Результаты изучения фармакологической активности препарата «Шингун-5» при олигомицин-индуцированной экспериментальной модели «Ингибирование потока протонов» на животных Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ствии конфликта интересов.

Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.

Декларация о финансовых и иных взаимодействиях. Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.

ЛИТЕРАТУРА

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. - М.: Медицина, 1990. - 384 с.

2. БудневскийА.В., Грекова Т.И., БурлачукВ.Т. Гипотиреоз и нетиреоидные заболевания. - Петрозаводск: ИнтелТек, 2004. - 169 с.

3. Гланц С. Медико-биологическая статистика - Пер. с англ. - М.: Практика, 1999. - 459 с.

4. Карпов О.И., Приходько В.П. Нарушения функции печени как дебют клинических проявлений тиреотоксикоза //

Новые Санкт-Петербургские врачебные ведомости. - 1997.

- С.42-44.

5. Козлов В.Н. Тиреоидная трансформация при моделировании эндемического эффекта у белых крыс в эксперименте // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2006. - №5.

- С.27-30.

6. Хрыщанович В.Я., Третьяк С.П., Горанов В.А. и др. Экспериментальная модель гипотиреоза // Медицинский журнал БГМУ - 2008. - №4. - С.80-82.

REFERENCES

1. Avtandilov G.G. Medical morphometry. - Moscow: Meditsina, 1990. - 384 p. (in Russian)

2. Budnevsky A. V., GrekovaT.I.,Burlachuk V.T. Hypothyroidism and netireoidnye disease. - Petrozavodsk: IntelTek, 2004. - 169 p.

3. Glantz S. Biomedical Statistics. - Translation from English. - Moscow: Praktika, 1999. - 459 p. (in Russian)

4. Karpov O.I., Prikhodko V.P. Liver dysfunction as the debut of clinical manifestations of thyrotoxicosis // Novie Sankt-

Peterburgskie Vrachebnie Vedomosti. - 1997. - P.42-44. (in Russian)

5. Kozlov V.N. Thyroid transformation at modeling endemic effect of white rats under experiment // Sibirskij Medicinskij Zurnal (Irkutsk). - 2006. - №5. - P.27-30. (in Russian)

6. Hryschanovich V.J., Tretiak S.P., Goranov V.A., et al. The experimental model of hypothyroidism // Meditsinskij Zurnal BGMU. - 2008. - №4. - P.80-82. (in Russian)

Информация об авторах:

Колесников Сергей Иванович - д.м.н., профессор, академик РАН, главный научный сотрудник ФГБНУ «Научный центр проблем здоровья семьи и репродукции человека», 664003, г.Иркутск, ул. Тимирязеваа,16; Макарова Надежда Георгиевна -старший лаборант кафедры гистологии эмбриологии, цитологии, 664003, Иркутск, ул. Красного Восстания,1,

е-mail: [email protected].

Information About the Authors:

Kolesnikov Sergey - MD, PhD, DSc, professor, academician of the Russian Academy of Sciences, chief researcher Scientific Center of family health problems and human reproduction, 664003, Irkutsk, Timiryazeva str., 16; Makarova Nadezhda G. - Senior Laboratory Department of Histology embryology, cytology, 664003, Irkutsk, Krasnogo Vosstania str., 1, e-mail: [email protected]

© ДЭЛГЭРМАА Э., МИЕЭГОМБО А., ЧОЙЖАМЦ Г. - 2014 УДК: 616.333-008.17:616-08:615

РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТА «ШИНГУН-5» ПРИ ОЛИГОМИЦИН-ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ «ИНГИБИРОВАНИЕ ПОТОКА ПРОТОНОВ» НА ЖИВОТНЫХ

Дэлгэрмаа Энхдалай1, Амбага Миеэгомбо2, Чойжамц Готов3 ('Медицинский Институт «Ач», ректор - д.м.н., проф. Н. Баасанжав, кафедра традиционной медицины, зав. - д.м.н., проф. Ш. Болд; 2Медицинский Институт «Новая Медицина», ректор - д.м.н., проф. М. Амбага; 3Медицинский Институт «Оточ Манрамба», ректор - к.м.н., проф. Г. Чойжамц, Улан-Батор, Монголия)

Резюме. Изучено влияние препарата Монгольской Традиционной медицины «Шингун-5» на экспериментальной модели олигомицин-индуцированного «ингибирования потока протонов» на животных. «Ингибирование поток апротонов» моделировали внутрибрюшинным введением олигомицина («Sigma-Aldrich», США) в дозе 0,5 мг/ кг вещества на животное в течение 3 дней. Эта модель эквивалентна состоянию, которое в Монгольской традиционной медицин называется абстрактным символическим термином «ветер». Препарат «Шингун-5» оказывал мембраностабилирующий эффект и проявлял антиоксидантную активность.

Ключевые слова: АТФ-синтаза, ингибирование потока протонов, олигомицин, «Шингун-5».

THE RESULTS OF SOME PHARMACOLOGICAL ACTIVITIES OF THE TRADITIONAL MEDICINE «SHINGUN-5» ON OLIGOMYCIN - INDUCED "THE INHIBITION OF PROTON FLOW" EXPERIMENTAL ANIMAL MODEL

Enkhdalai Delgermaa1, Miegombo Ambaga2, Gotov Choijamts3

('Department of Traditional Medicine, «Ach» Medical Institute of Mongolia, Ulaanbaatar; 2«New Medicine» Medical Institute of Mongolia, Ulaanbaatar; 3«Otoch Manramba» Medical Institute of Mongolia, Ulaanbaatar, Mongolia)

Summary. There has been studied the pharmacological effect of the traditional medicine «Shingun-5» on oligomycin - induced "the inhibition of proton flow" experimental animal model. In the rabbits, inhibition of proton flow in ATP synthase was induced by the intraperitoneal administration of oligomycin (Sigma-Aldrich, USA) with a dose of 0.5 mg/kg, for three days. This experimental model was closely equivalent to the conditions of the abstract rlung symbolic terminology in Traditional medicine Mughal. The aqueous extract of «Shingun-5» exhibited the membrane stabilizing and the antioxidant activity.

Key words: ATP synthase, inhibition of proton flow, oligomycin, «Shingun-5».

В последние годы Всемирная организация здравоохранения и Министерство здравоохранения Монголии рекомендует проводить больше исследований в области народной традиционной медицины и изучения лекарственных растений [14]. Для лечения заболеваний в монгольской традиционной медицине применялось самое разнообразное сырьё растительного, животного и минерального происхождения. Многие лекарственные средства, использовавшиеся в практике традиционной медицины, до сих пор мало или не изучены совсем. Поэтому, возникает необходимость биологических, фармакологических и клинических исследований лекарственных прописей и сырья, которые используются в народной традиционной медицине.

В традиционной монгольской медицине (ТММ) все вопросы связаны со здоровьем, болезнью и лечением, характеристикой и индивидуальностью человека объясняют по теории трех доша «ветра, желчи, слизи» (ВЖС) [8].

Монгольский лекарь

Джамбалчойжидданзанпринлэй (1789-1838 гг.) составил крупнейший рецептурный справочник «Ман-аг ринчен-жуй-най». В этом справочнике собраны более 2000 лекарственных прописей. Из них мы выбрали пропись препарата «Шингун-5», который используется для лечения болезни «ветра». Этот рецепт состоит из пяти ингредиентов: смола ферулы - Ferula sinkiangensis K. M. Shen., мускатный орех - Myristica fragmns Houtt., корневище имбиря - Zingiber officinak Rosc, смола дерева Коммифора - Commiphora mukul, каменная соль - Halite [4]. Смола ферулы лечит болезни «ветра»; мускатный орех лечит нарушения «ветра» и болезни сердца; корневище имбиря способствует увеличению «теплоты», усвоению пищи и лечит нарушение «ветра», «слизи»; каменная соль используется при несварении желудка; смола дерева Коммифора обладает антибактериальным и обезболивающими действиям [3].

В 1994 году доктор, профессор М. Амбага и другие учёные выявили, что мембранные структуры (МС) целого организма, обусловливающие происхождение жизни, передаются и сохраняются во всех клетках последующего эволюционного развития (Г.А. Деборин, 1975; Л.Д. Бергельсон, 1985). Окружающие любые клетки и ткани, они могут служить одним из материальных биоэквивалентов теории трех доша, т.е. являются связующим звеном между теоретическими представлениями традиционной и современной медицины [1,2].

Новая теория профессора М. Амбага «ВЖС - мембранные структуры» основывается на тех фактах, что липидные бислои МС, находясь в трех основных структурно-функциональных состояниях (альфа, бета, гамма), находятся во взаимном переходе друг к другу, в постоянной противоположности, подвергаются сезонному, суточному, возрастному изменению и обусловливают клеточное деление (Н.М. Бабенко, 1991; В.М. Дильман, 1981; Ю.М. Лопухин и др., 1983; А.В. Алесенко и др., 1983), опеспечивают аккумуляцию энергии в виде АТФ, выделение тепла (В.П. Скулачев, 1972, 1989), сохранение и восстановление следов информации в виде памяти (Е.Б. Бурлакова, 1989), изменяют направление термодинамических процессов (Я. Кагава, 1985), альтерации под действием любых болезнетворных агентов (А.М. Чернух, 1979; Ф.З. Меерсон, 1983, Ю.А. Владимиров, 1989), влечет за собой патологические изменения. Поэтому, трудно найти какие-либо нормальные и патологические явления в любом организме, которые происходят без участия трех основных состояний МС. Эта концепция убеждает, что древние теоретические выражения «ВЖС» отражают взаимные связи с мембранными структурами живого организма, поскольку три разных основных альфа, бета, гамма - структурно-функциональных состояния и редокс-потенциалы в МС; проводят три разных уровня (быстрый, средний, медленный) функции клетки, ткани и даже целого организма. Они приводят к трем разным результатам

(малый, умеренный и высокий) АТФ, НАДФН, тепловая энергия, которые влияют на все функции на уровне целого организма [1,2,14].

АТФ-синтаза является уникальным преобразователем энергии в живой клетке, интегральным белком, который находится на внутренней мембране митохондрий и состоит из двух субъединиц, обозначаемых как F0 и Fj. При нормальных условиях протоны Н+ перено-ся0 тся 1через внутреннюю митохондриальную мембрану из матрикса, создавая электрохимический протонный градиент. При достижении определенного критического уровня величины протонного потенциала в интермембранном пространстве происходит перенос протона через Fu-канал в ферменте АТФ-синтазе, а освобождающаяся 0при этом энергия тратится на синтез адено-зинтрифосфата (АТФ) из аденозиндифосфата (АДФ) и неорганических фосфатов [9]. Олигомицин вырабатывается штаммом Streptomyces diastatochromogenes. Этот антибиотик выборочно ингибирует проходящий через Fu-каналы поток протонов водорода (Н+), которые создают электрохимический протонный градиент во внутренней митохондриальной мембране [10-13].

Целью нашего исследования явилось создание экспериментальной модели «ингибированного потока протонов» у кроликов и изучение фармакологического действия традиционной медицинской прописи «Шингун-5».

Материалы и методы

Исследование проводили в Экспериментальном Инновационном центре и клинико-биохимической лаборатории в Медицинском Институте «Новая Медицина» в Монголии.

В экспериментах использовались кролики породы Шиншилла, массой 2-2,5 кг, содержавшиеся на стандартной диете. Для создания модели «ингибирование потока протонов» внутрибрюшинно вводили олигомицин («Sigma-Aldrich», США) в дозе 0,5 мг/кг вещества на животное, в течение 3 дней [11]. Каждая группа животных включала 8 кроликов. 1-я группа - нормальная (интакт-ная); 2-я - контрольная - олигомицин-индуцированная патологическая модель без применения каких-либо препаратов; 3-я - опытная - олигомицин-индуцированный модель с введением изучаемого препарата «Шингун-5». Опытная группа кроликов получала водный настой «Шингун-5» орально при соотношении отвара (1:10), в дозе 50 мг/кг 2 раза в сутки.

Все работы с лабораторными кроликами проводились согласно принципу гуманного отношения к животным, в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных», «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» (Страсбург, 1986). Животных содержали в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе и питании, световом и температурном режиме, со свободным доступом к воде.

Контрольные измерения проводились на 4, 7, 14 и 28-ой день. При тестировании кровь была собрана в пробирки с гепарином. После центрифугирования цельной крови получали плазму и эритроциты. В плазме определяли активность фермента лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на полуавтоматическом анализаторе «Hospitex Screen Master» с использованием наборов реактивов фирмы «Hospitex Diagnostics» (Италия). Величину интенсификации свободнорадикального перекисного окисления липидов при «ингибировании потока протонов» оценивали по накоплению перекисных продуктов: малондиальдегида (МДА) в мембранных структурах эритроцитов. МДА определяется в мембранных тенях (полученных по методике М.П. Петровой, 1989), по образованию триметиновых комплексов при реакции с тиобарбитуровой кислотой, которые дают максималь-

ное поглощение при длине волны на спектрофотометре 535 нм [7]. Устойчивость (проницаемость) эритроци-тарных мембран оценивалась по интенсивности гемолиза к прооксидантному действию Н2О2 (по методике преинкубации суспензии эритроцитов с Н2О2), общепринятым спектрофотометрическим методом [2,6]. Измерение ректальной температуры животных производилось цифровым термометром с ценой деления 0,1оС (температура тела первого дня - измерение через 1 ч после инъекции).

Для определения массы тела кроликов использовались электронные весы.

Полученные результаты обработаны с использованием пакета (One way ANOVA) статистических программ SPSS 17.0. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез был р=0,05.

Результаты и обсуждение

В результате исследований показано, что масса тела контрольной группы кроликов уменьшалась, по сравнению с интактными животными, в 1,11-1,15 раза через 4-28 суток (р<0,001) (табл. 1); температура тела снижа-

Рис. 1. Влияние препарата «Шингун-5» на МДА эритроцитарных мембранах (ЕД) у кроликов с олигомицин-индуцированным «ингибированием потока протонов», по сравнению с интактными и контрольными животными.

Влияние олигомицина на массу тела кроликов интактной, контрольной и основной групп

Таблица 1

Группы Вес тело (г)

животных 4 день 7 день 14 день 28 день

Интактная (n=8) 2210,00±71,92 2231,25±70,7 2263,75±68,1 2300,00±67,1

Контрольная (олигомицин) (n=8) 1925,00±70,1 1981,25±73,1 2015,00±56,3 2055,00±46,2

Опытная («Шингун-5») (n=8) 2035,00±79,4* 2050,00±65,7* 2091,25±50,2* 2130,00±51,1*

Примечания: *- разность статистически значима, по сравнению с контролем, при р<0,01; ** -разность статистически значима, по сравнению с контролем при р<0,001.

лась в 1,06-1,03 раза через 1-7 суток (р<0,01) после моделирования «ингибирования потока протонов» у кроликов (табл. 2).

Влияние олигомицина на температуру тела у кроликов интактной контрольной и основной групп

Группы Температура тела (оС)

животных 1 день 4 день 7 день 14 день 28 день

Интактная (n=8) 38,50±0,29 38,51±0,28 38,51±0,25 38,50±0,18 38,53±0,18

Контрольная (олигомицин) (n=8) 36,16±0,37 37,23±0,32 37,46±0,29 37,85±0,30 38,15±0,15

Опытная («Шингун-5») (n=8) 36,55±0,45 37,70±0,22 38,13±0,29 38,28±0,31 38,38±0,24

Примечание: *- разность статистически значима, по сравнению с контролем, при р<0,05.

В результате исследования показано, что масса тела опытной группы кроликов уменьшалась, по сравнению с контрольными животными в 1,03-1,06 раза через 4-28 суток (р<0,01) (табл. 1) после моделирования «ингиби-рования потока протонов» у кроликов.

Содержание МДА в мембранных структурах эритроцитов контрольной группы кроликов увеличивалось, по сравнению с интактными животными, в 1,85 раза через 4 суток, в 3,67 раза - через 7 суток, в 3,26 раза - через 14 суток, в 1,62 раза - через 28 суток (р<0,001) (рис. 1). Проницаемость эритроцитарных мембран снижалась в 2,32 раза через 4 суток (р<0,001), в 2,17 раза - через 7 суток, в 1,51 раза - через 14 суток, в 1,13 раза - через 28 суток (р<0,001) (рис. 2). Активность сывороточной ЛДГ увеличивалась, по сравнению с интактными животными, в 1,63 раза через 4 суток, в 1,10 раза - через 7 суток, а уменьшалась в 1,12 раза - через 14 суток, в 1,85 раза - через 28 суток (р<0,001) после моделирования «инги-бирования потока протонов» у кроликов (рис. 3).

Содержание МДА в мембранных структурах эритроцитов опытной группы («Шингун-5») кроликов уменьшалось, по сравнению с контрольными животными, в 1,35 раза через 4 суток, в 1,38 раза - через 7 суток, в 1,36 раза - через 14 суток, в 1,70 раза - через 28 суток

(р<0,001) (рис. 1). Проницаемость эритроцитарных мембран увеличивалась, по сравнению с контрольными животными, в 1,22 раза через 4 суток, в 1,48 раза -через 7 суток, в 1,33 раза - через 14 суток, в 1,64 раза - через 28 суток (р<0,001) (рис. 2). Активность сывороточной ЛДГ снижалась, по сравнению с контрольными животными, в 1,20 раза через 4 суток, и увеличивалась в 1,23 раза через 7 суток, в 1,18 раза - через 14 суток, в 1,25 раза - через 28 суток (р<0,001) (рис. 3).

Применение олигомицина привело к снижению уровней массы тела, температуры тела, увеличению

Таблица 2 МДА в мембранньк структурах эритроцитов, увеличению проницаемости эритроцитарных мембран, активности сывороточной ЛДГ. При ингибирова-нии олигомицином потока протонов на конечном этапе (АТФ-синтазы) происходит снижение синтеза АТФ на субъединице F1 [9,10,11,12,13].

АТФ - важнейшее макроэрги-ческое соединение, расходуемое на обеспечение энергии различных процессов жизне-

—

S =

i. S - ft

s е - "

4лень 7день 14 день 2Ядень

■ Ннтактнх) группа (п=&)

Контрольная грулпа (алкгомнцнк) (п=8) в Онылйп группа (Шнпгун-5) (:"8:

Рис. 2. Влияние препарата «Шингун-5» на устойчивость эритроцитарных мембран (ЕД) у кроликов с олигомицин-индуцированным «ингибированием потока протонов», по сравнению с интактными и контрольными животными.

:

; 50(1

4/um ?:iui;. I4;khl 28 день

■ Изпжпзя I а (и ';

Кошршмш группа (ситгоииин!^) т "Ошлтя группа(Шннун-5) (п=&)

Рис. 3. Влияние препарата «Шингун-5» на активность сывороточной лактатдегидрогеназы в плазме у кроликов с олигомицин-индуцированным «ингибированим потока протонов», по сравнению с интактными животными и с контрольными животными.

деятельности. При уменьшении количества АТФ происходит замедление метаболизма, уменьшение тепловой энергии, снижение синтеза углеводов, липидов, протеинов нуклеидов, снижается уровень НАДФН, и связанные с ним процессы, наблюдается уменьшение массы и температуры тела животных. Снижается утилизация кислорода в дыхательной цепи, происходит моментальное замедление скорости потока электронов и протонов, который транспортируется через внутренние митохондриальные мембраны, увеличивается анаэробное дыхание и свободнорадикальное перекисное

окисление липидов мембран, а также происходит снижение содержания липидов, холестролов, насыщенных и ненасыщенных жирных кислот - основных составных частей мембраны. Наблюдается снижение степени пере-кисной резистентности мембран эритроцитов, увеличение содержания МДА в мембране и активности ЛДГ в сыворотке. Все эти явления рассматриваются как изменение фазового перехода мембранных структур или структурно-функциональная гамма-состояния в МС [1,2,5,9,10,11,12,13]. Олигомицин-индуцированная экспериментальная модель эквивалентна состоянию, которое называется абстрактным символическим термином «ветер» в ТММ.

Применение препарата «Шингун-5» в ходе эксперимента привело к снижению уровня МДА в мембранных структурах эритроцитов, уменьшению проницаемости эритроцитарных мембран и активности сывороточной ЛДГ, по сравнению с контрольной группой животных.

Следовательно, препарат «Шингун-5» оказывает мембраностабилирующий эффект и действует как ан-тиоксидант. Изучение механизмов фармакологического действия препарата «Шингун-5» требует дальнейших исследований.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.

Декларация о финансовых и иных взаимодействиях. Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.

ЛИТЕРАТУРА

1. Амбага М. Ветер, желчь, слизь и мембранные структуры: Дис. ... д-ра мед. наук. - Улан-Батор, 1994.

2. Амбага М., Тумэн^лзий А. Традиционная Монгольская медицина. - Улан-Батор: Адмон, 2012.

3. Асеева Т.А, Дашиев Д.Б, Кудрин А.Н. и др. Лекарствоведение в тибетской медицине. - Новосибирск: Наука, Сиб.отделение, 1989. - 192 с.

4. Джамбалчойжидданзанпринлэй. Монгольские медицинские сокровища. (Ман-аг ринчен-жуй-най), Внутренной Монголии, 1978. - С.18-19.

5. Кагава Я. Биомембраны. - М.: Высшая школа, 1985. -303 с.

6. Покровский А.А., Абраров А.А. К вопросу о перекисной резистентности эритроцитов // Вопросы питания. - 1964. - Т. 23. №6. - С.44-49.

7. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Т .Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.66-68.

8. Чжуд-ши Канон тибетской медицины. T.I. - Улан-Удэ: Республиканская типография, 2003. - 336 с.

9. Boyer P.D. The ATP synthase - a splendid molecular machine // Annual Review in Biochemistry - 1997. - Vol. 66. -P.717-749.

10. Kramar R., Honenegger M., Srour A.N., Khanakah G. Oligomycin toxicity in intact rats // Agents Actions. - 1984. - №56. (Dec.). - P.660-663.

11. Lardy H.A., Johnson D., McMurray W.C. Antibiotics as tools for metabolic studies. A survey of toxic antibiotics in respiratory, phosphorylative and glycolytic systems // Arch. Biochem. Biophys. - 1958. - Vol. 78. - P.587-597.

12. Liu Y., Schubert D.R. The specificity of neuroprotection by antioxidants // Journal of Biomedical Science. - 2009. - Vol.16. №98 - P.1-14.

13. Symersky J., Osowski D., Walters D.E., Mueller D.M. Oligomycin frames a common drug binding site in the ATP synthase // PNAS. - 2012. - Vol. 109. №35. - P.13961-13965.

14. WHO traditional medicine strategy: 2014-2023. - Geneva: World Health Organization, 2013. - 76 p.

REFERENCES

1. Ambaga M. Wind, bile, mucus and membrane structures: Thesis for the degree of Doctor of Medicine. - Ulaanbaatar, 1994. (in Mongolian)

2. Ambaga M., Tumen-Olzy A. Traditional Mongolian medicine. - Ulaanbaatar: Admony, 2012. (in Mongolian)

3. Aseeva T.A., Dashiyeva D.B., Kudrin A.N., et al. Pharmacology in Tibetan medicine. - Novosibirsk: Nauka, Sib. otdelenie, 1989. - 192 p. (in Russian)

4. Dzhambalchoyzhiddanzanprinley Mongolian medical treasures. (Man-ai Rinchen-chew-nai). - Inner Mongolia, 1978. - P.18-19. (in Mongolian)

5. Kagawa Y. Biomembranes. - Moscow: Vyschaya Schola, 1985. - 303 p. (in Russian)

6. Pokrovsky A.A., Abrarov A.A. On the question of peroxide resistance of erythrocytes // Voprosy Pitania. - 1964. - Vol. 23. №6. - P.44-49. (in Russian)

7. Stalnaya I.D., Garishvili T.T. Metod determination of

malondialdehyde using thiobarbituric acid // Modern methods in biochemistry. - Moscow: Meditsina, 1977. - P.66-68. (in Russian)

8. Chzhud-shi Canon Tibetan medicine. - Vol. I. - Ulan-Ude: Publishing House of "Republican Printing House", 2003. - 336 p. (in Russian)

9. Boyer P.D. The ATP synthase - a splendid molecular machine // Annual Review in Biochemistry - 1997. - Vol. 66. -P.717-749.

10. Kramar R., Honenegger M., Srour A.N., Khanakah G. Oligomycin toxicity in intact rats // Agents Actions. - 1984. - №56. (Dec.). - P.660-663.

11. Lardy H.A., Johnson D., McMurray W.C. Antibiotics as tools for metabolic studies. A survey of toxic antibiotics in respiratory, phosphorylative and glycolytic systems // Arch. Biochem. Biophys. - 1958. - Vol. 78. - P.587-597.

12. Liu Y., Schubert D.R. The specificity of neuroprotection by

antioxidants // Journal of Biomedical Science. - 2009. - Vol.16. №98 - P.1-14.

13. Symersky J., Osowski D., Walters D.E., Mueller D.M. Oligomycin frames a common drug binding site in the ATP

synthase // PNAS. - 2012. - Vol. 109. №35. - P.13961-13965.

14. WHO traditional medicine strategy: 2014-2023. - Geneva: World Health Organization, 2013. - 76 p.

Информация об авторах:

Дэлгэрмаа Энхдалай - докторант, преподаватель Медицинского Института «Ач», Сонгино хайрхан район, Таван шар, пр. Энхтайван-11, Улан-Батор, 210535, Монголия, тел. (976) 96054988, e-mail: [email protected]; Амбага Миегомбо -д.м.н., профессор, ректор Медицинского Института «Новая Медицина», Монголия, Улан-Батор, Сонгино хайрхан район, пр. Сонсголон-20, тел. (976) 11-633235, [email protected]; Чойжамц Готов - к.м.н., профессор, ректор Медицинского Института «Оточ Манрамба», Улан-Батор, Монголия, Баянзурх район, пр. Их тойруу-Сансрын тойрог, тел. (976) 70157305,

e-mail: [email protected].

Information About of the Authors:

Delgermaa Enhdalay - doctoral student, teacher Medical Institute "Ah," Songino Khairkhan area, Tavan ball, etc. Enhtayvan-11, Ulaanbaatar 210535, Mongolia, tel. (976) 9605 4988, e-mail: [email protected]; Ambaga Miegombo - d.m.n., Rector of the Institute of Medicine "New Medicine", Mongolia, Ulaanbaatar, Songino Khairkhan district, pr. Sonsgolon-20, tel. (976) 11-633235, [email protected]; Choyzhamts Ready - Ph.D., Professor, Rector of the Medical Institute "Otoch Manramba", Ulaanbaatar, Mongolia, Bayanzurkh district, etc. Their toyruu- Sansryn toyrog, tel. (976) 70157305, e-mail: [email protected].

© НАСОНОВА М.В., ХОДЫРЕВСКАЯ Ю.И., БУРАГО А.Ю., ДОРОНИНА Н.В., ЕЖОВ В.А., КУДРЯВЦЕВА Ю.А. - 2014 УДК 615.462-036.5

ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ БИОДЕГРАДИРУЕМЫЕ МЕМБРАНЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ОБРАЗОВАНИЯ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ СПАЕК

Марина Владимировна Насонова1, Юлия Ивановна Ходыревская1, Андрей Юрьевич Бураго1, Нина Васильевна Доронина2, Владимир Александрович Ежов2, Юлия Александровна Кудрявцева1 (1Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний, г. Кемерово, директор - д.м.н., проф. О.Л. Барбараш; 2Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К.Скрябина РАН, г. Пущино, Московская область, директор - чл.-корр. РАН А.М. Боронин)

Резюме. Изготовлены и протестированы противоспаечные мембраны на основе сополимера полигидроксибу-тирата/оксивалерата с молекулярной массой 404 кДа. Для придания мембранам противовоспалительных и антиадгезивных свойств использовали дипиридамол с концентрацией 0,5 мг/мл. Образцы мембран изготавливали методом электроспиннинга. Для включения дипиридамола вовнутрь волокна использовали коаксиальную насадку. Для оценки противовоспалительной активности мембраны имплантировали внутрибрюшинно крысам-самцам линии Wistar. В сыворотке крови животных через 14 дней оценивали уровень TNF-a, IL-6 и МСР-1. Образцы мембран удаляли вместе с окружающими тканями и изучали при помощи световой микроскопии. Показано, что метод электроспиннинга позволяет равномерно распределять лекарственный препарат как по всему объему матрицы, так и включать во внутреннюю часть формируемых волокон. Дипиридамол, выделяясь в окружающие ткани, оказывает противовоспалительное действие. Включение дипиридамола во внутреннюю часть волокон способствует его последующему равномерному выделению в окружающее пространство и ускоряет сроки биодеградации мембраны.

Ключевые слова: спаечный процесс, биодеградируемые мембраны, биосовместимые полимеры.

ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF BIODEGRADABLE MEMBRANES IN PREVENTION OF POSTOPERATIVE ADHESION FORMATION

M.V. Nasonova1, Y.I. Khodyrevskay1, A.Y. Burago2, N.V. Doronina2, V.A. Ezhov1, Y.A. Kudryavtseva1 ^Research Institute for Complex Issues of Cardiovascular Diseases, Kemerovo, Russia; 2Skryabin Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms, Puschino, Moscow reg., Russia)

Summary. Anti-adhesion membranes from polyhydroxybutyrate / oxovalerate copolymer with molecular weight of 404 kDa were fabricated and tested. Membranes were loaded with 0.5 mg / ml dipyridamole to obtain anti-inflammatory and anti-adhesion properties. The membrane samples were prepared by electrospinning. Dipyridamole was incorporated in the fibers using the co-axial nozzle. The membranes were implanted intraperitoneally in male Wistar rats to assess their anti-inflammatory activity. Serum levels of TNF-a, IL-6 and MCP-1 were measured at days 14 after the implantation. The membrane samples were removed along with surrounding tissues and examined by light microscopy. The study results proved electrospinning method to be able to distribute equally the drug molecules in the scaffold and deliver them into the inner surface of the electrospun fibers. The release of dipyridamole into the surrounding tissues produces anti-inflammatory effects. The incorporation of dipyridamole in the inner surface of the fibers contributes to its subsequent release into the surrounding tissues and accelerates the membrane biodegradation rate.

Key words: adhesion process, prevention of adhesion formation, biodegradable membranes, biocompatible polymers, anti-inflammatory effects.

Совершенствование материалов для профилактики спаечного процесса после полостных хирургических операций продолжается по настоящее время [4,7,13], в том числе эта проблема актуальна и для сердечнососудистой хирургии [2,8,12]. Применение биорезор-бируемых мембран в кардиохирургии позволит значительно снизить риск таких осложнений, как случайное повреждение структур сердца при диссекции спаек в

случае повторной операции, исключить дополнительную хирургическую травму, сократить время операции и наркоза. Противоспаечные мембраны должны вызывать минимальный воспалительный ответ со стороны организма [6,13]. Однако ни одна из предложенных на рынке мембран не дает 100% эффективности в профилактике образования спаек [13]. Все разработанные мембраны не учитывают особенности патогенеза об-