CC BY
28
РАЗВИТИЕ ДИСПЕРСНОй КЛЕТОЧНОй СИСТЕМы
эпителиальной выстилки шейки матки в пренатальном
ОНТОГЕНЕЗЕ ЧЕЛОВЕКА
М.Ю. Жеглова, РК. Данилов
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Москва, Россия
Development of dispersed cell system of cervical epithelium in human prenatal ontogenesis
M.Y. Zheglova, R.K. Danilov
I.I. MechnikovNorth-Western State Medical University, Moscow, Russia
Гистологическая характеристика эпителиальной выстилки шейки матки является важнейшим критерием оценки ее реактивных изменений . Цель работы: дать мор-фофункциональную характеристику эпителиоцитов шейки матки в пренатальном онтогенезе человека . Изучены 50 эмбрионов и предплодов в возрасте с 4 по 12 нед . развития и 64 плода в возрасте с 13 по 30 недели развития . Анализ произведен с помощью гистологических, гистохимических, морфометрических, цитоспектрофотометриче-ских и статистических методов. Показано, что развитие парамезонефрального протока происходит с участием эпителия целомического типа, эпителия мезонефрально-го протока и малодифференцированных клеток в составе урогенитальной бластемы . В конце 12 и в начале 13 нед . возникает особая область, где обнаруживается тесное взаимодействие эпителиальных выстилок объединенных па-рамезонефральных протоков, мезонефральных протоков и дорсальной стенки мочеполового пространства . С 13 по 20 нед развития формируется связь маточного канала с внешней средой В этом принимает участие инвагинация эпителиальной выстилки мочеполового синуса в сторону объединенных парамезонефральных протоков и формирование полового тяжа . С 25 нед . развития формируется стык двух видов эпителиев: слизистой оболочки влагалища и слизистой оболочки шейки матки В базальной части цервикального эпителия обнаруживаются единичные клетки, которые согласно проведенному исследованию следует отнести к производным эпителиальной выстилки мочеполового синуса . Эти клетки сохраняют свою детерминацию и по своей локализации относятся к дисперсной клеточной системе слизистой оболочки шейки матки
Ключевые слова: дисперсная клеточная система эпителиальной выстилки шейки матки, производные мочеполового пространства (синуса), эмбриональный гистогенез органов женского полового тракта
A histological characteristic of the epithelial lining of the cervix is the most important criterion for evaluating its reactive changes . The aim of the research is to give the morphofunctional characteristics of the epithelial cells (epitheliocytes) of the cervix in human prenatal ontogenesis . 50 embryos and prefetuses from 4 to 12 weeks of fetal development, and 64 fetuses from 13 to 30 weeks of gestation have been studied Analysis was performed by using the histochemical, morphometric, cytospectrophotometric and statistical methods . Paramesonephric duct development occurs involving the coelomic epithelium, mesonephric duct epithelium and undifferentiated cells in the part of the urogenital blastema . in the late 12th and early 13th week of fetal development there is a particular area where a close interaction of the epithelial lining of the combined paramesonephric and mesonephric ducts and the dorsal wall of the urogenital area is found The connection of the uterine channel with the external environment is formed from 13th to 20th week of development invagination of the epithelial lining of the urogenital sinus towards the united paramesonephric ducts and the formation of a genital cord take part in this process . The junction of two kinds of epithelia: the vaginal mucosa and cervical mucosa is formed since 25th weeks of gestation in the basal part of the cervical epithelium the individual cells are detected According to the results of the research these cells should be classified as a derivative of the epithelial lining of the urogenital sinus They retain their determination and due to the character of their localization may be referred to the dispersed cellular system of the mucous membrane of the cervix
Keywords: disperse cellular system of the epithelial lining of the cervix, derivatives of the epithelial lining of the urogenital sinus, embryonic histogenesis of the female genital tract
Введение
В области наружного зева многослойный плоский эпителий и цилиндрический эпителий в так называемой переходной зоне соприкасаются между собой . Согласно определению ВОЗ [1], эта переходная зона называется зоной превращения резервных клеток, которые располагаются под цилиндрическим эпителием . «Резервные» клетки могут дифференцироваться как в цилиндрические эпителиоциты, так и в многослойный плоский эпителий кожи . Такая трактовка дивергентной дифференцировки клеток в разные генетические виды эпителия входит в некоторое противоречие с учением о тканевой детерминации [2]. При контакте с кислой средой влагалища цилиндрический эпителий постепенно замещается многослойным плоским, причем базальный слой клеток образуется из субэпителиально расположенных резервных клеток [3, 4]. Этот процесс замещения одного эпителия другим, происходящий в норме, в
e-mail: 6767150@rambler . ru
научной литературе получил название плоскоклеточная метаплазия [1, 5].
В клинической практике наблюдаются случаи, когда невозможно однозначно оценить данные гистологического и цитологического исследований при различных заболеваниях шейки матки . Связано это с рядом нерешенных вопросов, к которым следует отнести неоднозначное понимание термина «метаплазия», недостаточное знание об источниках происхождения резервных клеток и возможности их дифференцировки как в цилиндрический эпителий так и в многослойных плоский эпителий кожи [4, 6]. Обращает на себя внимание отсутствие комплексной характеристики эмбрионального гистогенеза эпителиальных тканей выстилки мочеполового тракта [7-9].
Цель работы: дать морфофункциональную характеристику эпителиоцитов шейки матки в прена-тальном онтогенезе человека
Материал и методы
Изучили 50 эмбрионов и предплодов в возрасте с 4 по 12 нед . развития и 64 плода в возрасте с 13 по 30 нед . развития . На все виды исследования получили разрешения этической комиссии СЗГМУ имени И . И . Мечникова (Санкт-Петербург, протокол №3 от 07 . 03 . 2013) . В ходе планирования научной работы руководствовались приложением к приказу Минздравмедпрома РФ № 82 от 29 . 04. 1994 г . и приложением № 4 к приказу МЗ РФ № 318 от 04 . 12 . 1992 г . Работали с Инструкцией по патоло-гоанатомическому исследованию, утвержденному III съездом Российского общества детских патологов [10]. При получении материала соблюдали этические нормы в соответствии с Хельсинкской декларацией (1964) с последующими дополнениями и изменениями в этом документе Соблюдали принципы, регламентирующие научные исследования с вовлечением человека (CIOMS; International ethical guidelines for biomedical research involving human subject) .
Фиксацию материала и приготовление препаратов осуществляли согласно общепринятым правилам Изготовляли серии срезов в сагиттальном и поперечном направлениях . Толщина среза составляла 5—7 мкм . Окраску препаратов производили общегистологическими методами: гематоксилином Коуля и эозином; кармином; для выявления ДНК — по Фельгену в модификации де Томази . Для оценки процессов пролиферации использован иммуногисто-химический маркер Ki67 (клон MIP-1) . Статистическую обработку параметров производили согласно рекомендациям Г . Г . Автандилова (2006) с оценкой среднего арифметического, дисперсии, среднего квадратического отклонения, стандартной ошибки, коэффициента вариации и относительной ошибки
Результаты
Развитие парамезонефрального протока (мюллеров каналец) происходит с участием эпителия целомического типа, эпителия мезонефрального протока (вольфов каналец) и малодифференциро-ванных клеток в составе урогенитальной бластемы На 4—5 нед . развития парамезонефральный проток обнаруживается непосредственно под мезотелием первичной почки. Эпителиоциты имеют столбчатую форму; ядра клеток — вытянутую форму . Последние находятся на разных уровнях и длинной осью расположены перпендикулярно базальной мембране . Это характеризует структуру эпителия как многорядного Парамезонефральный и мезонефральный протоки растут параллельно друг другу в кранио-каудальном направлении через всю толщу мезонефроса с 5 по 7 нед . развития . При этом мезонефральный проток располагается медиально и несколько дорсально, а парамезонефральный проток — латерально . По мере дальнейшего роста протоков происходит изменение их пространственной локализации На 8 нед эмбриогенеза протоки обнаруживаются между зачатками прямой кишки и мочеполового пространства (мочеполового синуса) При этом мезонефральные протоки располагаются латерально, а два параме-зонефральных протока сближаются и располагаются медиально по средней линии тела эмбриона, в «мезенхимальном блоке» . С 8 по 9 нед . развития парамезонефральные протоки объединяются Фор-
мирование общей структуры происходит путем сближения медиальных стенок парамезонефральных протоков . При этом между протоками сохраняется перегородка . В эпителиоцитах медиальных стенок обнаруживаются единичные фигуры митоза . К концу 10 — началу 11 нед . развития происходит постепенный рост объединённых парамезонефральных протоков к стенке мочеполового пространства В конце 12 и в начале 13 нед . развития возникает особая область, где обнаруживается тесное взаимодействие эпителиальных выстилок объединенных парамезо-нефральных протоков, мезонефральных протоков и дорсальной стенки мочеполового пространства
У плодов человека с 13 по 20 нед . развития мочеполовое пространство обеспечивает морфо-функциональную связь маточного канала с внешней средой В центре мочеполового синуса находится складка, толщиной до 150 мкм, которая разделяет пространство мочевой области от генитальной области Мочеполовое пространство, включая перегородку, выстлано многослойным эпителием . Базаль-ные промежуточные и поверхностные эпителиоциты имеют округлую или овальную формы (рис . 1).
Изменение средней площади эпителиоцитов МПП
Базальные эпителиоциты Парабазальные эпителиоциты Поверхностные эпителиоциты
Рис. 1. Средняя площадь эпителиоцитов мочеполового пространства у плодов человека 13—25 нед. развития
Мочеполовое пространство в дорсо-краниаль-ном направлении формирует инвагинацию эпителия в сторону объединенных парамезонефральных протоков . Инвагинация эпителия имеет треугольную форму . Вершина треугольника продолжается в краниальном направлении в виде полового тяжа Последний имеет разную протяженность в зависимости от срока гестации И первоначально с 13 по 18 нед . не имеет четкого просвета . Эпителиальная выстилка полового тяжа характеризуется выраженной гетероморфией, которая имеет свои особенности на всем протяжении . Так, в базальном слое обнаруживаются клетки как столбчатой, так и округлой формы; в парабазальном слое, который состоит из
2—3 рядов клеток, обнаруживаются клетки, имеющие округлую или овальную формы . Поверхностный слой клеток представлен клетками, имеющими округлую или вытянутую формы . В разных слоях обнаруживаются ядра клеток, экспрессирующих Ю67 (рис . 2). Периодически на протяжении всего полового тяжа обнаруживаются клетки с пикнотичными ядрами и оптически прозрачной цитоплазмой
Рис. 2. Мочеполовое пространство плода 13—14 нед. развития:
1 — базальный эпителиоцит;
2 — парабазальный эпителиоцит;
3 — поверхностый эпителиоцит. ИГХ-реакция с антителами к ЮВ7. Продукт сеакции коричневого цвета. Докраска ядер — гематоксилин. Ув. хЭ50
В месте появления четкого просвета маточного канала, эпителиальная выстилка представлена следующими видами клеток: базальными клетки округлой и столбчатой формы, парабазальными клетками овальной формы и плоскими эпителиоцитами поверхностного слоя В этой области детектируются Ю67 + . Необходимо отметить, что процессы пролиферации в поверхностных слоях снижают свою интенсивность . Краниальнее, по направлению к маточному каналу в базальном слое клеток преобладают эпителиоциты столбчатой формы, среди последних выявляются признаки двурядности . Промежуточные (парабазальные клетки) имеют овальную форму Поверхностные эпителиоциты исчезают В области формирования тела матки базальный слой клеток состоит преимущественно из клеток, имеющих столбчатую форму с четко выраженной многорядно-стью . Редко встречаются базальные клетки, имеющие округлую форму, промежуточный и поверхностный слои клеток не обнаруживаются
У плодов с 20 по 30 нед . пренатального онтогенеза обнаруживаются: тело матки, шейка матки, влагалище и связь влагалища с внешней средой Слизистая оболочка тела матки состоит из однослойного цилиндрического эпителия. Эпителиоциты имеют столбчатую форму, тесно прилежат друг к другу Ближе к формирующемуся внутреннему зеву шейки матки, обнаруживаются округлые клетки, расположенные одиночно или попарно Клетки расположены на базальной мембране, под столбчатыми эпителиоцитами Эпителиальная выстилка формирующегося цервикального канала продолжается вглубь формирующихся шейных желез, на дне которых также обнаруживаются клетки округлой формы
В области формирующейся влагалищной части шейки матки (с 25 нед . развития) шеечный эпителий взаимодействует с многослойным плоским не-ороговевающим эпителием кожного типа В области контакта обнаруживаются границы двух эпителиев: базальные и парабазальные эпителиоциты эпителия кожного типа, поверх которых на протяжении до 250 мкм в виде цепочки продолжаются клетки эпителиальной выстилки цервикального канала. Клетки теряют свою чёткую пространственную ориентацию ядер, длинной осью перпендикулярно базальной мембране В области контакта повышается концентрация клеток субэпителиальной локализации (рис 3)
Рис. 3. Базальные эпителиоциты (*) в составе однослойного столбчатого эпителия маточно-вагинального тракта 25-30-недельного плода человека.
Окраска гематоксилином. Ув. хЭ50
Таким образом, с 13 по 20 нед . развития формируется связь маточного канала с внешней средой В этом принимает участие инвагинация эпителиальной выстилки мочеполового синуса в сторону объединенных парамезонефральных протоков и формирование полового тяжа Следует отметить ге-тероморфный состав эпителиальной выстилки полового тяжа . При этом степень гетероморфности клеток постепенно уменьшается в каудо-краниальном направлении С 25 нед развития возникает стык эпителия кожного типа слизистой оболочки влагалища с эпителием слизистой оболочки шейки матки На протяжении всего формирующегося цервикально-го канала в базальной части эпителия обнаруживаются единичные клетки, которые согласно проведенному исследованию следует отнести к производным эпителиальной выстилки мочеполового синуса Эти клетки располагаются редко, поодиночке или попарно на всем протяжении эпителиального пласта шейки матки и на дне ее желез . В клинической практике их относят к «резервным» клеткам шейки матки [1, 3, 5], которые в реактивных условиях могут претерпевать цитодифференцировку с признаками чаще многослойности эпителия [6]. Эти клетки не являются идентичными клеткам кожной эктодермы и клеткам эпителия целомического типа . Они сохраняют свою детерминацию и по характеру своей локализации относятся к дисперсной клеточной системе эпителиальной выстилки шейки матки
ЛИТЕРАТУРА:
1. Комплексная борьба с раком шейки матки: краткое практическое руководство . Швейцария: ВОЗ, 2008 .
2 . Хлопин Н . Г . Руководство по гистологии . Ленинград, 1947 .
3 . Апгар Б . , Броцман Г ., Шпицер М . Клиническая кольпоскопия . В . Н . Прилепской, редактор . М .: Практическая медицина, 2012: 13163 .
4 . Ferris D . G . Anatomy and histology of normal female lower genital tract// In: Modern Colposcopy, Textbook and Atlas . 2nd edn . Dubuque: Kendall Hunt Publishing company 2004: 13-40 .
5 . Титмушш Э ., Адамс К . Шейка матки . Цитологический атлас .
Под ред Н И Кондрикова М : Практическая медицина 2009: 20-79
6 . Нейштадт Э .Л ., Крулевский В . А. Дифференциальная диагностика опухолей шейки матки . Санкт-Петербург, 2012 .
7 . Волкова О . В . , Пекарский М . И . Эмбриогенез и возрастная гистология внутренних органов человека . М .: Медицина, 1976; С . 97-193, С . 300-400 .
8 . Fritsch H ., Hoermann R ., Bitsche M . et al . Development of epithelial and mesenchymal regionalization of the human fetal uterovaginal anlagen . J . Anat . 2013; 222: 462-72 .
9 . Sullak О ., Coasar F . , Malas M .A . et al . Anatomical development of the fetal uterus . Early Hum . Dev . 2007; 83(6): 395-401.
10 . Труды III Съезда Российского общества детских патологов . СПб, 2008
Поступила: 20.01.2015
