CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
Ковынев И. Б.1, Поспелова Т. И.1, Веряскина Ю. А.2, Титов С. Е.3, Алиев Р. Ф.1
МИКРОРНК- ПРОФИЛИРОВАНИЕ КОСТНОГО МОЗГА БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ МИЕЛОБЛАСТНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
НА ФОНЕ ИНФЕКЦИИ СОУГО-19
1ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, 2ФГБНУ «ФИЦ ИЦИГ СО РАН», 3ФГБУН «ИМКБ СО РАН», АО «Вектор-Бест»
Введение. Больные острым миелобластным лейкозом (ОМЛ) представляют группу повышенного риска тяжелого течения ко-ронавирусной инфекции (SARS COVID-19). Показано, что воздействие вируса на клетки костного мозга при ОМЛ резко меняет экспрессию ключевых генов, определяющих качественные характеристики гемопоэза, что приводит к вирус-индуцированным нарушениям эффективности кроветворения. Данные патологические сдвиги в транскриптоме миелокариоцитов отражаются на характеристиках профиля микроРНК костного мозга и могут оказывать влияние на эффективность циторедуктивной терапии и выживаемость пациентов с ОМЛ.
Цель работы. Изучение особенностей экспрессии микроРНК широкого спектра у пациентов первичным ОМЛ с выявленным COVID-19 в сравнении с пациентами с ОМЛ, интактными по данной инфекции, до начала программной ПХТ.
Материалы и методы. В качестве материала для исследования использованы препараты костного мозга (КМ) пациентов с верифицированным ОМЛ: мазки костного мозга больных с первичным ОМЛ до лечения без вирусной нагрузки SARS COVID-19 (n=50) и препараты КМ пациентов с ОМЛ, ПЦР-позитивных по SARS COVID-19 (п=8). Выделение нуклеиновых кислот из клинических образцов проводилось с использованием набора реагентов «Реал Бест экстракция 100» («АО Вектор-Бест», Россия). Проводилось
исследованиеуровней экспрессии микроРНК-128, -150, -155, -18а, -181Ъ, -196Ъ, -20а, -223, -92а, -100, -124, -126, -181а, -210, -221, -26а, -29Ъ, -451а, -9, -96 и микроРНК-99а, являющихся, по данным литературы, активными регуляторами гемопоэза. Анализ уровней экспрессии микроРНК осуществляли методом ОТ-ПЦР в реальном времени.
Результаты и обсуждение. Сравнительный анализ профиля микроРНКмежду образцами КМпациентов с ОМЛ без COVID-19 и ОМЛ с COVID-19 показал, что общий профиль и уровни экспрессии значительно отличаются. Так, миРНК-128 в препаратах ОМЛ с COVID-19 понижен в 10 раз (р=0,00001), уровень экспрессии миРНК-26а понижен в 20 раз (р=0,0000001). Кроме того, уровень экспрессии миРНК-451 в КМ больных ОМЛ с COVID-19 повышен в 4 раза (р=0,0027), alet-7a — в 8 раз (р=0,00005) в сравнении с пациентами, ПЦР-негативными по данному вирусу.
Заключение. В представленной работе впервые проведен сравнительный анализ профиля экспрессии микроРНК широкого спектрав образцах КМу нелеченых пациентов с ОМЛ с COVID-19 и без инфекции. Эти данные могут представлять интерес при изучении эпигенетических механизмов, ответственных за повреждение гемопоэзау больных ОМЛ, на фоне новой вирусной инфекции COVID-19, а также вклада вирусной нагрузки на характеристики опухолевой прогрессии ОМЛ и исходы лечения гемобластоза.
Кожемяко О. В.1, Кривоносова Н. В.1, Хомичук Т. В.1, Жибурт Е. Б.2
РЕЗУЛЬТАТЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УРОВНЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ 8АЯ8-СОУ-2 У ДОНОРОВ В ХАБАРОВСКЕ
1КГБУЗ «Краевая станция переливания крови» министерства здравоохранения Хабаровского края, 2ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр
им. Н.И. Пирогова Минздрава России»
Введение. Применение плазмы от доноров-реконвалесцентов COVID-19 с высоким титром Ю О к вирусу SARS-CoV-2 при тяжелых формах инфекции и проявлениях ОРДС основано на принципе пассивной иммунизации реципиента и рекомендовано ВОЗ в качестве этиотропного лечения COVID-19. Эта концепция лечения ставит задачу перед службой крови по заготовке и созданию запасов антиковидной плазмы с высоким содержанием антител.
Цель работы. Оценка доли лиц с наличием С к вирусу SARS-CoV-2 среди доноров, которые не значились в регистре переболевших COVID-19.
Материалы и методы. ИФА, обобщение данных и математическая статистика.
Результаты и обсуждение. В лаборатории КСПК г. Хабаровска 25—29.01.2021 методом ИФА с использованием реактивов «SARS-CoV-2-IgG-ИФA-БECT», было проведено исследование образцов крови 542 доноров, не включенных в региональный регистр переболевших COVID-19, на наличие антител к вирусу SARS-Со^2. Результаты исследования оценивали с использованием КП. Антитела обнаружили у 280 доноров в возрасте от 18 до 58 лет. Для оценки результатов исследования применяли дескриптивную статистику и корреляционный анализ при уровне значимости р<0,05. Группы доноров с наличием и вероятным отсутствием
Таблица 1. Характеристика доноров с антиковидными антителами
п=280) и без них (п=262)
Характеристика обследованных Антитела присутствуют (п=280) Антитела отсутствуют (п=262)
Женщины, п (%) 118(42,1] 115(43,9]
Возраст, лет 26,9±1,2 31,1±1,3
Группа крови ABO, п (%)
О 90 (32,1] 95 (36,3]
А 96 (34,3] 82 (31,3]
В 62 (22,1] 58(22,1]
АВ 32(11,4] 27(10,3]
RhD-отрицательные, п (%) 49Щ5] 40(15,3]
Ке||-положительные, п (%) 3(1,1] 1 (0,4]
антител не отличались по тендерному составу, возрасту и фенотипу эритроцитов (табл. 1). В мире идет накопление данных о пригодности иммунохимических методов для отбора доноров антиковидной плазмы. В США на 4 февраля 2021 г. рекомендовано 9 наборов реагентов (табл. 2). Ранее НИН средств диагностики АО «Вектор-Бест» при проведении сравнительной оценки качества исследований, выполняемых с использованием наборов реагентов
«SARS-CoV-2-IgG-HOA-BECT», Anti-SARS-CoV-2 ELISA (IgG), EUROIMMUN, Германия, Architect SARS-CoV-2 IgG, Abbott, США и др. в результате исследования верификационной панели Anti-SARS-CoV-2 (NIBSC, Великобритания) было показано,
Таблица 2. Наборы реагентов, разрешенные для отбора доноров вы-сокотитражной антиковидной плазмы в США
Производитель Исследование Квалификационный результат
Abbot2 SARS-CoV-2 IgG (ARCITECT and Alinityi) Коэффициент позитивности (сигнал — кат офф S/C) £4,5
BeckmanCoulter Access SARS-CoV-2 IgG S/CO > 3,3
EUROIMMUN Anti-SARS-CoV-2 ELISA (IgG] Коэффициент позитивности £ 3,5
GenScript cPass SARSCoV-2 Neutralization Antibody Detection Kit Торможение £ 68%
Kantaro COVID-SeroKlir, Kantaro Semi Quantitative SARSCoV-2 IgG Antibody Kit ШипИФА>47АЕ/мл
Mount Sinai COVID-19 ELISA IgG ШипИФАтитр> 1:2880
Ortho Vitros Anti-SARSCoV-2 IgG S/C>9,5
Roche Elecsys Anti-SARS-CoV-2 S >132АЕ/мл
Siemens ADVIA Centaur SARSCoV-2 IgG (COV2G) Индекс >4,8
Таблица 3. Результаты определения титров Ig G к SARS-CoV-2
Титр Группа крови 1:200 1:400 1:800 1:1600 1:3200 1:6400 1:12800 Итого, п (%)
О 2 2 5 12 12 2 2 37 (36,6%]
А 1 2 3 6 19 3 3 37 (36,6%]
В 1 2 4 6 3 2 18(17,8%]
AB 2 3 4 9 (9%)
Итого, п (%) 3 (3%) 5 (5%) 10 (9,9%] 24 (23,8%] 40 (39,5%] 12 (11,9%] 7 (6,9%] 101 (100%)
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
что набор реагентов ^8АК8-СоУ-2-1^0-ИФА-БЕСТ» по специфичности не отличается от перечисленных тест-систем и обладает более высокой чувствительностью, оценку которой проводили с помощью индекса позитивности группы положительных образцов. В нашем исследовании доля доноров с КП выше 9,0 составила 30,8%, или 167 человек, в сравнении с остальными донорами (п=375) не выявлено отличий по тендерному составу, возрасту и фенотипу эритроцитов. Таким образом, можно предположить, что доля бессимптомных форм СОУТО-19 существенно превышает долю клинических форм и представляется перспективным поиск доноров антиковидной плазмы не только среди реконва-лесцентов и вакцинированных лиц, но и среди здоровых доноров.
Впоследствии в течение июня—октября 2021 г. после окончания сроков карантинизации было проведено титрование плазмы крови 101 донора с высоким значением КП из этой группы с использованием наборов реагентов ^8АК8-СоУ-2-1^0-ИФА-БЕСТ». Полученные результаты определения титров к 8АК8-СоУ-2 представлены в табл. 3.
Заключение. Таким образом, в образцах крови 92% доноров (п=101) с высоким значением КП при проведении скринингово-го исследования был определен высокий титр (более 1:800) к 8АК8-СоУ-2, что позволило использовать заготовленную плазму как антиковидную в лечебных целях вучреждениях г. Хабаровска и края.
Кольгаева Э. И., Дроков М. Ю., Омарова Ф. А., Попова Н. Н., Никифорова Н. М., Дмитрова А. А., Карасева Л. А., Сайдуллаева И. С.,
Васильева В. А., Кузьмина Л. А., Паровичникова Е. Н., |Савченко В. Г. |
ЧАСТОТА ВСТРЕЧАЕМОСТИ И СТЕПЕНЬ ВЫРАЖЕННОСТИ СИНДРОМА ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ЦИТОКИНОВ У ПАЦИЕНТОВ
ПОСЛЕ АЛЛО-ТГСК В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВИДА ТРАНСПЛАНТАЦИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Синдром высвобождения цитокинов нередко возникает как осложнение клеточной терапии. Однако его частота при трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) варьирует от исследования к исследованию, а текущие критерии оценки не всегда позволяют достоверно оценить тяжесть данного состояния и частоту у пациентов после алло-ТГСК.
Цель работы. Оценить частоту встречаемости и степень выраженности синдрома высвобождения цитокинову пациентов после алло-ТГСК в зависимости от видатрансплантации.
Материалы и методы. В исследование были включены 30 пациентов, которые поступили в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России для выполнения алло-ТГСК. С острым мие-лоидным лейкозом — 15 пациентов, с острым лимфобластным лейкозом — 10 пациентов, 3 пациента с миелодиспластическим синдромом и 2 — с диагнозом апластическая анемия. У всех пациентов режим профилактики включал посттрансплантационный циклофосфамид (ПТ-ЦФ) на +3, +4 день алло-ТГСК, циклоспорин А в комбинации с микофенолата мофетилом с +5 дня. В качестве источника трансплантата у всех пациентов были использованы стволовые клетки крови б млн/кг CD34+ клеток. На +3 день алло-ТГСК после исключения инфекционных осложнений (по данным микробиологических исследований посевов крови/ ЦВК и/или КТ ОГК) до введения ЦФ мы оценивали клинические проявления синдрома высвобождения цитокинов. Оценку проводили по двум шкалам: Lee et al. 2014 г. и критериям онкологического центра им. М.Д. Андерсона. Далее мы сравнили степень выраженности синдрома высвобождения цитокинов между двумя группами пациентов. В первую группу вошли пациенты после алло-ТГСК от гаплоидентичного донора (п=11), во вторую — от родственного совместимого (п=13), неродственного совместимого (п=5) и неродственного частично совместимого донора (п=1).
Результаты и обсуждение. Представлены в таблице. Так, у пациентов после алло-ТГСК от гаплоидентичного донора частота встречаемости синдрома высвобождения цитокинов была значимо выше, чему пациентов при трансплантации от других видов донора.
Заключение. Синдром высвобождения цитокинов развивается у 50% при проведении трансплантации гаплоидентичных стволовых клеток крови. Однако обращает на себя внимание, чтоу части пациентов при трансплантации от других доноров также может быть установлен данный диагноз. Что может говорить как о низкой специфичности данных критериев, так и о возможности развития синдрома высвобождения цитокинов при трансплантации от любого донора, особенно в условиях, когда в первые несколько суток после введения стволовых клеток крови не применяется им-му но супрессивная терапия, как это происходит при использовании схем с ПТ-ЦФ.
Таблица. Сравнение частоты встречаемости и степени выраженности С!^ между двумя группами пациентов
Оценки Гапло N=8 Другие N=17 р-зна-чение
Lee et.al,2014,n(%) 0.05
Нет симптомов 4(50) 15(88)
Симптомы не жизнеугрожающие и требуют только симптоматического лечения: лихорадка, тошнота, усталость, головная боль, миалгая и недомогание 4(50) 2 (12)
Симптомы, требующие умеренного вмешательства. Потребность в кислородной поддержке менее 40% или гипотензия, корректирующаяся волемической нагрузкой или низкими дозами вазопрессоров, органная токсичность 2 степени 0 (0) 0 (0)
Симптомы, требующие агрессивного вмешательства. Потребность в кислородной поддержке более 40% или гипотензия, корректирующаяся большими дозами вазопрессоров или несколькими вазопрессорами или органная токсичность 3 степени или гепатотоксичность 4 степени. 0 (0) 0 (0)
Жизнеугрожающие симптомы. Потребность в ИВЛ или 4 степень кислородной интоксикации 0 (0) 0 (0)
MDACC, п (%) 0.05
Нет симптомов 4(50) 15(88)
Лихорадка более 38 0С или органная токсичность 1 степени 4(50) 2(12)
САД менее 90 мм рт ст, корректирующиеся волемической нагрузкой или низкими дозами вазопрессоров или потребность в кислороде (F^ < 40%) при Sa02 > 90% или органная токсичность 2 степени 0 (0) 0 (0)
САД менее 90 мм рт. ст., корректирующиеся большими дозами вазопрессоров или несколькими вазопрессорами или потребность в кислороде (F¡О2 ^ 40%) при Sa02 > 90% или органная токсичность 3 степени или гепатотоксичность 4 степени 0 (0) 0 (0)
Жизнеугрожающая гипотензия. Потребность в ИВЛ или 4 степень кислородной интоксикации 0 (0) 0 (0)
Конова З. В., Паровичникова Е. Н., Хамаганова Е. Г., Урыбин И. Ю., Дроков М. Ю., Попова Н. Н., Масликова У. В., Омарова Ф. А., Кольгаева Э. И., Старикова О. С., Дубняк Д. С., Васильева В. А., Гальцева И. В., Кузьмина Л. А., | Савченко В. Г. |
ГЕНЫ КИЛЛЕРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОПОДОБНЫХ РЕЦЕПТОРОВ И ИХ ЛИГАНДЫ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ КЛЕТОК ОТ ГАПЛОИДЕНТИЧНОГО ДОНОРА У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Натуральные киллерные клетки (НК-клетки) являются компонентом врожденного иммунитета и обладают способностью к цитотоксическому лизису и секреции цитокинов без предварительной презентации антигена. Они восстанавливаются одними из первых после трансплантации, благодаря чему
могут играть решающую роль в предотвращении ранних рецидивов и инфекционных осложнений. Киллерный иммуноглобу-линоподобный рецептор (KIR), который экспрессируется на НК-клетках, опосредует иммунный ответ как противоопухолевый, так и направленный против инфекционных агентов. В случае
