CC BY
123
ANTIINFLAMMATORY AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF GENTIANA ALGIDA PALL. AND LEUCANTHEMUM SIBIRICUM DC
T.V. Kornopoltseva, Gh.Ts. Hotsaev, T.A. Aseeva, L.M. Tankhaeva (Institute of General and Experimental Biology, SB RAS, Ulan-Ude)
The pharmacologic research of antiinflammatory and antibacterial activity of Leucanthemum sibiricum as probable
substitute of Gentiana algida was conducted.
ЛИТЕРАТУРА
1. Блинова К. Ф., Куваев В.Б. Лекарственные растения тибетской медицины Забайкалья // Вопросы фармакогнозии. - Л 1965. - С. 163-178.
2. Варлаков М.Н. Избранные труды / Под ред. Туровой. —
М., 1963. — 172 с.
3. Гаммерман А.Ф., Семичов Б.В. Словарь тибетско-латино-русских названий лекарственного растительного сырья, применяемого в индо-тибетской медицине. —
Улан-Удэ, 1963. — 80 с.
4. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа / МЗ СССР. — 11-е изд., доп. — М.: Медицина, 1987. — 336 с.
5. Данзин-Пунцок. Шелпхренг: ксилограф на тибетском языке. — Агинский дацан, 1728. — 233 л.
6. Жамбалдоржи. ’’Дзейцхар Мигчжан”. Ксилограф на тибетском языке. — Монголия, конец XVIII - начало XIX вв. — 174л.
7. Ойвин И.А, Шетель С.Л. Методика изучения местных нарушений капиллярной проницаемости // Матер. по патогенезу воспаления и патологии белков крови. —
Душанбе, 1961. — № 5. — С.167-173.
8. Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии. — М., 1971. — 539 с.
9. Растительные ресурсы CCCP: Цветковые растения, их химический состав, использование; Cемейства Caprifoliaceae-Plantaginaceae. — Л., 1990. — 328 с.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М., 2000. — 398 с.
11. Cmрeльникoв Ю.Е. Cравнительная характеристика противовоспалительного действия некоторых пиримидиновых производных // Фармакология и токсикология. — 1960. — № 6. — C.526-531.
12. Tpmyc Ф.П., Moxopm H.A., Kлeбaнoв B.H. Нестероидные противовоспалительные средства. — Киев, 1975. — 239 с.
13. Xaйдaв Ц, Aлmaнчимэг Б., Baрлaмoвa Т. С. Лекарственные растения в монгольской медицине. — Улан-Батор, 1985. — 390 с.
14. “Чжуд-ши” — памятник средневековой тибетской культуры: Пер. с тиб. / Предисл. Д.Б. Дашиева, СМ. Николаева. — Новосибирск: Наука, ^б. отд-ние, 1989. — 349 с.
15. D. Dawa. A clear mirror of tibetan medicinal plants. — Dharmasala, India, 1999. — 373 p.
© МИРОВИЧ В.М., ФЕДОСЕЕВА Г.М., ГОЛОВНЫХ Н.Н., ПЕТРОВА И.Г. - 2007
РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА ЖИДКОГО ЭКСТРАКТА ДУШИЦЫ
В.М. Мирович, Г.М. Федосеева, Н.Н. Головных, И.Г. Петрова
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармакогнозии с курсом ботаники, зав. — д.ф.н., проф. Г.М. Федосеева; Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН, директор — д.б.н., проф. В.К. Войников, лаборатория физико-химических методов исследования, зав. — к.б.н.
Л.В. Дударева)
Резюме. Paзрaбomaны noкaзameли кaчecmвa жидкoгo экcmрaкma дyшицы. Прeдлoжeны кaчecmвeннaя рeaкция, moн-Koc/юйшя xрoмamoгрaфия, cneкmрoфomoмemричecкий мemoд кoличecmвeннoгo onрeдeлeния флaвoнoидoв. Рє^мє^ує-мьіє трмы: (уммы флaвoнoидoв нє мєнєє 0,55%, cyxoй ocmamoK нє мєнєє 17%.
Ключевые слова: жидкий xcmpaKm дyшиЦы, noкaзameли кaчecmвa.
В медицине настой душицы обыкновенной применяют как отхаркивающее, из травы делают компрессы в качестве болеутоляющего и противовоспалительного средства, используют при атонии кишечника. Надземные органы душицы содержат эфирное масло, флаво-ноиды (лютеолин, лютеолин-7-глюкуронд, космосиин, хризин-7-глюкуронид), дубильные вещества, аскорбиновую кислоту (в цветках — 166 мг%, листьях — 565 мг%, в стеблях — 58 мг%), тритерпеновые кислоты, семена содержат жирное масло[1, 3, 4].
Создание фитоэкстракционных средств из растительного сырья выгодно с точки зрения экономичности и рациональности использования сырья, поскольку в этом случае обеспечивается максимальный выход биологически активных веществ. Нами предложен способ получения жидкого экстракта из травы душицы. В задачу данного исследования входила разработка показателей качества жидкого экстракта душицы.
Материалы и методы Разработка показателей качества проводилась на 5 сериях жидкого экстракта (1:1), которые получали в лабораторных условиях из травы душицы обыкновенной 70%-ным этиловым спиртом методом перколяции.
Состав биологически активных веществ определяли качественными реакциями, методом тонкослойной хроматографии. Флавоноиды анализировали методом ВЭЖХ на приборе «Shimadzu CLASS V6.12 SP1» на колонке ЕС 125/
3 МиСЬЕ081Ь 120-5 С 18, детектор УФ (254 нм), подвижная фаза раствор ацетонитрила в буферно-фосфатном растворе (pH 3) (50:50 по объему).
При разработке методики количественного определения использовали Государственный стандартный образец (ГСО) лютеолина. Измерение оптической плотности проводили на спектрофотометре СФ-46.
Результаты и обсуждение
Качественными реакциями в составе жидкого экстракта определено содержание флавоноидов, дубильных веществ, кумаринов, ароматный специфический запах указывает на присутствие эфирного масла. Методом ВЭЖХ в экстракте обнаружены флавоноиды лютеолин, лютеолин-7- глюкуронид (рис.1).
Сумма флавоноидов душицы в эксперименте обладает противовоспалительным действием, поэтому стандартизацию экстракта следует проводить по содержанию флавоноидов [5].
Для определения подлинности экстракта предложена качественная реакция и тонкослойная хроматография.
Качественная реакция. К 1 мл жидкого экстракта прибавляют 9 мл 70% этилового спирта. К 2 мл раствора экстракта прибавляют 0,1 г металлического магния и несколько капель концентрированной хлористоводородной кислоты и нагревают на водяной бане в течение 5 минут. Появляется оранжевая окраска (флавоноиды).
Рис.1. ВЭЖХ флавоноидов жидкого экстракта душицы. Пик 7,375 соответствует по времени удерживания веществу-свидетелю лютеолин-7-глюкурониду, а пик 8,175 — ГСО лютеолину.
Хроматография. 0,015 мл раствора экстракта (оставшегося от качественной реакции) наносят на линию старта (2 см от края) пластинки «Силуфол» размером 8х15 см. Одновременно на линию старта наносят 0,005 мл 0,1% спиртового раствора Государственного стандартного образца (ГСО) лютеолина. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 5 ми-
Таблица 1
Статистическая обработка результатов количественного определения флавоноидов в жидком экстракте (1:1) душицы
0,78
0,0073
95
2,36
0,017
±2,18
нут, затем помещают в камеру (предварительное насыщение не менее 1 часа) со смесью растворителей хлороформ — этанол — вода (52:28:7). Хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителя пройдет 14 см, ее вынимают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу в течение 10 минут и просматривают в УФ-свете при длине волны 360 нм. На пластинке над
Таблица 2
Результаты количественного определения суммы флавоноидов в жидком экстракте душицы с использованием метода добавок ГСО лютеолина
Содержание суммы флаво-ноидов в 1 г экстракта, мг Добавлено ГСО лютеолина, мг Суммы флавоноидов Относительная ошибка, %
найдено, мг вычислено, мг
6,632 2,95 9,664 9,582 +0,85
6,632 5,90 12,700 12,532 + 1,34
6,632 8,85 14,971 15,482 -3,30
спиртового раствора алюминия хлорида и 0,05 мл 10% уксусной кислоты и доводят до метки 96% этиловым спиртом. Перемешивают. Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют через 30 минут на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Раствор сравнения состоит из 1 мл раствора экстракта, 0,05 мл 10% уксусной кислоты доведенных до 25 мл в мерной колбе 96%-ным этиловым спиртом.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лю-теолин в % вычисляют по формуле:
Х(%) "О х 50 х 25
( 549,41 х 1,5
где: Б — оптическая плотность испытуемого раствора; 549,41 — удельный показатель поглощения лютео-лина в комплексе с алюминия хлоридом.
При 9 независимых определениях ошибка методики не превышала ±2,8% (табл. 1).
Опыты с добавками ГСО лютеолина показали отсутствие систематической ошибки (табл. 2).
В 5 сериях жидкого экстракта душицы обыкновенной определили содержание суммы флавоноидов и сухой остаток (табл. 3). Рекомендуются для оценки качества экстракта показатели: содержание суммы флавоноидов не менее 0,5%, сухой остаток не менее 17%.
Таким образом, разработан способ получения и методы стандартизации жидкого экстракта (1:1) из травы душицы обыкновенной, обладающего противовоспалительным и отхаркивающим действием. Со-
местом нанесения раствора экстракта должны появиться три основных коричневых пятна. Хроматограмму проявляют 5% спиртовым раствором алюминия хлорида и нагревают в сушильном шкафу при температуре 100- 1050С в течение 2-3 минут. При этом пятна приобретают желтую окраску в видимом и УФ-свете. Верхнее пятно соответствует ГСО лютеолина. Нижние пятна со значением Кб (по отношению к ГСО лютеолина) 0,89 и
0,80 соответствуют лютеолин-7-глюкурониду и космо-сиину.
В основу количественного анализа положена методика определения суммы флавоноидов в сырье душицы [2].
Методика. 1,5 мл жидкого экстракта помещают в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки 70%-ным этиловым спиртом. Затем 1 мл раствора экстракта помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 2 мл 1%
Таблица 3 Содержание суммы флавоноидов и сухого остатка в жидком экстракте душица! обыкновенной
Номер серии Содержание, %
суммы фла-воноидов сухого остатка
1 0,79 24,2
2 0,78 22,0
3 0,56 17,6
4 0,66 19,0
5 0,60 18,0
держание суммы флавоноидов в пересчете на ГСО лю-теолин не менее 0,55%, сухой остаток не менее 17%.
х
х
8
ELABORATION OF THE INDICES OF QUALITY OF THE LIQUID EXTRACT OF ORIGANI
V.M. Mirovich, G.M. Fedoseeva, N.N. Golovnich, I.G. Petrova (Irkutsk State Medical University, Siberian Institute of Plant Physyology and Biochemistry SB RAS)
The standardization indices of the liquid extract Origani, the qualitative reaction, thinlayer chromatography, UV-spectrofotometrie method of quantitative definition of flavonoids were suggested. The content of the sum of flavonoids not less than 0,55%, dry rest not less than 17% is recommended.
ЛИТЕРАТУРА
1. Лекарственные растения Государственной Фармакопеи / Под ред. И.А. Самылиной. — М.: АНМИ, 1999. — 146 с.
2. Межгосударственный стандарт «Трава душицы». Технические условия. (ГОСТ 2108-93, Минск, 1993).
3. Мирович В.М. Исследование фенольных соединений душицы обыкновенной // Ресурсоведческое и фармаког-ностическое изучение лекарственной флоры СССР. Сб. научн. тр. НИИФ. — М., 1987. — Т 25. — С.105-109.
4. Мирович В.М., Федосеева Г.М., Головных Н.Н. и др. Ди-
намика накопления флавоноидов и дубильных веществ в душице обыкновенной траве, культивируемой в Прибайкалье // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Сб. научн. тр. вып. 62. — Пятигорск, 2007. — С.93-95.
5. Патент 2095075. Российская Федерация Способ получения суммы флавоноидов, обладающих противовоспалительным и спазмолитическим действием / Пешкова В.А., Федосеев А.П., Мирович В.М. (РФ). — № 93037860; заявл. 23. 06. 1993; опуб. 10.11.97.
СЛУЧАИ ИЗ ПРАКТИКИ
© БИДЕНКО М.А., КАЛЯГИН А.Н., НОВОХАТЬКО О.И. - 2007
АНТИФОСФОЛИПИДНЫЙ СИНДРОМ КАК ПРИЧИНА ВОЗНИКНОВЕНИЯ ИНСУЛЬТА
М.А. Биденко, А.Н. Калягин, О.И. Новохатько
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра пропедевтики внутренних болезней, зав. — д.м.н. проф. Ю.А. Горяев; Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра ангиохирургии, зав. — к.м.н., доц. В.В. Чернявский; МУЗ «Клиническая больница №1 г. Иркутска», гл. врач — Л.А. Павлюк, неврологическое отделение, зав. — к.м.н.
Э.Д. Атаманюк, отделение сосудистой хирургии, зав. — С.В. Зайцев)
Резюме. B cmamьє orncami coвpeмeнныe дaнныe o6 aнmифocфoлиnиднoм cиндpoмe, eгo диaгнocmикe, клшжє и лєчє-нии. Пpeдcmaвлeны дaнныe coбcmвeннoгo клиничecкoгo нaблюдeния вoзникнoвeния диcmaльнoгo rn^o3a naльцa кити и ишeмичecкoгo инcyльma y бoльнoгo c aнmифocфoлиnидным cиндpoмoм.
Ключевые слова: aнmифocфoлиnидный cиндpoм, диaгнocmикa, лєчєнш, ишeмичecкий инcyльm, диcmaльный нє^o3 naльцa, клиничecкoe нaблюдeниe.
Проблема антифосфолипидных антител (АФЛФ) появилась вначале ХХ века, когда была разработана реакция А. 'ЭДазвегтап’а, при которой выявлялись ложноположительные случаи. Только в 1941-1944 годах М.С. РаодЬогп установил, что важнейшим антигенным компонентом является фосфолипид, получивший название кардиолипин. Позднее была выявлена высокая ассоциативная связь обнаружения АФЛА у больных с системной красной волчанкой (СКВ), более того, одна из фракций была названа «волчаночным антикоагулянтом» (хотя это вещество приводит не к кровотечениям, а тромбозам). Термин антифосфолипидный синдром (АФС) впервые введен С.Я.У. Н^Ьег в 1986 году. По современным представлениям — это клинико-лабораторный симптомокомплекс, связанный с синтезом АФЛА, включающий в себя венозные и/или артериальные тромбозы, различные формы акушерской патологии (прежде всего привычное невынашивание беременности), тромбоцитопению, основу синдрома составляет васкулопатия, связанная с невоспалительным и/или тромботическим поражением сосудов и заканчивающаяся их окклюзией [2].
Частота встречаемости АФЛА в популяции существенно отличается. Так, в разных работах волчаночный антикоагулянт обнаруживается в 0-13,5%, антитела к кардиолипину в 0-29%, в пожилом возрасте распространенность положительных антифосфолипидных тес-
тов возрастает и колеблется от 0 до 68%. Отдельно анализировались беременные женщины. Было установлено, что у беременных с нормальной беременностью АФЛА выявляются в 5%, а у женщин послеэкстракор-порального оплодотворения — в 24%, у беременных с СКВ — у 37%.
Синтез АФЛА часто связывается с инфекционными заболеваниями: вирусными (гепатит В, цитомегало-вирус, Эпштейн-Барр, парвовирус В19, ВИЧ, аденовирус, вирус Herpes zoster, корь, краснуха, HTLV-1), бактериальными (микобактерии, сальмонелла, стафилококк, стрептококк, лихорадка Q), спирохетозными (сифилис, лептоспироз, клещевой боррелиоз), паразитарными (малярия, лейшманиоз, токсоплазмоз). В то же время, выявлена ассоциативная связь обнаружения АФС с носительством генов системы HLA DR4, DR7, DRw53, DQB1*0302, а также полиморфизмом генов бета2-гликопротеида-1, ингибитора активатора плазми-ногена-1, Fc-гамма-рецептора, ангиотензин-превраща-ющего фермента, GPIIa/P1A1/2, лейденским фактором и мутацией гена протромбина.
Представления о патогенетических механизмах АФС базируются на концепции «двух ударов». В соответствии с нею АФЛА создают условия для повышения свертываемости крови («первый удар»), а образование тромба определяется другими медиаторами, которые способствуют действию АФЛА («второй удар»). Счита-
