.1057.
8. Raza K, Scheel-Toellner D., Lee C.Y., Pilling D, Cur-now S.J., Falciani F. et al. Synovial fluid leukocyte apoptosis is inhibited in patients with very early rheumatoid arthritis. Arthritis Res. Ther. 2016. 8(4). 120. doi: 10.1186/ar2009.
9. Hugle T., KovacsH, Heijnen I.A., Daikeler T, Baisch U, Hicks J.M. et al. Synovial fluid metabolomics in different forms of arthritis assessed by nuclear magnetic resonance spectroscopy. Clin. Exp. Rheumatol. 2012. 30(2). 240-245. PMID: 22410098.
10. Zamani B, Jamali R., Ehteram H. Synovial fluid adenosine deaminase and high-sensitivity C-reactive protein activity in differentiating monoarthritis. Rheumatol. Int. 2012. 32(1). 183-188. doi: 10.1007/s00296-010-1602-3.
11. Peffers M.J., SmagulA., Anderson J.R.. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Rev. Proteomics. 2019. 16(4). 287-302. doi: 10.1080/14789450.2019.1578214.
12. Talabot-Ayer D, McKee T., Gindre P., Bas S, Baeten D.L., Gabay C. et al. Distinct serum and synovial fluid interleukin (IL)-33 levels in rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis and osteoarthritis. Joint Bone Spine. 2012. 79(1). 32-37. doi: 10.1016/j.jbspin.2011.02.011.
13. Adams S.B., Nettles D.L., Jones L.C., Miller S.D., Guyton G.P., Schon L.C. Inflammatory cytokines and cellular metabolites as synovial fluid biomarkers of posttraumatic ankle arthritis. Foot Ankle Int. 2014. 35(12). 1241-1249. doi: 10.1177/1071100714550652.
14. AltobelliE., AngelettiP.M., Piccolo D., De Angelis R. Synovial Fluid and serum concentrations of inflammatory markers in rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis and osteoarthitis: a systematic review. Curr. Rheumatol. Rev. 2017. 13(3). 170-179. doi: 10.2174/1573397113666170427125918.
15. Hampel U., SesselmannS., IserovichP., SelS., PaulsenF., Sack R. Chemokine and cytokine levels in osteoarthritis and rheumatoid arthritis synovial fluid. J. Immunol. Methods. 2018. 396(1-2). 134-139. doi: 10.1016/j.jim.2013.08.007.
16. Dickinson S.C., Vankemmelbeke M.N., Buttle D.J., Rosenberg K, Heinegard D., Hollander A.P. Cleavage of cartilage oligomeric matrix protein (thrombospondin-5) by matrix metalloproteinases and a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs. Matrix Biol. 2013. 22(3). 267-278. doi: 10.1016/s0945-053x(03)00034-9.
17. Sheridan C. Low-molecular-weight albumin drug touted for severe osteoarthritis. Nat. Biotechnol. 2018. 36(4). 293. doi: 10.1038/nbt0418-293.
18. Xu H, Geddes R., Roberts-Thomson P.J. Low molecular weight IgM and CD5 B lymphocytes in rheumatoid arthritis. Ann. Rheum. Dis. 2004. 53(6). 383-390. doi: 10.1136/ ard.53.6.383.
19. Meo Burt P., Xiao L, Hurley M.M. FGF23 Regulates Wnt/p-catenin signaling-mediated osteoarthritis in mice over-expressing high-molecular-weight FGF2. Endocrinology. 2018. 159(6). 2386-2396. doi: 10.1210/en.2018-00184.
20. Huang T.L., Hsu H.C., YangK.C., Yao C.H., Lin F.H. Effect of different molecular weight hyaluronans on osteoar-thritis-related protein production in fibroblast-like synoviocytes from patients with tibia plateau fracture. J. Trauma. 2019. 68(1). 146-152. doi: 10.1097/TA.0b013e3181a92cf8.
OmpuMaHo/Received 17.11.2020 Peu,eH30BaH0/Revised 26.11.2020 npuuHamo do dpyny/Accepted 03.12.2020 ■
Синяченко О.В., Ермолаева М.В., Алиева Т.Ю., Ливенцова Е.В., Верзилов С.Н., Синяченко Т.Ю. Донецкий национальный медицинский университет, г. Лиман, Украина
Уровень молекул средней массы в синовиальной жидкости больных ревматоидным артритом
Резюме. Актуальность. Благодаря прямому контакту синовии с хрящом, поверхностью кости и синовиоцитами исследование суставного ликвора при ревматоидном артрите (РА) имеет большое диагностическое значение, причем изменения показателей четко коррелируют с данными морфологического исследования пораженных суставных тканей. В синовии больных РА накапливаются белковые вещества разной молекулярной массы и ферменты, участвующие в процессах деструкции хряща, сухожилий и связок. Вместе с тем надежных дифференциально-диагностических биомаркеров синовиальной жидкости при патологии суставов пока не существует. Цель и задачи исследования: установить кли-нико-патогенетическую значимость среднемолекулярных соединений разных фракций в суставной жидкости больных РА, их связь с нарушениями физико-химического характера синовии и составом в ней поверхностно-активных веществ (сурфактанты). Материалы и методы. Синовиальную жидкость, полученную из коленных, локтевых и плечевых суставов, изучали у 21 больного РА (средний возраст составил 50 лет, соотношение мужчин и женщин — 1 : 2), среди которых умеренная и высокая степень активности заболевания установлена во всех случаях, III и IV стадии патологического процесса — в 61,9 %, внесуставная форма болезни — в 61,9 %, системный остеопороз — в 95,2 %, серопозитивность по ревматоидному фактору (RF) — в 90,5 %, по антителам к циклическому цитруллиновому пептиду (aCCP) — в 95,2 %. Для определения молекул средней массы в синовиальном ликворе и сыворотке крови применяли скрининговый метод с осаждением белков трихлоруксусной кислотой и опреде-
лением спектров поглощения света кислоторастворимои фракции. Белковые и небелковые азотистые сурфактанты изучали с помощью биоанализатора Olympus AU640 (Япония), а межфазную тензиометрию с подсчетом соотношения поверхностного натяжения при бесконечном времени жизни поверхности для высокомолекулярных веществ и при времени, равном 0,01 с, для низкомолекулярных соединении (ST 01 %) осуществляли с использованием компьютерного аппарата ADSA-Toronto (Германия, Канада). Результаты. Интегральный состав среднемолекулярных соединении в синовии и крови зависит от сывороточных уровней RF и aCCP, а с темпами прогрессирования артикулярного синдрома связаны показатели нуклеотидной (NF) и хромато-форной фракций (CF) молекул средней массы, которые наряду с аминопептидной (AF) и пептидной фракциями (PF) определяют высокую активность заболевания, костно-де-структивные изменения суставов (AF), минеральную плотность кости (AF, PF, CF), формирование остеоузур (AF) и внутрисуставных хондромных тел (NF, CF), прямо коррелируют с содержанием в суставном ликворе иммуноглобулина G (NF, CF), причем CF прямо соотносится с наличием артрокальцинатов и тел Гоффа. Выводы. При РА молекулы средней массы разных фракций в синовиальной жидкости участвуют в патогенетических построениях заболевания, зависят от клинических, рентгенологических и сонографиче-ских признаков заболевания, могут быть использованы для прогнозирования течения патологического процесса. Ключевые слова: артрит ревматоидный; течение; патогенез; синовия; молекулы средней массы
O.V. Syniachenko, M.V. Yermolaieva, T.Yu. Aliieva, K.V. Lientsova, S.M. Verzilov, T.Yu. Syniachenko Donetsk National Medical University, Lyman, Ukraine
Level of middle mass molecules in synovial
Abstract. Background. Due to direct contact with cartilage, bone surface and synoviocytes, the study of synovial fluid in rheumatoid arthritis has a great diagnostic value, and changes in its indicators clearly correlate with the data of the morphological study of the affected articular tissues. In the synovial fluid of rheumatoid arthritis patients, protein substances of diffe-
fluid of patients with rheumatoid arthritis
rent molecular mass and enzymes involved in the destruction of cartilage, tendons and ligaments are accumulated. At the same time, there are no reliable differential diagnostic biomarkers of synovial fluid in joint pathology. The purpose and objectives of the study: to establish the clinical and pathogenetic significance of medium molecular weight compounds of different fractions
in the synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis, the relationship with physicochemical disorders in the synovial fluid and the composition of surfactants in it. Materials and methods. The synovial fluid obtained from the knee, elbow and shoulder joints was studied in 21 patients with rheumatoid arthritis (mean age 50 years, male to female ratio of 1 : 2), among whom moderate and high degree of disease activity was established in all cases, III and IV stages of pathological process — in 61.9 %, extraarticular form of the disease — in 61.9 %, systemic osteoporosis — in 95.2 %, seropositivity for rheumatoid factor (RF) — in 90.5 %, for cyclic citrulline peptide antibodies (CCPA) — in 95.2 % of patients. To determine the middle mass molecules in the synovial fluid and blood serum, a screening method was used with trichloroacetic acid precipitation of proteins and determination of the light absorption spectra by the acid-soluble fraction. Protein and non-protein nitrogenous surfactants were studied using an Olympus-AU640 bioanalyzer (Japan), and interfacial tensiometry with calculating the surface tension ratio at an infinite surface lifetime for high molecular weight substances and at a time of 0.01 s for low-molecular weight compounds
(ST 01 %) was carried out using a computer apparatus ADSA-Toronto (Germany-Canada). Results. The integral composition of medium molecular weight compounds in synovial fluid and blood depends on serum levels of RF and CCPA, and the rates of progression of articular syndrome are associated with indicators of nucleotide (NF) and chromatophore fractions (CF) of middle mass molecules, which, along with aminopeptide (AF) and peptide fractions (PF), determine the high activity of the disease, bone-destructive changes in the joints (AF), bone mineral density (AF, PF, CF), the formation of bone erosions (AF) and intra-articular chondromic bodies (NF, CF), directly correlate with the content of immunoglobulin G in the synovial fluid (NF, CF), and CF is directly correlated with the presence of arthro-calcifications and Hoffa's fat pads. Conclusions. In rheumatoid arthritis, middle mass molecules of different fractions in the synovial fluid are involved in the disease pathogenesis, depend on clinical, radiological and sonographic signs of the disease, can be used to predict the course of the pathological process. Keywords: rheumatoid arthritis; course; pathogenesis; synovial fluid; middle mass molecules
