CC BY
20
УДК 616.717.4-007:576.316
В.О. Галаган Р1ДК1СН1 ХВОРОБИ ЛЮДИНИ: ДЕЛЕЦ1Я
КОРОТКОГО ПЛЕЧА ХРОМОСОМИ 9
Медико-генетичний центр Нащональног дитячоЧ спещал1зовано1 лгкарнг
«ОХМАТДИТ» МОЗ Укрални
вул. Чорновола 28/1, Ku'ie, 01135, Украта
Medical Genetics Center of the National Children's Hospital
"Ohmatdyt" of Ministry of Health of Ukraine
Chornovola str., 28/1, Kyiv, 01135, Ukraine
e-mail: ohmadet-asy@mail.ru
Ключов! слова: моносомгя короткого плеча хромосомы 9, тригоноцефал1я Key worlds: monosomy of chromosome 9, trigonocephaly
Реферат. Редкие заболевания человека: моносомия короткого плеча хромосомы 9. Галаган В.А. Задача исследования состояла в анализе анамнеза, фено- и генотипа у пациентов с такой редкой патологией как моносомия короткого плеча хромосомы 9. Использованы как генетические (клинико-генеалогический, цито-генетический, FISH-метод), так и параклинические и инструментальные методы обследования. Кариоти-пирование проводили по стандартной методике (G-метод дифференцированной окраски хромосом). За 10 последних лет работы МГЦ было диагностировано всего три случая патологии. По данным анамнеза никто в родословной, которая была представлена тремя поколениями, не имел вредных привычек, профессиональных вредностей, в т. ч. не был участником ликвидации аварии на ЧАЭС и не проживал на радиационно загрязненной территории. У родителей пробандов клинические признаки патологии не выявлены. У всех пробандов фено-типически были обнаружены тригоноцефалия (краниосиностоз), эпикант, глазной гипертелоризм, монголоидный разрез глазных щелей, длинный фильтр (расстояние между носом и верхней губой), плоское лицо и спинка носа, деформация ушных раковин. У двоих из трех пациентов обнаружен экзофтальм, контрактуры второго и третьего пальцев кисти, гипоплазия наружных половых органов. Во всех трех случаях обнаружена моносомия хромосомы 9 критического сегмента р 24. При кариотипировании родителей пробандов хромосомные перестройки не выявлены, то есть у пациентов обнаружены новые мутации. Задержка физического, статокинетического и психоречевого развития у пробанда, особенно в сочетании с микроаномалиями развития, является показанием для медико-генетического консультирования в медико-генетических учреждениях второго и третьего уровней. При репродуктивных потерях неясного генеза в анамнезе необходимо проводить цитогенетическое исследование плодного материала.
Abstract. Rare human diseases: 9p deletion syndrome. Galagan V.O. Objective of the study was to review the anamnesis, pheno - and genotype in patients with rare chromosome disorders such as 9p deletion syndrome. Genetic methods of investigation (clinical and genealogical, cytogenetic, FISH- method), paraclinical and instrumental methods of examination were used. Karyotyping was performed by the G-method of differential staining of chromosomes. Only three cases of pathology were diagnosed in the Medical Genetics Center over the last 10 years. By anamnesis data nobody in the probands' families had bad habits, was exposed to occupational hazards, took part in the elimination of the Chernobyl accident or lived in contaminated areas. Clinical signs of diseases have not been identified in probands' parents. All probands had trigonocephaly, bilateral epicanthal folds, ocular hypertelorism, downslanting palpebral fissures, long philtrum, flat face and nasal bridge, low set ears with malformed auricles. Two patients of three ones had exophthalmos, contracture of the second and third fingers, abnormal external genitalia. In all three cases there was monosomy of chromosome 9 of critical segment p 24. Normal karyotypes were seen in all parents, so there were three cases of new mutations of 9p deletion syndrome. Retardation of physical, psycho-spech, mental development in proband with or without congenital anomalies requires medical genetic counseling in a specialized institution. Cases of reproductive loss in anamnesis require cytogenetic investigation offetal membranes and amniotic fluid.
Увагу до рщюсних (сирггських, орфанних) сирггських фармаколопчних препарата (Orphan
хвороб суспшьство почало виявляти тшьки в Drug Act , 1983); рщюсних хвороб (Rare Disease
остант десятилигя, ймов1рно, у зв'язку з тим, Act, 2002), в яких визначено, що рщюсними е
що для 1хнього лшування потр1бт були об- хвороби, як! зустр1чаються 1: 1 500 (у США за-
межет кшькосп певних фармаколопчних пре- галом це становить близько 200 тис. oci6). Вщ-
пара-пв, яю не приносили великих зисюв повщну законодавчу базу мае i Росшська Фе-
фармаколопчним компаншм. Так, у Сполучених деращя. Для допомоги пащентам з рщюсними Штатах Америки був виданий закон щодо
14/ Том XIX/ 3
15
захворюваннями краши, зокрема i наша держава, об'едналися в мережу Orphanet.
Слщ визнати, що при д1агностищ рщюсних хвороб, бiльшicть з яких мае генетичну основу, виникають neBHi труднощ1, в т.ч. i у зв'язку з тим, що медичт генетики протягом свое! кттч-но1 практики не завжди стикаються з пащентами, KOTpi страждають на таю хвороби.
Синдром Альф1 (синдром 9р-) е вродженим i вперше описаний у 1973 рощ. Цитогенетичт ва-р1анти можуть бути р1зними: часткова делещя короткого плеча 9 хромосоми, 1зохромосома 9q, незбалансоват транслокаци, проте в ycix ви-падках спостер1гаеться втрата сегмента 9р22.
Д1агностичними ознаками захворювання е тригоноцефатя, р1зко виступаючий лоб, мон-голо1Дний розр1з очей, еткант, екзофтальм, ri-пертелоризм, сплющене i широке перетсся, маленький рот з великою верхньою губою, високе тднебшня. Вушт раковини без мочки або вона недорозвинена, 3i згладженим завитком. Шия коротка, пальщ рук i Hir довп, HirTi широю, опукт, квадратно! форми. У д1вчаток виражена гшоплаз1я малих i великих статевих губ, у хлопчиюв - гшоплаз1я мошонки i статевого члена. 3 вад внутрштх оргатв вщм1чено ура-ження серцево-судинно! системи i пдронефроз нирок. Спостер1гаеться розумова вщстатсть pi3-ного ступеня вираженога. За характером XBopi ласкав1, спокшт, слухнят. Прогноз для життя сприятливий [1].
Слщ також зазначити, що бшьш часто, тж вроджет синдроми, цитогенетичт змши короткого плеча хромосоми 9 (в1д 9 р 11 до 9 р 24) спостер1гають при неоплаз1ях кровотворно! системи. Делеци короткого плеча переважно рееструють при гострому л1мфобластному лейкоз1 [1, 4, 6]. Вщповщно до даних, викладе-них у лгтератур1, 7-12% хворих на гостру л1мфобластну лейкемто мають вищевказат цитогенетичт змши, як1 виникають на piBHi муль-типотентно1 стволово! кл1тини [8]. Молекулярно-генетичн1 досл1дження, виконан1 в цш област1, дозволяють припустити, що причиною неоплази може бути втрата генетичного матер1алу, який м1стив гени, що стримували picT пухлини [4, 5].
Таким чином, за даними лгтератури 1снують yci п1дстави вважати втрату генетичного мате-р1алу в короткому плеч1 хромосоми 9 значущою як для виникнення вроджених хвороб, так i для розвитку неоплаз1й кровотворно! системи. Зав-дання представлено! роботи полягало в анал1з1 анамнезу, фено- та генотипу у пац1ент1в з такою р1дк1сною вродженою патолог1ею як моносомш короткого плеча хромосоми 9.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНБ
У робот! використан1 генетичн1 (кл1н1ко-генеалопчний, цитогенетичний, FISH-метод), па-ракл1н1чн1 та шструментальт методи обстежен-ня. Карютипування проводили за стандартною методикою (G-метод диференц1йного фарбуван-ня хромосом) [2].
Для верифшаци м1кроделец1йних синдром1в застосовували метод флуоресцентно1 in situ ri6-ридизацй' з використанням локус-специф1чних зонд1в: Vysis DiGeorge Region Probe - LSI TUPLE 1 SpectrumOrange/LSI ARSA Spec-trumGreen; Vysis Williams Region Probe - LSI ELN SpectrumOrange/LSI D7S486, D7S522 Spec-trumGreen. FISH-метод виконували зг1дно з 1нструкц1ею в комплект! i3 зондами.
Анал1з стандартних цитогенетичних препара-tîb проводили на м1кроскоп1 Nikon E400 (Япо-тя); FISH - на флуоресцентному м1кроскоп1 Nikon E600 (Япон1я).
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ÏX ОБГОВОРЕННЯ
У медико-генетичному центр1 (МГЦ) На-ц1онально! дитячо! спещатзовано! л1карн1 «ОХМАТДИТ» МОЗ Укра!ни з 2004 по 2013 piK було д1агностовано всього три випадки синдрому Альф1 (Bei пробанди - д1вчатка). Два пац1енти -жител1 м. Киева - були спрямован1 до МГЦ ди-тячими неврологами, один пащент проживав у м. Житомир i мав направлення Житомирського обласного Центру планування cîm'ï та репродук-цИ' людини.
Перший пробанд А. поступив на консультування у МГЦ у мюячному вгц1. С1м'я проживае у м. Киев1. Батькам по 38 роюв, ознак патологй' у них не вияв-лено. Тато в1д попереднього шлюбу мае здорову 19-р1чну дитину. У цьому шлюб1 перша ваг1тн1сть закгнчилася викиднем на термЫ 24 тижн1. При па-тологонатом1чому досл;дженн1 плода ознак врод-жено1 патологй' не виявлено, однак пл1д не був обстежений цитогенетично.
Другий пробанд Б. був д1агностований у в1ц1 один м1сяць 3 тижт. С1м'я проживала у м. Киев1. Кл1н1чно здоров1 батьки (мати bîkom 34 роки, батько - 39) були TORCH шфшоват. Подружжя мало здорову 8-р1чну дитину та самовшьний ви-кидень на термш 5-6 тижн1в (цитогенетично не обстежений).
Третш пробанд В. поступив на обстеження у двор1чному в1ц1. При цьому за м1сцем проживания (м. Житомир) було проведено карютипування - 46ХХ. У батьюв (мати - 25, батько -29 рок1в) ознак будь-яко! патологи не виявлено. У них обох е по одн1й здоров1й дитит в1д попе-редн1х шлюб1в.
Родоводи пробанд1в були представлен! трьома поколшнямп. У Bcix представнпюв третього по-колшня (за словами батьюв пробанд1в та фото-граф1ями) клЫчт ознаки вроджено! патологй' не впявлет. За даними анамнезу н1хто в родовод1 не мав шкщлпвпх звичок, не тддавався впливу професшнпх шкщлпвостей, у т.ч. не був учас-ником лшвщацн авари на ЧАЕС та не проживав на рад1ацшно забрудненш територи.
Слад також зазначити, що, незважаючи на прям1 показания (вш майбуттх батьюв, репро-дуктпвт втрати в анамнез^, до народження про-банд1в жодна з сшей не отримала медико-гене-тичного консультування.
Bei пробанди при народжент мали масу 3000 - 3370 г i середнш зр1ст 52-54 см.
Шд час медико-генетичного консультування у Bcix пробанд1в фенотипово були впвпявлет три-гоноцефатя (кратоспностоз), еткант, очний ri-пертелоризм, монголощнпй розр1з очних щшин, подовжений фшьтр (вщетань м1ж носом i верхньою губою), пласю обличчя та спинка носа, деформащя вушних раковин. У двох з трьох па-щен™ мав мгсце екзофтальм, контрактури другого i третього пальщв khcti, гшоплаз1я зов-тштх статевих оргатв.
Два з трьох пробанд1в мали двоб1чну пахову килу та вроджений стеноз легенево! артери.
У невролопчному статуа у Bcix пробанд1в вщзначена м'язова гшотонш, гшорефлекс1я, за-тримка ф1зичного та психомовного розвитку.
За даними лггературп, критичним perioHOM хромосоми 9 при такому синдром! е сегмент р 24
[3]. У представленому дослщжент карютипи пробанд1в А, В., В. характеризувались як 46, XX, del (9) (p23); 46, XX, del (9) (p21); 46, XX, del (9) (: p22 **q ter) вщповщно, тобто y Bcix трьох ви-падках мала м1сце моносом1я хромосоми 9 критичного сегмента р 24.
При карютипувант батьюв пробанд1в хро-mocomhî перебудови у них не впявлет, тобто у пащент1в мали м1сце hobî мутаци.
Пащенти отримували симптоматичне лшуван-ня залежно вщ д1агностовано1 органно!' патологи, а також вщповщний реабЫтацшнпй комплекс у центрах реабЫтаци для дггей з ураженнями центрально!' нервово!' системи.
висновки
1. Найбшьш характерною клЫчною ознакою у пащенпв з моносем1ею хромосоми 9 е триго-ноцефалш, яка в сполучент з шшпмп феноти-повими проявами (стигми дпзембрюгенезу) на-дае можлпвють затдозрптп хромосомну пато-лопю, яка повинна бути тдтверджена цитогене-тично.
2. Наявтсть у пробанда затримки ф1зичного, статокшетпчного та психомовного розвитку, особливо в сполучент з мшроаноматями розвитку, е показаниям для медико-генетичного консультування у медико-генетичних закладах другого та третього р1втв.
3. При репродуктивних втратах невстанов-леного генезу в анамнез1 необхщно проводити цитогенетичне дослщження плщного матер1алу.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Ворсанова С.Г. Медицинская цитогенетика (учебное пособие) / С.Г. Ворсанова, Ю.Б. Юров, В.Н. Чернышов. - М.: Медпрактика-М, 2006. - 299 с.
2. Зерова-Любимова Т.Е. Цитoгeнeтичнi дослщ-жеиия хромосом людини: методичш рекомеидацп / Т.Е. Зерова-Любимова. - К., 2003. - 23 с.
3. Перестройки хромосомы 9 при различных гематологических неоплазиях / С.В. Андреева, В.Д. Дроздова, Е.В. Поночевная, Н.В. Кавардакова // Цитология и генетика. - 2008. - № 5. - С. 72-79.
4. Childhood and Adolescence lymphoid and Myeloid Leukemia / Ch._H.Pui, M. Schrappe, R. Ribeiro, C. Niemeyer // Hematology Amer. Soc. Hematol. Educ. Program. - 2004. - P. 118-145.
5. Gilliland D.G. Targeted therapies in myeloid leukemia. Acute leukemias XI. Prognostic factors and
treatment strategies / D.G. Gilliland // Ann. Hematol. -2004. - Vol. 83, Suppl. 1. - P. 75-76.
6. Human Cytogenetics. A practical approach. Malignancy and acquired abnormalities / Eds D.E. Rooney, B.H. Czepulkovsky. - New York : Oxford Univer. Press, 1995. - 293 p.
7. Karyotype evolution: cytogenetics follow_up study in children acute lymphoblastic leukemia / P. Mel-dipour, R. Mirfakhraie, M. Jahani, A.R. Meldipour // Asian Pac. J. Cancer Prev. - 2003. - Vol. 4, N 4. - P. 358-368.
8. Raimondi S.C. Current status of cytogenetic research in childhood acute lymphoblastic leukemia / S.C. Raimondi // Blood. - 1993. - Vol. 81, N 1. -P. 2237-2251.
14/ Том XIX/ 3
17
REFERENCES
1. Vorsanova SG, Yurov YuB, Chernyshov VN. [Medical cytogenetics (manual)]. Moskow: Medpraktika-M; 2006. Russian.
2. Zerova-Lyubimova TE. [Cytogenetic researches of chromosomes of the person: methodical recommendations]. Kyiv; 2003. Ukrainian.
3. Andreeva SV, Drozdova VD, Ponochevnaya EV, Kavardakova NV. [Reorganizations of chromosome 9 in various hematologic neoplaziyakh]. Tsitologiya i ge-netika. 2008;5:72-79. Russian.
4. Pui CH, Schrappe M, Ribeiro RC, Niemeyer CM. Childhood and Adolescence lymphoid and Myeloid Leukemia. Hematology Amer. Soc. Hematol. Educ. Program. 2004;118-145.
5. Gilliland DG. Targeted therapies in myeloid leukemia. Acute leukemias XI. Prognostic factors and treatment strategies. Ann. Hematol. 2004;83(1): 75-76.
6. Human Cytogenetics. A practical approach. Malignancy and acquired abnormalities. Eds D.E. Rooney, B.H. Czepulkovsky. New York: Oxford Univ. press., 1995;293.
7. Meldipour P, Mirfakhraie R, Jahani M, Meldipour AR. Karyotype evolution: cytogenetics follow_up study in children acute lymphoblastic leukemia. Asian Pac. J. Cancer Prev. 2003;4:358-68.
8. Raimondi SC. Current status of cytogenetic research in childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood. 1993;81(1):2237-51.
♦
УДК 618.19-006.6-06:577.215/.216
ОЦ1НКА1НФОРМАТИВНОСТ1 СТУПЕНЯ МЕТИЛЮВАННЯ ДНК ГЕНА DKK4 ЯК Д1АГНОСТИЧНОГО КРИТЕР1Ю ПРИ АДЕНОКАРЦИНОМ1 М0Л0ЧН01 ЗАЛОЗИ
Одесъкий нащональний медичний утверситет пров. BcmixiecbKuü, 2, Одеса, 65082, Украта Odessa National Medical University ln. Valihovskyy, 2, Odessa, 65082, Ukraine e-mail: andronov_d@bk.ru
Ключов! слова: метилювання ДНК, ген DKK4, CG сайт, аденокарцинома молочно! залози. Key words: DNA methylation, DKK4 gene, CG site, breast adenocarcinoma
Реферат. Оценка информативности степени метилирования ДНК гена DKK4 как диагностического критерия при аденокарциноме молочной железы. Запорожан В.Н., Бубнов В.В., Маричереда В.Г., Петровский Ю.Ю., Андронов Д.Ю. Аномалии метилирования ДНК играют значительную роль в возникновении и развитии онкологических заболеваний. Целью данного исследования была оценка значимости количественного определения гиперметилирования первого экзона гена DKK4 в качестве биомаркера опухолевой трансформации эпителиальных клеток молочной железы больных аденокарциномой 2-3 стадии. Анализ метилирования был проведен методом количественного пиросеквенирования с использованием набора PSQ96MA фирмы Qiagen. Установлено, что содержание метилированной ДНК гена DKK4 в образцах ткани аде-нокарциномы молочной железы значительно выше, чем в образцах неизмененной ткани молочной железы, взятых от этих же больных. Так содержание метилированной ДНК при раке молочной железы в среднем составило 36,8±12,63 процента, тогда как в образцах условно нормальной ткани молочной железы - 19,37±7,1 процента, р<0,01. Из 23 образцов ткани аденокарциномы молочной железы высокий уровень содержания метилированной ДНК первого экзона гена DKK4 был выявлен в 20 образцах (86,96 %, р<0,01); в 3 образцах уровень метилированной ДНК был сопоставим с содержанием в образцах условно нормальной ткани.
В.М. Запорожан, В.В. Бубнов, В.Г. Mapinepeda, Ю.Ю. Петровський, Д.Ю. Андронов
