CC BY
31
Р - ISSN 2226-7425 Е - ISSN 2412-9437
Журнал научных статей
Здоровье
q^ в XXI веке
'образование
УДК 615.454.23;615.213:54.061;54.062 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2018-20-6-93-97
РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ И АНАЛИЗ СУППОЗИТОРИЕВ С КАРБАМАЗЕПИНОМ Манджиголадзе Т. Ю., Арчинова Т.Ю., Кузнецова Л.С., Кузнецов А.В. Пятигорский медико-фармацевтический институт -филиал ФГБОУ ВО ВолгГму, г. Пятигорск, Российская федерация Аннотация. Целью исследования явилось обоснование оптимального состава, разработки технологии и методик анализа новой лекарственной формы - суппозиториев с кар-бамазепином. В опытах in vitro методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану подобран оптимальный носитель для суппозиториев с карбамазепином. Установлено, что наиболее высокую скорость и степень высвобождения препарата 91,72% обеспечивает композиционная основа ПЭГ 400 и ПЭГ 1500. Разработана технология изготовления суппозиториев методом выливания. Модельная концентрация карбамазепина составила 0,2. Разработаны методики качественного и количественного анализа предлагаемых суппозиториев с использованием спектрофото-метрического метода. Проведена валидационная оценка по критериям: «Линейность», «Правильность», «Прецизионность». Установлено, что предлагаемая методика количественного спектрофотометрического определения карба-мазепина в суппозиториях пригодна для аналитических целей. Ключевые слова: суппозитории, карбамазепин, антикон-вульсант, спектрофотометрический метод, валидационная оценка методики. DEVELOPMENT OF TECHNOLOGY AND THE ANALYSIS OF SUPPOSITORIES WITH CARBAMAZEPINE Mandzhigoladze T.Y., Archinova T.Y., Kuznetsova L.S., Kuznetsov A.V. Рyatigorsk medical pharmaceutical institute of Volgograd state medical university, Pyatigorsk, Russian Federation Annotation. The purpose of the study was to substantiate the optimal composition, development of technology and techniques for the analysis of a new dosage form - suppositories with car-bamazepine. In experiments in vitro, the optimal carrier for suppositories with carbamazepine was selected through the semipermeable membrane by the method of equilibrium dialysis. It is established that the maximum speed and extent of release of carbamazepine of 91,72% is provided with the carrier polyeth-yleneglycol 400 and 1500. The technology of receiving suppositories is developed by a pouring out method. The model concentration of carbamazepine was 0.2. Methods for the qualitative and quantitative analysis of the proposed suppositories using the spectrophotometric method have been developed. A validation assessment was carried out according to the criteria: «Linearity», «Correctness», «Precision». It was found that the proposed technique for quantitative spectrophotometric determination of carbamazepine in suppositories is suitable for analytical purposes. Key words: suppositories, carbamazepine, antikonvulsant, spek-trofotometrichesky method, validation assessment of a technique.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК [1] Евдокимова О.В. Ректальные лекарственные формы //Фармац. обозрение. 2003. №5 (21). С. 53-54. [2] Кисилева Г.С., Тенцова А.И. Приборы и методы оценки фармацевтической доступности лекарственных форм //Фармация. 1993. Т.42. №4. - С. 58-62. [3] Кузнецова Л.С., Лихота Т.Т. Разработка состава, технологии и анализ карандашей медицинских с камфорой //Фундаментальные исследования. 2011. №11-3. С. 522-525. [4] Лежнева Л.П., Хаджиева З.Д., Темирбулатова А.М. Технологический поиск оптимальной композиции геля на основе фитокомплексов крапивы двудомной //Науч. ведомости Белгородского гос. ун-та. Серия: Медицина. Фармация. 2017. Т.37, №5 (254). С. 129-133. REFERENCES [1] Evdokimova O.V. Rectal dosage forms //Pharmac. review. 2003. 5(21). P. 53-54. [2] Kisileva G.S., Tentsova A.I. Devices and methods for assessing the pharmaceutical availability of dosage forms //Pharmacia. 1993. Vol.42, N4. P. 58-62. [3] Kuznetsova L.S., Likhota T.T. Development of structure, technology and the analysis of pencils medical with camphor //Basic researches. 2011. N11-3. P. 522-525. [4] Lezhneva L.P., Hadzhiyeva Z.D., Temirbulatova A.M. Technological search of optimum composition of gel on the basis of nettle phytocomplexes a two-blast furnace //Scientific sheets the Belgorod state. universitetat. Series: Medicine. Pharmacy. 2017. Vol.37, N5 (254). P. 129-133. [5] Mandzhigoladze T.Yu., Archinova T.Yu., Romantsova
5 Манджиголадзе Т.Ю., Арчинова Т.Ю., Романцова Н.А. Детские суппозитории с цетиризина дигидрохлоридом для профилактики и лечения аллергических заболеваний //Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2013. Т.15, №3(6). - С.1860-1863.
[6] Применение карбамазепина при эпилепсии /С.В. Котов, И.Г. Рудакова, А.С. Котов, Ю.А. Белова //Русский _медицинский журнал. 2005. №27. С.1827-1831._
N.A. Children's suppositories with cetirizine dihydrochlo-ride for the prevention and treatment of allergic diseases //Izvestiya Samara Scientific Center, Russian Academy of Sciences. 2013. Vol.15, №3 (6). P.1860-1863. [6] The use of carbamazepine in epilepsy /S.V. Kotov, I.G. Rudakova, A.S. Kotov, Yu.A. Belova //Russian Medical Journal. 2005. N27. P.1827-1831.
Эпилепсия - заболевание головного мозга, характеризующееся приступами, связанными с нарушениями двигательных, чувствительных, вегетативных или мыслительных функций. При этом в период между приступами пациент ничем не отличается от других здоровых людей. Важно отметить, что единичный приступ еще не является эпилепсией. Только при повторных приступах устанавливается диагноз эпилепсии. Из препаратов, наиболее часто используемых для лечения эпилепсии, применяется антиконвульсант карбамазепин. Он относится к производным карбок-самида и используется в качестве противосудорожно-го средства от судорожных припадков и при фокальной психомоторной эпилепсии [6]. На данный момент карбамазепин широко представлен на фармацевтическом рынке под различными торговыми наименованиями в виде таблеток и таблеток ретард. Однако пе-роральное назначение препарата имеет целый ряд недостатков, присущих способу назначения при данном заболевании. Большой интерес представляет ректальное применение карбамазепина, так как при этом пути введения будет обеспечена более быстрая биодоступность лекарственного средства [1]. Исходя из вышеизложенного, полагаем, что предлагаемая нами лекарственная форма - суппозитории с карбамазепи-ном будет эффективной, безопасной и целесообразной и займет прочные позиции в лечении эпилепсии.
Целью нашего исследования явилось обоснование оптимального состава, разработки технологии и методик анализа новой лекарственной формы - суппозиториев с карбамазепином.
Методы исследования. Выбор оптимального носителя заключался в изучении степени и скорости высвобождения карбамазепина из суппозиториев на различных основах: липофильных, дифильных и гидрофильных, которые по структурно-механическим и физико-химическим свойствам отвечали требованиям нормативной документации [3, 5]. Модельная концентрация карбамазепина в суппозиториях составляла 0,2, как и в таблетках. При расчете количества суппо-
зиторной основы коэффициент замещения не учитывался, так как масса лекарственного вещества, вводимого в суппозитории менее 5%. Карбамазепин практически нерастворим в воде, умеренно растворим спирте 96%, поэтому в суппозиторные основы субстанцию вводили в виде тонко измельченного порошка.
Для качественной и количественной оценки высвобождения карбамазепина из лекарственной формы в опытах in vitro использовали метод равновесного диализа через полупроницаемую мембрану [2, 4]. Взятые пробы анализировали на содержание в них карбамазепина. Количественное определение карба-мазепина в пробах проводили спектрофотометриче-ски. С помощью спектрофотометра СФ - 46 при длине (Хшек) 285нм в кювете с толщиной рабочего слоя 1см относительно 95% спирта этилового измеряли оптическую плотность раствора. Расчет проводили по удельному показателю поглощения (А1%Асм=505). Чтобы избежать влияния основ на показания оптической плотности параллельно проводили диализ с суппозиториями - плацебо на тех же суппозиторных основах.
Суппозитории с карбамазепином готовили методом выливания в металлических разъемных формах, позволяющих получить суппозитории массой 3,0±0,1 г. Для изготовления определенного числа суппозиториев рассчитывали количество основы и лекарственного вещества. Учитывая тот факт, что размер частиц твердой фазы существенно влияет на кинетику высвобождения препаратов из лекарственных форм, нами проводилось измельчение порошка до размера частиц не более 50мкм.
Экспериментальная часть. Установлено, что от вида используемой основы зависит степень высвобождения карбамазепина. Так уже через 5 минут кар-бамазепин обнаруживается в пробах диализата из всех композиций, а через 60 минут наблюдалось максимальное высвобождение лекарственного вещества (рис. 1).
Рис. 1. Кинетика высвобождения карбамазепина из суппозиторных основ
1 - ПЭГ 400 и ПЭГ 1500; 2 - твердый жир; 3 - бутирол; 4 - желатино-глицериновая; 5 - новата.
Наиболее полное и быстрое высвобождение карбамазепина обеспечивает основа, состоящая ПЭГ 400 и ПЭГ 1500, что составляет 91,72%. За этот же промежуток времени из основы твердый жир высвободилось 58,35%. Наименьшая степень высвобождения наблюдается из основы новата - 24,24%.
Таким образом, для дальнейших исследований нами выбрана основа, состоящая из ПЭГ 400 и ПЭГ 1500, которая обеспечивает наиболее полное высвобождение карбамазепина.
Карбамазепин измельчали в ступке, затем просеивали через сито №38. Суппозиторную основу помещали в выпарительную чашку и расплавляли на водяной бане. Расплавленную основу частями при постоянном перемешивании добавляли к порошку. Полученную суппозиторную массу перемешивали до тех пор, пока температура смеси не становилась близка к температуре застывания суппозиториев около 42°С и быстро разливали в предварительно охлажденную и смазанную вазелиновым маслом форму. Через 15-20 минут готовые суппозитории вынимали из формы. Подсушивали их на воздухе. Получали суппозитории массой от 2,85 до 3,15 г с содержанием карбамазепина 0,2 в одном суппозитории. Заворачивали суппозитории в пергаментную бумагу.
Подлинность карбамазепина в суппозиториях подтверждали с помощью спектра поглощения 0,001% спиртового раствора суппозитория. Предварительные исследования показали отсутствие поглощения спиртовых растворов выбранной основы. В спектре поглощения спиртового раствора из суппозиториев, как и в спектре поглощения спиртового раствора субстанции карбамазепина наблюдаются два максимума в области 237 и 285нм.
При разработке методики количественного определения карбамазепина в суппозиториях использовали в качестве оптимальных условий: Xmax=285 нм, растворитель - 95% спирт этиловый, раствор сравнения тот же растворитель.
Методика. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают предварительно взвешенный до 0,0001 г суппозиторий, приливают 100 мл 95% спирта этилового и растворяют на кипящей водяной бане. Затем раствор охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, доводят 95% спиртом этиловым до метки и перемешивают (раствор А). В мерную колбу вместимостью 100мл помещают 1мл раствора А, доводят объем спиртом до метки и перемешивают.
Оптическую плотность полученного раствора измеряют в кварцевых кюветах с толщиной слоя 1 см относительно 95% спирта этилового при Xmax=285 нм. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО карбамазепина в 95% спирте этиловом.
Приготовление раствора РСО карбамазепина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1000 г карбамазепина (РСО), растворяют в 50 мл 95% спирта этилового, доводят объем до метки и перемешивают (раствор А). В мерную колбу вместимостью 100мл помещают 1 мл раствора А, доводят объем раствора 95% спиртом этиловым до метки и перемешивают. 1мл полученного раствора содержит 0,00001 г РСО карбамазепина (Сст).
Содержание карбамазепина в одном суппозитории в граммах (х) вычисляют по формуле: Ах ■CcT-W1-W2-Pcp
х=---, (1)
ACT-a-v
где Ах - оптическая плотность испытуемого раствора;
Аст - оптическая плотность стандартного раствора;
а - навеска одного суппозитория, г;
v - аликвота, мл;
Wi и W2 - объемы мерных колб, мл;
Рср - средняя масса одного суппозитория, г.
Проводят 7 параллельных определений, результаты которых приведены в таблице 1.
Таблица 1
Результаты количественного спектрофотометрического определения карбамазепина в суппозиториях
(Сст=0,00001 г/мл, Аст=0,502, Рср=3,12, Хмах=285 нм)
№ п/п Навеска (г) А Найдено, Xi Xi-X (Xi-X)2 Метрологические характеристики
(г) %
1 3,103 0,505 0,202 101,15 1,37 1,8769 Х=0,1994 Хср(%)=99,78 S2=1,66 SD=1,39 RSD=1,4% SX=0,526 Ах=1,29 £a=±1,3%
2 3,103 0,495 0,198 99,15 -0,63 0,3969
3 3,103 0,502 0,201 100,55 0,77 0,5929
4 3,103 0,492 0,197 98,55 -1,23 1,5129
5 3,103 0,488 0,196 97,75 -2,03 4,1209
6 3,103 0,498 0,199 99,75 -0,03 0,0009
7 3,103 0,507 0,203 101,55 1,77 3,1329
3,103 Х=0,1994 ХСр=99,78 -0,01 11,6348
Полученные результаты свидетельствуют о том, что относительная погрешность определения (еа) не превышает±1,3%.
Далее, с целью установления пригодности предлагаемой методики количественного спектрофотометрического определения карбамазепина в суппозиториях для аналитических целей была проведена ее ва-лидационная оценка по критериям: «Линейность», «Правильность», «Прецизионность»
(ОФС.1.1.0012.15).
Чтобы определить «Линейность» методики нами была приготовлена серия спиртовых растворов кар-бамазепина из суппозиториев с концентрациями действующего вещества: С1=0,0005%; С2=0,001%; С3=0,0015%; С4=0,002%. При измерении оптических плотностей были получены следующие результаты: А:=0,248; А2=0,505; Аз=0,753; А4=1,005. Далее были рассчитаны коэффициенты регрессии (а и в) и уравнение градуировочного графика приняло вид: А=507,5-С-0,0075 (2).
Расчет коэффициента корреляции (г=0,999) показал «Линейность» методики.
С целью установления критерия «Правильность» готовили три модельные смеси трех уровней концентрации. В модельной смеси (суппозитория) №1 содержание субстанции карбамазепина составляло 0,1500г; в модельной смеси №2 - 0,2000г, а в модельной смеси №3 - 0,2500 г. Каждую смесь растворяли в мерных колбах вместимостью 200мл. Растворитель -95% спирт этиловый. Затем готовили по три разведения из каждой серии (всего 9 опытов) и измеряли их оптическую плотность при Хтзх=285нм. Количественное содержание карбамазепина в граммах (х) рассчитывают по уравнению градуировочного графика: (.Ах+а)
Х(г)=-, (3)
в •д -у -100
где Ах - оптическая плотность исследуемого раствора;
а - свободный коэффициент линейной зависимости;
в - угловой коэффициент линейной зависимости;
д - навеска субстанции, г;
Wl и W2 - объем мерных колб (200мл и 100мл соответственно), мл;
V - аликвота, мл.
Открываемость (Я) рассчитывается по формуле:
найдено аналита(Х; )
Я=--—— • 100% (4)
взято аналита (д{)
В результате: открываемость составила (Яср) 99,75%, стандартное отклонение (SD) 1,31%, относительное стандартное отклонение (RSD) 1,3%, вычислительный коэффициент Стьюдента ^выч) составил 0,57 0габл=2,33).
Чтобы установить «Прецизионность» методики готовили 9 разведений из модельной смеси №2, по три разведения с разными аликвотами (2 мл, 2,5 мл, 3 мл). Оптическую плотность полученных разведений измеряли при Хтзх=285нм относительно этанола. Количественное содержание карбамазепина рассчитывали по уравнению градуировочного графика. В результате: SD равно 1,37%, а RSD - 1,38%.
Полученные результаты свидетельствуют о правильности (точности) предлагаемой методики, об отсутствии систематической ошибки, а стандартные отклонения критерий «Правильность» и «Прецизионность» не превышают допустимого значения для лекарственных форм 3%.
Заключение. Изучены оптимальные суппозитор-ные композиции и разработана технология изготовления суппозиториев с карбамазепином. Наиболее полное и быстрое высвобождение лекарственного вещества за 60 минут обеспечивает композиционная осно-
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
~ 96 ~
ва ПЭГ 400 и ПЭГ 1500 - 91,72%. Разработаны методики качественного и количественного анализа карбамазепина в суппозиториях с использованием химических реакций и спектрофотометрического метода.
Проведена валидационная оценка пригодности для аналитических целей разработанной методики количественного определения карбамазепина в суппозиториях.
