CC BY
25
о ° BY This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License ^ https://creativecommons.Org/licenses/by/4.0/
RESEARCH ARTICLE | НАУЧНАЯ СТАТЬЯ © Mandzhigoladze T.Y., Kuznetsova L.S., 2021
45 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2021-23-l-28-33
к ЩГ Y / Ч Поступила 28.11.2020/Принята 10.01.2021 | Received 28.11.2020/Accepted 10.01.2021
УДК 582.711.26:615.012/.014:615.07
DEVELOPMENT OF COMPOSITION, TECHNOLOGY AND ANALYSIS OF GRANULES WITH LARYNX TREE EXTRACT LIQUID
Mandzhigoladze T. Y., Kuznetsova L.S.
Pyatigorsk Medical Pharmaceutical Institute of Volgograd Medical State University, Pyatigorsk, Russian Federation
РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И АНАЛИЗ ГРАНУЛ С ГОРТЕНЗИИ ДРЕВОВИДНОЙ ЭКСТРАКТОМ ЖИДКИМ
Манджиголадзе Т.Ю., КузнецоваЛ.С.
Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО ВолгГМУ, г. Пятигорск, Российская федерация
Abstract. The purpose of the study was to substantiate the optimal composition, development of technology and methods for analyzing a new dosage form - granules with hydrangeas with a liquid tree extract. Optimal auxiliary substances for granule production were experimentally selected and process parameters were determined: fractional composition, abrasion, disintegration, mass loss during drying, bulk density. It was found that for all indicators granules with hydrangea tree extract liquid meet the requirements of GF XIV. Process diagram of granules manufacturing by wet granulation method has been developed. The TLC method made it possible to identify rutin, quercetin, luteolin, chlorophyll, coumarin. The method of differential spectrophotometry was tested for the method of quantitative determination of the sum of flavonoids. The proposed quantification methodology has been found to be suitable for analytical purposes. The content of the sum of flavonoids in the granules in terms of rutin is about 0,0225%. The relative error of the technique does not exceed ± 2,5%.
Аннотация. Целью исследования явилось обоснование оптимального состава, разработка технологии и методик анализа лекарственной формы - гранулы с гортензии древовидной экстрактом жидким. Экспериментально подобраны
оптимальные вспомогательные вещества для получения гранул и определены технологические параметры: фракционный состав, истираемость, распадаемость, потеря в массе при высушивании, сыпучесть, насыпная плотность. Установлено, что по всем показателям гранулы с гортензии древовидной экстрактом жидким отвечают требованиям ГФ XIV. Разработана технологическая схема изготовления гранул методом влажного гранулирования. Метод ТСХ позволил идентифицировать рутин, кверцетин, лютеолин, хлорофилл, кумарин. Для методики количественного определения суммы флавоноидов апробирован метод дифференциальной спектрофотометрии.
Установлено, что предлагаемая методика количественного определения пригодна для аналитических целей. Содержание суммы флавоноидов в гранулах в пересчете на рутин
Keywords: granules, hydrangea tree extract, TLC, differential spectrophotometry.
REFERENCES
[1] Georgievsky V.P., Fedorin G.F. The connection between the structure of coumarins and their chromatographic behavior in thin layers of sorbents //Past. resources. 1972. vol.8. no 2. P. 275-279.
[2] State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV edition. vol.1., vol.2. M., 2018. 1814p, P. 1856-1861.
[3] Mandzhigoladze, T.Yu., Archinova T.Yu., Romantsova N.A. and others. Study of the antimicrobial activity of the hydrangea of the tree extract of liquid //Belikovo readings: mater. V AllRoss. scientific and practical conf. Pyatigorsk: Advertising and information. agency on Kavminvody, 2017. P. 115-117.
[4] Mandzhigoladze, T.Yu., Archinova T.Yu., Kuznetsova L.S., Kuznetsov V.A. Issledovaniya po razrabotke resursosberegayushchei tekhnologii gortenzii drevovidnoi travy ekstrakta zhidkogo //Zhurn nauch. ct. Zdorov'e i obrazovanie v XXI veke. 2019. T.21., №2. S. 21-24.
[5] TU 9197-023-71732284-06 with rev. no.1 "Biologically active supplement to food" Gortex. "
составляет около 0,0225%. Относительная погрешность методики не превышает ±2,5%.
Ключевые слова: гранулы, гортензии древовидной экстракт жидкий, ТСХ, дифференциальная спектрофотометрия.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
[1] Георгиевский В.П., Федорин Г.Ф. Связь между строением кумаринов и их хроматографическим поведением в тонких слоях сорбентов //Раст. ресурсы. 1972. Т.8. вып.2. С. 275-279.
[2] Государственная фармакопея Российской Федерации XIV изд. Т.1., Т.2. М., 2018. 1814с, С. 1856-1861.
[3] Манджиголадзе, Т.Ю., Арчинова Т.Ю., Романцова Н.А. и др. Изучение антимикробной активности гортензии древовидной экстракта жидкого //Беликовские чтения: матер. V Всеросс. науч.-практ. конф.- Пятигорск: Рекламно-информац. агенство на Кавминводах, 2017.- С. 115-117.
[4] Манджиголадзе, Т.Ю., Арчинова Т.Ю., Кузнецова Л.С., Кузнецов В.А. Исследования по разработке ресурсосберегающей технологии гортензии древовидной травы экстракта жидкого //Журн. науч. ст. Здоровье и образование в XXI веке. 2019. Т.21., №2. С. 2124.
[5] ТУ 9197-023-71732284-06 с изм. №1 "Биологически активная добавка к пище "Гортекс".
Authors contributions: Mandzhigoladze T. Y. - collection, statistical data processing; Kuznetsova L.S. - literature review, writing a text.
Conflict of interest statement: The authors declare no conflict of interest. Mandzhigoladze T.Y. - SPIN ID: 3425-0239; ORCID ID: 0000-0002-9350-9169
Research interests, number of main publications: The development of composition, technology and quality assessment of various dosage forms, published more than 40 publications of which 14 in the Higher Attestation Commission and 26 in the materials of conferences.
Kuznetsova L.S. - SPIN ID: 7051-0404; ORCID ID: 0000-0002-1678-5872
Research interests, number of main publications: The development of composition, technology and quality assessment of various dosage forms, published more than 50 publications of which 21 in the Higher Attestation Commission and 29 in the materials of conferences.
Вклад авторов: Манджиголадзе Т.Ю. - сбор, статистическая обработка данных; Кузнецова Л.С. - обзор литературы, написание текста.
Заявление о конфликте интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Манджиголадзе Т.Ю. - SPIN ID: 3425-0239; ORCID ID: 0000-0002-9350-9169
Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Разработка состава, технологии и оценка качества различных лекарственных форм, опубликованы более 40 публикаций из них 14 в ВАК и 26 в материалах конференций.
Кузнецова Л.С. - SPIN ID: 7051-0404; ORCID ID: 0000-0002-1678-5872
Сфера научных интересов, количество основных публикаций: Разработка состава, технологии и оценка качества различных лекарственных форм, опубликованы более 50 публикаций из них 21 в ВАК и 29 в материалах конференций.
For citation: Development of composition, technology and analysis of granules with larynx tree extract liquid Mandzhigoladze T.Y., Kuznetsova L.S. // Medical & pharmaceutical journal "Pulse". 2021. Vol.23. №1. С. 28-33. http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2021-23-1-28-33.
Для цитирования: Разработка состава, технологии и анализ гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким Манджиголадзе Т.Ю., Кузнецова Л.С. // Медико-фармацевтический журнал "Пульс". 2021. Т.23. №1. С. 28-33. http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2021-23-1-28-33.
Введение. Основной проблемой лечения инфекции мочеполовой системы (ИМС) является развитие резистентности к антибиотикам. Формирующаяся резистентность возбудителей требует поиска новых лекарственных препаратов для предотвращения развития заболевания. Существенными преимуществами лекарственных веществ из природных источников являются доступность сырья, меньшая сложность технологических процессов выделения и очистки, выраженная фармакологическая активность и, как правило, низкая токсичность.
Объектом наших исследований являются
гранулы с гортензии древовидной экстрактом жидким. Ранее нами был получен из травы гортензии древовидной экстракт жидкий, содержащий комплекс биологически активных веществ (БАВ), обладающий
противовоспалительным, антимикробным,
мочегонным действием [3,4].
Целью настоящего исследования явилось
обоснование оптимального состава, разработка технологии и методик анализа лекарственной формы - гранулы с гортензии древовидной экстрактом жидким.
Материалы и методы. При выборе состава гранул исходили из доз для взрослых в БАДах Гортекс, Гортензия TSN (содержит в своем составе гидрангии 400мг) [5].
Учитывая назначение разрабатываемых нами гранул, мы остановились на вспомогательных веществах, которые не будут вступать во взаимодействие с БАВ, входящими в состав экстракта, будут придавать необходимую распадаемость и биодоступность лекарственной форме. Для этого использовали наполнители лактозу, свекловичный сахар, кислоту лимонную в различных сочетаниях и метод влажного гранулирования продавливанием. Увлажнителем (связывающим веществом) являлся гортензии древовидной экстракт жидкий, который был получен на 70% спирте этиловом. Далее нами
были наработаны серии гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким с рассчитанными количествами связывающих веществ. В каждой серии были определены следующие технологические параметры: фракционный состав, истираемость,
распадаемость, потеря в массе при высушивании, сыпучесть, насыпная плотность. Установлено, что по всем показателям гранулы отвечают требованиям ГФ XIV [2].
На основании результатов проведенных исследований нами предложена технологическая схема производства гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким, которая состояла из вспомогательных работ и основной стадии технологического процесса (ТП), которая заключалась в получении гранул. Предварительно подготовленный материал (высушенный, измельченный, просеянный) порошков лактозы, свекловичного сахара и кислоты лимонной смешивали в соответствии с рабочей прописью. Тщательно перемешивали до однородности полученного порошка. Далее массу увлажняли гортензии древовидной экстрактом жидким до получения пластичной массы, способной к гранулированию. Массу протирали через гранулятор с диаметром отверстий 4мм. Сушку первичного гранулята проводили в сушильном шкафу в течении 30 минут при температуре 37°С до остаточной влажности 2,74%. Высушенный гранулят подвергали повторному сухому гранулированию с целью получения гранул одинаковой формы и размера (для этого использовали гранулятор с диаметром отверстий 2мм), отсеивали от пыли. Упаковывали в банки из оранжевого стекла с навинчиваемыми крышками (на 100г гранул в упаковку должна входить ложка-дозатор).
Гранулы с гортензии древовидной экстрактом жидким представляют собой округлые крупинки, однородные по окраске зеленого цвета, со сладковато-кислым вкусом и со слабым запахом. Рекомендуемая дозировка гранул с гортензией древовидной экстрактом жидким составляет 0,5 чайной ложки 3 раза в день
и подтверждена специфической активностью и отсутствием острой токсичности [3].
С целью разработки методик качественного и количественного анализа исследуемых гранул использовали методы ТСХ и спектрофотометрии. Для выбора оптимальных условий хроматографирования некоторых индивидуальных БАВ были апробированы 3 подвижные фазы систем растворителей: (1) гексан-этилацетат (17:3); (2) хлороформ-уксусная кислота-вода (4:1:1); (3) н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (БУВ) (2:1:0,5).
Растворение смеси БАВ в растворе гранул проводили на пластинах марки «Сорбфил-УФ-254» отечественного производства, в стандартной хроматографической камере. Свидетелями
служили: а) 0,1% хлороформный раствор кумарина; б) 0,1% спиртовой раствор рутина; в) 0,2% спиртовой раствор лютеолина; г) 0,3% спиртовой раствор кверцетина; д) 0,2% раствор хлорофилла. Проявителями служили УФ-свет и 5% спиртовой раствор алюминия (III) хлорида.
Результаты и обсуждения. Результаты хроматографирования для идентификации некоторых индивидуальных БАВ в гранулах приведены на рисунках 1-3.
На рисунке 1 видно проявление 6 пятен с различной флуоресценцией. Вещество №3 флуоресцирует голубым цветом; вещество №4 -фиолетовым; вещество №5 - красным; вещество №6 - красно-коричневым; вещество№7 - зеленым.
Рис. 1. Хроматограмма хлороформного раствора гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким в системе: гексан-этилацетат (17:3): 1-смесь веществ; 2-кумарины
Fig. 1. Chromatogram of chloroform solution of granules with hydrangea with a liquid tree extract in the system: hexane-ethyl acetate (17:3): 1-mixture of substances; 2 coumarins
Рис. 2. Хроматограмма хлороформного раствора гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким в системе хлороформ-уксусная кислота-вода (4:1:1): 1-веществ; 2-кумарины; 3-хлорофилл
Fig. 2. Chromatogram of chloroform solution of granules with hydrangea by liquid extract in chloroform-acetic acid-water system (4:1:1): 1-substances; 2 coumarins; 3 chlorophyll
С помощью свидетелей удалось идентифицировать кумарин и хлорофилл (рисунок 2). По данным В.П. Георгиевского с соавторами [1] в этой системе пятно Я^=0,71 (пятно №7) соответствует 3-оксикумарину (зеленая флуоресценция), а вещество с Я^=0,32 (пятно №4) - 5-оксикумарину (сиреневая
флуоресценция). Пятно №6 (Rf=0,66) флуоресцирует голубым цветом, что предположительно соответствует скополетину.
Полученные результаты позволяют предположить, что в состав гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким входит ряд кумаринов.
Рис. 3. Хроматограмма спиртового раствора гранул с гортензии древовидной экстрактом жидким в системе растворителей: н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (2:1:0,5): 1-смесь веществ; 2-рутин; 3-кверцетин; 4-лютионин
Fig. 3 Chromatogram of the alcoholic solution of granules with hydrangea with a tree extract liquid in the solvent system: n-butanol-glacial acetic acid-water (2:1: 0.5): 1-mixture of substances; 2 routines; 3 quercetin; 4-lyutionin
-О» 8
О7
о*
<§н О
<ms>3 <0
§2 О
05
i 2 г 4
На рисунке 3 изображена хроматограмма спиртового раствора гранул, которая позволила идентифицировать рутин, кверцетин и лютеолин. Остальные пятна идентифицировать не удалось, ввиду отсутствия свидетелей.
Таким образом, в исследуемых гранулах были идентифицированы кумарин, хлорофилл, рутин, кверцетин и лютеолин.
Для разработки методики количественного определения суммы флавоноидов апробировали метод дифференциальной спектрофотометрии. В результате поиска оптимальных условий проведения реакции комплексообразования установили, что в качестве реактивов необходимо использовать 5% раствор алюминия (III) хлорида в 70% спирте этиловом и разведенную кислоту хлористоводородную. В этих условиях осадок не
образуется. Время получения стабильного комплекса 45 минут. Предварительно, для выяснения аналитической длины волны, нами был измерен дифференциальный спектр поглощения комплекса. В спектре наблюдается один максимум поглощения в области 420нм, что характерно для рутина и кверцетина. Для разработки методики количественного анализа в качестве аналитической длины волны выбрана ^тах=420нм.
В найденных оптимальных условиях разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в исследуемых гранулах дифференциальным
спектрофотометрическим методом.
Статистически обработанные данные семи параллельных определений суммы флавоноидов в пересчете на рутин приведены в таблице 1.
Таблица 1
Результаты количественного спектрофотометрического определения суммы флавоноидов в гранулах с гортензии древовидной экстрактом жидким
(п=7; Ах=0,445, Сст=0,002%)
N Навеска (а), Оптическая плотность Найдено Xi-x \Xi-x\2 Метрологические
п/п (г) (Ai) (Xi, мг-%) характеристики
1 0,502 0,103 23,05 +0,54 0,2916 х=22,51%
2 0,494 0,096 21,84 -0,67 0,4489 S2=0,39
3 0,500 0,101 22,70 +0,19 0,0361 SD=0,63
4 0,496 0,095 21,52 -0,99 0,9801 RSD=0,64%
5 0,505 0,102 23,14 +0,63 0,3961 Sx=0,23
6 0,512 0,105 22,91 +0,40 0,1600 ДХ=0,57
7 0,492 0,098 22,38 -0,13 0,0169 £2=±2,5%
х=22,51 Е= -0,03 Е=2,3297
Table 1
Results of quantitative spectrophotometric determination of the sum of flavonoids in granules with hydrangea tree extract liquid (n = 7; Ah =0,445, CSt of =0,002%)
N n/n Hinge plate (a), (g) Optical depth (Ai) Found (Xi, mg-%) Xi-x | Xi-x |2 Metrological characteristics
1 0,502 0,103 23,05 +0,54 0,2916 х=22,51%
2 0,494 0,096 21,84 -0,67 0,4489 S2=0,39
3 0,500 0,101 22,70 +0,19 0,0361 SD=0,63
4 0,496 0,095 21,52 -0,99 0,9801 RSD=0,64%
5 0,505 0,102 23,14 +0,63 0,3961 Sx=0,23
6 0,512 0,105 22,91 +0,40 0,1600 ДХ=0,57
7 0,492 0,098 22,38 -0,13 0,0169 £2=±2,5%
х=22,51 E= -0,03 E=2,3297
Содержание суммы флавоноидов в гранулах в пересчете на рутин составляет 0,0225%. Полученные результаты
свидетельствуют о высокой воспроизводимости методики, так как стандартное отклонение (8Б=0,64%) не превышает допустимого значения для лекарственных форм (3%). Относительная погрешность определения не превышает ±2,5%
Таким образом, проведенные нами исследования и полученные результаты свидетельствуют об использовании гортензии древовидной экстракта жидкого как перспективного препарата в виде гранул при воспалительных заболеваниях
мочевыделительных органов, склонности к образованию камней в почках и мочевыводящих путях, а так же как антифлебоидное и кроворазжижающее средство.
Corresponding Author: Mandzhigoladze Tatyana Yuryevna -associate professor of the department of pharmaceutical technology with a course in medical biotechnology of the Medical and Pharmaceutical Institute - a branch of FSBOU VO Volga State Medical University, Pyatigorsk, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Ответственный за переписку: Манджиголадзе Татьяна Юрьевна - кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической технологии с курсом медицинской биотехнологии медико-фармацевтического института -филиала ФГБОУ ВО ВолгГМУ, г. Пятигорск, Российская
федерация
E-mail: [email protected]
