Научная статья на тему 'Репаративная регенерация губчатой кости при использовании костно-пластического материала "Депротекс"'

Репаративная регенерация губчатой кости при использовании костно-пластического материала "Депротекс" Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

CC BY
609
44
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Политравма
Scopus
ВАК
Ключевые слова
КОСТНО-ПЛАСТИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ / АУТОЛОГИЧНЫЕ ФАКТОРЫ РОСТА / ОРТОТОПИЧЕСКАЯ ИМПЛАНТАЦИЯ / РЕПАРАТИВНАЯ РЕГЕНЕРАЦИЯ / ОСТЕОГЕНЕЗ / BONE PLASTIC MATERIAL / AUTOLOGIC GROWTH FACTORS / ORTHOTOPIC IMPLANTATION / REPARATIVE REGENERATION / OSTEOGENESIS

Аннотация научной статьи по биотехнологиям в медицине, автор научной работы — Кирилова И. А.

В статье изучена возможность восстановления анатомической целостности губчатой кости разработанным костно-пластическим материалом «Депротекс» на основе депротеинизированной аллокости изолированно и в сочетании с аутогенными факторами роста в виде тромбоцитарно-фибринового геля. Выполнены две группы экспериментов на 12 половозрелых беспородных собаках-самцах. Количество операций 24, имплантаций КПМ 72. В качестве модели использовали поднадкостничную резекцию фрагментов ребер на 3-4 уровнях с последующим заполнением дефектов костно-пластическим материалом. Сроки наблюдения составляли 1, 3, 6 месяцев после имплантации. Использование аутологичных факторов роста в сочетании с костно-пластическим материалом «Депротекс» инициирует хондрогенез в ранние сроки наблюдения до 30 суток, остеогенез и формирование органотипического регенерата в последующие сроки наблюдения.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биотехнологиям в медицине , автор научной работы — Кирилова И. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Reparative regeneration of trabecular bone in using of bone plastic material «Deprotex»

The article reviews the possibility of restoration of anatomic integrality of trabecular bone during plastics with the bone plastic material «Deprotex » on the base of deproteinized allobone separately or in combination with autogenous growth factors in the view of thrombocytic fibrinous gel. Two groups of experiments were performed in 12 eugamic outbred male dogs. The amount of operations was 24, implantations of bone plastic material 72. As a model, subperiosteal resection of rib fragments on the 3-4 levels with filling of defects with bone plastic material was used. The terms of follow-up were 1, 3 and 6 months after implantation. The using of autologic growth factors in combination with bone plastic material «Deprotex» initiates chondrogenesis in early terms of follow-up up to 30 days, osteogenesis and formation of organotypic regenerate in following terms of follow-up.

Текст научной работы на тему «Репаративная регенерация губчатой кости при использовании костно-пластического материала "Депротекс"»

Статья принята к публикации 14.01.2011 г.

РЕПАРАТИВНАЯ РЕГЕНЕРАЦИЯ ГУБЧАТОЙ КОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ КОСТНО-ПЛАСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА «ДЕПРОТЕКС»

REPARATIVE REGENERATION OF TRABECULAR BONE IN USING OF BONE PLASTIC MATERIAL «DEPROTEX»

Кирилова И.А. Kirilova I.A.

Федеральное государственное учреждение Novosibirsk scientific

«Новосибирский научно-исследовательский институт research institute of traumatology

травматологии и ортопедии Федерального агентства and orthopedics, по высокотехнологичной медицинской помощи»,

г. Новосибирск, Россия Novosibirsk, Russia

В статье изучена возможность восстановления анатомической целостности губчатой кости разработанным костно-пластическим материалом «Депро-текс» на основе депротеинизированной аллокости изолированно и в сочетании с аутогенными факторами роста в виде тромбоцитарно-фибринового геля. Выполнены две группы экспериментов на 12 половозрелых беспородных собаках-самцах. Количество операций - 24, имплантаций КПМ - 72. В качестве модели использовали поднадкостничную резекцию фрагментов ребер на 3-4 уровнях с последующим заполнением дефектов костно-пла-стическим материалом. Сроки наблюдения составляли 1, 3, 6 месяцев после имплантации.

Использование аутологичных факторов роста в сочетании с костно-пласти-ческим материалом «Депротекс» инициирует хондрогенез в ранние сроки наблюдения до 30 суток, остеогенез и формирование органотипического регенерата в последующие сроки наблюдения.

Ключевые слова: костно-пластический материал; аутологичные факторы роста; ортотопическая имплантация; репаративная регенерация; остеогенез.

Проблема восстановления анатомической целостности и функции костной ткани до сих пор остается актуальной [1-4]. Характер регенераторных процессов в значительной мере определяется свойствами материалов, используемых для заполнения дефектов кости. Современный уровень медицины трудно представить без биологических имплантатов, с помощью которых выполняются реконструктивные хирургические вмешательства в травматологии и ортопедии [1-3, 5-10], челюстно-лицевой хирургии [11, 12], костной онкологии [13].

Увеличивается объем исследований о роли различных веществ или субстанций, инициирующих формирование костных структур. Одной из таких субстанций являются аутогенный тромбоцитарно-фибрино-вый сгусток или обогащенная тромбоцитами плазма, полученные пу-

The article reviews the possibility of restoration of anatomic integrality of trabecular bone during plastics with the bone plastic material «De-protex» on the base of deproteinized allobone separately or in combination with autogenous growth factors in the view of thrombocytic fibrinous gel. Two groups of experiments were performed in 12 eugamic outbred male dogs. The amount of operations was 24, implantations of bone plastic material - 72. As a model, subperiosteal resection of rib fragments on the 3-4 levels with filling of defects with bone plastic material was used. The terms of follow-up were 1, 3 and 6 months after implantation. The using of autologic growth factors in combination with bone plastic material «Deprotex» initiates chondrogenesis in early terms of follow-up up to 30 days, osteogenesis and formation of organotypic regenerate in following terms of follow-up.

Key words: bone plastic material; autologic growth factors; orthotopic implantation; reparative regeneration; osteogenesis.

тем PRP-технологии (Platelet Rich Plasma). Аутогенный тромбоцитар-но-фибриновый сгусток включает в себя семь основных аутогенных факторов роста: тромбоцитарный фактор роста (PDGF-aa, PDGF-bb, PDGF-ab), трансформирующий фактор роста (TGF-ß1, TGF-ß2), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и фактор роста эпителия (EGF) в биологически предопределенных соотношениях [14-19]. Основными направлениями исследований в настоящее время являются вопросы использования аутогенных факторов роста в сочетании с остеопластикой [11-13].

Поиск новых способов воздействия на остеогенез с целью формирования органотипического регенерата, с помощью костно-пла-стических материалов и факторов роста, является актуальным для современной медицины.

Цель исследования — исследовать органотипичность костного регенерата при замещении костных дефектов разработанными кост-но-пластическими материалами на основе аллокости.

1. Изучить процессы репаративного остеогенеза на модели ортотопиче-ской имплантации при использовании композиционного костно-пла-стического материала «Депротекс».

2.Изучить процессы репаративной регенерации костной ткани при обогащении костно-пластиче-ского материала аутологичными факторами роста.

3.Провести сравнительный анализ репаративной регенерации кости при пластике губчатой кости.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалом исследования служили регенераты ребер после пластики

22

ПОЛИТРАВМА

дефектов костно-пластическим материалом «Депротекс» или «Депро-текс» в сочетании с аутологичными факторами роста. Костно-пласти-ческий материал «Депротекс» приготовлен из аллогенных костных фрагментов после депротеинизации (ДПК), коллагенсодержащего раствора и антибактериальных препаратов по авторской методике [8, 18]. Аутологичные факторы роста получали по методике, описанной Самодай В.Г., путем центрифугирования крови, предварительно забранной у собаки перед операцией.

Уход и содержание экспериментальных животных соответствовали требованиям приказов «Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию вивариев» № 1045-73 от 06.04.1973 г., № 1179 МЗ СССР от 10.10.1983 г., № 267 МЗ РФ от 19.06.2003 г., «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных», «Правила по обращению, содержанию, обезболиванию и умерщвлению экспериментальных животных», утвержденных МЗ СССР (1977 г.) и МЗ РСФСР (1977 г.), принципам Европейской конвенции (Страсбург, 1986) и Хельсинской декларации Всемирной медицинской организации о гуманном обращении с животными (1996 г.).

МЕТОДЫ

Экспериментальный метод.

Для изучения возможности восстановления анатомической целостности губчатой кости при пластике разработанными костно-пластиче-скими материалами на основе алло-кости выполнены две группы экспериментов на половозрелых беспородных собаках-самцах с массой тела 10-16 килограмм. В качестве модели использовали поднадкост-ничную резекцию фрагментов ребер на 3-4 уровнях с последующей имплантацией в дефекты костнопластических материалов.

В первой серии эксперимента осуществляли ортотопическую имплантацию в дефект ребер собак костно-пластический материал «Де-протекс» изолированно, а во второй — в сочетании с обогащением аутогенными ангиогенными факторами роста в виде тромбоцитарно-

фибринового геля. Количество животных — 12, количество операций — 24, имплантаций ККПМ — 72. Сроки наблюдения составляли 1, 3, 6 месяцев после имплантации.

Выведение животных из эксперимента осуществлялось по заранее составленному графику. Эвтаназию осуществляли согласно требованиям приказа № 755 Министерства здравоохранения.

Микроскопический метод. Регенераты выделяли вместе с прилежащими участками мышечной ткани. Препараты фиксировали в 12 % растворе нейтрального формалина в течение 2-3 дней. Затем де-кальцинировали путем помещения в 10 % раствор трилона Б (ЭДТА) в течение 10-12 дней. Промывали, обезжиривали и заливали в целлоидин или парафин. Из целлоидиновых и парафиновых блоков готовили продольные и поперечные срезы регенерата. Для решения поставленных задач были избраны общие морфологические методики, дающие представление о структуре исследуемых тканей (окраска гематоксилин-эозином и по ван Гизону). Процесс костеобразования в месте имплантации костно-пластических материалов изучали под световым микроскопом МБС-2, МБИ-6.

Рентгенографический метод. Рентгенограммы выполнялись аппаратом АРД-2-125 в период наркотического сна, в послеоперационном периоде и далее по срокам наблюдения.

Морфометрический метод.

Морфометрический подсчет проводился с использованием паке-

та программ «Micromed Images» и цифровой фотокамеры «Lumix, DMC-LC 33».

Статистический метод. Количественные данные обрабатывали статистически. Вычисляли среднюю арифметическую, стандартную ошибку средней арифметической. Критерий значимости для оценки достоверности различий между средними арифметическими — уровень значимости Р < 0,05. Статистическая обработка данных выполнялась с помощью программного обеспечения Microsoft Word и программы Statistica. Достоверность отличий определяли по непараметрическому критерию Уилкин-сона-Манна-Уитни.

РЕЗУЛЬТАТЫ

ИССЛЕДОВАНИЙ

При анализе рентгенограмм регенератов ребер после сегментарной резекции с последующей пластикой ККПМ «Депротекс» в разные сроки наблюдения получили следующие данные. В срок наблюдения 1 месяц после операции костная мозоль (регенерат) веретенообразной формы в 1,5 раза шире интактного ребра. В зоне сформированного ранее дефекта ширина ребра максимальная. Величина периостальной реакции связана с отслойкой надкостницы в ходе операции. Контуры периостальной костной мозоли (регенерата) вдоль ребра отчетливые, а над самим дефектом неровные или размытые. Концы ребер размыты и плохо определяются, соединены между собой металлической проволокой (рис. 1).

Рисунок 1

Рентгенограммы регенератов ребер после сегментарной резекции с пластикой ККПМ «Депротекс», сроки наблюдения 1(а), 3(б), 6(в) месяцев

В срок наблюдения 3 месяца костная мозоль (регенерат) шире ребра на 3-4 мм (+ 50 %), контуры четкие, ровные. Определяются размытые концы ребер, между ними участок чуть ниже плотности ребра, но костной структуры. Костная мозоль окутывает концы ребер как муфта, плотность которой чуть ниже плотности самого ребра, но имеет костную структуру (трабеку-лярную).

В срок 6 месяцев регенерат чуть шире интактного ребра (+ 1 мм), костной архитектоники и костной плотности, иногда с очагами небольшого просветления вдоль металлической проволоки. В зоне сформированного ранее дефекта ширина ребра максимальная. Контуры регенерата отчетливые, четкие, но чуть изогнутые.

При анализе рентгенограмм регенератов ребер после сегментарной резекции с последующей пластикой ККПМ «Депротекс» в комбинации с обогащенной тромбоцитами плазмой в разные сроки наблюдения получили следующие данные. В срок наблюдения 1 месяц костная мозоль (регенерат) веретенообразной формы в 1,5 раза шире интактно-го ребра. В зоне сформированного ранее дефекта ширина ребра максимальная. Величина периосталь-ной реакции связана с отслойкой надкостницы в ходе операции. Контуры периостальной костной мозоли (регенерата) вдоль ребра отчетливые, а над самим дефектом неровные или размытые. Концы ребер размыты и плохо определяются, соединены между собой металлической проволокой. В диастазе реберных концов отмечается увеличение плотности костной ткани, так называемый костный шов. Встречается и другой вариант, когда в диастазе реберных концов очаги по плотности выше костной, чередуются с очагами просветления (рис. 2).

В срок наблюдения 3 месяца костная мозоль (регенерат) несколько шире интактного ребра (+ 50 %), костной архитектоники и костной плотности, иногда с очагами небольшого просветления. В зоне сформированного ранее дефекта ширина ребра максимальная. Контуры регенерата отчетливые, чет-

кие, но чуть изогнутые. В середине ребра металлическая проволока.

В срок наблюдения 6 месяцев костная мозоль (регенерат) не определяется. Ребро костной плотности, гомогенное на всем протяжении, с характерной костной архитектоникой, контуры четкие, ровные. О ранее существовавшем дефекте косвенно свидетельствует металлическая проволока, вдоль которой отмечаются небольшие очаги просветления костной ткани.

При сравнении между собой по размерам регенератов ребер после операций с использованием отдельных видов костно-пластических материалов в динамике выявили следующие закономерности:

- при пластике Депротекс регенерат в 1 месяц достоверно шире, чем в 6 месяцев;

- при пластике Депротекс + БоТП регенерат в 1 месяц достоверно шире, чем в 3 и 6 месяцев (почти в 2 раза).

Морфологическая картина репаративной регенерации при заполнении дефекта ребра КПМ «Депротекс»

При изучении морфологических препаратов получены следующие результаты.

Через 30 суток после операции со стороны материнского ложа отмечается дифференцировка клеточных элементов и образование грубоволокнистой костной ткани, образование соединительной ткани. В центре дефекта между опилами ребер визуализируются гранулы костно-пластического материала

Рисунок 2 Рентгенограммы регенератов ребер после сегментарной резекции

с пластикой ККПМ «Депротекс» в комбинации с обогащенной тромбоцитами плазмой.

Сроки наблюдения 1(а), 3(б), 6(в) месяцев

«Депротекс» в виде базофильно окрашенных плотных фрагментов различной величины и конфигурации, окруженные соединительно-тканными волокнами. Местами гранулы костно-пластического материала окружены плотно прилегающими балками новообразованной костной ткани. Между сформированными костными балками местами рыхловолокнистая ткань, местами преимущественно миелоидный костный мозг (рис. 3).

Через 90 суток после операции продолжается перестройка костной мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми, однако балки становятся уже, а межбалочные пространства шире, чем у нормального ребра, что является косвенными признаками дистрофических изменений в зоне операции (рис. 4).

Через 180 суток после операции морфологически структура ребра в зоне пластики не отличается от строения неизмененного ребра, что свидетельствует о построении орга-нотипического регенерата (рис. 5).

Морфологическая картина репаративной регенерации при заполнении дефекта ребра КПМ «Депротекс» в сочетании с аутологичными факторами роста

Через 30 суток после резекции ребра на протяжении 1 см и пластики костно-пластическим материалом «Депротекс» в сочетании с БоТП со стороны материнского ложа отмечается дифференцировка клеточных элементов и образование

ПОЛИТРАВМА

Рисунок 3

Заполнение дефекта ребра костно-пластическим материалом «Депротекс», срок наблюдения 1 мес. Окр. гематоксилин-эозин. Ув. а х70, б х140, в х280

I рануш шхшниислнюшго материала мОйОйбрйкШяНИне КОСТЛЫе мм ¡км

- тклнь реГ^ри

■ рмхшнолгжнштн соединительная тжннь

Рисунок 4 Рисунок 5

Результат заполнения дефекта ребра костно- Результат заполнения дефекта ребра костнопластическим материалом «Депротекс», пластическим материалом «Депротекс», срок срок наблюдения 3 мес. Окр. гематоксилин-эозин. наблюдения 6 мес. Органотипическое восстановление Ув. х70 кости. Окр. гематоксилин-эозин. Ув. х70

■ иклеащшй п »фонЛ: поппый жлг - нжкн^сниякс ЕКПН

■ [-ил:||1М1.»,'К1м+: иг 1.1МН1М<: 1МЫ1 и-:лмь

^ - ■ шачч'ри.'ньнизшыс НОС с и иг цм 1>.п - р. МПСЛП11. И 1и 1411 | ..13,|Ч'с жк : ш.п'1 ^ямг - I Ш.ЧЬМГ .|||"|,|

грубоволокнистой костной ткани. На поверхности новообразованных костных балок цепочкой расположены активные остеобласты, что свидетельствует о течении процесса репаративной регенерации костной ткани. У основания части костных балок визуализируются многоядерные остеокласты, которые формируют лакуны Хаушипа, это свидетельствует об остеокластической резорбции при ремоделировании новообразованной костной ткани. В межбалочных пространствах встречаются участки, в которых отмеча-

ется инвагинация сосудов с форменными элементами в их просвете. В центре дефекта сформированные очаги хондрогенеза с хрящевыми клетками различной степени зрелости. По направлению от центра к периферии дефекта хрящевые клетки выстраиваются в виде монетных столбиков, затем разрушаются, высвобождая содержимое клеток, и формируют бесклеточные очаги основного вещества, по периферии которого формируются молодые костные балки, что говорит о течении процесса энхондрального

остеогенеза. Костно-пластический материал не визуализируется, что может свидетельствовать о рассасывании материала к данному сроку наблюдения (рис. 6).

Через 90 суток после операции продолжается перестройка костной мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми, кость приобретает грубоволокни-стую структуру, на поверхности балок цепочки остеобластов, в межбалочных промежутках миелоидный и жировой костный мозг. Однако межбалочные пространства ши-

ре, чем у нормального ребра, что является косвенными признаками дистрофических изменений в зоне операции (рис. 7).

Через 180 суток после операции продолжается перестройка костной мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми, в межбалочных промежутках мие-лоидный и жировой костный мозг. Морфологически структура ребра в зоне пластики не отличается от строения неизмененного ребра, что свидетельствует о формировании

органотипической костной ткани (рис.8).

Анализ фаз репаративной регенерации при пластике губчатой кости

Для сопоставления результатов морфологического исследования мы попытались систематизировать результаты экспериментов. В качестве базовой классификации использовалась классификация морфологических фаз репаративного остеогенеза, предложенная Ка-план А.В., согласно которой суще-

ствует пять фаз морфологических изменений при репаративной регенерации костной ткани (табл. 1).

Через 30 суток после костной аллопластики КПМ «Депротекс» в сочетании с БоТП наблюдали дифференцировку клеточных элементов и образование волокнистых структур, а также формирование остеоида и примитивных костных балочек на его основе, а в сочетании с БоТП дифференцировку клеточных элементов, образование волокнистых структур, образова-

Рисунок 6

Заполнение дефекта ребра костно-пластическим материалом «Депротекс» в сочетании с аутогенными факторами роста, срок наблюдения 1 мес. Окр. гематоксилин-эозин. Ув. а х70, б, в, г х140, д х280

Рисунок 7

Результат заполнения дефекта ребра костно-пластическим материалом «Депротекс» в сочетании с аутогенными факторами роста, срок наблюдения 3 мес. Окр. по ван Гизон и гематоксилин-эозин. Ув. х70

Ш1Г.10МДПЫЙ II щрэюП С.Н.-ТИНП шит

- мрим^ищаймишклстик^Аики.

ние соединительной и хрящевой ткани. При пластике «Депротекс» достоверно больше наблюдалось молодых костных балок и рыхло-волокнистой соединительной ткани, а при сочетании с БоТП — хрящевой ткани (р < 0,001).

Через 30 суток после костной аллопластики КПМ «Депротекс» в сочетании с БоТП наблюдали изменения, характерные для 2-3 фаз регенерации, а без БоТП — 2 фазы, соответственно. Через 90 суток при пластике дефекта «Депротекс» и «Депротекс» + БоТП наблюдали перестройку костной мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми, однако, при пластике Депротекс сформированные балочки уже, а межбалочные промежутки шире, чем при пластике Депротекс + БоТП.

ОБСУЖДЕНИЕ

Аутогенный тромбоцитарно-фи-бриновый сгусток или обогащенная тромбоцитами плазма (БоТП), полученные путем РИР-технологии, являются субстанцией, состоящей из: тромбоцитов, нитей фибрина и адгезивных молекул. Причем концентрация данных элементов в БоТП будет больше, чем в 1 мл обычной крови, и тем больше, чем больше крови исходно будет за-

Рисунок 8

Результат заполнения дефекта ребра костнопластическим материалом «Депротекс» в сочетании с аутогенными факторами роста, срок наблюдения 3 мес. Окр.

гематоксилин-эозин. Ув. х70

- ||1:1Кч'|1|и тин -иг 111'. ИкЕ 1Ы 1111

брано у пациента. Объяснить это можно на простой математической модели. Например, у человека 200 тыс. тромбоцитов в 1 мл крови. Для того, чтобы получить концентрат заданной характеристики, нам надо взять 5 мл крови. И тогда после центрифугирования получится БоТП с содержанием тромбоцитов 1000000 клеток.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

При разрушении мембран клеточных элементов выделяются факторы роста. При увеличении концентрации тромбоцитов увеличивается концентрация факторов роста. Ниже перечислены семь основных факторов роста, кото-

рые содержатся в богатой тромбоцитами плазме: тромбоцитарный фактор роста (PDGF-aa, PDGF-bb, PDGF-ab), трансформирующий фактор роста (TGF-pl, TGF-p2), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и фактор роста эпителия (EGF). Эти естественные факторы роста находятся в биологически предопределенных соотношениях [18, 19]. Однако БоТП имеет один существенный недостаток — не обладает прочностными характеристиками, необходимыми при операциях на опорных частях скелета. В связи с этим, сочетанное использование БоТП с костно-пластически-

Таблица 1 Восстановление кости по фазам регенерации

Показатели Депротекс Депротекс+БоТП

Морфологические характеристики регенерата в сроки 1 мес. 2 фаза регенерации Дифференцировка клеточных элементов и образование волокнистых структур, образование соединительной ткани 2-3 фаза регенерации Дифференцировка клеточных элементов и образование волокнистых и хрящевых структур + формирование остеоида и примитивных костных балочек

Морфологические характеристики регенерата в срок 3 мес. 5 фаза регенерации Перестройка мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми, однако, балки уже, а межбалочные пространства шире, чем у нормального ребра 5 фаза регенерации Перестройка мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми с формированием органотипической костной ткани

Морфологические характеристики регенерата в срок 6 мес. 5 фаза регенерации Перестройка мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми 5 фаза регенерации Перестройка мозоли с замещением незрелых костных структур более зрелыми

Органотипичность Органотипичный Органотипичный

Пути остеогенеза Периостальный Периостальный, энхондральный

Биодеградация имплантата Средняя (30 -90 суток) Средняя (30-90 суток)

Присутствие в регенерате других тканей Присутствует рыхловолокнистая соединительная ткань до 90 суток Присутствует хрящевая ткань до 90 суток

Степень активности остеогенеза +++ ++++

ми материалами вызывает большой интерес.

В лаборатории заготовки и консервации биотканей ФГУ «Новосибирский НИИТО» разработан костно-пластический материал «Депротекс», состоящий из ДПК-аллогенных фрагментов, колла-генсодержащего раствора и антибактериальных препаратов [20, 21]. Фрагменты депротеинизированной аллокости обладают меньшей им-муногенностью по сравнению с на-тивными костными фрагментами, поскольку в процессе обработки лишаются органического компонента кости [4]. Кроме того, процесс депротеинизации повышает вирусную и бактериальную безопасность аллокости, на которую постоянно ссылаются производители синтетических костьзамещающих материалов [9, 13]. По сути, полученный подобным образом костный материал представляет собой минеральный компонент кости аллогенного происхождения с сохраненной архитектоникой и микроэлементным составом [5].

Исходя из состава костно-пла-стического материала «Депротекс», изначально высказывалось предположение, что при пластике дефекта КПМ «Депротекс» изолированно будут задействованы как минимум два механизма регенерации: остео-кондуктивный и остеоиндуктивный. При сочетанном использовании материала с БоТП, по сути, представ-

ляющей собой аутогенные факторы роста, реализуется еще один механизм остеогенеза — стимулированный остеогенез.

Анализ результатов эксперимента показал, что течение репаративной регенерации в двух сериях различается. В срок наблюдения 30 суток при пластике дефекта КПМ «Де-протекс» отмечен периостальный путь репаративного остеогенеза, т.е. остеогенез направлен от надкостницы и материнского ложа к центру дефекта. А сам материал выполнял функцию «остеокондуктивной матрицы», которая являлась каркасом или решеткой, поддерживала врастание новой кости и определяла направление формирования регенерата со стороны ложа.

При сочетанном использовании КПМ «Депротекс» с БоТП дополнительно отмечены признаки эн-хондрального остеогенеза в виде различных его фаз. Данный путь реализуется за счет стимуляции БоТП процесса хондрогенеза в ранние сроки наблюдения.

При имплантации костно-пла-стического материала «Депротекс» и «Депротекс» в сочетании с обогащенной тромбоцитами плазмой в дефект ребра экспериментального животного происходит полное возмещение дефекта тканью, полностью идентичной органотипической ткани ребра. Имеет место полная репаративная регенерация кости ребра или реституция к сроку на-

блюдения 90 суток. Тот факт, что при пластике дефекта «Депротекс» сформированные костные балочки уже, а межбалочные промежутки шире, чем при пластике дефекта КПМ «Депротекс» в сочетании с БоТП, свидетельствует об активности процесса репаративного остеогенеза во второй серии эксперимента.

ВЫВОДЫ:

1. Использование костно-пласти-ческого материала «Депротекс» для остеопластики губчатой кости приводит к остеогенезу с формированием в срок наблюдения 30 суток костного регенерата, в 90 суток — к полному замещению дефекта органотипи-ческой костной тканью и ремо-делированию в срок наблюдения до 180 суток.

2. Использование аутологичных факторов роста в сочетании с костно-пластическим материалом «Депротекс» инициирует хондро-генез в ранние сроки наблюдения до 30 суток, остеогенез и формирование органотипического регенерата в последующие сроки наблюдения.

3.Репаративный остеогенез при ортотопической имплантации костно-пластических материалов активнее при сочетанном использовании аутологичных факторов роста с костно-пластическим материалом «Депротекс».

Таблица 2

Морфометрические показатели репаративной регенерации после ортотопической имплантации костно-пластических материалов

Срок наблюдения Показатели Депротекс Депротекс + БоТП

1 месяц КПМ 9,8 ± 1,8 9,2 ± 1,8

МКБ 61,5 ± 1,8 42,3 ± 1,8

ХР.Т. - 28,1 ± 1,8

РВСТ + МЖКМ 28,7 ± 1,8 20,4 ± 1,8

3 месяца МКБ 58,6 ± 1,8 67,3 ± 1,8

ХР.Т. - -

РВСТ + МЖКМ 41,4 ± 1,8 32,7 ± 1,8

6 месяцев МКБ 62,5 ± 1,8 69,2 ± 1,8

РВСТ + МЖКМ 37,5 ± 1,8 30,8 ± 1,8

Литература:

1. Климовицкий, В.Г. Возможные пути оптимизации репаратив-ных процессов у пострадавших с переломами длинных костей конечностей (взгляд на проблему) /В.Г. Климовицкий, В.Н. Пастернак, В.М. Оксимец //Ортопедия, травматология и протезирование. - 2006. - № 1. -С. 90-99.

Корж, А.А. Репаративная регенерация кости: современный взгляд на проблему. Стадии регенерации (сообщение 1) /А.А. Корж, Н.В. Дедух //Ортопедия, травматология и протезирование. - 2006. - № 1. - С. 7784.

28

2

ПОЛИТРАВМА

3. Имплантационные материалы и остеогенез. Роль индукции и кондукции в остеогенезе / Н.А. Корж, В.А. Радченко, Л.А. Клад-ченко, С.В. Малышкина // Ортопедия, травматология и протезирование. - 2003. - №2. - С. 150-157.

4. Лаврищева, Г.И. Морфологические и клинические аспекты ре-паративной регенерации опорных органов и тканей /Г.И. Лаврищева, Г.Н. Оноприенко. - M.: Медицина, 1996. - 208 с.

5. Экспериментальный спондилодез с использованием комбинированного костного депротеинизированного аллотрансплантата /С.Б. Корочкин, А.Е. Симонович, И.А. Кирилова [и др.] //Хирургия позвоночника. - 2007. - № 2. - С. 71-76.

6. Нигматуллин Р.Т. Очерки трансплантации тканей: курс лекций для врачей /Р.Т. Нигматуллин. - Уфа, 2003. - 160 с.

7. Two-year fusion rate equivalency between Grafton DBM gel and autograft in posterolateral spine fusion: a prospective controlled trial employing side-by-side comparison in the same patient /F.P. Cammisa, G. Lowery, S.R. Garfin et al. //Spine. -2004. - Vol. 29. - P. 660-666.

8. Bone allografts: What they can offer and what they cannot /C. Delloye, O. Cornu, V. Druez, O. Barbier //J. Bone. Joint Surg. Br.

- 2007. - Vol. 89, N 5. - Р. 574-579.

9. Hofer, S. Clinical perspectives on the use of bone graft based on allografts /S. Hofer, S.S. Leopold, J. Jacobs //J. Bone Joint Surg. Am.

- 2003. - Vol. 85. - Р. 2127-2137.

10. Lieberman, J.R. Bone Regeneration and Repair: Biology and Clinical Applications /J.R. Lieberman, G.E. Friedlander. - N.J.: Humana Press, 2005. - 398 p.

11. Белозеров, М.Н. Оценка остеопластических свойств различных биокомпозиционных материалов для заполнения дефектов челюстей: дис. ... канд. мед наук /М.Н. Белозеров. - М., 2004.

- 97 с.

12. Особенности регенерации костной ткани при использовании различных остеопластических материалов в эксперименте /Д.А. Трунин, Л.Т. Волова, А.Е. Беззубов [и др.] //Стоматология.

- 2008. - № 5. - С. 4-8.

13. Швец, А.И. Костные трансплантаты и их заменители в хирургии позвоночника /А.И. Швец, В.К. Ивченко //Ортопедия, травматология и протезирование. - 2008. - № 3. - С. 66-69.

14. Брехов, В.Л. Хирургическое лечение больных с дефектами костной и хрящевой тканей с применением богатой тромбоцитами аутоплазмы: автореф. дис. ... канд. мед. наук /В.Л. Брехов.

- Курск, 2007. - 20 с.

15. Самодай, В.Г. Использование богатой тромбоцитами аутоплазмы (БОТП) в хирургическом лечении дефектов костной ткани с нарушением непрерывности кости /В.Г. Самодай, В.Л Брехов, В.Е. Гайдуков //Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 493-495.

16. Evaluation of factors that can modify platelet-rich plasma properties /M.G.S. Andrade, C.J. de Freitas Brandao, C. Neves Sa [et al.] //Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod. - 2008.

- Vol. 105, N 1. - P. e5-e12.

17. Effect of platelet-rich plasma (PRP) concentration on the viability and proliferation of alveolar bone cells: an in vitro study /B.H. Choi, S.J. Zhu, B.Y. Kim [et al.] //Int. J. Oral Maxillofac. Surg. - 2005.

- Vol. 34, N 4. - P. 420-424.

18. Platelet-rich plasma: quantification of growth factor levels and the effect on growth and differentiation of rat bone marrow cells /J. van den Dolder, R. Mooren, A.P. Vloon et al. //Tissue (Eng).

- 2006. - Vol. 12, N 11. - Р. 3067-3073.

19. Marx, R.E. Platelet-rich plasma (PRP): what is PRP and what is not PRP? /R.E. Marx //Implant dentistry. - 2001. - V. 10, N 4. - P. 225-228.

20. Новые виды материалов для костной пластики в свете современных представлений о костных трансплантатах /И.А. Кирилова, Н.Г. Фомичев, В.Т. Подорожная, В.И. Трубников //Хирургия позвоночника. - 2007. - № 2. - С. 66-70.

21. Пат. № 2232585, РФ, МКИ6 A 61 K 35/32, A 61 F 2/28, A 61 L 27/00, A 61 L 27/54, A 61 P 19/00. Способ приготовления биоактивного костно-пластического материала «Депротекс» /Кирилова И.А. (РФ). - № 2001105849/15; заявл. 01.03.2001; опубл. 07.2004, Бюл. № 35.

Сведения об авторе: Information about author:

Кирилова И.А., к.м.н., врач травматолог-ортопед лаборатории Kirilova I.A., MD, traumatologist-orthopedist, laboratory of procure-

заготовки и консервации тканей, ФГУ «ННИИТО» Минздравсоцраз- ment and preservation of tissues, Novosibirsk scientific research institute

вития РФ, г. Новосибирск, Россия. of traumatology and orthopedics, Novosibirsk, Russia.

Адрес для переписки: Address for correspondence:

Кирилова И.А., ул. Фрунзе, 17, г. Новосибирск, Россия, 630091 Kirilova I.A., Frunze st., 17, Novosibirsk, Russia, 630091

Лаборатория заготовки и консервации тканей Laboratory of procurement and preservation of tissues

Тел: 8-383-224-4569 Tel: 8-383-224-4569

E-mail: [email protected] E-mail: [email protected]

m

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.