CC BY
6
СБОРНИК ТЕЗИСОВ
089-090
Материал и методы. Исследованию подвергались симпатические узлы, спинной мозг, интрамуральные ганглии тонкой кишки и гипоталамус молодых (2-3 месяца) и старых крыс (2-2,5 года) . Эксперименты проводились с соблюдением основных биоэтических правил . Выявление nNOS проводили при помощи иммуногистохимических методов, вестерн-блот-тинга
Результаты. Во всех возрастных группах nNOS-иммуноре-активные (ИР) нейроны отсутствуют в симпатических узлах . У молодых крыс две трети преганглионарных симпатических спинномозговых нейронов являются nNOS-ИР. Эта доля увеличивается у старых животных до 75-80% . В тонкой кишке в узлах подслизистого сплетения у молодых крыс наблюдались единичные nNOS-ИР нейроны, однако у старых крыс процент nNOS-ИР нейронов увеличивался до 27±1,9 . У старых животных процент nNOS-ИР нейронов и степень имму-нофлуоресценции к nNOS также достоверно увеличивались в ВМЯ и ДМЯ гипоталамуса .
Заключение. Таким образом, в старческом периоде nNOS экспрессирует большее число центральных и периферических нейронов автономной нервной системы по сравнению с молодыми животными Тем не менее, значение повышенной экспрессии nNOS у старых животных остается неясным .
Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 19-15-00039) .
089 РЕЦИКЛИРОВАНИЕ СИНАПТИЧЕСКИХ ВЕЗИКУЛ У ТЕПЛОКРОВНЫХ И ХОЛОДНОКРОВНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ВНУТРИКЛЕТОЧНОГО АЦИДОЗА
Мухамедзянов Р. Д., Зефиров А. Л.
Казанский государственный медицинский университет, Казань, Россия
mramild1975@ra
Эксперименты проводили на диафрагме мыши и кожно-грудинной мышце лягушки с использованием флуоресцентного метода Исследовали эффекты закисления цитоплазмы нервных окончаний (НО) на рециклирование синаптических везикул Уменьшение внутриклеточного рН достигали замещением 50% NaC1 во внеклеточном растворе на пропионат натрия
Показателем загрузки красителя в НО при эндоци-тозе синаптических везикул являлось характерное свечение НО Для того, чтобы сравнить эффективность эндоцитоза в контроле и при действии пропионата натрия, нужно, чтобы за время раздражения, освободилось одинаковое количество квантов медиатора, т к эффективность захвата красителя FM1-43 напрямую определяется интенсивностью процессов экзоцитоза синаптических везикул . Анализ кумулятивных кривых показал, что загрузку красителя следует производить следующим образом: если в экспериментах с закислением внутриклеточной среды стимулировать двигательный нерв с частотой 20 имп/с в течение 100 секунд, то в контроле понадобится стимуляция двигательного нерва в течение 70 сек, для выброса одинакового количества квантов медиатора
Результаты экспериментов показали, что интенсивность свечения как в НО мыши, так и в НО лягушки при действии пропионата натрия была достоверно выше по сравнению с контролем
Динамику экзоцитоза синаптических везикул при длительном высокочастотном раздражении можно оценить по выгрузке красителя (снижению флуоресценции) из предварительно загруженных FM1-43 НО .
В синапсах мыши, в контроле интенсивность свечения постепенно снижалась в течение первых 7 минут ритмической стимуляции до 28% исходного и далее больше не изменялось Оставшийся уровень яркости отражал свечение нервного волокна, в котором не наблюдались пятна показывающие наличие окрашенных синаптических везикул При закисле-нии цитоплазмы двигательных НО, интенсивность свечения
падала более плавно и через 7 минут раздражения составляла 67% исходного, и далее до конца стимуляции снижалась не значительно Однако визуально можно было наблюдать оставшиеся светящиеся пятна, которые указывали на наличие синаптических везикул не подвергшихся экзоцитозу
В контроле у лягушки снижение свечения происходило в две фазы — сначала в течение 2 мин, быстро до 70% исходного уровня, а затем более медленно К 20 минуте стимуляции интенсивность свечения падала до 28%, и отражала фоновое свечение "пустой" нервной терминали . При закислении цитоплазмы НО лягушки динамика снижения флюоресценции отличалась В начале ритмического раздражения интенсивность свечения снижалась очень медленно и в течение первых 2 минут падала только до 94%±5 . Затем интенсивность свечения падала немного быстрее и к 20 минуте раздражения составляло 66% исходного В нервных терминалях лягушки так же наблюдались светящие пятна, указывающие на наличие синаптических везикул не подвергшихся экзоцитозу
Сделано заключение, что внутриклеточный ацидоз двигательного нервного окончания ведёт к изменению рециклирования синаптических везикул Изменения эти существенно отличаются у теплокровных и холоднокровных животных, и связаны они с неодинаковым вкладом разных путей рециклирования синаптических везикул в общую картину секреции медиатора у теплокровных и холоднокровных животных
090 25-ГИДРОКСИХОЛЕСТЕРИН ПОДАВЛЯЕТ ЭФФЕКТЫ СТИМУЛЯЦИИ ИЗОПРОТЕРЕНОЛОМ БЕТА-АДРЕНОРЕЦЕПТОРОВ В ПРЕДСЕРДИЯХ МЫШИ Одношивкина Ю. Г.1, Хакимов И. Р.1, Трусов Н. А.1, Исмагилова Д. А.1, Зефиров А. Л.1,2, Петров А. М.2,3 ТБОУ ВПО Казанский ГМУ, Казань, Россия 2ГБОУ ВПО Казанский ГМУ, Институт Нейронаук, Казань, Россия
3Казанский институт биохимии и биофизики, Федеральный исследовательский центр "Казанский научный центр Российской академии наук", Казань, Россия zjubra@mail . ru
Основную роль в регуляции инотропной функции сердца играют бета-адренорецепторы (бета-АР) . Бета-АР способны взаимодействовать со многими сигнальными путями, разнонаправленно регулировать сократительный ответ В физиологических и патофизиологических условиях пути бета-адренер-гической сигнализации могут изменяться, что ведет к значительным "перестройкам" в деятельности сердца . Кроме того, бета-АР являются удобной фармакологической мишенью, так как бета-миметики и бета-блокаторы широко применяются в терапевтической практике сердечно-сосудистых патологий . Мы предполагаем, что один из эндогенных механизмов, влияющих на зависимую от бета-АР регуляцию, связан с окисленными производными холестерина (оксистеринами), которые образуются в ходе ферментативных и свободно-радикальных реакций . В частности, большой интерес вызывает 25-гидро-ксихолестерин (25-ГХ), который образуется практически во всех тканях под действием холестерин 25-гидроксилазы . При индукции врожденного иммунного ответа в макрофагах и дендритных клетках повышается экспрессия этого фермента, а образующийся в повышенных концентрациях 25-ГХ оказывает противовирусный эффект. Концентрация 25-ГХ может системно повышаться при сосудистых и нейродегене-ративных заболеваниях, сопряженных с воспалительными реакциями, в том числе при атеросклерозе
Целью исследования было оценить инотропную реакцию предсердий на аппликацию агониста бета-АР — изо-протеренола (ИЗО 10-100 нМ) в контроле и в условиях 15 мин аппликации 25-ГХ. Определить вклад разных подтипов бета-АР в этих эффектах . Регистрацию сократимости (Tissue Bath System с тензодатчикоми BIOPAC Systems, Inc), детекцию Са2+-транзиента (Fluo-4AM) и продукции оксида азота
42
Российский кардиологический журнал. 2021;26(S5), дополнительный выпуск (апрель)
