CC BY
62
Разработка новых подходов к стандартизации сбора «Комфорт»
А.А. Шмыгарёва, к.фарм.н., Оренбургский ГМУ
Сбор «Комфорт», активно применяемый в настоящее время для стимуляции выделительной системы организма, обладает слабительным, противовоспалительным и бактерицидным действием, расслабляет гладкую мускулатуру внутренних органов, устраняет спазмы. В составе сбора плоды жостера, трава цикория, будры плющевидной трава, листья сенны, плоды, корневище и корень конского щавеля [1—6].
Определено, что слабительное действие сбора «Комфорт» обусловлено наличием антраценпроиз-водных, в том числе франгулином А и В.
На сегодняшний момент не существует методики количественного определения антраценпроизвод-ных в сборе «Комфорт».
Ранее нами была разработана методика количественного определения суммы антраценпроиз-водных в плодах жостера слабительного, предусматривающая пересчёт содержания анализируемых веществ на франгулин А, являющийся домини-
рующим антрагликозидом данного растения [6]. Учитывая то обстоятельство, что плоды жостера слабительного входят в состав сбора «Комфорт», нами сделано предположение о возможности применения разработанных подходов к стандартизации плодов жостера слабительного к сбору «Комфорт».
Цель настоящих исследований — разработка методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт».
Объекты и методы. Объектом исследования служило сырьё промышленного образца сбора «Комфорт» «ООО «Травы Башкирии» (Республика Башкортостан) (2013 г.), листьев сенны («ОАО «Красногорсклексредства») (2013 г.), образцы плодов жостера слабительного, собранные в период плодоношения (август — сентябрь 2012—2013 гг.) в Оренбургской области, г. Бузулук, близ р. Сакмары.
Электронные спектры измеряли на спектрофотометрах «Specord 40» (Analytik Jena) и «UNIC0-2800» в кюветах с толщиной слоя 10 мм.
Результаты исследований. Ранее с целью обоснования методических подходов к стандарти-
зации плодов жостера слабительного проведено исследование по выделению веществ из его сырья [6]. Было установлено, что доминирующими компонентами являются 3-О-рутинозид рамнетина (флавоноид), 6-О-а^-рамнопиранозид франгула-эмодина (франгулин А) и 6-О-р-О-апиофуранозид франгула-эмодина (франгулин В) (антраценпроиз-водные), причём было обосновано использование в методиках анализа плодов жостера слабительного франгулина А в качестве стандартного вещества [6]. В ходе разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт» изучены УФ-спектры растворов водно-спиртовых извлечений из данного сбора, растворов водно-спиртовых извлечений из плодов жостера слабительного, а также раствора франгулина А. Кроме того, изучены в сравнительном плане растворы водно-спиртовых извлечений из листьев сенны, корневищ и корня щавеля, входящих в состав сбора «Комфорт».
При исследовании щёлочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из сбора «Комфорт» в электронном спектре обнаруживается характерный максимум поглощения при длине 524±2 нм (рис. 1). Сравнительное исследование УФ-спектров щёлочно-аммиачных растворов водно-спиртовых извлечений из плодов жостера слабительного, листьев сенны и корней и корневищ щавеля конского показало (рис. 2—5), что в случае обоих видов сырья имеет место вклад в кривую поглощения веществ исследуемых видов сырья в кривую поглощения щёлочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из сбора «Комфорт». Однако в наибольшей степени корреляция наблюдается со щёлочно-аммиачным раствором водно-спиртового извлечения из плодов жостера слабительного (рис. 4). Ранее нами было показано, что одним из доминирующих антраценпроизвод-ных из плодов жостера слабительного является франгулин А [6]. Следовательно, как и в случае
плодов жостера слабительного, в качестве аналитической длины волны может быть использовано значение 524 нм, а стандартным образцом может служить доминирующий антрагликозид франгулин А, причём в случае отсутствия данного стандарта в расчётной формуле может быть использовано теоретическое значение удельного показателя поглощения (Ej%M ) - 180.
С целью разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных нами определены оптимальные условия экстракции антраценпроизводных из сбора «Комфорт»: экстра-гент 40-процентный этиловый спирт; соотношение «сырьё — экстрагент» — 1:50; время экстракции — извлечение на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин.
Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт» заключается в следующем.
Аналитическую пробу сбора измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г измельчённого сбора (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 40-процентного этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарированных весах с точностью до ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем колбу закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр («красная» полоса) и охлаждают в течение 30 мин. Испытуемый раствор готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора до метки щёлочно-аммиачным раствором (испытуемый раствор А). Испытуемый раствор А помещают в колбу ёмкостью 50 мл и нагревают в течение 15 мин. на
\ 1 2
2 50 3 ]0 3 50 4 00 4 50 5 00 5 50 В 00 G 50 [nm]
Рис. 1 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения сбора «Комфорт (1), щё-лочно-аммиачного раствора сбора «Комфорт (2)
Рис. 2 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения корней щавеля конского (1), щёлочно-аммиачного раствора корней щавеля конского (2)
[А]
де®1 Ц«
125
Щ
1.73 1:50.75 0.5
0Й5'
?
4 4
Ч га
Рис. 3 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения листьев сенны (1), щёлоч-но-аммиачного раствора листьев сенны (2)
л
1
У \
л. \ 1 /
щ \ / /
\ ^ X \
и X \ --- ?-г--
Рис. 4 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения плодов жостера слабительного (1), щёлочно-аммиачного раствора плодов жостера слабительного (2)
Метрологические характеристики методики
количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт»
/ X 5 Р, % Г (Р, /) ±X Е, %
10 3,19 0,0582 95 2,23 ±0,130 ±4,07
.Йо: [пт]
Рис. 5 - Электронные спектры исходного раствора франгулина А (1), щёлочно-аммиачного раствора франгулина А (2)
кипящей водяной бане с обратным холодильником. После охлаждения измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 524 нм. В качестве раствора сравнения используют воду очищенную.
Содержание суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт» в пересчёте на франгулин А и абсолютно сухое сырьё в процентах (X) вычисляют по формуле:
Б•50•50 100
X — -
т 180 • (100 - W)
где Б — оптическая плотность испытуемого раствора;
Ж — потеря в массе при высушивании в процентах;
180 — удельный показатель поглощения РСО франгулина А.
Метрологические характеристики методики количественного определения содержания суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт» представлены в таблице. Результаты статистической обработки проведённых опытов свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения суммы антра-ценпроизводных в сборе «Комфорт» с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,07%.
С использованием разработанной методики нами проанализирован ряд образцов сбора «Комфорт» и при этом определено, что содержание суммы антраценпроизводных варьирует от 3,00 до 3,19%, что позволяет рекомендовать в качестве нижнего предела для исследуемого сбора содержание суммы антраценпроизводных не менее 3,0%.
Выводы. 1. Разработаны методологические подходы к стандартизации сбора «Комфорт», заключающиеся в определении содержания суммы антраценпроизводных и использовании в методиках анализа стандартного образца франгулина А.
2. Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в пересчёте на франгулин А в сборе «Комфорт» с использованием 40-процентного этилового спирта в качестве экстрагента и УФ-спектроскопии при аналитической длине волны 524 нм.
3. Содержание суммы антраценпроизводных в сборе «Комфорт» варьирует от 3,00 до 3,19%.
Литература
1. Государственный реестр лекарственных средств. Офиц. изд. Т. 1. М., 2008. 1398 с.
2. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов. Изд. 2-е, перераб. и доп. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. 1239 с.
3. Куркин В.А. Основы фитотерапии: уч. пос. для студентов фармацевтических вузов. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. 963 с.
4. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: учебник. М.: Медицина, 2002. 656 с.
5. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование; семейство Rutaceae Elaeagnaceae. Л.: Наука, 1988. С. 182-186.
6. Куркин В.А., Шмыгарёва А.А. Разработка новых подходов к стандартизации плодов жостера слабительного // Фармация. 2012. Т. 60. № 6. С. 10-14.
