Регуляция апоптоза бактериальными клетками семейства Enterobacteriaceae Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ЛИТЕРАТУРА

1. Аминев, А.М. Руководство по проктологии в 4 т. - Куйбышев: Кн. изд-во, 1965. -Т. 1-4. -1973.

2. Масляк, В.М. Практическая колопроктология / В.ММасляк, М.П.Павловский,

Ю.С.Лозинский, И.М.Варивода. - Львов: Свит, 1990.-183с.

3. Мельман, Е.Н. Функциональная морфология прямой кишки и структурные основы патогенеза геморроя / Е.Н.Мельман, И.Г.Дацун. - М.: Медицина, 1986. -185с.

4. Проктология/ Под ред. В.Д. Федорова, Ю.В. Дульцева. -М.: Медицина, 1984-380 с.

5. Ривкин, В.Л. Геморрой / В.Л.Ривкин, Л.Л.Капуллер - 2-е изд. - М.: Медицина, 1985. - 175с.

6. Ривкин, В.Л. Геморрой и другие заболевания заднепроходного канала / Ривкин В.Л., Дульцев Ю.В., Капуллер Л.Л. М.: Медицина. 1994. - 240с.

7. Рыжих, А.Н. Атлас операций на прямой и толстой кишках. - 2-е изд. -М.: Медучпособие, 1968.-385 с.

8. Татаринов, Д.И. Геморрой: дис. ... д-ра мед. Наук. - М., 1905 - 85 с.

9. Stelzner F.,Staubesand J., Machleidt H. Das Corpus Сavemosum Recti//Arch. Klin. Chir. -1962. -Bd 299.-S. 302-312.

УДК 579.842.1/.2:616-091.818

© З.Г. Габидуллин, А.А. Ахтариева, М.М. Туйгунов, Р.С. Суфияров, В.Г. Туйгунова,

Р.Р. Суфияров, Ю.З. Габидуллин, Г. А. Идиатуллина, В.М. Изикаев, А.А. Габдрахманова, 2GG9

З.Г. Габидуллин, А.А. Ахтариева, М.М. Туйгунов, Р.С. Суфияров, В.Г. Туйгунова,

Р.Р. Суфияров, Ю.З. Габидуллин, Г.А. Идиатуллина, В.М. Изикаев, А.А. Габдрахманова РЕГУЛЯЦИЯ АПОПТОЗА БАКТЕРИАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE

ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» г. Уфа

В обзоре обобщены результаты исследований отечественных и иностранных авторов о способности бактерий семейства Enterobacteriaceae управлять гибелью клеток хозяина. При этом показано, что бактериальные клетки данного семейства могут активизировать программу клеточной гибели или подавлять апоптоз клеток хозяина.

Ключевые слова: Апоптоз, элиминация, клетки, рецептор, лимфоциты, некроз опухолей, каспазы, Enterobacteriaceae, цитоплазма.

Z. G. Gabidullin, A.A. Akhtarieva, M.M. Tuygunov, R.S. Sufiarov, V.G. Tuygunova,

R.R. Sufiarov, U.Z. Gabidullin, G. A. Idiatullina, V.M. Izicaev, A.A. Gabdrachmanova THE REGULATION OF APOPTOSIS BY BACTERIAL CELLS OF ENTEROBACTERIACEAE FAMILY

The article summarizes the results of home-grown and foreign scientists studies on the ability of the bacteria of Enterobacteriaceae family to influence the death of host’s cells. It is shown that the bacterial cells of this family may activate the programe of cell-death and may slow down the apoptosis of the host’s cell.

Key words: apoptosis, elimination cells, receptor, lymphocytes, necrose of tumours, caspases, Enterobacteriaceae, cytoplasm.

Тактический спектр приемов, при помощи которых возбудителю удается отстоять свое право на выживание в организме, разнообразен. Одним из таких приемов оказалась способность бактерийных патогенов влиять на апоптоз.

Апоптоз, или запрограммированная форма клеточной гибели, представляет собой процесс, посредством которого внутренние и внешние, физиологические или патологические факторы активируют генетическую программу и приводят к гибели клетки и ее эффективному удалению из ткани [37]. Благода-

ря апоптозу в многоклеточном организме обеспечивается баланс между пролиферацией клеток, их дифференцировкой и элиминацией. Элиминируются клетки, выполнившие свою функцию, потенциально опасные для организма дефектные клетки. Это происходит во время эмбриогенеза, эндокринзависимой атрофии тканей, в процессе удаления стареющих клеток и т.д. В естественных условиях процесс отмирания клеток регулируется через эндогенные факторы (гормоны, цитокины, дериваты арахидоновой кислоты, прямые межклеточные контакты) [16,36].

Механизмы реализации апоптоза чрезвычайно сложны и в определенной мере индивидуальны для конкретного типа клеток. Однако можно условно выделить два основных пути активации апоптоза, различающихся по характеру сигналов к запуску этого процесса: 1) рецепторный апоптоз - сигналы к запуску апоптоза поступают извне и опосредованы через специальные рецепторы; 2) нерецепторный апоптоз или митохондриальный

- сигналами к запуску апоптоза являются внутриклеточные факторы.

Первый путь осуществляется с участием клеточных рецепторов, специально предназначенных для включения программы апоп-тоза. Это рецепторы TNFR1, DR3, DR4, DR5, и в числе первых - Fas рецептор (Fas R, CD95, DR2) [33]. Fas - член семейства рецептора TNF. Все они представляют собой трансмембранные белки, которые внеклеточным участком взаимодействуют со специфическими лигандами - индукторами. Среди цитокинов, обладающих эффекторной функцией апоптоза в организме, является TNF-a. На клетках, «считающих себя ненужными», появляется рецептор TNF-R1 к TNF-a, и при лиганд-рецепторном взаимодействии запускается суицидная программа [31]. В культурах клеток НТ-29 апоптоз индуцируется IFN-y в комбинации с TNF-a [20,38]. FasR может экспрессироваться практически на всех клетках организма, особенно при их активации. Так, в Т-лимфоцитах появление Fas рецептора на мембране происходит при переходе из фазы покоя (G0) в пресинтетическую (G1) фазу клеточного цикла, сопряжено с активацией протеинки-назы С и транскрипционных факторов NF-AN, AP-1, Nur77, индукцией транскрипции Fas - регуляторного гена (TDAG51). Более того, экспрессия FasR безусловно необходима для митотической активности клетки, а сам Fas можно рассматривать как один из маркеров ранней активации (12-24 ч.) [21,30]. Тем же путем погибают ставшие не нужными выздоровевшему организму В-лимфоциты, продуценты антител, несущие Fas рецептор (FasR).

Среди описанных лигандов выделяют, FasL, относящийся к многочисленному семейству факторов некроза опухолей (TNF-tumor necrosis factor), TNFa, TNFß, TRAIL, CD40L, CD27L, CD30L. В отличие от FasR FasL экспрессируется преимущественно на активированных лимфоцитах (СВ 8+ Т-лимфоциты, в меньшей степени CD4 + Т-лимфоциты, NK-лимфоциты) и клетках некоторых «забарьерных» органов (клетки Серто-

ли, эпителий роговицы, сетчатка, кератиноци-ты) [387,29].

В результате взаимодействия FasR и FasL образуется комплекс из мембранной части рецептора и специальных внутриклеточных белков (смертьиндуцирующий сигнальный комплекс, dealth inducing signaling complex, DISC) [12,35]. Он активирует каскад уникальных внутриклеточных предшественников протеаз из семейства каспаз (Cs). Кас-пазы - это цистеиновые протеазы, расщепляющие белки в специфической для апоптоза последовательности, после аспарагиновой кислоты. По фунциональным свойствам кас-пазы могут быть разделены на три группы: активаторы цитокинов (Cs1, Cs4, Cs5, Cs13); индукторы активации эффекторных каспаз (Cs2, Cs8, Cs9, Cs10); эффекторные каспазы -исполнители апоптоза (Cs3, Cs6, Cs7, Cs14). Первоначально активируются так называемые инициирующие каспазы - Cs8 или Cs2, которые затем вызывают протеолитическую активацию эффекторных каспаз (Cs3, Cs7 и Cs10). После того, как каспазы из второй группы активируют эффекторные каспазы, процесс, запущенный программой смерти, оказывается необратимым [28,34]. Эффекторные каспазы осуществляют протеолиз более чем 70 жизненно важных для функционирования клетки белковых субстратов, контролирующих организацию ДНК и ее функцию, сигнальных белков, транскрипционных факторов, а также «запуск» каспазозависимых эндонуклеаз, что в конечном счете приводит к деградации ДНК до олгигонуклеосомных фрагментов и формированию апоптозных телец [32].

Сигналами к индукции нерецепторного апоптоза служат: 1) изменение «оксидантного статуса» клетки, образование реактивных интермедиатов кислорода; 2) нарушение процессов активации клетки, дефицит ко-стимулирующих сигналов, цитокиновой или гормональной «поддержки»; 3) активация

мембранных стресс-киназ; 4) нарушение прохождения клеткой митотического цикла, изменение ДНК, приводящие к активации белка 53, контролирующего правильность деления клетки, и т. д. Все эти факторы так или иначе вызывают нарушение баланса про- и анти-апоптогенных белков семейства Bcl-2, обеспечивающих потенциал, стабильность и целостность митохондриальной мембраны [23]. Подавление белков антиапоптогенов (Bcl-2, Bcl-xL, Mcl-1 и др.), которые, по сути, являются белками - антиоксидантами, и активация проапоптогенного потенциала, образованию пор в митохонриальой мембране и выхо-

ду цитохрома С и ряда других белков в цитоплазму [25,2,3,13]. В цитоплазме цитохром С образует комплекс с белком Apafl. Этот комплекс инициирует каспазу 9, которая, в свою очередь, активирует эффекторные каспазы -3, 7 и 10.

Применительно к инфекционной патологии, обусловленной бактериальными патогенами, апоптоз выполняет функцию защиты макроорганизма. Гибель инфицированных клеток с последующей элиминацией разрушенных клеток и микроорганизмов клетками иммунной системы позволяет предотвратить распространение инфекционного процесса.

В свою очередь, многие патогенные микроорганизмы выработали весьма совершенные механизмы, позволяющие им управлять гибелью клеток хозяина, более того, индуцировать апоптоз для своей «выгоды».

К индукторам апоптоза многие авторы относят гемолизины [4], экзотоксины [1], мембранные белки (III тип секреторных белков) [21].

Фактором, вызывающим апоптоз макрофагов, является а-гемолизин, продуцируемый энтероаггрегативными вариантами кишечной палочки (EaggEC) [24]. а-гемолизин является прототипом Са-зависимого поро-формирующего цитолизина, механизм действия которого связан с изменением проницаемости клеточной мембраны для ионов кальция. Увеличение внутриклеточного кальция сопровождается вторичными изменениями в клетке, что запускает апоптоз. EaggEC О157:Н7 серогруппы, продуцирующие шига-подобный токсин 2, напротив, замедляют апоптоз нейтрофилов [17].

Shigella flexneri посредством системы секреции III типа секретирует ряд белков в макрофаги, запуская тем самым разнообразные клеточные ответы. Так, белок IpaB может связываться с каспазой 1, активировать ее и в результате ее дальнейшей активации эффек-торных каспаз приводить к клеточной гибели [226,10]. Кроме того, каспаза-1 является активатором некоторых цитокинов, в частности IL-IP, конвертирующего фермента (ICE), и способствует выходу ИЛ-1 и развитию воспалительного процесса. Индукция апопотоза макрофагов и воспалительная реакция создают ряд «преимуществ» для возбудителя, способствуя массивной цикличной инвазии ши-гелл и развитию инфекции [18]. ICE наподобие Asp 29 активизирует прокаспазу - 8 в каспазу, что в последующем запускает каспа-зы апоптотических реакций.

Для Salmonella typhimurium и E. coli (EPEC) показано наличие аналогичного механизма индукции апоптоза. При этом сальмонеллы транспортируют в клетку посредством системы секреции III типа белок SipB, имеющий высокую гомологию с белком IpaB Sh. flexneri и также связывающийся с каспазой 1, что приводит к апоптозу макрофагов [5,6,11,22].

Иной механизм индукции апоптоза у иерсиний. Иерсинии экспрессируют два белка: YopP (Yersinia enterocolitica) и YopJ (Yersinia pestis pseudotuberculosis), транспортировка в клетки которых осуществляется при участии системы III типа. Активаторным белком апоптоза служит YopP, который взаимодействуют с внутриклеточными IkB-a и IkB-ß белками, продуктами NF-kB генов эукариотических клеток, которые являются основными энханцерами клеток на выживание, в связи с чем нарушается внутриклеточное равновесие белков «усилителей» и «подавителей» клеточной пролиферации. В результате этого белки «подавители» начинают превалировать и клетки вынуждены выбирать путь к самоуничтожению [27]. Вместе с тем белки YopP подавляют в макрофагах и продукцию TNF-a, что приводит к нарушению иммунной регуляции хозяина. Об участии белка YopJ индукции апоптоза свидетельствует тот факт, что мутанты по YopJ белку не вызывали апоптоз макрофагов и характеризовались сниженной вирулентностью по сравнению с диким типом

[19].

Pseudomonas aeruginosa использует другой механизм запуска клеточной гибели. Показано, что при инфекции эпителиальных в условиях in vitro и in vivo P.aeroginosa активирует эндогенную Fas лиганд-рецепторную систему. Активация зависит от наличия системы секреции III типа, так как установлено, что при подавлении функции этой системы бактерии не индуцировали апоптоз эпителиальных клеток. Взаимодействие Fas - рецептора с лигандом приводит к активации каспаз - 3 и 8, выходу цитохрома С из митохондрий и развитию апоптоза [8,9].

Имеющиеся к настоящему времени данные позволяют говорить о двух разных группах механизмов, выявленных у бактерий и направленных на подавление апоптоза клеток хозяина:

- непрямое действие бактерий либо их отдельных компонентов, направленное на увеличение резистентности к апоптозным факторам;

SG

- прямое воздействие на апоптозные пути, выявленное у облигатных внутриклеточных паразитов.

Реализация различных механизмов определяется, во-первых, характером взаимодействия между бактериями и эукариотической клеткой, т.е. принадлежностью патогенов к внеклеточным, факультативным или облигатным паразитам; во-вторых, принципиальным различием прямого и непрямого действия бактерий на сигнальные пути, приводящие к апоптозу [14]. Так, механизмы непрямого воздействия в основном связаны с процессами дифференциации, клеточной пролиферации, изменением экспрессии цитокинов, адгезивных молекул, увеличением резистентности к апоптозным сигналам.

Бактериальные клетки либо их отдельные компоненты, ЛПС, липотейхоевые кислоты, бактериальная ДНК, пептидогликан, распознаются эукариотической клеткой благодаря наличию рецепторов, например рецепторов семейства Toll-like (TLR), активация которых приводит к запуску комплекса клеточных от-

ветов: активации транскрипционного фактора NF - kB, синтезу белков с антиапоптозной активностью, таких как белки семейства IAP ( Inhibitor of Apoptosis), Bcl-x и др. Так, NF -kB индуцирует экспрессию гена, кодирующего белок с-FLIP (caspase 8 homologue FLICE -inhibitory protein), продукт которого является ингибитором процесса активации каспазы 8, прерывая тем самым сигнальный путь апоптоза [7,15,26].

Как показывают результаты многолетних исследований, бактерии семейства

Enterobacteriaceae могут управлять гибелью клеток хозяина: активируют программу клеточной гибели или подавляют апоптоз, что является необходимым этапом вызванного ими инфекционного процесса. Однако остается не понятным вопрос: зачем патогену использовать апоптоз или его ингибирование на начальных этапах взаимодействия патогена с клеткой хозяина? Наконец, каким образом апоптоз влияет на развитие инфекции? Приблизить решение данного вопроса позволят дальнейшие исследования.

Сведения об авторах статьи

З.Г. Габидуллин, д.м.н. профессор, зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии, заслуженный деятель науки РБ, РФ, раб. тел. (347) 273-57-5G

A.А. Ахтариева, к.м.н. доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 25G-G1-66, e-mail: microkam@. mail.ru

М.М. Туйгунов, д.м.н. профессор микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 25G-5S-62 Р.С. Суфияров, гл. врач Калтасинского, раб. тел. (347) р-на 234-47-S2

B.Г. Туйгунова, аспирант микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 212-8Ъ-88 P.P. Суфияров, студент ГОУ ВПО БГМУ Росздрава, раб. тел. (347) 34 -47-82

Ю.З. Габидуллин, докторант микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 235-37-G7 Г.А. Идиатуллина, аспирант микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 272-83-88 В.М.Изикаев, заочный аспирант микробиологии, вирусологии и иммунологии, раб. тел. (347) 272-83-88

ЛИТЕРАТУРА

1. Жеребцова, Н.Ю. с соавт. Генетические маркеры патогенности условно-патогенных энтеробактерий, выделенных у детей и подростков при острых кишечных инфекциях. / Н.Ю. Жеребцова, А.Х. Баймиев, Д.А. Валишин, А.Р. Мавзютов // Ж. микробиол. - 2007. - №4. - С.65-69.

2. Baudas B. Effect of a chronic nail - biting habit on the oral carriage of Enterobacteriaceae. / B. Baudas, H. Uslu, I. Yavuz, I. Ceylan, I.M. Dagsuyu // Oral Microbial. Imunol. - Vol. 22, №1. - P.1-4.

3. Giron J.A., Yho A.S., Schoolnik G.K./ Characterization of fimbria produced by enteropathogenic Eschirichia coli // J. Bacteriol.-1993.- Vol.175.-p.7391-403. *220*

4. Gusman-Verduzco, L.M. et al. Recification of two Escherichia coli heat-stable enterotoxin allele sequences and lack of biological effect of changing the carboxyterminal tyrosine to histidine. / L.M. Gusman-Verduzco, Y.M. Kupersztoch // Infect. Immun. - 1989. - Vol.57. - P.645-648.

5. Hajishengallis G. et al. The type II heat - labile enterotoxins LT - IIa and LT - IIb and their respective B pentamers differentially induce and regulate cytocine production in human monocytice-cells. / G. Hajishengallis, R.I. Tapping, M.N. Martin, H. Nawar, E.A. Lyle, M.W. Russell, T.D. Connell

6. Hajishengallis G. et al. Toll-like 2 mediates celluler activation by the B subunits of type II heat -labile enterotoxins. / G. Hajishengallis, H. Nawar, R.I. Tapping, M.W. Russell, T.D. Connell // Infec. Immunol. - 2004. - Vol. 72, №11. - P.6351-6358.

7. Hauser A.R., Engel J.N. / Hauser A.R. Pseudomonas aeruginosa induced type -III-secretion mediated apoptosis of macrophages and epithelial cells // Infect. Immun. -1999. -Vol.67. -P.5530-

37.*330*

8. Hedlund M., Svensson M., Nilson A., et al. / Role of the ceramide signalling pathway in cytokine responses to P fimbriated Escherichia coli / // J. Exp. Med. -1996. -Vol.183. -P.1037-44.*31*

9. Hedlund, M. et al. Sphingomyelin, glycosphingolipids and ceramide signalling in cells exposed to P fimbriated Escherichia coli. / M. Hedlund, A. Nilsson, R. D. Duan, C. Svanborg // Mol. Microbiol. -1998. -Vol.29. -P. 1297-1306.*32*

10.Hirayama, T. et al. / Glycoprotein receptors for a heat-stable enterotoxin "STh" produced by enterotoxigenic Escherichia coli. / T. Hirayama, A. Wada , N. Ywata // Infect. Immun. - 1992. - Vol.60. -P.4213-4220.

11.Huang B.H., DuPont Herbert L., Jiang Zhi-Dong et al. / Huang B.H. Interleukin - 8 respons in an Intestinal HCT-8 Cell Line Infected with Enteroaggregative and Enterotoxigenic Escherichia coli. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2004. -Vol.11, №3. - P.548-551.

12.Klose, K.E. The suckling mouse model of cholera / K.E. Klose // Trends Microbiol. - 2000. - Vol.8.

- P.189-191.

13.Liang, S. et al. Gangliozide GD1 is an essential coreceptor for toll - like receptor 2 signaling in response to the B subunit of type II B enterotoxin. // S. Liang, M. Wang, R.I. Tapping, V. Stepensky,

H.F. Nawar, M. Triantafilou, K. Triantafilou, T.D. Connell, G. Hajishengallis. // J. Biol. Chem. - 2007. [Epub. Ahead of print.

14.Lockman H.,Kaper J.B./Lockman H.Nucleotide sequence analysis of the A2 and B subunits of the Vibrio cholerae enterotoxin//J.Biol.Chem .-1983.-Vol.258.-P.13722-6.*250*

15.Luo G., Niesel W., Shaban R.A. et al. / Tumor necrosis factor alpha binding to bacteria: evidence for a high-affinity receptor and alteration of bacterial virulence properties // Infect. Immun. -1993. -Vol.61. -P.830-35.* 194*

16.Mahmood A., Karamat K.A., Butt T. Neonatal sepsis high antibiotic resistance of the bacterial par-hogens in neonatal intensive care unit in Karachi.// J. Pak. Med. Assoc. -2002, 8. - P.348-350.53

17.Malaviya R., Ross E.A., Jakschik B.A. et al. / Mast cell degranulation induced by type 1 fimbriated Escherichia coli in mice // J.Clin. Invest. -1994. -Vol.93. -P.1645-53.* 199*

18.Milevsky S.A. Endophthalmitis caused by Enterobacter cloacae. /S.A. Milevsky, C.P. Anderson //Ann Ophthal.-1993.-Vol.25, №8. - P.309-311.

19.Nashar T.O., Williams N.A., Hirst T.R. / Nashar T.O. Cross-linking of cell surface ganglioside GM1 induces the selective apoptosis of mature CD8+ T lymphocytes // Int. Immunol. -1996. -Vol.8. -P.731-6.*324*

20.Nelson K.L., Brodsky R.A., Buckley J.T. / Nelson K.L. Channels formed by subnanomolar concentration of the toxin aero-lysin trigger apoptosis of T lymphomas // Cell. Microbiol. -1999. -Vol.1. -P.69-74.*85*

21.Nicoletti G., Schito G., Fadda G., Boros S. Bacterial isolates from severe infections and their antibiotic susceptibility patterns in Italy: a nationwide study in the hospital setting.// J. Chemother.- 2006,

6.-P.589-602. 44

22.O'Brien A.D., Kaper J.B. / O'Brien A.D. Shiga toxin-producing Escherichia coli: yesterday, today, and tomorrow // Escherichia coli 0157:H7 and other Shiga toxin-producing E. coli strains / Eds. J.B. Kaper, A.D. O'Brien. - Washington: Am. Soc. Microbiol, 1998. -P. 1-11.* 104*

23.Paraje, M.G. Pore formation, polymerization, hemolytic and leukotoxic effects of a new Enterobacter cloacae toxin neutralized by antiserium. / M.G. Paraje, A. J. Eraso, I. Albesa // Microbiol. Res. -2005. - Vol.160, №2 - P.203-211.

24.Porat R., Clark B.D., Wolf S.M., Dinarello C.A. / IL-1B and Escherichia coli // Scince. -1992 -Vol.258. -P.1562-3.*192*

25.Sato, T. et al. FAP-1: a protein tyrosine phosphotase that associates with Fas. / T. Sato, S. Erie, S. Kitada, J. C. Reed // Science. -1995. -Vol.268. -P.411-5.*84*

26.Schmidt, G. et al. / Gin-63 of Rho is deamidated by Escherichia coli cyto-toxic necrotizing factor-

I. / G. Schmidt, P. Sehr, M. Wilm // Nature. -1997. - Vol.387. - P.725-972.

27.Schmidt, H. et al. Pathogenicity islands in bacterial pathogenesis. /H. Schmidt., M. Hensel. // Clin. Microboil, Rev. - 2004. - Vol.17, №1. -P.14-56. Schulte, R. et al. Yersinia enterocolitica - unduced interleukin - 8 secretion by human intestinal epithelial cells dependens on cell differentiation. / R. Schulte, I.B. Autenrieth // Infect. Immun. - 1998. - Vol.66, №3. - P.1216-1224. Sears, C.L. et al. Enteric bacterial toxins: mechanisms of action and linkage to interstinal secretion / C.L. Sears, J.B. Kaper // Microbiol. Rev. - 1996. - Vol.60. - P.167-215.

28.Sears, C.L. et al. Enteric bacterial toxins: mechanisms of action and linkage to interstinal secretion / C.L. Sears, J.B. Kaper // Microbiol. Rev. - 1996. - Vol.60. - P.167-215.

29.Shutze S. et al. TNF activated NF-kB by phospholipase C-induced ‘acidic’ sphingomyelin breakdown. / S. Shutze, K. Potthoff, T. Machleidt // Cell. -1992. - Vol.71. - P.765-766.

30.Shapiro, J.A. Pattern and control in bacterial colonies. / J.A. Shapiro // Sci. Progr. - 1994. - Vol.76.

- P.399-424.

31.Simi, A et al. A low molecular weight enterotoxic hemolysin from clinical Enterobacter cloacae. /A. Simi, G.V. Carbonell, R.M. Falcon, M.S. V. Gatti, P.P.Joazeiro, A.L.Darini, T.Yano // Can. J. Microbiol. / Rev. can. Microbial.-2003. - Vol.49, №7. - P.479-482.

32.Strasser A., O’Connor L., Dixit V.M. / Strasser A. Apoptosis signaling // Annu. Rev. Biochem. -2000. -Vol.69. -P.217-45.*158*

33.Szeto C.C., Chow V.C., Chow K.M. et al. Enterobacteriaceae peritonitis complicating peritoneal dialysis: a review of 210 consecutive cases.// Kidney Int.- 2006, 7.-P. 1245-1452.64

34.Thankavel K., Madison B. et al. / Localization of Domain in the FimH adhesion of Escherichia coli type 1 fimbriae capable of receptor recognition anduse of domain-specefic antibody to confer protection against experimental urinary tract infection // J. Clin. Invest. -1997. -Vol.100. -P.1123-35.*146*

35.Walev S., Vollmer P., Palmer M. et al. /Poreforming toxins trigger shedding of receptors for inter-leukine-6 and lipopolysacharide //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996. -Vol.93. -P.7882-87.*196*

36.Wenzel R.P., Sahm D.F., Thornsberry C., Draghi D.C., Jones M.E., Karlowsky A. In vitro susceptibilities of gram-negative bacteria isolated from hospitalized patients in four European countries, Canada, and the United States in 2000-2001 to expanded-spectrum cephalosporins and comparator antimicrobials: implications for therapy. //Antimicrob. Agents Chemother.- 2003, 47.-P.3089-3098. 27

37.Wilson M., Seymour R., Henderson B. /Wilson M. Bacterial perturbation of cytokine networks //Infect. Immun. -1998. -Vol.66. -P.2401- 09.*178*

38.Zou H., Li Y., Liu X., Wang X. /An Apaf-1 cytochrome multimeric complex is a functional apop-tosome that activates procaspase - 9 //J. Biol. Chem. -1999. -Vol.274. -P.1154-1156.

УДК 616

© П.И. Миронов, 2009

П.И. Миронов

ЭТИЧЕСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ: ХЕЛЬСИНСКАЯ ДЕКЛАРАЦИЯ-2008

ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа

В статье обсуждаются основные этические принципы проведения биомедицинских исследований в сопоставлении с эволюцией Хельсинской декларацией Всемирной медицинской ассоциации

Ключевые слова: клинические испытания, этические принципы, Хельсинская деларация.

P.I. Mironov

ETHICAL EXPERTISE OF CLINICAL INVESTIGATIONS:

HELSINRY DECLARATION-2008

Main ethical principles of earring out biomedical investigation in comparision with evolution of the Helsinki declaration of the World Medical Association were discussed in the article.

Key words: clinical trials, ethical principles, Helsinki declaration

Необходимость клинических исследований не вызывает сомнения, но при их планировании и реализации необходимо разрешить две, зачастую, плохо совместимые задачи: получение обоснованных доказательств эффективности медицинского вмешательства и отсутствие риска для участников эксперимента. Для клинициста однозначно и четко регламентирует взаимоотношения пациента, исследователя и лечащего врача, при прове-

дении медицинского исследования с участием людей, Хельсинская декларация всемирной медицинской ассоциации (WMA). Цель данной публикации ознакомление врачей с содержанием нового варианта декларации, принятого 59-й Генеральной ассамблеей WMA в Сеуле в октябре 2008 года.

В течение длительного времени этот аспект биомедицинской деятельности регулировался только моральными установками кон-