CC BY
53
(МК-59.2007.4), BRHE (№ Y4-B-08-13), Рособразования (РНП.2.2.2.3.10035), интеграционным
проектом СО РАН №13, Фондом содействия отечественной науке.
РАЗРАБОТКА СПОСОБА СТАНДАРТИЗАЦИИ ИММУНОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ БЕЛКА ТЕПЛОВОГО шОКА HSP70
В.А. ЧЕРНИКОВ1, Н.В. ГОРОХОВЕЦ2, В.А. МАКАРОВ1, Л.В. САВВАТЕЕВА2,
С.Е. СЕВЕРИН2
Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова1 Московский научно-исследовательский институт медицинской экологии2
Актуальность. Одним из наиболее перспективных и динамично развивающихся методов терапии злокачественных новообразований является иммунотерапия. Предотвращение метастазирования и уменьшение размеров опухоли достигается в основном за счет двух типов эффекторных клеток - цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) и нормальных киллерных клеток (НК). Индукция ЦТЛ, специфичных к антигенам опухоли, возможна при участии антиген-презентирующих клеток (АПК), предварительно нагруженных соответствующим опухолевым антигеном. Белок теплового шока hsp70 является мощным средством доставки антигенных пептидов в АПК, стимулирующим кросс-презентацию этих антигенов и созревание АПК. В отличие от РНК и ДНК-вакцин препараты hsp70 способны активировать НК, отвечающие за деструкцию клеток, не экспрессирующих молекулы МНС-1 класса на поверхности мембраны, чем часто характеризуются клетки злокачественных новообразований. Эффективность препаратов hsp70 определяется содержанием комплексов с антигенными пептидами. Увеличение содержания комплексов с пептидами в препарате hsp70 повышает эффективность индукции ЦТЛ. С другой стороны, конформационные изменения, происходящие с белком при образовании комплексов, могут снижать эффективность активации им НК. Поэтому определение оптимального содержания комплексов с антигенными пептидами и разработка метода стандартизации препаратов на основе hsp70 представляют собой одну из
важнейших задач, которые необходимо решить перед внедрением методов иммунотерапии с использованием hsp70 в клиническую практику.
Цель исследования. На основе экспериментальных данных о функционировании hsp70 in vitro предложить способ стандартизации препарата на основе его комплексов с пептидами.
Материал и методы. Объектом исследования являлись рекомбинантный HSP70A1B человека и его гибридный аналог, полученные стандартными методами генной инженерии и биотехнологии. АТР-азная активность белка (нмоль/мг*мин) определялась колориметрическим методом по количеству образовавшегося фосфата. Связывание с меченым пептидом (% связавшегося белка) определялось колориметрическим методом по поглощению метки. Статистичекий анализ данных проводился с помощью ПО Statistica 7.0 и Origin Pro 7.5.
Результаты. Зависимость АТР-азной активности препаратов HSP70A1B и его гибридного аналога от процентного содержания в них комплексов с пептидом носила линейный характер и не зависела от структуры пептида (p<0,05). Угловой коэффициент прямой, отражающей данную зависимость, различался для HSP7 0A1B и его гибридного аналога.
Выводы. На основе полученных экспериментальных данных можно утверждать, что АТР-азная активность препарата hsp70 является следствием образования комплексов данного белка с пептидами. Определение величины АТР-азной активности может быть предложено в качестве способа стандартизации препаратов
на основе комплексов hsp70 с антигенными пептидами. Описанный нами способ стандартизации является в настоящее время единственным
способом количественной оценки связанных с hsp70 немеченых пептидов.
ПРИМЕНЕНИЕ ХИМИОЛУЧЕВОИ ТЕРАПИИ В КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ГОРТАНИ И ГОРТАНОГЛОТКИ
С.Ю. ЧИЖЕВСКАЯ, Е.В. СТАРОХА
ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»
Цель исследования. Разработка и клиническая апробация комбинированной терапии рака гортани и гортаноглотки с использованием современных противоопухолевых препаратов и новых режимов лучевой терапии для повышения эффективности лечения и улучшения качества жизни больных.
Материал и методы. В исследование включены 23 больных с морфологически верифицированным раком гортани и гортаноглотки И-1У стадии, получающие комбинированное лечение в отделении опухолей головы и шеи НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. На первом этапом комбинированного лечения проводилось 2 курса неоадъювантной химиотерапии по схеме РС (паклитаксел, карбоплатин), с последующей лучевой терапией в режиме мультифракционирования дозы с оценкой эффекта на дозе 40 изоГр. После чего пациентам, у которых была достигнута полная регрессия, лучевая терапия продолжена до радикальной дозы - 65 изоГр, а больным, эффект лечения которых был оценен как частичная регрессия и стабилизация процесса, выполнено оперативное вмешательство. Всем пациентам на этапах комбинированного лечения определялись показатели гормонального и иммунного статуса, проводилось радионуклидное исследование с туморотропным
препаратом 99Тс-МИБИ «Технетрил», КТ с контрастированием, эндоскопическое и ультразвуковое исследование, оценка качества жизни в рамках международного протокола с Европейской организацией исследований и лечения рака - EORTS QLQ-30 (базовая анкета) и Head & neck cancer module: QLQ-H&35 (опухоли области головы и шеи).
Результаты. При оценке непосредственной эффективности неоадьювантной химиотерапии полная регрессия зарегистрирована у 11 больных, частичная регрессия - у 5 пациентов, стабилизация процесса - у 7 человек. Проведение курсов химиотерапии в указанном режиме удовлетворительно переносилось пациентами и не сопровождалось гематологической и гастроинтестинальной токсичностью. Основным видом токсичности была неврологическая: у 4 из 23 больных отмечалась нейросенсорная нейропатия I-II степени. У всех больных наблюдалась аллопеция.
Выводы. Рекомендованный режим неоадъю-вантной химиотерапии удовлетворительно переносится больными. Осложнений со стороны системы крови не зарегистрировано. Послеоперационное течение не осложнено по сравнению с контрольной группой.
