CC BY
11
5. Резанов А.Г. Кормовое поведение: метод цифрового кодирования и анализ базы данных. - М.: Издат-школа, 2000. - 223 с.
6. Формозов А.Н. Проблемы экологии и географии животных. - М.: Наука, 1981. - 351 с.
7. Хлебосолов Е.И. Трофические отношения и социальная организация у птиц. - Владивосток, ДВО АН СССР, 1990. - 124 с.
8. Чернов Ю.И. Эволюционный процесс и историческое развитие сообществ // Фауногенез и филогенез. - М.: Наука, 1984. - С.5-23.
развитие коллагеновых волокон в рубце почки
к»
после частичной нефрэктомии при использовании в качестве шовного материала кетгут и аллоплант
Сидельников Александр Игоревич
Аспирант, Ставропольский государственный аграрный университет,
г. Ставрополь
Квочко Андрей Николаевич
Доктор биологических наук, профессор, Ставропольский государственный аграрный университет, г. Ставропол
Шаламова Екатерина Васильевна
Кандидат ветеринарных наук, заведующая ветеринарной клиникой, ветеринарная клиника «Колибри», г. Ставрополь АННОТАЦИЯ
В статье представлено сравнение развития коллагеновых волокон в рубце почки кроликов после частичной нефрэктомии при ушивании ее хирургической раны нитями кетгута и аллопланта. Проведено экспериментальное исследование на лабораторных животных. Установлено, что к шестидесятым суткам толщина коллагеновых волокон в рубце почек ушитых кетгутом была 142.40±9.44 мкм, а аллоплантом - 69.48±2.18 мкм. Гистологическим методом доказано, что при использовании аллопланта в качестве шовного материала обеспечивается регенерация почечной паренхимы и ее фиброзной оболочки без явлений фиброза, некроза и воспаления, способствует восстановлению физиологической целостности почки и сохранению ее функции. Данный факт обеспечивает физиологическую фиксацию почки с сохранением ее функции.
ABSTRACT
The article presents a comparison of the development of collagen fibers in the scar of the kidney of rabbits after partial nephrectomy when suturing surgical wounds with brands of catgut and Alloplant. Experimental research on laboratory animals. It was found that by the sixtieth day thickness of the collagen fibers in the scar of the kidney was sutured with catgut was 142.40±9.44 ^m, and the Alloplant - 69.48±2.18 ^m. Hiflologically proven, that the use of Alloplant as suture material is provided by regeneration of the renal parenchyma and fibrous membrane without signs of fibrosis, necrosis and inflammation, helps to reflore the physiological integrity of the kidneys and preserve its function. This fact provides physiological fixation of the kidney with preservation of its function.
Ключевые слова: кролики, почки, коллагеновые волокна, аллоплант, кетгут.
Keywords: rabbits, kidney, collagen fibers, Alloplant, catgut.
Введение
Разработка технологий адекватного заживления раны почки и восстановления ее целостности относятся к одной из сложных проблем регенеративной хирургии и урологии [4, 9, 7]. До настоящего времени не разработаны эффективные методы оптимизации заживления ран почки (послеоперационной, травматической и т.д.) [2, 4, 8, 9], восстановления ее паренхимы для обеспечения анатомической целостности почки и достижения гемостаза раневой поверхности [2, 3, 7, 8].
Первые работы по регенерации почки принадлежат Мааs Н. (1978) и Tillmans Н. (1979), утверждавшим, что заживление почки происходит рубцом [4, 9]. В последующих работах целый ряд авторов доказали способность почки к регенерации, вплоть до полного восстановления ее функций (работы Тюфье, Тильи, Вольфа, Волощенко А. А., Подвы-соцкого В. В., Виноградова В. В., Захарьевской М. А. и др.) [10].
Известные в арсенале хирурга способы органосохраняю-щих операций при травматических разрывах почек не всегда эффективны в связи с тем, что паренхима почки рыхлая
и чрезвычайно непрочная, а ее капсула очень тонкая. В силу указанных причин во время ушивания раны традиционным способом наблюдается прорезывание швов и может возникнуть вторичное кровотечение [2, 4], к тому же трудно достигается восстановление целостности поврежденного органа [3, 6, 7, 9].
Наиболее полно подобным требованиям отвечают специальные виды биоматериалов Аллоплант, разработанных под руководством профессора Э. Р. Мулдашева (1994) [5, 6, 8, 9].
Целью работы является изучение в отдаленные сроки развития коллагеновых волокон в рубце почки с применением двух шовных материалов - аллоплант и кетгут.
Материал и методика
Объектом исследования служили самцы кроликов породы шиншилла в возрасте 6-8 месяцев и массой тела 3-4 кг.
В эксперименте было использовано 36 кроликов, разделенных на 2 группы по 18 животных. Проводили частичную нефрэктомию с ушиванием в первой опытной группе кетгутом (HELM, Германия), во второй - аллоплантом (ФГУ «Всероссийский центр глазной и пластической хирургии Федерального агентства по здравоохранению и социально-
му развитию», г. Уфа) и отбирали пробы для гистологического исследования.
Для изучения микроморфометрических показателей проводили эвтаназию кроликов в соответствии с Директивой 2010/63/EU ЕВРОПЕЙСКОГО ПАРЛАМЕНТА И СОВЕТА ЕВРОПЕЙСКОГО СОЮЗА по охране животных, используемых в научных целях, и проводили отбор левой почки для гистологического исследования.
Материал, взятый для гистологического исследования, фиксировали в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина, проводили через спирты возрастающей крепости и ксилол, а затем заливали в гистологическую среду «Гистомикс» с использованием гистологического процессора замкнутого типа Tissue-Tek VIP™ 5 Jr. производства Sakura (Япония).
Гистологическое исследование было направлено на оценку коллагеновых волокон. Для этого срезы окрашивали трихромом по Массону.
С каждого препарата выполняли цифровые снимки (в формате .jpg, размером 3136*2352 пикселей в палитре 24
При использовании кетгута в качестве шовного материала средняя толщина коллагеновых волокон с третьих по шестые сутки достоверно (р<0.05) не изменяется. На двенадцатые сутки отмечено достоверное (р<0.05) увеличение данного параметра на 49.13 %, по сравнению с шестыми сутками. По сравнению с двенадцатыми, к пятнадцатым
бит) в области раневых дефектов при увеличении х40, х100, х200, х400, х1000.
Морфометрические исследования проводили с использованием программы VideoTesTMa^er 4.0 для Windows XP (АОЗТ «ИСТА», Санкт-Петербург) на IBM-совместимом компьютере согласно рекомендациям Г. Г. Автандилова [1].
Полученные материалы исследований анализировали, а статистическую обработку числовых данных проводили с помощью однофакторного дисперсионного анализа и множественного сравнения Ньюмена-Кейлса в программе Primer of Bio&ati&ics 4.03 для Windows. Достоверными считали различия при р<0.05.
Результаты исследований
При изучении динамики развития коллагеновых волокон в ране почки кроликов (рисунок 1.), установлено, что со сроком проведения операции, а также между шовными материалами (кетгут и аллоплант) одного срока, средние значения данных имеют ряд достоверных (р<0.05) различий (таблица 1).
суткам нами установлено достоверное (р<0.05) повышение средней толщины коллагеновых волокон на 38.50 %. На восемнадцатые сутки, по сравнению с пятнадцатыми, достоверных (р<0.05) отличий по данному параметру выявлено не было. К шестидесятым суткам нами отмечено достоверное (р<0.05) повышение средней толщины коллагеновых
Рисунок 1. Коллагеновые волокона в зоне повреждения тканей почки после нефрэктомии при использовании в качестве шовного материала кетгут на третьи сутки, окраска трихромом по Массону, х100.
Таблица 1
Толщина коллагеновых волокон в зоне повреждения тканей почки после нефрэктомии при использовании в качестве
шовного материала кетгут и аллоплант, мкм
Сроки исследования Кетгут, M±m(n=30) Аллоплант, M±m(n=30)
3 сутки 34.20±2.04 19.07±0.83#
6 сутки 37.98±1.89 32.38±2.48*
12 сутки 74.66±3.68* 44.61±2.05#
15 сутки 121.40±3.68* 51.40±1.90#
18 сутки 123.70±3.53 55.85±2.73#
60 сутки 142.40±9.44* 69.48±2.18*#
Примечание: статистическая значимость различий с более ранним сроком исследования: * - р<0.05; между шовными материалами одного срока исследования: # - р<0.05.
волокон на 13.13 % при сопоставлении с восемнадцатыми сутками.
В почках ушитых аллоплантом достоверное (р<0.05) увеличение средней толщины коллагеновых волокон отмечено лишь на шестые и шестидесятые сутки после проведения частичной нефрэктомии на 41.11 % и 19.62 % соответственно по сравнению с более ранним сроком.
При сопоставлении средней толщины коллагеновых волокон в зоне рубца при использовании кетгута и аллопланта отмечено, что в почках ушитых аллоплантом на третьи сутки значения данного параметра достоверно (р<0.05) ниже на 44.24 %, чем при использовании кетгута. На шестые сутки
достоверных (р<0.05) отличий не выявлено. На двенадцатые сутки средняя толщина коллагеновых волокон в почках с применением аллопланта достоверно (р<0.05) меньше на 40.25 %, по сравнению с кетгутом. На пятнадцатые сутки значения этого параметра достоверно (р<0.05) меньше на 57.66 % в почках, где применяли аллоплант. Средняя толщина коллагеновых волокон на восемнадцатые сутки в почках ушитых аллоплантом, по сравнению с кетгутом, достоверно (р<0.05) меньше на 54.85 %. На шестидесятые сутки (рисунок 2) в почках с применением нитей аллопланта данный параметр меньше на 51.20 %, по сравнению с таковым, где применяли нити кетгута.
Рисунок 2. Коллагеновые волокона в зоне повреждения тканей почки после нефрэктомии при использовании в качестве шовного материала аллоплант на шестидесятые сутки, окраска трихромом по Массону, х100.
Минимальные значения средней толщины коллагеновых волокон были выявлены в почках ушитых аллоплантом на третьи сутки (19.07±0.83 мкм), а максимальные - в почках ушитых кетгутом на шестидесятые сутки (142.40±9.44 мкм).
Таким образом, ушивание почечной паренхимы биоматериалом Аллоплант в эксперименте имеет следующие преимущества перед кетгутом:
1. Заживление хирургической раны почечной паренхимы происходит без явлений фиброза;
2. Заживление не сопровождается обширным некрозом и воспалением паренхимы почки.
3. Восстанавливается анатомическая целостность почки как органа, включая паренхиму и соединительнотканную оболочку. Данный факт обеспечивает физиологическую фиксацию почки с сохранением ее функции.
Выводы
Применение нитей аллопланта для ушивания операционной раны после частичной нефрэктомии обеспечивает регенерацию почечной паренхимы и ее фиброзной оболочки без явлений фиброза, некроза и воспаления, способствует восстановлению физиологической целостности почки и сохранению ее функции. Подобные результаты в своих исследованиях получал В. Н. Павлов с соавторами [10].
Список литературы:
1. Автандилов Г. Г. Компьютерная микротелефотоме-трия в диагностической гистоцитопатологии / Г. Г. Автанди-лов. М.: РМАПО, 2005. 256 с.
2. Казихинуров А. А. Методы гемостаза при операциях на почке с применением аллгенных трансплантантов: автореф. дис.... канд. мед. наук / А. А. Казихинуров. Уфа, 2003. 43 с.
3. Коваленко П. П. Основы трансплантологии / П. П. Коваленко. Ростов-на-Дону: Изд. Ростовского университета, 1975. 180 с.
4. Котельников В. П. Раны и их лечение / В. П. Котельников. М.: Знание, 1991. 64 с.
5. Мулдашев Э. Р. Теоретические и прикладные аспекты создания аллотрансплантантов серии «Аллоплант» для пластической хирургии лица: автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Э. Р. Мулдашев. С-Пб., 1994. 40 с.
6. Муслимов С. А. Морфологические аспекты регенеративной хирургии / С. А. Муслимов. Уфа: Изд-во «Здравоохранение Башкортостана», 2000. 168 с.
7. Нигматуллин Р. Т. Очерки трансплантации тканей: курс лекций для врачей / Р. Т. Нигматуллин. Уфа, 2003. 160 с.
8. Сафиуллин Р. И. Аллогенные трансплантаты в урологии: автореф. дис. ... д-ра мед. наук / Р. И.Сафиуллин. Саратов, 2009. 40 с.
9. Способ хирургического лечения раны почки: Патент РФ № 2354305 ; опубликовано 10.05.2009, Бюл. №13.
10. Хирургическое лечение ран почки с применением аллотрансплантатов / В. Н. Павлов [и др.] // Медицинский вестник Башкортостана. 2014. Том 9. № 5. С. 149-152.
