CC BY
19
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
10—50 УЕ/мл). Пациент получил курс преднизолона, интерферон, Заключение. Несмотря на редкую встречаемость болезни Розаи—
иммуномодуляторы. Выписан в удовлетворительном состоянии. Ре- Дорфмана, детские гематологи в своей практике должны помнить цидива не было. об этой патологии.
Марьина С. А., Соболева Н. П., Петрова Н. А., Ускова О. С., Ковалева П. А., Орданина К. А., Двирнык В. Н.
СРАВНЕНИЕ ТРЕХ МЕТОДОВ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНЫХ ЛЕГКИХ ЦЕПЕЙ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
В СЫВОРОТКЕ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Количественное содержание в сыворотке свободных легких цепей (СЛЦ) является важной составляющей при обследовании пациентов с моноклональной гаммапатией. Определение концентрации СЛЦ особенно показано для диагностики и мониторирования заболеваний с низким уровнем моноклональной секреции как независимый прогностический признак, для оценки ответа на терапию и определения глубины ремиссии. В настоящее время для определения СЛЦ используются тест системы разных производителей.
Цель работы. Провести количественное определение СЛЦ тремя разными методами, сравнить полученные результаты и оценить взаимозаменяемость этих методов.
Материалы и методы. Определение уровня СЛЦ в сыворотке тремя методами было выполнено 40 пациентам (с парапротеинеми-ческими гемобластозами — 37, с неходжкинскими лимфомами — 2, В-ХЛЛ — 1). Медиана возраста составила 56 (20—75) лет; м/ж — 1:1. СЛЦ определяли методами: Freelite (The Binding Site) и K^oneus (Trimero Diagnostics) на анализаторе Immage 800 (Beckman Coulter), Human Immunoglobulin FLC Kappa and Lambda ELISA (Biovendor) с помощью прибора Personal Lab (Adaltis). Статистический анализ проводился с использованием программ IBM SPSS Statistics v.24 (IBM Corporation), MedCalc (MedCalc Software).
Результаты и обсуждение. Диагностическое значение имеет соотношение к/Х СЛЦ, поэтому этот параметр принимался как основной критерий оценки метода. Результаты, полученные при количественном определении СЛЦ разными методами, представлены в таблице 1. По всем трем методам получено нормальное соотношение к/Х СЛЦ у 15 пациентов, дисбаланс к/Х СЛЦ — у 25 пациентов при различном распределении уровня к и Х СЛЦ. При сравнении соотношения к/Х СЛЦ статистически значимых различий не выявлено (р=0,803). Однако в 15% случаев были получены несопоставимые абсолютные значения к и Х СЛЦ, определенные разными методами. Наиболее значительные количественные различия наблюдались между тремя методами в сыворотках с высокими концентрациями СЛЦ (табл. 2).
Заключение. Все три метода (Freelite, ^oneus и Human Immunoglobulin FLC Kappa and Lambda ELISA) сопоставимо выявляют дисбаланс к/Х СЛЦ, что позволяет их использовать в диагностических
целях. Ввиду наличия у ряда пациентов различий в абсолютных значениях СЛЦ, определенных с помощью трех разных тест-систем, методы нельзя считать взаимозаменяемыми. Оценка динамики концентрации СЛЦ у каждого пациента должна проводиться одним и тем же методом.
Таблица 1. Распределение пациентов по результатам количественного определения СЛЦ разными методами (п=40)
Соотношение к/л СЛЦ Уровень СЛЦ М е т о д ы
Freelite (n) ^oneus (n) Human Immunoglobulin FLC Kappa and Lambda ELISA (n)
Норма Норма к и А 14 12 13
Повышение к и А 1 3 2
Дисбаланс При повышении к или А 23 19 20
При повышении к и А 0 2 1
При норме к и А 2 3 4
При снижении А 0 1 0
Таблица 2. Несопоставимые значения СЛЦ, полученные разными методами
Пациенты СЛЦ Концентрация СЛЦ (мг/л)
Freelite ^oneus Human Immunoglobulin FLC Kappa and Lambda ELISA
Норма к 3,3-19,4 3,3-19,4 0,78-12,5
Норма А 5,7-26,3 5,7-26,3 2,5-12,8
1. к 4,0 3,04 1,5
А 1580 1150 97,87
2. к 8,87 10,9 6,29
А 3750 1020 171,9
3. к 138 159 2064
А 5,54 16,8 2,9
4. к 1188 214 23,3
А 4,0 4,37 2,78
5. к 1240 203 47,1
А 11,2 <0,5 6,79
6. к 4050 393 375,2
А 13,9 31,6 4,68
Масликова У. В., Попова Н. Н., Дроков М. Ю., Давыдова Ю. О., Капранов Н. М., Михальцова Е. Д., Королева О. М., Довыденко М. В., Конова З. В., Дмитрова А. А., Дубняк Д. С., Старикова О. С., Камельских Д. В., Гальцева И. В., Васильева В. А., Кузьмина Л. А.,
Паровичникова Е. Н., Савченко В. Г.
РЕКОНСТИТУЦИЯ CD8+ ^КЛЕТОК ПАМЯТИ У ПАЦИЕНТОВ ПОСЛЕ ГАПЛОИДЕНТИЧНОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ
ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КРОВИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Использование гаплоидентичного донора позволяет в кротчайшие сроки выполнить трансплантацию аллогенных гемо-поэтических стволовых клеток (гапло-ТГСК) пациентам с гемобластозами из группы высокого риска. Однако проведение такой трансплантации сопряжено с высокими рисками развития острой реакции «трансплантат против хозяина». В настоящее время профилактика при гапло-ТГСК включает в себя посттрансплантационный цикло-фосфамид и TCR ар-деплецию. Однако нет данных о влиянии этих методов на восстановление Т-клеточного звена иммунной системы пациентов после гапло-ТГСК.
Цель работы. Сравнить восстановление CD8+ Т-клеток памяти у пациентов после гапло-ТГСК с посттрансплантационным цикло-фосфамидом и TCR ар-деплецией.
Материалы и методы. В исследование было включено 27 пациентов с гемобластозами после гапло-ТГСК. Профилактику острой ре-
акции «трансплантат против хозяина» с посттрансплантационным циклофосфамидом применяли у 9 пациентов (м/ж 5/4). 18 больным была выполнена процедура TCR ар-деплеции (м/ж 7/11). Из них 5 пациентам проводилась реинфузия донорских CD45RA- клеток в 0, +30, +60, +90 дни. Медиана возраста в группах составила 30 (25—38) и 23,5 (17—57) лет соответственно. Методом проточной цитометрии (проточный цитометр BD FACS Canto II, Becton Dickinson, США) в образцах периферической крови больных мы исследовали субпопуляционный состав CD8+ Т-клеток на +30, +90 дни: T-наивные и стволовые клетки памяти (Tnv+Tscm) -CD45R0-CCR7+CD28+; T-клетки центральной памяти (Tcm) — CD45R0+CCR7+CD28+; T-клетки транзиторной памяти (Ttm) — CD45R0+CCR7-CD28+; T-клетки эффекторной памяти (Tem) — CD45R0+CCR7-CD28-; T-терминальные эффекторы (Tte) — CD45R0-CCR7-CD28-. При оценке различий использовали критерий U Манна— Уитни. Статистически значимым мы считали значение p<0,05.
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2020; ТОМ 65; №1 |
Результаты и обсуждение. Распределение субпопуляционного состава CD8+ Т-клеток памяти на +30 и +90 дни представлено в таблице 1.
Заключение. На +30 день у пациентов, у которых в режиме профилактики острой РТПХ использовали циклофосфамид на +3, +4 дни, количество всех субпопуляций CD8+ Т-клеток памяти было значимо больше, чем у пациентов после TCR ар-деплеции, вне зависимости от инфузий CD45RA- клеток. Полученные данные говорят о более мощной иммуноаблации при использовании Т-клеточной де-
плеции ex vivo в сравнении с посттрансплантационным циклофосфа-мидом. На +90 день количество CD8+ Tnv+Tscm остается значительно выше у пациентов после посттрансплантационного циклофосфами-да в сравнении с TCR ар-деплецией, что также подтверждает более «агрессивное» воздействие TCR ар-деплеции на Т-клеточное звено иммунной системы по сравнению с циклофосфамидом, что, в свою очередь, может пролонгировать период глубокого Т-клеточного иммунодефицита у этих больных.
Контрольная точка Популяция Циклофосфамид +3, +4 дни Медиана (процентиль 25— процентиль 75) TCRa^-деплеция с инфузией CD45RA-Медиана (процентиль 25 — процентиль 75) TCRa^-деплеция без инфузии CD45RA-Медиана (процентиль 25 — процентиль 75) Значение р
+30 день Tnv+Tscm 0,52 (0,12-2,73) 0,01 (0,00-0,13) 0,05 (0,00-0,14) 0,003
Tem 6,03 (4,52-14,10) 0,29 (0,02-0,36) 0,54 (0,29-2,64) 0,006
Tcm 0,30 (0,22-1,02) 0,03 (0,01-0,29) 0,02 (0,00-0,18) 0,006
Tte 5,50 (2,36-22,90) 0,22 (0,06-0,60) 0,64 (0,15-0,83) 0,011
Ttm 7,82 (5,73-16,95) 1,03 (0,15 -2,74) 0,72 (0,15-1,99) 0,003
CD8* 31,48 (16,96-46,77) 1,98 (1,07-3,18) 2,53 (0,83-6,17) 0,002
+ 90 день Tnv+Tscm 1,98 (1,74 -3,30) 0,31 (0,22-1,36) 0,22 (0,04-0,47) 0,003
Tem 39,71 (4,18-133,98) 13,39 (5,54-35,38) 13,49 (5,36-65,04) 0,626
Tcm 0,41 (0,34-1,94) 1,04 (0,09-5,67) 0,09 (0,02-0,25) 0,040
Tte 11,39 (7,46-22,64) 1,53 (0,36-4,48) 6,19 (2,04-25,23) 0,251
Ttm 25,52 (6,88-31,18) 30,50 (7,76-69,13) 4,21 (2,53-8,78) 0,027
CD8* 89,42 (24,81-262,96) 20,52 (16,99-151,20) 28,78 (16,99-104,10) 0,199
Матохина К. А., Захарько Е. И., Рыбкина Е. Б., Дрокова Д. Г., Дроков М. Ю., Троицкая В. В., Паровичникова Е. Н., Двирнык В. Н.
ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ОСТРОГО ПРОМИЕЛОЦИТАРНОГО ЛЕЙКОЗА С РМЬ-ЯАЯА
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ) с PML-RARA составляет 5—8% от всех случаев острых миелоидных лейкозов. Выделяют 2 варианта ОПЛ — гипергранулярный (классический) и микрогранулярный (вариантный). Иммунофенотипическое (ИФТ) исследование является дополнительным методом в диагностике ОПЛ. В большинстве случаев аномальные промиелоциты экспрессируют маркер предшественников CD117. Экспрессия раннего маркера CD34 чаще отсутствует, однако может наблюдаться при вариантной форме ОПЛ. Бластные клетки экспрессируют линейно-специфический ми-елоидный маркер миелопероксидазу (МРО) и миелоид-ассоцииро-ванные маркеры (CD13, CD33). Другие антигены, ассоциированные с гранулоцитарной дифференцировкой (CD15, CD11b, CD11c), чаще отрицательны или отмечается их слабая экспрессия. По литературным данным, экспрессия NK-клеточного антигена CD56 встречается в 10% случаев ОПЛ, коррелирует с короткой продолжительностью ремиссии и развитием экстрамедуллярных рецидивов. Экспрессия других лим-фоид-ассоциированных антигенов (CD7, CD19) встречается редко.
Цель работы. Представить ИФТ особенности и аберрации аномальных промиелоцитов при ОПЛ с PML-RARA.
Материалы и методы. Исследуемый материал — костный мозг (КМ). ИФТ диагностика проводилась на 8-цветном проточном цито-метре FACS Canto II.
Результаты и обсуждение. В период с 2015 по 2019 г. в ЦКДЛ было проведено ИФТ исследование КМ 50 пациентам с ОПЛ. Классический вариант был диагностирован у 39/50 (78%) пациентов (Ме количества лейкоцитов периферической крови (ПК) — 1,6), вариантный — у 11/50
(22%) (Ме количества лейкоцитов ПК — 40,5). Экспрессия CD117 на аномальных промиелоцитах отмечалась в 100% образцов, ранний маркер CD34 экспрессировался при классическом варианте в 3/39 (7,7%) случаях, при вариантном — в 4/11 (36,4%) (р = 0,82). МРО, CD33 и CD13 экспрессировались в 100% случаев, при этом экспрессия МРО и CD33 была яркой, а CD13 — гетерогенной. Экспрессия антигенов гранулоцитарной дифференцировки CD15, CD11b, CD11c выявлялась в 24/35 (68,6%), 13/39 (33,3%) и 16/39 (41%) соответственно в группе с гипергранулярным вариантом; в 7/10 (70%), 3/11 (27,3%), 3/11 (27,3%) — с микрогранулярным вариантом и была гетерогенной в обеих популяциях. Аберрантная экспрессия лимфоидных антигенов CD7 и CD19 наблюдалась только в группе с классическим вариантом ОПЛ у 1/39 (2,6%) и 2/39 (5,1%) соответственно. Экспрессия CD56 выявлялась у 2/39 (5,1%) пациентов с гипергранулярным вариантом и у 1/11 (9%) с микрогранулярным. При этом у 1 пациента с аберрантной экспрессией CD56 был диагностирован поздний цитогенетический и молекулярный рецидив заболевания, другие 2 пациента в настоящее время находятся в ремиссии заболевания, однако время наблюдения в среднем составило 8 месяцев.
Заключение. ИФТ исследование позволяет в короткие сроки предположить диагноз ОПЛ. Количество лейкоцитов в группах пациентов с классическим и вариантным ОПЛ достоверно различалось (р<0,0001), однако значимых различий в экспрессии антигенов выявлено не было (р<0,05). Аберрации иммунофенотипа аномальных промиелоцитов требуют дальнейшего изучения для определения их прогностического значения.
Меликян А. Л., Егорова Е. К., Пустовая Е. И., Володичева Е. М., Чабаева Ю. А., Куликов С. М.
ОЦЕНКА ОБЩЕЙ ВЫЖИВАЕМОСТИ БОЛЬНЫХ С ИММУННОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИЕЙ СТАРШЕЙ ВОЗРАСТНОЙ ГРУППЫ
В ТУЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ ПО ДАННЫМ НАЦИОНАЛЬНОГО РЕГИСТРА
'ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России, Москва, Россия; 2ГУЗ ТО «Тульская областная клиническая больница», Тула, Россия
Введение. Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП) — аутоиммунное заболевание, характеризующееся изолированным снижением количества тромбоцитов <100,0х109/л. Основным клиническим проявлением, влияющим на качество жизни, развитие осложнений и необходимость терапии, является геморрагический синдром. Согласно литературным данным, общая выживаемость больных с ИТП не отличается от таковой в популяции. Однако в случаях с тяжелым течением возможно развитие смертельных исходов, связанных
с некупируемым геморрагическим синдромом. С 2014 года в Российской Федерации (РФ) проводится многоцентровое проспективное наблюдательное когортное исследование «Эпидемиологические и клинические характеристики ИТП у взрослых в России», призванное оценить заболеваемость, распространенность и общую выживаемость в регионах РФ среди взрослого населения с ИТП. В ходе экспертной оценки активности, полноты заполнения и покрытия популяции региона для оценки общей выживаемости больных с ИТП была выбрана Тульская область
