CC BY
37
ным ожирением является анализ количества фитобальнеологических воздействий у боль-
дней временной нетрудоспособности за 12 ных с метаболическим синдромом подтвер-
месяцев после завершения лечения. Этот по- ждают наибольшую эффективность ком-
казатель составил для больных 1-6-й групп плексного применения корригирующих фак-
последовательно 12,2±0,38; 13,0±0,42; торов. На фоне комплексного применения фи-
9,0±0,28; 7,3±0,19; 10,4±0,31 и 8,9±0,23 дней. тотерапии и минеральных вод длительность
Во всех группах этот показатель был досто- сохранения достигнутых клиниковерно меньше, чем в контроле, и его мини- лабораторных результатов составила 8-9 ме-
мальные значения отмечались в 3, 4 и 6-й сяцев. Изолированное применение фитокок-
группах. тейлей или бальнеотерапии сопровождалось
Таким образом, отдаленные результаты с°хранн°стью эффектов в течение 6 месяцев.
Сведения об авторах статьи:
Разумов А.Н. — академик РАМН, д.м.н., профессор, ген. директор ФГУ «Российский научный центр восстановительной медицины и курортологии Росздрава», тел/факс: (495) 697-97-11; E-mail: [email protected]
Михайленко Л.В. — соискатель ФГУ «Российский научный центр восстановительной медицины и курортологии Росздрава», г. Москва, тел/факс: (495) 697-97-11; E-mail: [email protected]
Балакин С.А. — соискатель ФГУ «Российский научный центр восстановительной медицины и курортологии Росздрава», главный врач санатория «Волжский утес», г. Москва, тел/факс: (495) 697-97-11; E-mail: [email protected]
Янтурина Н.Х. — к.м.н., соискатель кафедры восстановительной медицины и курортологии ИПО, ГОУ ВПО «БГМУ Росз-драва», тел/факс:(347)228-76-80; E-mail: [email protected]
Гильмутдинова Л.Т. — д.м.н., профессор, директор НИИ восстановительной медицины и курортологии зав. кафедрой восстановительной медицины и курортологии ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», тел/факс: (347) 228-43-78; E-mail: [email protected]
Юсупова Р.М. — соискатель кафедры восстановительной медицины и курортологии ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», тел/факс: (347)228-43-78; E-mail: [email protected]
Назарова Э.М. — ассистент кафедры восстановительной медицины и курортологии ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», тел/факс: (347)228-43-78; E-mail: [email protected]
Кириллова Н.А. — соискатель кафедры восстановительной медицины и курортологии ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава».
ЛИТЕРАТУРА
1. Еделев, Д.А., Применение физических и природных факторов в восстановительной коррекции функциональных резервов человека /Д. А. Еделев, И.П. Бобровницкий, Л.В. Михайленко, В.К. Фролков. - М., 2009. - 263 с.
2. Кузнецов, Б.Г. Новые представления о физических механизмах действия питьевых минеральных вод // Современные аспекты курортной гастроэнтерологии: Сб. науч. тр. Пятигорского НИИКиФ. - Пятигорск, 1988. - С. 9-12.
3. Михайленко, Л.В. Фитотерапия артериальной гипертонии в сочетании с ожирением в санаторно-курортных условиях /Л.В.Михайленко, С.Н. Нагорнев, И.П. Бобровницкий [и др.] //Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК, 2009. - № 5. -С. 13-17.
4. Полушина, Н.Д. Превентивная курортология (теоретические и прикладные аспекты, перспективы) / Н.Д. Полушина, В.К.
Фролков, Л.А. Ботвинева. - Пятигорск, 1997. - 225 с.
5. Фролков, В.К. Функциональные резервы гликогомеостатической системы и их восстановительная коррекция с применением минеральных вод / В.К. Фролков, И.П. Бобровницкий. - М.. 2007. -191 с.
УДК 613.632:616.71-007.234-057:66[577.12:611.018.4]-092.9
© Ф.Х. Камилов, Т.И. Ганеев, Е.Р. Фаршатова, Э.Р. Бикметова, И. А. Меньшикова, Г.В. Иванова, 2011
Ф.Х. Камилов, Т.И. Ганеев, Е.Р. Фаршатова,
Э.Р. Бикметова, И.А. Меньшикова, Г.В. Иванова РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ДЕЙСТВИИ ХЛОРПРОИЗВОДНЫХ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ АЛИФАТИЧЕСКИХ
УГЛЕВОДОРОДОВ
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа
При экспериментальной двухмесячной интоксикации хлорпроизводными алифатических углеводородов (дихлорэтаном) белых половозрелых крыс в суммарной дозе 0,1ЛД50 установлено ускорение процессов ремоделирования кости с превалированием процессов резорбции. Усиление катаболических процессов в костной ткани обусловлено активацией процессов липопероксидации на фоне снижения антиокислительной защиты, дезинтеграцией функции эндокринных желез со вторичным нарушением фосфорно-кальциевого обмена, развитием неспецифического адаптационного синдрома, поражением метаболических функций печени, оказывающих опосредованный эффект на процессы всасывания и образования активной формы витамина Д.
Ключевые слова: хлорпроизводные алифатических углеводородов, интоксикация, костная ткань, ремоделирование.
F.Kh. Kamilov, T.I. Ganeyev, Ye.R. Farshatova,
E.R. Bikmetova, I.A. Menshikova, G.V. Ivanova REMODELLING OF BONE TISSUES BY THE ACTION OF CHLORINATED ALIPHATIC HYDROCARBONS
In the course of the experiment on puberal white rat models, following a two-months exposure to chlorinated aliphatic hydrocarbons (dichloroethane) intoxication of a cumulative 0.1 LD50 dose, a bone remodeling processes acceleration with prevailing resorption processes were observed. An enhancement of catabolic processes in bone tissue was due to lipid peroxidation processes ac-
tivation with antioxidation defense reduction, endocrine glands function disintegration with a consequent disturbance of phospho-calcium metabolism, nonspecific adaptation syndrome development, metabolic liver functions injury, causing a mediated effect on resorption processes and active form vitamin D formation.
Key words: chlorinated aliphatic hydrocarbons, intoxication, bone tissue, remodeling.
Ремоделирование, занимая особое место в процессах метаболизма кости, имеет важное значение, поддерживая, обновляя, корректируя микроструктуру ткани в соответствии с изменяющимися условиями, а также являясь звеном в обеспечении кругооборота ряда важнейших минеральных веществ (Са, М§, Б и др.) в организме, в поддержании их оптимального уровня в биологических жидкостях. Интенсификация резорбции костной ткани и/или ингибирование остеогенеза приводят к потере костной массы с развитием остеопении и остеопороза.
У работников химического предприятия, имеющих производственный контакт с различными хлорпроизводными алифатических углеводородов (дихлорэтан, хлорвинил, хлорпропан, хлорпропен, дихлорпропан, эпи-хлоргидрин и др.), во всех возрастных группах в 1,5-2 раза чаще, чем у работников других профессий, выявляются остеопения и ос-теопороз [4, 10]. Концентрация этих веществ в производственных помещениях цехов, выпускающих поливинилхлоридную продукцию, как правило, колеблется в пределах ПДК [7, 11.]. По содержанию вредных веществ в воздухе рабочей зоны условия труда у работников основных профессиональных групп в производствах каустика, винилхлорида, поливинилхлорида относятся к вредным (3-й класс 1-2-й степени вредности и опасности) согласно «Руководству по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового кодекса. Критерий и классификации условий труда Р 2.1.10.1920-04». Хотя рабочие пользуются средствами индивидуальной защиты, у работающих в постоянном контакте с хлорированными углеводородами наблюдается их накопление и неблагоприятное воздействие на организм.
В целях профилактики ускоренного развития остеопороза у работников химического предприятия возникает необходимость целенаправленных исследований патогенетических механизмов остеотоксического действия хлорпроизводных алифатических углеводородов.
Цель работы. Оценить интенсивность ремоделирования костной ткани и охарактеризовать возможные механизмы остеотокси-ческого влияния хронической интоксикации малыми дозами дихлорэтана в эксперименте.
Материал и методы
Эксперименты проведены на 78 белых половозрелых крысах, находящихся в условиях вивария и разделенных на 2 группы: контрольную и подопытную. Крысы подопытной группы ежедневно внутрижелудочно получали дихлорэтан (ДХЭ) в оливковом масле в течение двух месяцев в суммарной дозе 0,1 ЛД50, крысы контрольной группы получали только оливковое масло. У животных в плазме крови исследовали уровень общего и ионизированного кальция, фосфора (реактивы «Human», Германия), С-телопептидов костного коллагена («Serum Cross Laps Elisa», Nordic Biosciense Diagnostic d/s, Дания), активность костной щелочной фосфатазы (КЩФ, «Metra DAF EIA kit», Oudel Corporation). В гомогенате костной ткани определяли содержание свободного (СО) и белковосвязанного (БСО) ок-сипролина [1], интенсивность включения в
14/-ч
состав коллагена радиоактивных С-пролина, 14С-тирозина - неколлагеновых белков [9], уровень ТБК-активных продуктов (реактивы ООО «Агат-Мед», Россия), активность супер-оксиддисмутазы (СОД, «Ransod», Randox Labor Ltd), каталазы [6], глутатионпероксидазы (ГП, «Glutathion Peroxidase», Randox Labor Ltd). В плазме крови изучали содержание альбумина, билирубина, холестерина, активность аспарагиновой и аланиновой трансаминаз, у-глутамилтрансферазы, общей щелочной фос-фатазы (реагенты ЗАО «Вектор-Бест», Россия), а также уровни паратиреоидного гормона (IRMA PTH, Франция), эстрадиола (RIA ESTRADIOL,Франция), тестостерона (RIA TESTOSTERONE direct, Франция), кортизола (IMMUNOTCH CORTISOL RIA KIT, Греция).
Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ Statis-tica 6,0 фирмы Stat Soft. Достоверность меж-групповых различий средних величин оценивали по критерию Манна-Уитни.
Результаты и обсуждение
Изучение особенностей структуры, биосинтеза и метаболизма ферментов и других белков, продуцируемых костными клетками позволило выделить наиболее информативные из них и разработать методы их определения в плазме (сыворотке) крови и моче [2]. Биохимические маркеры формирования кости представлены костным изоферментом щелочной фосфатазы, остеокальцином, карбокси- и аминотерминальными фрагментами прокол-
лагена I типа. Маркерами резорбции костной ткани являются различные фрагменты коллагена I типа, а также коллагеновые белки, поступающие в кровоток из зоны резорбции костного матрикса: С-концевые и К-концевые телопептиды, пиридинолины и дезоксипири-динолины, галактозил-гидроксилизин, костный сиалопротеин, костная кислая фосфатаза. Менее специфичными маркерами костной резорбции являются оксипролин и уровень кальция.
Результаты исследования маркеров ремоделирования костной ткани при интоксикации ДХЭ представлены в табл. 1. У животных, подвергнутых длительной интоксикации ДХЭ, обнаруживается в крови статистически значимое снижение кальция как общего, так и ионизированного, фосфора, что свидетельствуя о развитии нарушений кальций-фосфорного обмена. В плазме крови резко повышается уровень С-концевых телопепти-дов коллагена типа I (до 225%), отражающего интенсивность течения остеорезорбции. Кар-бокси (С- как и амин (К-концевые пропептиды проколлагена I типа представляют собой большие домены, которые отделяются от синтезированной остеобластами молекулы проколлагена специфическими пептидами при ее поступлении из клетки во внеклеточное пространство. Образовавшаяся при этом молекула коллагена I типа включается в процесс формирования фибрилл зрелого коллагена костного матрикса, а отщепленные пропептиды во внеклеточном пространстве под действием катепсина К и матричных металлопро-теиназ расщепляются, продукты расщепления поступают в кровь, где под влиянием протео-литических ферментов образуются С-концевые и К-концевые структуры, состоящие из двух октапептидов, связанных пири-динолиновой или пирроловой поперечной сшивками, уровень которых определяется для оценки интенсивности деградации только зрелого коллагена и поэтому являются высокоспецифичными маркерами резорбции кости [2].
Таблица 1
Уровень маркеров костного ремоделирования и содержания
кальция и фос( эора в плазме крови, Ме [G,25; G,75]
Показатели Группа животных, n=16
контрольная Подопытная (ДХЭ G,1 ЛД5o) Р
Са общий, ммоль/л 2,2 [1,9; 2,3] 1,9 [1,8; 2,2] G,G2G6
Са ионизированный, ммоль/л 1,G3 [G,S9; 1,11] G,S4 [G,SG; G,9G] G,G372
Фосфор, ммоль/л 1,25 [1,19; 1,35] G,S9 [G,54; 1,11] G,G441
p-Cross Laps, мг/мл 1,6 [1,1; 2,1] 3,6 [3,G; 5,3] <<G,GG1
КЩФ, МЕ/л 45,G [37,5; 5G,G] 59,5 [55,G; SG,5] G,G4S7
ОЩФ, МЕ/л 124 [1G3; 165] 2G7 [2G3; 21] <<G,GG1
Уровень в плазме крови маркеров остеогенеза - активности КЩФ и ОЩФ [2] -также повышается, что свидетельствует и об усилении процессов образования новых ос-теонов. Однако активность КЩФ увеличивается значительно меньше, достигая лишь 132,2% к контролю, чем содержание С-концевых телопептидов. Активность ОЩФ является маркером не только остеогенеза, но и холестатического синдрома. Поэтому более высокое повышение активности ОЩФ может быть связано и с нарушениями секреции желчи, поскольку ДХЭ оказывает выраженное гепатотоксическое действие [8].
Таблица 2
Влияние интоксикации дихлорэтаном на некоторые показатели
метаболизма костной ткани, n=16
Группа животных СО, ммоль/г БСО, мкмоль/г
плечевая кость челюсть плечевая кость челюсть
Контрольная G,92 [G,S4; G,94] G,9S [G,S6; 1,18] G,34 [G,3G; G,3S] G,2G [G,19; G,2G]
Подопытная (ДХЭ 0,1ЛД50) 1,38 [1,21; 1,5G] Р=G,GGGS 1,49 [1,46; 1,SG] Р=G,GG7G G,16 [G,16; G,19] Р=G,GGGS G,13 [G,G9; G, 15] Р=0,0133
Превалирование резорбции костной ткани над ее образованием подтверждается и результатами исследования показателей метаболизма коллагена костной ткани, в частности трубчатой кости и кости нижней челюсти (табл. 2). У подопытных животных при интоксикации ДХЭ в течение двух месяцев в суммарной дозе 0,1 ЛД50 в обеих костях наблюдается существенное снижение белковосвязанного оксипролина, отражающего уровень костного коллагена, и повышается в полтора раза уровень свободного оксипролина, что характеризует интенсификацию катаболизма этого основного белка матрикса костной ткани.
В то же время под влиянием ДХЭ в костной ткани снижается образование как органического, так и неорганического компонента межклеточного вещества. На рис. 1 представлены данные изучения включения
К 1 2 2
Рис. 1. Интенсивность включения 14С-пролина (1) и 14С-тирозина (2) в белки, 45Са (3) в неорганическую фазу костной ткани (большеберцовая кость) в процентах к контролю (К).
*Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001, п=8
радиоактивных аминокислот и кальция в костную ткань животных, экспонированных ДХЭ. При этом наиболее значительное тор-
можение отмечается в биосинтезе неколлагеновых белков (включение 14С-тирозина, содержание которого в первичной структуре коллагена костной ткани менее 2%), в меньшей степени, но статистически значимо ингибируется синтез коллагена (включение 14С-пролина, который обнаруживается лишь в составе коллагена). Снижение удельной радиоактивности минеральной фазы костной ткани
45
при введении Са вполне согласуется с результатами других показателей метаболизма кости, подтверждая интенсификацию ее рассасывания.
К ПІГ КОР ФСГ лтг э т лг
Рис. 2. Содержание гормонов в плазме крови у крыс, подвергнутых длительной экспозиции малыми дозами дихлорэтана, в процентах к контролю. К-контроль, ПТГ-паратгормон, КОР-кортизол, ФСГ - фолликулостимулирующий гормон, ЛТГ -лактикотропин, Э-эстрадиол у самок, Т-тестостерон у самцов, ЛГ-лютеинизирующий гормон
Для анализа возможных механизмов ос-теотоксического действия ДХЭ были проведены исследования состояния гормонального статуса, метаболической функции печени и процессов липопероксидации в гомогенатах костной ткани. При интоксикации ДХЭ у подопытных животных наблюдаются изменения содержания гормонов, оказывающих существенное влияние на метаболизм костной ткани: уровни паратгормона, кортизола, про-лактина, фолликулостимулирующего гормона, оказывающих катаболический эффект, повышается; содержание тестостерона у самцов и эстрадиола у самок крыс, препятствующих резорбции и усиливающих анаболические
процессы, снижается. Также снижается и продукция лютеинизирующего гормона, что констатирует функциональные нарушения по типу обратной связи между центральными и периферическими составляющими оси гипоталамус - гипофиз - гонады.
Исследования метаболической и желчевыделительной функций печени показали, что интоксикация ДХЭ снижает содержание в крови альбумина и холестерина, увеличвает общий билирубин, повышает активность у-глутамилтрансферазы, АсТ, АлТ (табл. 3), что свидетельствует о существенных нарушениях метаболизма в печени, выражающихся в развитии цитолитического синдрома, снижении биосинтетического потенциала, функций детоксикации и выделения желчи. Снижение желчевыделительной функции печени подтверждается и уже указанной активацией ОЩФ.
Первичным токсическим эффектом хлорорганических соединений является интенсификация радикалообразования в результате их биотрансформации ферментами мик-росомальной монооксигеназной системы с последующей активацией перекисного окисления липидов биологических мембран клеток структурных элементов различных тканей [5, 8]. В этой связи при хронической интоксикации дихлорэтаном в гомогенатах костной ткани были исследованы содержание продуктов перекисного окисления липидов и активность основных антиокислительных ферментов (табл. 4).
Длительное введение даже малых доз ДХЭ приводит к накоплению вторичных продуктов липопероксидации, свидетельствуя об интенсификации в костной ткани процессов свободнорадикального окисления. При этом выявляется существенное снижение (в 1,5-2 раза) активности ферментов, препятствующих развитию в тканях окислительного стресса.
Таблица 3
Влияние хронической интоксикации ДХЭ на некоторые биохимические маркеры функции печени, X ±бх, п=24
Группа Показатели
животных Альбумин, г/л Холестерин, ммоль/л Билирубин, мкмоль/л АлТ, Е/л АсТ, Е/л у-ГТ, Е/л
Контрольная 34,7±2,26 3,56±0,26 7,56±0,24 17,5±1,53 19,1±1,06 11,6±1,04
Подопытная (ДХЭ 0,1ЛД50) 25,3±1,69 2,66±0,19 19,2±1,26 56,3±7,24 56,5±4,82 22,8±2,36
Р 0,0008 0,0031 <<0,001 <<0,001 <<0,001 <<0,001
Таблица 4
Активность антиоксидантных ферментов и уровень ТБК-активных соединений в гомогенатах костной ткани нижней челюсти при интоксикации крыс дихлорэтаном, Ме [0,25; 0,75]____________
Показатели
Группа животных ТБК-активные продукты, нмоль/г СОД, Е/мг белка Глутатион-пероксидаза, Е/мг белка Каталаза, мкмоль/мг белка
Контрольная 2,71 [2,56; 2,77] 69,5 [68,0;71,1] 460 [454,2;466,9] 7,42 [7,27; 7,85]
Подопытная (ДХЭ 0,1ЛД50) 4,21 [4,10; 4,26] 40,0 [38,0; 51,0] 231,3 [184,0; 264,4] 4,11 [4,07; 4,40]
Р 0,0007 0,0007 0,0006 0,0005
Заключение
Резюмируя результаты исследования, можно констатировать следующие основные положения. Длительное поступление в организм даже малых доз хлорпроизводных алифатических углеводородов (дихлорэтана) ускоряет процессы ремоделирования костной ткани с превалированием процессов резорбции. Механизмы ускорения катаболических процессов в костной ткани при действии хло-рорганических поллютантов включает интенсификацию процессов липопероксидации на фоне снижения антиокислительной защиты, дезинтеграцию функции эндокринных желез со снижением половых гормонов, развитие
вторичного гиперпаратиреоза с увеличением продукции паратгормона и нарушением фосфорно-кальциевого обмена, развитие неспецифического адаптационного синдрома с усилением продукции глюкокортикоидов (кортизола) и пролактина, поражением метаболических функций печени, оказывающим опосредованный эффект на процессы всасывания и образования активной формы витамина Д и, как конечный результат, обмена кальция.
Полученные нами данные, экспериментальных исследований укладываются в общую схему влияния различных факторов на ремоделирование костной ткани (рис. 3).
Несбалансированное питание; инволюционные процессы; нарушения секреции Са-регулирующих и системных гормонов; гомеостаза Са и Р; метаболизма витамина Д; воспалительный процесс; инфекция; гипоксия, ацидоз; аутоиммунные, атрофические процессы в пищеварительном тракте; энзимопатии; холестаз; нарушения продукции желчи; мальабсорбция; хроническая почечная недостаточность
Эстрадиол; тестостерон; анаболические стероиды; кальций; бор; цинк; медь; марганец; магний
РЕЗОРБЦИЯ КОСТИ <С I РЕМОДЕЛ?- 1=^ОБРАЗОВАНИЕ КОСТИ
РОВАНИЕ
И її
Стресс; усиление свободнорадикальных процессов; генетические дефекты; неопластический процесс; ятрогенные воздействия; вредные привычки; экологические факторы; влияние токсических веществ; физические упражнения высокой интенсивности; хронические перегревания; похудение, уменьшение массы тела; вибрация; длительное плавание, пребывание в невесомости, иммобилизация
а-токоферол; витамины С; Д; А; p-каротин; биофлавоноиды
Рис. 3. Влияние различных факторов на ремоделирование костной ткани.
Сведения об авторах статьи:
Камилов Ф.Х. - д.м.н., профессор, зав. кафедрой биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава» Ганеев Т.И.. - аспирант кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», адрес: г. Уфа, Ленина, 3; e-mail: [email protected]
Меньшикова И.А. - к.м.н., ассистент кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава» Фаршатова Е.Р. - к.м.н., ассистент кафедры патофизиологии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», адрес: г. Уфа, Ленина, 3; e-mail: [email protected];
Бикметова Э.Р. - соискатель кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава»
Иванова Г.В. — ст. научный сотрудник кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава»
ЛИТЕРАТУРА
1. Шараев, П.Н. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани: методические рекомендации / П.Н. Шараев, В.Н. Пишков, О.Н. Зубарев, В.М. Иванов, И.В. Вольхина, Н.Г. Наумова. - Ижевск, 1990. - С. 3-10.
2. Ермакова, И.П. Биохимические маркеры костного обмена: биохимические, аналитические и клинические аспекты использования: руководство по остеопорозу / Под ред. Л.И. Беневолевской / И.П. Ермакова, И.А. Пронченко. - М.: Бином, Лаборатория знаний, 2003. - С. 168-181.
3. Казимирко, В.В. Остеопороз: патогенез, клиника, профилактика и лечение / В.В. Казимирко, В.Н. Коваленко, В.И. Мальцев. -Киев: Морион, 2006. - 145 с.
4. Камилов, Ф.Х. Состояние минеральной плотности костной ткани у рабочих химического производства / Ф.Х. Камилов, И.А. Меньшикова, Р.З. Нурлыгаянов, Л.М. Рамазанова // Мед.вестник Башкортостана. - 2007. - №2. - с. 78-82.
5. Карпищенко, А. И. Глутатионзависимая антиоксидантная система в некоторых тканях крыс в условиях острого отравления дихлорэтаном / А.И. Карпищенко, С.И. Глушков, В.В. Смирнов // Токсикол. вестник. - 1997. - №3. - С. 17-23.
6. Королюк, М.А. Метод определения каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лаб.дело. - 1988. -№1. - С.16-19.
7. Лабораторный контроль за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны предприятий нефтяной, нефтеперерабатывающей и нефтехимической отраслей промышленности / Л.К. Каримова, З.Ф. Шарафисламова, Т.К. Ларионова, Н.А. Бейгул // Нефть и здоровье. - Уфа, 2007. - С. 97-100.
8. Лужников, Е.А. Острые отравления: руководство для врачей / Е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова. - М.: Медицина, 1989. - 347с.
9. Прохорова, М.И. Методы биохимических исследований / М.И. Прохорова. - Л.: Изд-во Ленинград. ун-та, 1982. - 272 с.
10. Рамазанова, Л.М. Нарушения минеральной плотности костной ткани у мужчин - работников химического производства / Л.М. Рамазанова, И.А. Меньшикова, Ф.Х. Камилов // Вестник Оренбурского госуниверситета - 2008. - №9. - С.199-203.
11. Шаяхметов, С.Ф. Оценка профессионального риска нарушений здоровья работников предприятий химической промышлености / С.Ф. Шаяхметов, М.П. Дьякович, Н.М. Мещакова // Мед. труда и промышленная экология. - 2008. - №8. - С.27-33.
