CC BY
19
В статье проведен анализ иммунологического статуса у 264 больных с приобретенными пороками сердца, осложненными инфекционным эндокардитом (ИЭ). Исследовались количественные показатели Т-лимфоцитов, НК-кпеток, В-лимфоцитов, уровня иммуноглобулинов, СЗ-компонента комплемента, ЦИК. Подтверждено, что активность ИЭ сопровождается значительным дисбалансом показателей клеточного и гуморального иммунитета (89,7% больных), повышением уровня ЦИК в 2,8 раза с одновременным повышением содержания /дв, 1дА, 1дМ и СЗ-компонента комплемента, обнаружена сенсибилизация к антигенам стафилококковой группы (основной этиологический фактор — 78,3% больных).
Результаты изучения некоторых показателей иммуиореактивности у хирургических больных инфекционным эндокардитом
А.М.Воробьева, З.Т.Баланник, А.В.Руденко, Л.Н.Ходаковская, Е.Я.Беспалова, Т.В.Войтюк
Институт сердечно-сосудистой хирургии АМН Украины, Киев
Проблема инфекционного эндокардита ИЭ на Украине является ведущей при приобретенных пороках сердца (ППС). Проведенный нами анализ поступления больных в клинику выявил неуклонный рост ИЭ. Удельный вес по Украине возрос с 1986 по 1996 гг. в 9 раз. Изучение ИЭ на протяжении этого ряда лет позволило выявить этиологический фактор, при котором доминирующим является стафилококк (эпидер-мальный или золотистый). Частота встречаемости его у больных составила 78,3% [1].
Ведущее место в патогенезе ИЭ занимают нарушения клеточного и гуморального звена иммунитета [2, 4].
Целью работы является изучение особенностей иммунологического состояния больных ИЭ и возможность формирования у них аутоиммунных процессов.
Материалы и методы
Иммунологический статус изучали у 264 больных ИЭ, поступивших на хирургическое лечение: мужчин — 79,3%, женщин—19,7%, в возрасте от 20 до 58 лет. У всех больных имелся в наличии выраженный порок сердца. Поражение митрального клапана — 22%, аортального —
38%, трикуспидального — 8%. Остальные страдали комбинированными митрально-аортальными пороками — 32%.
Лимфоциты выделяли из периферической крови по общепринятой методике. Количественные показатели субпопуляций лимфоцитов определяли методом непрямой иммунофлюорес-ценции с использованием МКА. Учет показателей проводили с помощью люминесцентного микроскопа «Люмам» И-1 (АО «ЛОМО»). Исследованы количественные показатели Т-лим-фоцитов (СД5) (ИКО-80), Т-хелперов/индукто-ров (СД4) (ИКО-86), Т-супрессоров (СД8) (ИКО-31), НК-клеток (СД16) (ИКО-116), В-лимфоцитов (СД22) (ИКО-91), лимфоцитов с рецепторами к ИЛ-2 (СД25) (ИКО-105), лимфоцитов, экспрессирующих антигены НЬАБК. (ИКО-1) и антигены НЬААВС (ИКС-63).
Определение циркулирующих иммунных комплексов (ДИК) в сыворотке крови проводили методом преципитации комплексов антиген-антитело в 3,75% растворе полиэтиленгликоля-6000 с последующим фотометрическим определением плотности преципитата по методу Н.А.Константиновой [3].
Функциональную активность Т-лимфоцитов оценивали с помощью реакции бласттранс-
ш
Уровень лимфоцитарных субпопуляций при различных поражениях структур сердца больных ИЭ
2
Поражение митрального клапана (п=16)
18,8±1,4
34,5±2,4
19,0± 1,5 0,99±0,06 34,1 ±2,0
22,4±1,0 35,0±2,5
21,5±1,0
1,60±0,21 5,4±0,8
3
Сочетанные поражения клапанов (п=12)
19,5±1,6
31,6±2,1
16,5±2,0 1,20±0,08 34,5±4,3
20,9±1,5 30,0±3,1
17,5± 1,3
1,80±0,12 6,0±0,5
Достоверность различий
Р4<0,05 Р<0,1 Р2,Р5<0,2 Р3<0,05 Р3, Р5<0,2 Р3,Р6<0,1 Р,, Р2<0,001 Р3,Р4<0,1
Р5<0,2 Р2, Р5<0,2 Р3<0,05 Р,,Р3<0,1 Р5, Р6<0,05
Р„Р3<0,1
Лимфоцитарные Контрольная 1 рецепторы группа Поражение
доноры аортального (СД%) (п=35) клапана
(п=19)
СД4 23,2±4,3 23,5±1,2
СД5 39,7±2,3 38,0±2,4
СД8 СД4/СД8 СД16 24,0±4,3 0,97±0,09 22,2±4,2 21,2±1,7 1,10±0,07 39,7±1,8
НЬАЭК НЪААВС 22,1±3,2 39,5±2,1 24,1 ± 1,2 35,9±2,8
СД22 23,2±4,0 23,4±1,9
СД5/СД22 СД25 1,71 ±0,11 3,8±1,1 1,62±0,13 6,5±0,7
Р! - 1-я группа больных ИЭ и контрольная группа;
Р, - 2-я группа больных ИЭ и контрольная группа;
Р; - 3-я группа больных ИЭ и контрольная группа;
Р4 — 1 и 2-я группы;
Р5~ 1 и 3-я группы;
Р6 — 2 и 3-я группы.
формации лимфоцитов с лимфоцитарным ми-тогеиом, ФГА и аллергеном золотистого стафилококка [4].
Для выявления циркулирующих противо-тканевых аутоантител использовали реакцию потребления комплемента [5], сердечный антиген готовили по методике А.И.Николаева [6].
Результаты исследований
Сравнительный анализ количественных показателей субпопуляций лимфоцитов у больных ИЭ выявил у больных ИЭ достоверное повышение уровня НК-клеток (естественных киллеров) (СД-16) — клеток первой линии иммунологической защиты, составляющей соответственно (39,7+1,8)% в первой группе, (34,1 ±2,0)% во второй группе, (34,5±4,3)% в третьей группе при (22,2±4,2)% в контрольной группе (Р(<0,001, Р2<0,05, Р3<0,1) (табл. 1), что свидетельствует об активации этих клеток вследствие инфекционного процесса в организме больных ИЭ. Это согласуется с гипергаммаглобулинемией, свидетельствующей о высокой степени инфицирования организма больных. Так, уровень ^А повышен до (2,42±0,13) г/л, в контроле (1,96±0,07) г/л,
^М — до (1,15±0,07) г/л при (0,92±0,05) г/л в контроле. Уровень СЗ-компонента комплемента составляет (0,92±0,09) г/л при (0,78±0,06) г/л в контроле, что свидетельствует в свою очередь о наличии значительного воспалительного процесса у больных ИЭ. Наблюдается значительное — в 2-3 раза — повышение уровня ЦИК, составляющее (1,02±0,08) Ед при норме (0,34±0,02) Ед.
Исследования по изучению клеточного и гуморального ответа больных ИЭ показали достоверное снижение как Т-лимфоцитов (СД-5), так и В-лимфоцитов (СД-22) во всех трех группах, наиболее выраженное в третьей группе.
Соотношение клеточных субпопуляций СД-4/СД-8 и СД-5/СД-22 отличаются от контрольных показателей низкой степенью достоверности, однако можно говорить о тенденции к изменению соотношений лимфоцитарных субпопуляций, влияющих на кооперативные взаимодействия лимфоцитов и их функциональное состояние. Функциональное состояние отражает снижение показателей уровня экспрессии рецепторов к ИЛ-2 и уровня экспрессии антигенов гистосовместимости первого и второго класса у больных ИЭ.
ПАТОЛОГИЯ КРОВООБРАЩЕНИЯ II КАРОПОХПРУРГИЯ 2/3*98
Пролиферативная активность лимфоцитов в РБТЛ при ИЭ
РБТЛ Контрольная Поражение Поражение Сочетанные Достоверность
группа аортального митрального поражения различий
доноры клапана клапана клапанов
(п=40) (п=78) (п=17) (п=28)
Спонтанная 7,5+0,6 6,7±0,5 6,2±0,8 6,5±0,3 Р<0,5 Р<0,5
ФГА 48,8±2,3 26,5±1,5 31,2±3,0 36,1 ±5,7 Р<0,001 Р<0,05 Р<0,5
Лимфоцитарный 39,7±2,0 33,1±1,5 33,1+2,6 32,7±3,0 Р<0,05
митоген Р<0,1 Р>0,5
Стафилококковый 29,3±2,0 35,1±1,6 39,1±1,3 33,6±2,3 Р<0,05
аллерген Р<0,01 Р<0,1 Р>0,5
Изменения функциональной активности лимфоцитов нами выявлены также при сравнительном изучении РБТЛ на лимфоцитарный митоген, ФГА, стафилококковый аллерген в вышеописанных группах.
Как было отмечено выше, у больных ИЭ (62,1% случаев) обнаружены микроорганизмы стафилококковой группы (81;.ер1с1еггшсЦ8, Б1;.аигеи8), и поэтому в работе был использован для исследований в РБТЛ аллерген золотистого стафилококка. Проведенные исследования выявили значительную сенсибилизацию организма больных ИЭ к антигенам микроорганизмов стафилококковой группы.
Данные пролиферативной активности лимфоцитов в РБТЛ при ИЭ приводятся в табл. 2. Видно угнетение функционального состояния лимфоцитов в РБТЛ на ФГА и лимфоцитарный митоген и скрытая сенсибилизация организма на стафилококковый аллерген, подтверждающего инфекционную природу ИЭ.
О наличии персистирующих антигенов, стимулирующих иммунную систему больных ИЭ, свидетельствует повышение уровня ЦИК в сыворотке крови этих больных.
При сопоставлении полученных данных было выявлено, что среднее значение ЦИК в сыворотке крови больных ИЭ по сравнению с группой доноров в 2,8 раза выше и носит достоверный характер (Р<0,05), а уровень ЦИК у больных с первичной формой ИЭ несколько ниже, чем у больных с вторичной формой ИЭ, хотя эти различия статистически недостоверны (Р>0,05).
Сравнение групп больных с гр.(+) и гр.(-) гемокультурой показало, что уровень ЦИК у
больных с гр.(-) гемокультурой на 0,25% выше, чем у больных с гр.(+) гемокультурой, повышение недостоверно (Р>0,05).
Наиболее высокий уровень ЦИК был зарегистрирован у двух больных со стафилококковой инфекцией и у одного больного с синегной-ной инфекцией.
Наши исследования показали, что уровень ЦИК при пороках трикуспидального и смешанного поражения клапанов несколько выше (на 0,7%>), чем при пороках митрального и аортального клапанов (повышение носит недостоверный характер, Р>0,05). Самый высокий уровень ЦИК наблюдается при пороке трикуспидального клапана (1,13±0,13), хотя эта патология встречается в 5 раз реже, чем патология аортального клапана.
Уровни ЦИК у больных ИЭ с вегетация-ми, вегетациями + перфорации на клапанах и без них практически одинаковы, Р>0,05.
Уровень ЦИК после операции снижается по сравнению с дооперационными показателями на 0,9%>, снижение носит недостоверный характер, и уровень ЦИК остается в сыворотке крови повышенным в 2,1 раза по сравнению с контрольной группой.
По результатам исследований можно отметить тенденцию к повышению уровня ЦИК у больных ИЭ, особенно при поражении трикуспидального и смешанного поражения клапанов, а также у больных с гр.(-) гемокультурой, что свидетельствует о длительной антигенной стимуляции в организме больного при персистиру-ющей бактериальной инфекции в эндокарде. Это все позволяет предположить, что персистен-ция значительных количеств ЦИК, способных
■11*1
поддерживать и усиливать воспалительный процесс, является механизмом, который результи-рует действие врожденных и приобретенных дефектов иммунной системы, а содержание ЦИК в периферической крови отражает особенности динамики иммунного ответа.
Было проведено обследование больных ИЭ на наличие в сыворотке крови циркулирующих противотканевых антител. Аутоан-титела к эндокарду обнаружены у 63% обследованных больных ИЭ, из них у 67% больных иммунные комплексы увеличены в 1-1,5 раза по сравнению с нормой. Аутоиммуни-зация в 80% случаев развивается вследствие дефицита по Т-супрессорам, в результате чего В-клетки начинают реагировать на тканевые антигены, и выработавшиеся аутоан-титела приводят к развитию аутоиммунного процесса.
Таким образом, проведенные нами исследования иммунного статуса у больных ИЭ подтверждают наличие активного инфекционного процесса, сопровождающегося значи-
тельным дисбалансом показателей клеточного и гуморального иммунитета с выраженными изменениями функционального состояния иммунокомпетентных клеток, сопровождающегося развитием аутоиммунного процесса у больных ИЭ.
Вывоаы
1. У 89,7% больных ИЭ выявлены разной степени нарушения иммунологического статуса.
2. При ИЭ наблюдается дисбаланс факторов гуморального иммунного ответа. В 2,8 раза повышен уровень ЦИК в сыворотке крови больных ИЭ с одновременным повышением содержания ^О, 1§А, ^М и СЗ компонента комплемента.
3. На фоне вторичного иммунодефицита была обнаружена сенсибилизация к антигенам стафилококковой группы, проявляющаяся выраженной пролиферативной активностью лимфоцитов в РБТЛ.
Литература
1. Воробьева A.M., Баланник З.Т., Руденко A.B., Списаренко С.П., Ханюченко С.И., Ходаковская JI.H. Особенности иммунного статуса больных инфекционным эндокардитом//КлШчна xipypzin. Kuie, 1995. №2. С. 25-26.
2. Окунева Г.Н., Буилманова Г.М., Велътмандер H.H., Бредихина И.Ю. Иммунный статус больных хроническим септическим эндокардитом в клинике приобретенных пороков сердца//Тез. науч.-практ. конф. Новосибирск, 1986. С. 17-22.
3. Насонов Е.Л., Буткевич О.М., Виноградова Т.Л., Тимофеева Е.Б., Корешков Г.Г., Сура В.В. Клиническая оценка ЦИК при инфекционном эндокардите//Клиническая медицина. М., 1984. С. 76.
4. Мешалкин E.H., Сергиевский B.C., Приходченко И.А., Девятьяров J1.A. Бласттрансформациялимфоцитов в условиях хирургического вмешательства//Кардюлог1я. 1986. Т.26. №3. С.104—106.
5. Кондрашова Н.И. Реакция потребления комплемента в новой постановке для выявления противотканевых антител в сыворотке крови/Шабораторное дело. М., 1974. С.9.
6. Николаев А.И. Аспекты общей аутоиммунопатологии. М., 1977. 158 с.
ПАТОЛОГИЯ КРОВООБРАЩЕНИЯ И КАРДИОХИРУРГИЯ 2/3 98
