CC BY
24
Thus, the genotype of MTHFR gene allele polymorphism Ala222Val is genetic predictor of migraine in the Uzbek population of persons living in the Aral Sea region.
Conclusion. Detection of PCR-diagnostics genotype alleles of MTHFR gene polymorphism on Ala222Val can be used for early diagnosis and differential diagnosis of migraine in Uzbek people.
References
1. Ameline A. V., Ignatov Y. D., Skoromets A. A. Migraine (pathogenesis, clinical features and treatment). St. Petersburg Medical Publishing House, 2001. - 199 p.
2. Vein A. M., Kolosov O. A., Yakovlev N. A., Slusar T. A. Migraine. - M., 1995. - 180 p.
3. Vein A. M., Kolosov O. A. Headache and migraine // Top. Medicine, 1997. - № 2.- with. 13-16.
4. Headache. Proc.: Neurology for general practitioners. Edited A. M. Veyna. 2nd edition. Publishing house «Eidos Media», 2002, p. 18 - 48.
5. Gerhard Laybhohd. Migraine - a disease of the century // Journal of Russian folk medicine, 1996. - № 2, - with. 33-36.
6. Diamond S. Migraine Headache. In: Diamond and Dalessio's The practicing physician's approach to headache. - 6th ed. 1999, p. 46-71.
7. Diener H. C., Limmroth V. Prevention migraine:. Beta-blockers and amine agonists: efficacy. In: Preventive pharmacotherapy of headache disorders. Oxford University Press. 2004, p.59-67.
Development of HPLC methods for the quantitative determination
of thymol in syrup «KALINOL PLUS» 1 2 Suleymanov T. , Balayeva E. (Republic of Azerbaijan)
Разработка ВЭЖХ методики количественного определения тимола
в сиропе «КАЛИНОЛ ПЛЮС»
Сулейманов T. A.1, Балаева Э. З.2 (Азербайджанская Республика)
1Сулейманов Таир Аббасали оглы /Suleymanov Tayir - профессор, заведующий кафедрой; 2Балаева Эмилия Закир кызы /Balayeva Emiliya - докторант кафедры, кафедра фармацевтической химии, Азербайджанский медицинский университет, г. Баку, Азербайджанская Республика
Аннотация: разработка оптимальных условий количественного определения тимола в сиропе «Калинол плюс» была проведена по различным показателям: скорость потока, температура, объем вводимой инъекции, длина волны, колонка неподвижной фазы количества сиропа. В результате проводимых исследований установлено, что скорость потока 1 мл/мин, температура 300C, объем вводимой инъекции 10 мкл, длина волны 274нм, колонка неподвижной фазы «Zorbax SB-C18» и количества сиропа 1мл являются оптимальными.
Abstract: development of optimal conditions of quantitative determination of thymol in syrup «Kalina plus» was carried out for different parameters: flow rate, temperature, volume of injected injection, wavelength, column stationary phase amount of syrup. As a result of the conducted researches it is established that a flow rate of 1 ml/min, temperature 300 C, injection volume of injected 10 ц1, wavelength 274нм, column stationary phase «Zorbax SB-C18» and the amount of syrup 1ml is optimal.
Ключевые слова: сироп «Калинол плюс», тимол, хроматография. Keywords: syrup «Kalinol plus», thymol, chromatography
Сироп «Калинол плюс» (Государственный регистрационный номер: ЛС№15-00336) производства завода «ООО Азерфарм», состоит из экстракта чабреца, сахарного сиропа, калия бромида и 80 %-ного этилового спирта. В медицинской практике используется как муколитическое и отхаркивающее средство при остром и хроническом воспалении дыхательных путей [1]. Основными действующими компонентами сиропа являются экстракт чабреца и калия бромид. В настоящее время с целью осуществления контроля за качеством препарата «Калинол плюс» проводится идентификация и количественное определение только калия бромида, что является не достаточным. Таким образом, есть потребность в разработке современного метода анализа и валидации определения количества тимола в экстракте чабреца, являющегося основным действующим компонентом препарата.
Известен способ количественного определения тимола в этанольных экстрактах лекарственного сырья спектрофотометрически. Недостатком указанного способа является наличие в экстракте растительного сырья сопутствующих веществ, мешающих спектрофотометрическому определению, невозможность определения тимола, минуя стадию осаждения мешающих веществ 10 %-ным раствором ацетата свинца [2].
Известен способ качественного определения тимола с помощью тонкослойной хроматографии. Недостатком указанного способа является невозможность количественного определения тимола, громоздкость и длительность эксперимента [3].
Известны способы определения тимола и карвакрола методом хроматомасс-спектрометрии и газовой хроматографии. Недостатком указанного способа является необходимость большого количества растительного материала, необходимость выделения из растительного материала или их экстрактов эфирного масла методом перегонки с водяным паром, длительность перегонки с водяным паром, длительность анализа, большое количество сопутствующих компонентов эфирного масла и их близкие времена удерживания и вследствие этого трудность идентификации [4]. Как уже отмечалось, действующими нормативными документами трава чабреца стандартизуется только по содержанию экстрактивных веществ, извлекаемых 30 % спиртом [5]. На сайте Минздрава РФ размещен проект фармакопейной статьи на траву чабреца для включения в Государственную фармакопею РФ XII издания. Проект предлагает стандартизацию травы чабреца проводить по содержанию суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид. Методика определения флавоноидов предусматривает часовую экстракцию сырья кипящим 70 % этанолом и проведением цветной реакции с хлоридом алюминия в аликвоте экстракта. Оптическая плотность полученного раствора измеряется при длине волны 395±2 нм. Расчет ведется с использованием удельного показатель поглощения цинарозида с алюминия хлоридом равным 345. Из действующих нормативных документов на препараты чабреца можно отметить ФСП 42-2627-08 «Чабреца экстракт жидкий субстанция» ОАО «Фармстандарт-Томскхимфарм». В данной статье стандартизация препарата осуществляется по содержанию суммы флавоноидов после реакции с хлоридом алюминия. Измерения проводятся длине волны 395 нм с использованием для расчетов стандартного образца лютеолина [6].
В связи с выше изложенным применение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для определения количества отдельных компонентов в растительных препаратах с многокомпонентным составом имеет исключительное значение.
Известно, что в настоящее время на этапах регистрации и перерегистрации лекарственных средств одним из основных требований международного регулирующего органа является осуществление валидации аналитическим методом.
216
Объект и методы. Экспериментальные исследования проводились в UB-детекторной хроматографе HPLC - «Agilent-1100» (США). Колонка неподвижной фазы «Zorbax SB-C18», размеры частиц 5 мкм. Температура колонки 300C, скорость подачи растворителя 1 мл/мин, объем стандартного образца 10 мкл. Время проведения анализа 15 минут.
Подвижная фаза готовится в соответствии с соотношением ацетонитрила к воде 50:50 и дегазируется ультразвуковой водной ванной.
Приготовление исследуемого раствора. 1.0 г сиропа (точная навеска) «Калинол плюс» помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляли 20 мл растворителя и взбалтывали до полного растворения, затем в течение 5 минут полученный раствор выдерживали в ультразвуковой ванне, далее объем раствора доводили до необходимого количества тем же растворителем и размешивали. Полученный раствор центрифугировали в течение 10 минут со скоростью 10000 об/мин.
Приготовление раствора стандартного образца. 50 мг (точная навеска) тимола помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, к нему добавляли 20 мл растворителя, взбалтывали до полного растворения, затем объем раствора доводили до необходимого количества тем же растворителем и размешивали.
Результаты. Разработка оптимальных условий количественного определения тимола в сиропе «Калинол плюс» была проведена по различным показателям: скорость потока, температура, объем вводимой инъекции, длина волны, колонка неподвижной фазы количества сиропа. В результате проводимых исследований установлено, что скорость потока 1 мл/мин, температура 300C, объем вводимой инъекции 10 мкл, длина волны 274нм, колонка неподвижной фазы «Zorbax SB-C18» и количества сиропа 1мл являются оптимальными.
Литература
1. [Электронный ресурс]: Kalinol plus. Режим доступа:Шр // www.pharma.az.
2. Мазулин А. В., Петренко В. В., Калошина Н. А. Способ количественного определения тимола в лекарственном растительном сырье // Патент 2025717, Россия, C15 G01N 21/33.
3. Маркова О. М., Карпенко В. А., Саушкина А. С., Лихота Т. Т. Использование физико-химических методов в анализе лекарственных средств растительного происхождения // Вестник ВГУ. Серия химия, биология, фармация. 2003, № 1, С.99-100.
4. Банаева Ю. А., Покровский Л. М., Ткачев А. В. Исследование химического состава эфирного масла представителей рода Thymus L., произрастающих на Алтае // Химия растительного сырья, 1999, № 3, с. 41-48.
5. Трава чабреца: [фармакоп. ст.] // Государственная Фармакопея СССР. 11- е изд.: в 2 вып. / МЗ СССР. Вып. 2: Лекарственное растительное сырье М.: 1989, С. 338.
6. ФСП 42-2627-08 «Чабреца экстракт жидкий субстанция» ОАО «Фармстандарт-Томскхимфарм» Введ .29.12.2008 .- М., 2008, 14 с.
