CC BY
26
УДК 619:615.1+577.15/17
резистентность у новорожденных телят под влиянием «гамавита»
С. Ю. Смоленцев
Марийский государственный университет, г. Йошкар-Ола
resistance in newborn calves under the influence of "gamavit"
s. Yu. Smolentsev
Mari State University, Yoshkar-Ola
Большой проблемой современного животноводства является сохранение молодняка в ранний постнатальный период, поскольку новорожденные животные обладают слабой устойчивостью к большинству заболеваний или не имеют ее совсем. Это связано с тем, что при рождении у телят отсутствуют в крови иммуноглобулины - основной фактор защиты в постнатальный период, а состояние иммунологической неполноценности изменяется только после потребления первых порций молозива, содержащего высокий уровень иммуноглобулинов и иммунокомпетентных клеток. Проведен опыт на новорожденных телятах с подкожным введением «Гамавита» с целью стимуляции всасывания колостральных иммуноглобулинов и становления неспецифической резистентности. Работа выполнена в весенне-летний период на молочно-товарной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива «Рассвет» Куженерско-го района Республики Марий Эл. Объектами исследования были отобранные по принципу пар аналогов 16 новорожденных телят черно-пестрой породы, которые были разделены на 2 группы - контрольную и опытную. Телятам опытной группы «Гамавит» инъецировали внутримышечно двукратно по 100 мкг в первый час после рождения и через 4-5 часов. Животным контрольной группы вводили подкожно физиологический раствор хлористого натрия по той же схеме. Пробы крови отбирали через 1 и 10 суток после рождения. Применение данного препарата повысило уровень лейкоцитов, белка и иммуноглобулинов в крови новорожденных телят, что дает основание считать, что тимус у новорожденных телят участвует в регуляции всасывания иммуноглобулинов и других важных компонентов молозива. «Гамавит» стимулировал становление неспецифической резистентности, что проявилось в увеличении показателей фагоцитарной и бактерицидной активности крови. Повышение показателей неспецифической резистентности телят сопровождалось увеличением прироста живой массы в молочный период выращивания.
Ключевые слова: новорожденные телята, иммуноглобулины, неспецифическая резистентность, гамавит.
A major problem is the preservation of modern animal husbandry calves in the early postnatal period, as newborn animals have poor resistance to most diseases or do not have it at all. This is due to the fact that at the birth of calves blood immunoglobulins - the main factor of protection in the postnatal period - are absent. Therefore, immunologic inadequacy condition is changed only after consumption of the first portions of colostrum containing high levels of immunoglobulins and immune cells. Experiments were performed on newborn calves with subcutaneous "Gamavita" to stimulate absorption of colostral immunoglobulins and the formation of non-specific resistance. The work was held in spring and summer at dairy farm of agricultural production cooperative "Rassvet" of the Kuzhenersky district of the Republic of Mari El. The objects of study were 16 newborn calves of black-motley breed selected on the basis of pairs of analogs. Animals were divided into 2 groups - the control-one and the experimental-one. The calves from the experimental group were injected "Gamavit" intramuscularly with 100 micrograms twice in the first hour after birth and after 4-5 hours. The calves from the control group were injected subcutaneously with a physiological sodium chloride solution in the same way. Blood samples were collected at 1 and 10 days after birth. The use of this drug increased the level of white blood cells, proteins and immunoglobulins in the blood of newborn calves, which gives the reason to believe that the thymus in newborn calves involved in the regulation of absorption of immunoglobulins and other important components of colostrum. "Gamavit" stimulated the formation of non-specific resistance, which was manifested in the increase in the phagocytic and bactericidal activity of blood. Improving indicators of nonspecific resistance of calves was accompanied by an increase in weight gain in dairy season of cultivation.
Keywords: newborn calves, immunoglobulins, nonspecific resistance, gamavit.
Одним из резервов увеличения продуктивно- повышение резистентности, особенно в условиях сти молодняка крупного рогатого скота является несбалансированного кормления коров-матерей
> Смоленцев С. Ю., 2017
Vestnik of the Mari State University
Chapter "Agriculture. Economics". 2017, vol. 3, no. 1 (9)
и нарушений технологии содержания. Для этих целей предложено множество препаратов, однако преимущество имеют природные вещества, участвующие в процессах естественной регуляции жизнедеятельности организма.
Проведенными ранее исследованиями установлено участие ряда аминокислот в регуляции процессов пищеварения, межуточного обмена и неспецифической резистентности у телят и отработаны способы применения препаратов аминокислот для этих целей. У новорожденных телят аминокислоты глицин, глутамат, таурин, орнитин, введенные перорально или парентерально, повышают интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива в кишечнике, ускоряют становление естественной резистентности [3; 12; 13].
В регуляции неспецифической резистентности и иммунитета участвуют также производные аминокислот, в том числе пептиды [4; 14; 15].
Для проведения исследований нами был выбран дипептид «Гамавит» (глутамил-триптофан). Глутаминовая кислота, входящая в его состав, относится к группе аминокислот, способных ускорять дифференцировку предшественников Т-клеток в Т-лимфоциты и усиливать ответ на гетерологические эритроциты in vitro на спле-ноцитах и в опытах на лабораторных животных [2]. «Гамавит» стимулировал гуморальный иммунный ответ у тимэктомированных мышей, увеличивал содержание циклических нуклеотидов в спленоцитах, усиливал хемотаксис и фагоцитоз нейтрофилов, стимулировал регенерацию печени у крыс после частичной гепатэктомии и при экспериментальном циррозе.
Препарат применяют для стимулирования регенерации тканей при воспалительных заболеваниях, трофических нарушениях, поражениях кожи и слизистых оболочек, последствиях воздействия термических и химических факторов, сопровождающихся нарушением репаративных процессов [10; 16].
Материалы и методы. Работа выполнена в весенне-летний период на молочно-товарной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива «Рассвет» Куженерского района Республики Марий Эл. Объектами исследования были отобранные по принципу пар аналогов 16 новорожденных телят черно-пестрой породы, которые были разделены на 2 группы - контрольную и опытную. Телятам опытной группы «Гамавит» инъецировали внутримышечно двукратно по 100 мкг в первый час после рождения и через 4-5 часов. Животным контрольной группы вводили подкож-
но физиологический раствор хлористого натрия по той же схеме. Пробы крови отбирали через 1 и 10 суток после рождения.
У телят каждой группы в ходе проведения научно-хозяйственного опыта определяли следующие показатели:
■ гематологические - подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов пробирочным методом в камере Горяева, количество гемоглобина по методу Сали, выведение лейкоцитарной формулы путем подсчета в мазках крови лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза;
■ биохимические - исследование в сыворотке крови животных уровня общего белка, мочевины и глюкозы на биохимическом анализаторе AU480 Olympus, иммуноглобулинов на анализаторе Minicap, Sebia;
■ иммунологические - определение бактерицидной активности сыворотки крови - с применением тест культуры Staphylococcus epidermidis в модификации (Смирнова, Кузьмина, 1966); ли-зоцимной активности - с использованием тест культуры Micrococcus lysodeikticus в модификации УНИИЭВ;
■ оценку достоверности эффектов проводили методом парных сравнений [1].
Анализы выполнялись в лаборатории «Гемо-хелп» на кафедре «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» Нижегородской ГСХА.
Таблица 1
Биохимические показатели крови телят
Показатели Возраст 1 сутки Возраст 10 суток
контроль опыт контроль опыт
Иммуноглобулины, мг/мл 12,5±0,7 17,2±1,3* 13,8± 1,1 17,1±1,0*
Общий белок, % 5,53±0,49 6,41±0,47 6,48±0,53 6,79±0,55
Гемоглобин, г/л 96,7±7,8 99,8±8,2 93,4±6,5 96,7±5,5
Мочевина, ммоль/л 4,61±0,35 4,92±0,27 3,91±0,32 3,78±0,17
Глюкоза, ммоль/л 5,82±0,41 6,29±0,32 5,44±0,39 5,42±0,23
Примечание: * P < 0,05 по парному критерию при сравнении с контролем.
Результаты исследований. Результаты, полученные в ходе опыта, показали, что через сутки после внутримышечного введения новорожденным телятам «Гамавита» уровень иммуноглобулинов в крови у них был на 37,6 % (Р < 0,05) выше, чем
у контрольных животных (табл. 1), что, вероятно, связано с изменением интенсивности всасывания этих белков из молозива. Известно, что поступление иммуноглобулинов молозива осуществляется у новорожденных телят в основном в первые сутки после рождения, особенно в первые часы, посредством пиноцитоза. Повышенный уровень иммуноглобулинов в крови телят опытной группы сохранился и через 10 дней после введения препарата (+23,9 %, Р < 0,05). Некоторое увеличение концентрации иммуноглобулинов в крови телят контрольной группы на 10 день опыта (+10,4 %) может быть связано с тем, что через неделю после рождения у телят слизистая оболочка тонкого кишечника способна синтезировать т. н. секреторные защитные иммуноглобулины [5].
Одновременно у телят опытной группы отмечена тенденция повышения в крови уровня общего белка, гемоглобина и глюкозы. При втором анализе крови телят различия наблюдались лишь по содержанию общего белка и гемоглобина, при некотором снижении концентрации мочевины и глюкозы.
У телят опытной группы через 1 сутки после рождения отмечен более высокий уровень лейкоцитов в крови по сравнению с интактными животными (+26,2 %, Р < 0,05). Показатели крови телят на фоне применения «Гамавита» (табл. 2).
Таблица 2
Морфологические показатели крови телят на фоне применения
Показатели Возраст 1 сутки Возраст 10 суток
контроль опыт контроль опыт
1 2 3 4 5
Эритроциты, млн/мкл 7,72±0,27 8,83±0,23* 8,05±0,06 8,17±0,05
Лейкоциты, тыс/мкл 8,54±0,63 10,78±0,57* 8,79±0,31 9,83±0,65*
Лейкофор-мула, %:
палочкоядерные нейтрофилы 2,1 1,4 1,8 1,2
сегментоядер-ные нейтрофилы 37,3±2,6 40,1±3,4 42,6±3,0 41,8±2,8
общее количество нейтро-филов, тыс/мкл 3,61 4,65 4,2 4,5
эозинофилы 1,1 1,3 0,8 1,1
базофилы 2,0 1,6 1,7 1,2
моноциты 7,8 7,3 8,3 7,5
лимфоциты 49,7±2,5 48,3±3,4 45,8±2,9 46,2±3,3
Продолжение табл. 2
1 2 3 4 5
общее количество лимфоцитов, тыс/мкл 4,7 5,81* 4,52 4,98
Соотношения лейкоцитов:
лимфоциты/ сегменто-ядер-ные нейтрофилы 1,33 1,2 1,08 1,19
нейтрофилы/ лимфоциты 0,79 0,86 0,97 0,86
Выявленные различия морфологических показателей крови у животных опытных групп нашли отражение в показателях неспецифической резистентности. Фагоцитарная активность крови у телят опытной группы на 1 сутки была выше на 13,4 % (Р < 0,05 %), чем в контроле, что обусловлено в значительной мере функцией нейтро-филов. Увеличение фагоцитарного индекса отражает повышение активности фагоцитарных клеток крови.
Бактерицидная активность сыворотки крови, показывающая суммарное действие гуморального и клеточного звеньев защиты, была выше у телят опытной группы на 12,5 % (Р < 0,05 %), чем в контроле, на 1 сутки.
При повторном исследовании крови по отмеченным показателям на 10 сутки после начала опыта различия с контрольной группой у опытных животных несколько сгладились. Выровнялся уровень лейкоцитов в основном за счет увеличения количества сегментоядерных нейтрофилов, но при этом снизилось содержание лимфоцитов, что привело к изменению показателей неспецифической реактивности.
Стимуляция неспецифической резистентности телят введением подкожно «Тимогена» способствовала повышению прироста живой массы телят на 13,7 %, в сравнении с контрольной группой (457 г/сут. и 520 в контроле и опыте), в молочный период выращивания за 2 месяца наблюдения.
Заключение. Полученные данные позволяют уточнить некоторые стороны регуляции формирования иммунитета и становления неспецифической резистентности у новорожденных телят, что должно быть учтено при разработке физиологически обоснованных способов иммуностиму-ляции в этот период, часто сопровождающийся иммунодефицитами и болезнями инфекционной природы.
Vestnik of the Mari State University
Chapter "Agriculture. Economics". 2017, vol. 3, no. 1 (9)
Литература
1. Асатиани В. С. Новые методы биохимической фотометрии. М., 1965. 543 с.
2. Белокрылов Г. А., Молчанова И. М., Сорочинская Е. И. Аминокислоты как стимуляторы иммуногенеза // Доклады АН СССР. 1986. № 2. С. 289-293.
3. Великанов В. И., Шумов И. С., Маслова М. А., Харитонов Л. В. Состояние неспецифической резистентности новорожденных телят под воздействием препаратов аминокислот // Новые фармакологические средства в ветеринарии: материалы 18-й междунар. конф. СПб., 2006. С. 49-50.
4. Воробьев А. А., Лященко В. А. Иммунобиологические препараты: настоящее и будущее // ЖМЭИ. 1995. № 6. С. 105-111.
5. Карпуть И. М., Пивовар Л. М. Иммунология лактации при аутоиммунных заболеваниях и ее роль в этиопатогенезе диспепсии новорожденных телят // Вестник АН БССР. Серия «Сельскохозяйственные науки». 1982. № 4. С. 108-110.
6. Коваленко Я. Р. Формирование иммунобиологического статуса у молодняка сельскохозяйственных животных // Вестник селскохозяйственной науки. 1979. № 2. С. 50-58.
7. Кондрахин И. П., Курилов Н. В., Малахов А. Г. и др. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: справочное издание. М.: Агропромиздат, 1985. 287 с.
8. Методы биохимического анализа. Справочное пособие / под ред. акад. Б. Д. Кальницкого. Боровск, 1997.
9. Смирнов В. С. Тимоген в животноводстве и ветеринарии. СПб.: Медико-биол. НПК, 2005. 36 с.
10. Хавинсон В. Х., Анисимов В. Н. Пептидные биорегуляторы и старение. СПб.: Наука, 2003. 223 с.
11. Хавинсон В. Х., Кветной И. М., Ашмарин И. П. Пептидергическая регуляция гомеостаза // Успехи современной биологии. 2002. № 41. С. 83-96.
12. Харитонов Л. В., Кузнецов И. Л., Пронькина Е. А., Великанов В. И. Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность телят // Труды ВНИИФБиП. 2002. № 41. С. 83-96.
13. Харитонов Л. В., Матвеев В. А., Великанов В. И., Пронькин Д. Е. Участие аминокислот в регуляции процессов питания и резистентности молодняка крупного рогатого скота // Актуальные проблемы биологии в животноводстве: материалы 3-й междунар. конф. Боровск, 2001. С. 177-188.
14. Goldstein A. L., Cohen G. H., Zatz M. M. Purification and biological activity of thymosin, a harmone of thymus gland // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1972. Vol. 69. Pp. 1800-1803.
15. Miller J. F. Immunologic function of thymus // Lancet. 1961. Vol. 2. Pp. 748-749.
16. Morozov V. G., Khavinson V. K. Natural and synthetic thymus peptides as therapeutics for immune dysfunction // Int. Immunopharm. 1997. Vol. 19. Pp. 501-505.
References
1. Asatiani V. S. Novye metody biohimicheskoj fotometrii [New methods of biochemical photometry], Moscow, 1965, 543 p.
2. Belokrylov G. A., Molchanova I. M., Sorochinskaja E. I. Aminokisloty kak stimuljatory immunogeneza. Doklady AN SSSR. [Amino acids as stimulants of immunogenesis. Reports of the USSR Academy of Sciences Amino acids as stimulants of immunogenesis. Reports of the USSR Academy of Sciences], 1986, no. 2, pp. 289-293.
3. Velikanov V. I., Shumov I. S., Maslova M. A., Haritonov L. V. Sostojanie nespecificheskoj rezistentnosti novorozhdennyh teljat pod vozdejstviem preparatov aminokislot [Status of non-specific resistance of newborn calves under the influence of amino acid products], Novye farmakologicheskie sredstva v veterinarii: materialy 18-j mezhdunar. konf. = New pharmacological agents in veterinary medicine: Proceedings of the 18th International Conference, St. Petersburg, 2006, pp. 49-50.
4. Vorob'ev A. A., Ljashhenko V. A. Immunobiologicheskie preparaty: nastojashhee i budushhee [Immunobiological products: present and future], ZhMJeI, 1995, no. 6, pp. 105-111.
5. Karput' I. M., Pivovar L. M. Immunologija laktacii pri autoimmunnyh zabolevanijah i ee rol' v jetiopatogeneze dispepsii no-vorozhdennyh teljat [Immunology lactation autoimmune diseases and its role in the etiopathogenesis of dyspepsia of newborn calves], Vestnik AN BSSR. Serija Sel'skohozjajstvennye nauki = Bulletin of the Academy of Sciences of the BSSR. Agricultural sciences Series, 1982, no. 4, pp. 108-110.
6. Kovalenko Ja. R. Formirovanie immunobiologicheskogo statusa u molodnjaka sel'skohozjajstvennyh zhivotnyh [Formation of the immunobiological status in young farm animals], Vestnik sel'skohozjajstvennoj nauki = Bulletin of agricultural science, 1979, no. 2, pp. 50-58.
7. Kondrahin I. P., Kurilov N. V., Malahov A. G. i dr. Klinicheskaja laboratornaja diagnostika v veterinarii: spravochnoe izdanie [Clinical laboratory diagnostics in veterinary medicine. Reference edition], Moscow: Agropromizdat, 1985, 287 p.
8. Metody biohimicheskogo analiza. Spravochnoe posobie [Methods of biochemical analysis. Handbook], in akad. B. D. Kal'nickij (ed.). Borovsk, 1997.
9. Smirnov V. S. Timogen v zhivotnovodstve i veterinarii [Timogen in animal husbandry and veterinary medicine], St. Petersburg: Mediko-biol. NPK, 2005, 36 p.
10. Havinson V. H., Anisimov V. N. Peptidnye bioreguljatory i starenie [Peptide bioregulators and aging], St. Petersburg: Nauka, 2003, 223 p.
11. Havinson V. H., Kvetnoj I. M., Ashmarin I. P. Peptidergicheskaja reguljacija gomeostaza. Uspehi sovremennoj biologii [Peptidergic regulation of homeostasis. Successes of modern biology], 2002, no. 41, pp. 83-96.
12. Haritonov L. V., Kuznecov I. L., Pron'kina E. A., Velikanov V. I. Vlijanie preparatov aminokislot na funkcional'noe sos-tojanie i nespecificheskuju rezistentnost' teljat [Effect of amino acid drugs on the functional state and the non-specific resistance of calves], Trudy VNIIFBiP. 2002, no. 41, pp. 83-96.
13. Haritonov L. V., Matveev V. A., Velikanov V. I., Pron'kin D. E. Uchastie aminokislot v reguljacii processov pitanija i re-zistentnosti molodnjaka krupnogo rogatogo skota [Participation of amino acids in the regulation of power and resistance of young cattle], Aktual'nye problemy biologii v zhivotnovodstve: materialy 3-j mezhdunar. konf. = Actual problems of biology in livestock: Proceedings of the 3rd International Conference, Borovsk, 2001, pp. 177-188.
14. Goldstein A. L., Cohen G. H., Zatz M. M. Purification and biological activity of thymosin, a harmone of thymus gland. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1972, v. 69, pp. 1800-1803.
15. Miller J. F. Immunologic function of thymus. Lancet, 1961, v. 2, pp. 748-749.
16. Morozov V G., Khavinson V K. Natural and synthetic thymus peptides as therapeutics for immune dysfunction. Int. Immunopharm., 1997, vol. 19, pp. 501-505.
Статья поступила в редакцию 22.09.2016 г.
Submitted 22.09.2016.
Для цитирования: Смоленцев С. Ю. Резистентность у новорожденных телят под влиянием «Гамавита» // Вестник Марийского государственного университета. Серия «Сельскохозяйственные науки Экономические науки». 2017. Т. 3. № 1 (9). С. 70-74.
Citation for an article: Smolentsev S. Ju. Resistance in newborn calves under the influence of "Gamavit". Vestnik of the Mari State University. Chapter "Agriculture. Economics ". 2017, vol. 3, no. 1 (9), pp. 70-74.
Смоленцев Сергей Юрьевич, доктор биологических наук, профессор, Марийский государственный университет, г. Йошкар-Ола, [email protected]
Smolentsev Sergey Yu., Dr. Sci. (Biology), professor, Mari State University, Yoshkar-Ola,
