CC BY
5DOI: 10.24412/1999-6780-2023-4-59-64 УДК: 579.86: 543.9
Для цитирования: Домотенко Л.В., Морозова Т.П., Храмов М.В. Разработка питательных сред для энтерококков, рекомендованных нормативными документами, при проведении анализа проб воды. Проблемы медицинской микологии. 2023; 25 (4): 59-64. DOЫ0.24412Л999-6780-2023-4-59-64
For citation: Domotenko L.V., Morozova T.P., Khramov M.V. Development of nutrient media for enterococci recommended by regulatory documents when analyzing water samples. Problems in Medical Mycology. 2023; 25 (4): 59-64. (In Russ). DOI: 10.24412/1999-6780-2023-4-59-64
РАЗРАБОТКА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ЭНТЕРОКОККОВ, РЕКОМЕНДОВАННЫХ НОРМАТИВНЫМИ ДОКУМЕНТАМИ, ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АНАЛИЗА ПРОБ ВОДЫ
Домотенко Л.В. (в.н.с.)*, Морозова Т.П. (н.с.), Храмов М.В. (зам. директора)
Государственный центр прикладной микробиологии и биотехнологии, Оболенск, Россия
После введения в действие СанПиН 1.2.3685-21, устанавливающих новые санитарно-микробиологические и паразитологические показатели безопасности питьевой воды, с 1 января 2022 г. стало обязательным исследование питьевой воды, воды поверхностных водных объектов и обеззараженных сточных вод, допустимых к сбросу в поверхностные водные объекты на наличие энтерококков в качестве индикатора фекального загрязнения. В рамках программы импортозамещения разработан комплект питательных сред для обнаружения и подтверждения наличия /отсутствия энтерококков в пробах воды, включающий среду Сланеца-Бартли, желчь-эскулин-азидный агар, канамицин- эскулин-азидный агар и солевой агар с ТТХ. Показано, что питательные среды удовлетворяют требованиям нормативно-методических документов, устанавливающих методы обнаружения и подсчета энтерококков в воде.
Ключевые слова: энтерококки, среда Сланеца-Бартли, желчь-эскулин-азидный агар, канамицин- эскулин-азидный агар, солевой агар
* Контактное лицо: Домотенко Любовь Викторовна, e-mail: domotenko@obolensk.org
DEVELOPMENT OF NUTRIENT MEDIA FOR ENTEROCOCCI RECOMMENDED BY REGULATORY DOCUMENTS WHEN ANALYZING WATER SAMPLES
Domotenko L.V. (leading scientific researcher), Morozova T.P. (scientific researcher), Khramov M.V. (deputy director)
State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology, Obolensk, Russia
After the introduction of SanPiN 1.2.3685-21, which established new sanitary-microbiological andparasitological indicators for the safety of drinking water, from January 1, 2022, it became mandatory to study drinking water, water from surface water bodies and disinfected wastewater allowed for discharge into surface water bodies on presence of enterococci as an indicator of fecal contamination. As part of the import substitution program, a set of culture media has been developed for the detection and confirmation of entero-cocci in the analysis of water samples, including Slanetz-Bartley medium, bile-esculin-azide agar, kanamycin-esculin-azide agar and salt agar with 2, 3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC). It has been shown that nutrient media meet the requirements of regulatory and methodological standards establishing methods for detecting and counting enterococci in water.
Key words: enterococci, Slanetz-Bartley medium, bile-esculin-azide agar, kanamycin-esculin-azide agar and salt agar with TTC for enterococci
Известно, что большинство тяжелых инфекций в мире, включая связанные с оказанием медицинской помощи, вызывают бактерии, известные под аббревиатурой ESCAPE, в которую вошли: Entero-coccus faecium, Staphylococcus aureus, Acinetobacter bau-mannii, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae и другие представители Enterobacteriaceae. Энтерококки вызывают различные инфекции у человека, включая эндокардиты, инфекции мочевыводящих путей,
органов малого таза, раневую инфекцию и др. Энтерококки относят к санитарно-показательным микроорганизмам, так как они обитают в кишечнике человека и животных, способны загрязнять объекты внешней среды (почву и воду). Один из самых актуальных вопросов, стоящих перед санитарными службами и организациями системы здравоохранения всего мира, связан с безопасностью и качеством воды [1]. Учитывая важность данного вопроса, в 2021 г. приняты санитарные правила и нормы Сан-ПиН 1.2.3685-21 «Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания», в которых введены новые санитарно-
микробиологические показатели безопасности питьевой воды централизованного водоснабжения с учетом международных требований [2]. В соответствии с требованиями данного документа, с 1 января 2022 г. стало обязательным исследование качества и безопасности питьевой воды, воды поверхностных водных объектов и обеззараженных сточных вод, допустимых к сбросу в поверхностные водные объекты, на наличие энтерококков. До этого энтерококки в воде поверхностных водоемов рекомендовалось определять только в случае превышения уровня общих колиформных бактерий, а также при несоответствии оценки качества воды по основным показателям и санитарной ситуации на водных объектах.
Введение данного показателя в качестве индикатора фекального загрязнения воды обусловлено способностью энтерококков к более длительному выживанию в водной среде по сравнению с Escherichia coli или термотолерантными колиформ-ными бактериями, их большей устойчивостью к высыханию и хлорированию, высокой галлотолерант-ностью, а также распространением штаммов энтерококков, обладающих высокой антибиотикоустойчи-востью [3, 4]. Особую обеспокоенность в последние годы вызывает распространение штаммов энтерококков с высокой вирулентностью и обладающих устойчивостью к ванкомицину (vancomycin-resistant enterococcus, VRE). [5, 6]. При этом наибольший процент VRE штаммов характерен для вида Enterococcus faecium [7].
Методология обнаружения энтерококков в воде регламентирована нормативно-методическими документами, описывающими технику проведения исследования [8-12]. Общим для всех перечисленных стандартов является применение бактериологического метода выявления энтерококков с использованием питательных сред. Отличия касаются метода исследования и набора питательных сред. Основные методы исследования воды включают метод мембранной фильтрации, титрационный метод (или метод ферментации в пробирках) и качественные (ускоренных) тесты с хромогенным или флуороген-
ным субстратом. Титрационный метод рекомендуется при анализе мутных образцов воды. Метод мембранной фильтрации считается современным «золотым стандартом» для оценки качества воды на наличие энтерококков [3]. Как правило, анализ воды данным методом осуществляется в два этапа - выявления и подтверждения.
Цель данной работы: проанализировать рекомендации действующих нормативно-методических стандартов в отношении питательных сред для проведения микробиологического контроля воды методом мембранной фильтрации и разработка комплекса необходимых питательных сред для выявления и подтверждения энтерококков.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Перечень питательных сред для выявления и подтверждения энтерококков в воде определяли на основе анализа рекомендаций нормативно-методических документов: ГОСТ 33463.6-2016 «Системы жизнеобеспечения на железнодорожном подвижном составе. Часть 6. Методы гигиенической оценки системы водоснабжения»; ГОСТ 24849-2014 «Вода. Методы санитарно-бактериологического анализа для полевых условий»; ГОСТ 34786-2021 «Вода питьевая. Методы определения общего числа микроорганизмов, колиформных бактерий, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и энтерококков»; ГОСТ ISO 7899-2-2018 «Качество воды. Обнаружение и подсчет кишечных энтерококков. Часть 2. Метод мембранной фильтрации»; «Методы санитарно-микробиологического и санитарно-
паразитологического анализа прибрежных вод морей в местах водопользования населения: МУК 4.2.295911».
В процессе разработки питательных сред применяли ферментативные гидролизаты: панкреатический гидролизат рыбной муки и панкреатический гидролизат казеина, а также желчь содержащие компоненты: соли желчных кислот, желчь бычью сухую и желчь бычью, очищенную активированным углем (все производства ФБУН ГНЦ ПМБ (Оболенск).
Ростовые свойства разрабатываемых питательных сред изучали с использованием штаммов энтерококков Enterococcus faecalis ATCC 19433 (NCTC 775); E. faecium ATCC 19434 (NCTC 7171), E. faecalis var. zimogenes 365, ингибирующие свойства - с использованием Escherichia coli АТСС 25922, Staphylococcus aureus АТСС 25923, Streptococcus pyogenes Dick 1, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Bacillus cereus ATCC 10704, полученных из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур «ГКПМ-Оболенск».
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Согласно требованиям международного стандарта ISO 7899-2, определение кишечных энтерококков в воде методом мембранной фильтрации осуществляют на питательной среде Сланеца-Бартли, инкубируя мембранный фильтр, через который пропущен определенный объем образца воды при температуре (36±2) °С в течение (44±4) ч. Затем проводят следующий этап анализа - подтверждение и подсчет энтрерококков. Для этого проверяют чашку с посевами на наличие типичных для энтерококков колоний, которые должны иметь красную, бордовую или розовую окраску по центру или по всей площади колонии. При наличии типичных колоний мембранный фильтр с колониями, не переворачивая, переносят в чашку, содержащую желчно-эскулиновый агар с азидом, предварительно нагретый до температуры 44 °С. Проводят инкубацию при температуре (44±0,5) °С в течение 2 ч и выполняют подсчет колоний в чашке. Все типичные колонии, цвет среды вокруг которых варьируется от желто-коричневого до черного, рассматривают как дающие положительную реакцию и учитывают при подсчете как колонии кишечных энтерококков [9]. Отметим, что ГОСТ ISO 7899-2-2018, введенный Евразийским советом по стандартизации, метрологии и сертификации, не принят в РФ, но некоторые российские лаборатории аккредитовали проведение анализа воды на наличие энтерококков именно по данному стандарту.
При изучении действующих отечественных нормативно-методических документов, регламентирующих методы по обнаружению энтерококков в воде и их подтверждение, отмечено, что все стандарты, за исключением ГОСТ 34786-2021, рекомендуют для определения энтерококков энтерококкагар или среду Сланеца-Бартли. ГОСТ 34786-2021 ориентирован на использование питательных сред в основном импортного производства, таких как: хромо-генные среды энтерококковый агар Chromocult и m-EI Chromogenic Agar, а также стрептококковый агар КЕ (КЕ Streptococcus Agar), желчь-эскулин-азидный агар, энтерококковый (азидный) агар и среда Сланеца-Бартли. Для подтверждения энтерококков всеми стандартами, в отличие от международного, регламентировано использование солевого ТТХ агара или проведение микроскопии и определение каталазной активности у выросших на среде выделения культур, предположительно, относящихся к энтерококкам. И даже новый ГОСТ 34786-2021, несмотря на приверженность к иностранным питательным средам, рекомендует солевой ТТХ агар для подтверждения энтерококков, проведение микроскопии или постановку каталазного теста. Хотя в настоящее время международные стандарты на основании большой доказательной базы исключают
использование микроскопии и каталазного теста при рутинных исследованиях воды, при условии выделения энтерококков на средах с ТТХ и подтверждения только на желчь-эскулин-азидном агаре [9, 1315].
Среди сред, рекомендуемых отечественными стандартами, только энтерококкагар уже длительное время производится в нашей стране. Другие питательные среды, необходимые для обнаружения и подтверждения энтерококков, в нашей стране не выпускались. Энтерококкагар представляет собой модификацию m-Enterococcus agar (также известный как агар Сланеца-Бартли), производимого многими иностранными компаниями и относящегося к основным питательным средам для подсчета энтерококков методом мембранной фильтрации [14]. m-Enterococcus agar содержит азид натрия, придавая средам селективные свойства и позволяя изолировать энтерококки, стрептококки, Aerococcus viridans, некоторые грамположительные спорообразующие палочки, стафилококки и некоторые грамотрица-тельные палочки. Энтерококкагар дополнительно содержит кристаллический фиолетовый, что заметно улучшает селективные свойства среды в отношении грамположительных микроорганизмов. Восстановление присутствующего в среде 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ) приводит к образованию окрашенных колоний, предположительно, энтерококков, которые затем необходимо подтверждать в соответствии со способностью гидроли-зовать эскулин при 44 °С в течение 2 ч [14].
В соответствии с требованиями стандартов, была предпринята попытка разработать необходимые питательные среды для обеспечения лабораторий, осуществляющих контроль качества воды из различных источников и особенно питьевой воды: среду Сланеца-Бартли, желчь-эскулин-азидный агар, канамицин-эскулин-азидный агар и солевой агар c ТТХ.
Среда Сланеца-Бартли. В ходе исследований разработан компонентный состав среды с использованием белкового гидролизата рыбной муки с тви-ном-80 производства ФБУН ГНЦПМБ: панкреатический гидролизат рыбной муки с твином сухой - 10,5 г/л, дрожжевой экстракт - 5,0 г/л, D-глюкоза - 2,0 г/л, калий фосфорнокислый однозамещенный - 2,0 г/л, натрий углекислый (1,0±0,5 г/л), натрия азид -0,5 г/л, 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид - 0,1 г/л, агар - 10,0 ±2,0 г/л. pH среды - от 7,1 до 7,3. Питательная среда обеспечивает при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-6 через 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С рост тест-штаммов: E. faecalis ATCC 19433 - в виде гладких круглых бордовых блестящих колоний диаметром не менее 1 мм; E. faecium ATCC 19434 - в виде гладких круглых сиренево-розовых со светлым ободком ко-
лоний диаметром не менее 1,5 мм, полностью подавляет рост тест-штаммов E. coli АТСС 25922; P. aeruginosa АТСС 27853 - при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10-4 через 48 ч инкубации при (37±1)°С.
Желчь-эскулин-азидный агар. При разработке состава и технологии производства питательной среды использовали панкреатические гидролизаты рыбной муки и казеина, а также желчь содержащие компоненты: желчь бычью сухую, желчь бычью, очищенную активированным углем, соли желчных кислот. В ходе исследований в качестве белковой основы был выбран панкреатический гидролизат рыбной муки. Установлено, что только применение желчи бычьей, очищенной активированным углем, в концентрации 10 г/л позволяет получить питательную среду, обеспечивающую рост энтерококков в виде типичных серых колоний с почернением среды вокруг колоний после инкубирования посевов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С. При посеве энтерококков бактериологической петлей и инкубации на протяжении 2 ч при (44±0,5) °С отмечали почернение среды по ходу штриха.
Разработанная питательная среда имеет следующий состав (г/л): панкреатический гидролизат рыбной муки - 15,0, пептон ферментативный - 5,0, дрожжевой экстракт - 5,0, натрий углекислый -(0,3±0,1), натрия азид - 0,5, эскулин - 1,0, цитрат железа - 0,5, желчь очищенная -10,0, агар бактериологический - (10,0±2,0). Среда обеспечивает рост тест-штаммов E. faecalis ATCC 29212 и E. faecium ATCC 19434 при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10-6 (100 м.к.) через 24 ч инкубации при температуре (37±1) °С в виде гладких, круглых серых колоний размером до 1 мм с изменением цвета среды вокруг колоний до коричневато-черного, а при посеве бактериологической петлей энтерококков и инкубации посевов при (44±0,5) °С через 2 ч наблюдается изменение цвета среды до коричневато-черного для тест-штаммов E. faecalis ATCC 29212, E. faecium ATCC 19434, E. faecalis ATCC 19433, E. faecalis var. zimogenes 365. Тест-штаммы S. pyogenes Dick 1, P. aeruginosa ATCC 27853, E. coli АТСС 25922 и B. cereus ATCC 10704 могут давать слабый рост в начале штриха при посеве бактериологической петлей из колоний, при этом изменения цвета среды не происходит.
В ходе исследований показано, что разработанная питательная среда не уступает по ростовым и селективным свойствам импортному аналогу - Bile Esculin Azide Agar (HiMedia).
Канамицин-эскулин азидный агар в своем составе содержит (г/л): панкреатический гидролизат казеина -15,0, пептон сухой ферментативный - 5,0, дрожжевой экстракт - 5,0 натрий хлористый - 5,0, натрия азид - 0,5, эскулин - 1,0, железо лимонноам-
миачное - 0,5, натрий лимоннокислый - 1,0, агар бактериологический - (10,0±2,0), канамицин - 0,02. Селективные свойства среды достигаются благодаря наличию в среде азида натрия и канамицина. Энтерококки, вырабатывающие фермент эскулиназу, гидролизуют эскулин до эскулетина (6,7-дигидроксикумарин) и глюкозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа, образуя фенольный комплекс железа, который окрашивает питательную среду вокруг колоний энтерококков в цвет от темно-коричневого до черного.
Солевой ТТХ агар. Согласно действующим нормативным документам по бактериологическому анализу воды (ГОСТ 34786-2021, ГОСТ 24849-2014, МУК 4.2.1884-04), для подтверждения энтерококков, выросших на среде выделения при посеве образцов воды, рекомендовано использование солевого агара с ТТХ. Солевой ТТХ агар выпускается только для B. cereus и не подходит для энтерококков. Описанный в нормативных документах процесс лабораторного приготовления солевого агара с ТТХ не позволяет получить стерильную питательную среду.
В ходе проведенных исследований определен состав, форма промышленного выпуска питательной среды в сухом виде и способ ее приготовления. Среда представляет собой набор реагентов, состоящий из сухой основы и ТТХ. Основа среды содержит (г/л): панкреатический гидролизат рыбной муки с твином 15,0, пептон ферментативный - 5,0, дрожжевой экстракт -5,0, глюкозу - 1,0, натрий хлористый - 65,0, агар бактериологический - (10,0±2,0), 2,-3,-5-трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) - 0,1. Набор реагентов «Солевой агар с ТТХ для энтерококков» состоит из 1 банки с основой и 1 коробки с добавкой - 2,-3,-5-трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) - 4 флакона.
Для приготовления питательной среды необходимо растворить навеску основы среды в дистиллированной воде, прокипятить и стерилизовать в автоклаве, после чего в стерильную основу внести стерильный раствор ТТХ, получаемый растворением в дистиллированной воде содержимого флакона с сухим ТТХ, перемешать и разлить в чашки Петри. Исследование изготовленных образцов солевого ТТХ агара с использованием расширенного набора штаммов показало, что разработанная питательная среда обеспечивает рост и характерное окрашивание культур E. faecalis ATCC 19433 и E. faecium ATCC 19434 и полное или частичное подавление роста штаммов E. coli ATCC 25922, B. cereus ATCC 10702, P. aeruginosa ATCC 27853 и S. aureus ATCC 25922.
Солевой агар с ТТХ для энтерококков предназначен для санитарно-бактериологических исследований с целью подтверждения принадлежности к роду Enterococcus микроорганизмов, выделенных на соответствующих питательных средах при анализе
образцов воды и других материалов. Совокупность компонентов (панкреатический гидролизат рыбной муки, пептон ферментативный и дрожжевой экстракт), входящих в состав солевого агара с ТТХ для энтерококков, обеспечивает питательные потребности энтерококков. Высокое содержание хлорида натрия действует как селективный агент, влияя на проницаемость мембран и осмотическое равновесие, обеспечивая рост солеустойчивых энтерококков. Агар является отвердителем питательной среды. Дифференцирующие свойства среды основаны на способности Е. /аесаНэ восстанавливать 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида в формазан, в результате колонии Е. /аесаНз окрашиваются в красный цвет, а колонии Е. /аесшт, который не обладает такой способностью, остаются беловатыми или окрашиваются в бледно-розовый цвет с темным центром. Для подтверждения наличия энтерококков в анализируемой пробе отбирают красные, беловатые, бледно-розовые с темным центром колонии, выросшие на средах выделения с ТТХ (например, энтерококкагар, сланец-Бартли). Затем производят посев отобранных колоний бактериологической петлей секторами на солевой агар с ТТХ с последующей инкубацией в течение 24-48 ч при температуре (36±1) °С. Энтерококки на среде дают равномерный нежный рост на протяжении всего штриха: эн-
терококки, восстанавливающие ТТХ, например, Е. /аесаНз - красного цвета, Е. /аесшт, Е.Литат и др. -беловатого или бледно-розового цвета с темным центром. Другие бактерии на этой подтверждающей среде не растут, за исключением солеустойчивых микроорганизмов, в частности стафилококков.
ВЫВОДЫ
При анализе нормативно-методических документов по микробиологическому анализу качества воды выявили недостаток коммерческих питательных сред, необходимых для обнаружения и подтверждения энтерококков методом мембранной фильтрации. Разработанные в рамках программы импортозамещения питательные среды для выявления и подтверждения энтерококков удовлетворяют требованиям стандартов. Организация отечественного производства питательных сред позволяет обеспечить ими лаборатории, осуществляющие микробиологический контроль качества и безопасности воды.
Работа выполнена в рамках отраслевой программы Роспотребнадзора.
ЛИТЕРАТУРА
1. Питьевая вода. Информационный бюллетень ВОЗ. 15 июня 2019. [Drinking water. WHO newsletter. June 15, 2019. (In Russ)]. https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/drinking-water
2. Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания: СанПиН 1.2.3685-21. Утверждены постановлением Главного санитарного врача РФ от 28 января 2021 г. №2 и введены в действие 01.03.2021 г. [Hygienic standards and requirements for ensuring the safety and (or) harmlessness of environmental factors for humans: SanPiN 1.2.3685-21. Approved by the resolution of the Chief Sanitary Doctor of the Russian Federation dated January 28, 2021 №2 and put into effect on 01.03.2021.(In Russ)].
3. Byappanahalli M.N., Nevers M.B, Korajkic A., et al. Enterococci in the environment. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2012; 76 (4): 685-706. doi: 10.1128/MMBR.00023-12
4. Rodrigues C., Cunha M.A. Assessment of the microbiological quality of recreational waters: indicators and methods. Euro-Mediterr. J. Environ. Integr. 2017; 2, 25 doi.org/10.1007/s41207-017-0035-8
5. TeixeiraL.M. andMerquior V.L.C. Enterococcus. In: De Filippis, I. and McKee, M.L., Eds., Molecular Typing in Bacterial Infections, Springer Science Business Media, New York, 2013; 17-26. dx.doi.org/10.1007/978-1-62703-185-1_2
6. Фёдорова А.В., Клясова Г.А., Фролова И.Н. и др. Антибиотикорезистентность Enterococcusfaecium и Enterococcus faecalis, выделенных из гемокультуры от больных с опухолями системы крови, в разные периоды исследования. Онкогематология. 2021; 16 (1): 54-63. [Fedorova A.V., Klyasova G.A., Frolova I.N., et al. Antimicrobial resistance of Enterococcus faecium and Enterococcus faecalis, isolated from blood culture of patients with hematological malignancies during different study periods. Oncohematology. 2021; 16 (1): 54-63. (In Russ)]. doi.org/10.17650/1818-8346-2021-16-1-54-63
7. R^ickova, M., Vitezova, M., & Kushkevych, I. The characterization of Enterococcus genus: resistance mechanisms and inflammatory bowel disease. Open Med. (Wars). 2020; 15: 211-224. doi: 10.1515/med-2020-0032
8. Вода питьевая. Методы определения общего числа микроорганизмов, колиформных бактерий, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и энтерококков: ГОСТ 34786-2021. Дата введения 01.01.2022. [Drinking water. Methods
for determining the total number of microorganisms, coliform bacteria, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and enterococci: GOST 34786-2021. Date of introduction 01.01.2022. (In Russ).]
9. Качество воды. Обнаружение и подсчет кишечных энтерококков. Часть 2. Метод мембранной фильтрации: ГОСТ ISO 7899-2—2018 (ISO 7899-2:2000). 2018; 14 с. [Water quality. Detection and counting of intestinal enterococci. Part 2. Method of membrane filtration: GOST ISO 7899-2-2018 (ISO 7899-2:2000). 2018; 14 p. (In Russ)].
10. Системы жизнеобеспечения на железнодорожном подвижном составе. Часть 6 Методы гигиенической оценки системы водоснабжения: ГОСТ 33463.6—2016. Дата введения 01.01.2017. [Life support systems on railway rolling stock. Part 6 Methods of hygienic assessment of the water supply system: GOST 33463.6—2016. Date of introduction 01.01.2017. (In Russ)].
11. Вода. Методы санитарно-бактериологического анализа для полевых условий: ГОСТ 24849-2014 Дата введения 01.01.2016. [Water. Methods of sanitary and bacteriological analysis for field conditions: GOST 24849-2014 Date of introduction 01.01.2016. (In Russ)].
12. Методы санитарно-микробиологического и санитарно-паразитологического анализа прибрежных вод морей в местах водопользования населения: Методические указания. Дата введения: 29.07.2011. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 114 с. [Methods of sanitary-microbiological and sanitary-parasitological analysis of coastal waters of the seas in places of water use of the population: Methodological guidelines. Date of introduction: 29.07.2011. Moscow: Federal Center for Hygiene and Epidemiology of Rospotrebnad-zor. 114 p. (In Russ)].
13. Guidance on the use of Enterococci as an Indicator in Canadian Drinking Water Supplies. Ottawa: Ontario Health Canada, 2020; 25 р.
14. Handbook of Culture Media for Food and Water / Eds. J.E.L. Corry, G.D.W. Curtis, R.M. Baird. 3rd Edition, 2012; 1036 p.
15. APHA. Standard methods for the examination of water and wastewater, 22nd edition. Washington: American Public Health Assn, 2012; 22 p.
Поступила в редакцию журнала 17.11.2023 Принята к печати: 24.11.23
i ^
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова
Научно-исследовательский институт медицинской микологии им. П.Н.Кашкина
Адрес редакции: 194291, Санкт-Петербург, ул. Сантьяго-де-Куба, 1/28. Тел.: (812) 303-51-45, факс (812) 510-62-77 E-mail: mycobiota@szgmu.ru, elena.gukova@szgmu.ru. Заведующая редакцией: Е.С.Гукова.
North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov Kashkin Research Institute of Medical Mycology
Address of Editorial Office: Santiago-de-Cuba str., 1/28, Saint Petersburg, 194291, RUSSIA. Tel.: (812) 303-51-45, Fax (812) 510-62-77 E-mail: mycobiota@szgmu.ru, elena.gukova@szgmu.ru. Manager of Editorial Office: E.S.Gukova
«ПРОБЛЕМЫ МЕДИЦИНСКОЙ МИКОЛОГИИ»
Per. № 77-1396 от 20.12.1999 г. ISSN 1999-6780 Журнал зарегистрирован ВАК, с 2005 г. включен в Российский индекс научного цитирования (РИНЦ), в реферативный журнал и базы ВИНИТИ. Сведения о журнале ежегодно публикуются в международной системе по периодическим и продолжающимся изданиям
«Ulrich's Periodicals Directory». Оригинал-макет— НИИ «Медицинской микологии им. П. Н. Кашкина СЗГМУ». Подписано в печать 20.12.2023 г.
