CC BY
0
DOI: 10.48612/sbornik-2023-2-20 УДК 619:615.9:616-092.9
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ КРОВИ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ОЦЕНКЕ СУБХРОНИЧЕСКОЙ ПЕРОРАЛЬНОЙ ТОКСИЧНОСТИ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩЕГО СРЕДСТВА ЭКОВЕТ-А
Абдулхажиева Айсет Шаамановна
Кузьминова Елена Васильевна, д-р вет. наук, доцент
Рогалева Евгения Викторовна, д-р. вет. наук
ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар, Российская Федерация
В статье представлены материалы по изучению гематологических показателей лабораторных животных при оценке субхронической пероральной токсичности дезинфицирующего средства Эковет-А. Результаты проведенных исследований показали, что применение образца Эковет-А в дозах 2,2; 1,1 и 0,45 мл/кг массы тела на протяжении 28 дней не вызывает внешних признаков токсикоза и гибели крыс. Применение средства в дозах 2,2 и 1,1 мл/кг массы тела обуславливает изменение относительно контрольных крыс в пределах видовой нормы ряда гематологических показателей -повышение уровня лейкоцитов и эозинофилов, снижение эритроцитов и гемоглобина.
Ключевые слова: дезинфицирующее средство Эковет-А; субхроническая токсичность; лабораторные крысы; гематологические показатели
RESULTS OF BLOOD STUDIES OF LABORATORY ANIMALS WHEN ASSESSING THE SUBCHRONIC ORAL TOXICITY OF THE ECOVET-A DISINFECTANT
Abdulkhazhieva Ayset Shaamanovna
Kuzminova Elena Vasilievna, Dr. Vet. Sci., Associate Professor Rogaleva Evgenia Viktorovna, Dr. Vet. Sci.
Krasnodar Research Centre for Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Krasnodar, Russian Federation;
The article presents materials on the study of hematological parameters of laboratory animals when assessing the subchronic oral toxicity of the Ecovet-A disinfectant. The results of the studies showed that the use of the Ecovet-A sample in doses of 2.2; 1.1 and 0.45 ml/kg body weight for 28 days does not cause external signs of toxicosis and death in rats. The use of the drug in doses of 2.2 and 1.1 ml/kg body weight causes a change in a number of hematolog-ical parameters relative to control rats within the species norm - an increase in the level of leukocytes and eosinophils, a decrease in erythrocytes and hemoglobin.
Key words: disinfectant Ecovet-A; subchronic toxicity; laboratory rats; hematological parameters
Дезинфекция - это комплекс мер по уничтожению возбудителей инфекционных болезней человека и животных во внешней среде физическими, химическими и биологическими методами. В насто-
ящее время возросшая угроза вспышек инфекционных болезней, с учетом возрастающий резистентности различных микроорганизмов к антибиотикам, диктует необходимость усиления мер по раз-
работке эффективных дезинфицирующих средств, приводящих к быстрой гибели возбудителей на контаминированных объектах [5].
При выборе дезинфицирующих средств предпочтение отдается тем, которые обладают широким спектром антимикробного действия, малой токсичностью, длительными сроками использования, медленным формированием резистентных вариантов микроорганизмов, низкой агрессивностью по отношению к материалам, экологической безопасностью, стабильностью при хранении и транспортировке, низкой стоимостью [3].
Большинству этих требований отвечают активированные растворы, содержащие в своем составе биоцидные компоненты - хлорноватистую кислоту, озон и другие. Перед внедрением в практику новых дезинфектантов обязательным критерием оценки, кроме специфических свойств, является изучение их токсико-метрических параметров. Токсикология занимается изучением как природы и механизма токсических повреждений, так и количественной оценкой всего спектра биологических изменений, обусловленных воздействием химических веществ. Основная цель субхронической токсичности - выявить чувствительные к действию изучаемого препарата органы и ткани у лабораторных животных, а также оценить обратимость токсических эффектов [1, 4, 6].
Цель работы - изучить гематологические показатели лабораторных животных при оценке субхронической перо-ральной токсичности дезинфицирующего средства Эковет-А.
Методика исследований. Объект исследований - дезинфицирующее средство Эковет-А, представляющее собой бесцветную прозрачную жидкость без запаха или с легким запахом оксидантов. Состав Эковета-А представлен хлоркисло-родными и гидропероксидными соединениями: хлорноватистая кислота (50-95 %); диоксид хлора (1-7 %); пероксид во-
дорода (3-8 %); другие пероксидные и супероксидные соединения (1-5 %). Концентрация оксидантов в пересчете на активный хлор составляет 0,5 г/л.
Исследования проведены в Краснодарском научно-исследовательском ветеринарном институте с соблюдением правил, предусмотренных Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, которые используются с экспериментальной и научной целью (ETS № 123, Страсбург. 18.03.1986).
Субхроническую токсичность дезинфицирующего средства Эковет-А определяли на лабораторных животных с использованием методик, представленных в Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, изданном под общей редакцией Р.У. Хабриева (2005).
Для опыта из 40 нелинейных лабораторных крыс со средней массой тела 127,8±1,23 г, по принципу пар-аналогов сформировали 4 группы по 10 в каждой (три группы - опытные, одна - контрольная). Отправной точкой для проведения субхронической токсикометрии служила доза дезинфицирующего средства Эковет-А, полученная при проведении острой токсичности - 22,1 мл/кг массы тела. С учетом чего в эксперименте использовались следующие дозы образца Эковет-А: 1 опытная группа - 1/10 от максимально введенной в остром эксперименте, что составило 2,2 мл/кг массы тела; 2 опытная группа - 1/20 от максимально введенной в остром эксперименте или 1,1 мл/кг массы тела; 3 опытная группа -1/50 от максимально введенной в остром эксперименте или 0,45 мл/кг массы тела; 4 контрольная группа - дистиллированная вода в эквиобъеме, используемом в 1 опытной группе. Схема введения предусматривала однократное ежедневное пе-роральное введение животным образца дезинфицирующего средства Эковет-А с помощью дозатора переменного объема на протяжении 28 дней.
На протяжении опыта за крысами
всех групп осуществлялся ежедневный физикальный контроль, когда оценивались сохранность, общее состояние и поведение животных (поедаемость корма, потребление воды, подвижность, кожная чувствительность, нервно-рефлекторная возбудимость), состояние кожи, шерстного покрова и видимых слизистых оболочек, функциональние систем и органов. Особое внимание уделялось возможным проявлениям интоксикации.
Комплексный гематологический анализ был проведен у пяти животных из каждой группы на 14 и 28 сутки эксперимента при помощи автоматизированного анализатора Mythic 18 vet.
Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с помощью программного пакета Statistica 10.0 с определением следующих показателей: М - среднее арифметическое; m - ошибка среднего арифметического.
Результаты исследований и их обсуждение. В результате наблюдений установлено, что длительное применение образца дезинфицирующего средства Эковит-А в изучаемых дозах не приводит к гибели животных, а также не вызывает изменений в поведенческих реакциях крыс (не выявлено повышенной возбудимости, настороженности, агрессивности и пугливости), нарушений двигательной активности и нервно-мышечной возбудимости (изменения спонтанной двигательной активности, сонливости, тремора, судорог, атаксии, изменения рефлексов положения, изменения реакций на прикосновение).
При исследовании кожи и шерстного покрова выпадения шерсти, алопеций, изменения цвета и структуры не установлено. У опытных животных не выявлено изменений и достоверных различий с контрольной группой в показателях ритма дыхания, частоты сердечных сокращений и температуры тела, которые не выходили за границы видово-возрастной нормы для взрослых здоровых крыс. Отклонений в функциях пищеварения и мочеотделения отмечено не было: фекальные болюсы были оформлены, коричневатого цвета, нормальной консистенции; отсутствовали изменения в цвете и объеме мочи.
Изучение гематологических показателей крыс в субхроническом эксперименте (таблица 1) показало, что применение образца дезинфицирующего средства Эковет-А в дозах 2,2 и 1,1 мл/кг массы тела приводит к повышению в пределах видовой нормы уровня лейкоцитов: к середине опыта, в среднем по группам, на 14,5 %; к концу опыта в 1 опытной на 20,1 % (р<0,01) и во 2 опытной на 14,2 %. Также в 1 и 2 опытной группах относительно контроля выявлено повышение уровня эози-нофилов: на 14 день достоверная (р<0,05) разница составила 43,7 % и 30,8 %; на 28 день - 29,4 % и 25 % соответственно по группам. У опытных крыс 1 группы после 28-дневного введения образца дезинфицирующего средства Эковет-А зарегистрировано достоверное (р<0,05) снижение количества эритроцитов - на 9,5 % и гемоглобина - на 12,4 % относительно интактных животных.
Таблица 1 - гематологические показатели лабораторных крыс при оценке субхронической пероральной токсичности дезинфицирующего средства Эковет-А (М±т; п=5)
Показатели Группы
1 опытная 2 опытная 3 опытная 4 контрольная
На 14 день исследований
Лейкоциты, 109/л 11,8±0,85 11,6±0,90 10,3±0,42 10,0±0,57
Эозинофилы, % 3,2±0,18* 2,6±0,24* 2,2±0,37 1,8±0,21
Палочкоядерные нейтрофилы, % 2,2±0,37 2,0±0,55 3,0±0,45 2,8±0,37
Сегментоядерные нейтрофилы, % 21,4±1,96 24,6±0,81 24,6±1,96 25,6±1,36
Лимфоциты, % 71,2±1,69 69,0±1,05 67,8±1,59 67,4±1,44
Продолжение таблицы 1
Моноциты, % 2,0±0,32 1,8±0,58 2,4±0,51 2,4±0,24
Эритроциты, 1012/л 8,6±0,24 8,8±0,27 9,2±0,30 9,0±0,33
Гемоглобин, г/л 142,2±4,50 144,0±3,85 151,4±5,08 156,6±6,76
Тромбоциты, 109/л 411,4±37,95 420,6±27,07 408,6±20,27 392,2±13,48
СОЭ (по Панченкову) 2,0±0,32 1,8±0,37 2,2±0,58 2,0±0,32
На 28 день исследований
Лейкоциты, 109/л 12,9±0,56** 12,0±0,73 10,6±0,43 10,3±0,62
Эозинофилы, % 3,4±0,27 3,2±0,37 2,6±0,51 2,4±0,40
Палочкоядерные нейтрофилы, % 1,8±0,37 2,0±0,45 2,2±0,37 2,8±0,58
Сегментоядерные нейтрофилы, % 21,0±0,71 22,8±1,16 24,8±1,20 23,6±1,12
Лимфоциты, % 72,2±0,97 70,2±1,53 68,0±1,41 69,4±1,44
Моноциты, % 1,6±0,24 1,8±0,37 2,0±0,45 1,8±0,37
Эритроциты, 1012/л 8,4±0,25* 8,5±0,32 9,0±0,38 9,2±0,19
Гемоглобин, г/л 138,8±4,57* 147,0±6,85 158,6±5,19 156,0±5,57
Тромбоциты, 109/л 427,0±20,02 410,8±18,54 398,2±21,41 382,2±13,51
СОЭ (по Панченкову) 2,4±0,51 2,5±0,45 2,4±0,75 2,2±0,37
Примечание: степень достоверности ** р < 0,01; * р < 0,05 по отношению к контролю
Выводы. В результате исследования субхронической токсичности дезинфицирующего средства Эковет-А на лабораторных животных установлено, что его применение в дозах 2,2; 1,1 и 0,45 мл/кг массы тела на протяжении 28 дней не вызывает внешних признаков токсикоза и гибели крыс. Применение средства в дозах 2,2 и 1,1 мл/кг массы тела обуславливает изменение в пределах видовой нормы относительно контроля ряда гематологических показателей крыс - повышение уровня лейкоцитов и эози-нофилов, снижение эритроцитов и гемоглобина.
Список литературы
1. БирюковаН. П. Общие принципы доклинической оценки безопасности фармакологических лекарственных средств для ветеринарного применения / Н. П. Бирюкова, С. В. Русаков, В. В. Напалкова // Ветеринарный врач. - 2018. - № 1. - С. 3-9.
2. Дорожкин В. И. Изучение острой и субхронической токсичности диатомита / В. И. Дорожкин, Г. И. Павленко, Н. С. Павлова // Российский журнал Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2021. - № 4 (40). - С. 505-513.
3. Тяпкина Е. Рациональное использование лекарственных препаратов в ветеринарии / Е. Тяпкина, Л. Хахов, М. Семе-ненко [и др.]. - Краснодар : Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт, 2014. - 57 с.
4. Черкасова О. А. Биоцидная активность электролизного раствора гипохло-рита натрия и электрохимически активированного раствора анолита нейтрального / О. А. Черкасова, И. И. Бурак, А. А. Ра-дишевич [и др.] // Вестник Витебского государственного медицинского университета. - 2008. - Т. 7, № 1. - С. 103-112.
5. Шандала М. Г. Дезинфектология как важная составляющая системы антимикробной защиты / М. Г. Шандала // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. - 2014. - № 3. - С. 4-7.
6. Шапиев Б. И. Дезинфекционное средство на основе нейтрального анолита / Б. И. Шапиев, А. А. Алиев, З. Г. Гебекова [и др.] // Проблемы экологической медицины : материалы VII научно-практической конференции памяти профессора С. А. Абусуева, Махачкала, 22 декабря 2017 года. - Махачкала: Дагестанский государственный медицинский университет, 2017. - С. 263-267.
