CC BY
91
Разработка новых подходов к стандартизации сбора «Для очищения организма»
В.А. Куркин, д.ф.н., профессор, ГБОУ ВПО Самарский ГМУ; А.А. Шмыгарёва, к.ф.н., А.Н. Саньков, к.м.н., ГБОУ ВПО Оренбургский ГМУ
Существование большого числа сборов, фиточаёв и биологически активных добавок к пище, представляющих собой многокомпонентные смеси растительного сырья, делает всё более актуальной проблему определения их безопасности и подлинности, а также разработки достоверных критериев идентификации [1].
Необходимость определения незначительных концентраций действующих веществ на фоне сложного состава БАД предъявляет высокие требования к селективности и чувствительности методов анализа.
Особенно актуальным является идентификация индивидуальных биологически активных веществ с помощью современных хроматографических и оптических методов в случае оценки качества и стандартизации продуктов, включающих многокомпонентное растительное сырьё.
Сбор «Для очищения организма», активно применяемый в настоящее время для стимуляции выделительной системы организма, обладает слабительным, противовоспалительным и бактерицидным действием, расслабляет гладкую мускулатуру внутренних органов, устраняет спазмы. В его состав входят плоды шиповника коричного и жостера слабительного (крушины слабительной), листья мяты перечной, корни солодки голой, листья стевии, трава тысячелистника обыкновенного, листья шалфея лекарственного, трава фиалки полевой и хвоща полевого, плоды можжевельника обыкновенного, трава зверобоя продырявленного, цветки ромашки аптечной и липы сердцевидной, листья кассии остролистной (сенны) [1—5].
Определено, что слабительное действие сбора «Для очищения организма» обусловлено наличием антраценпроизводных, в том числе франгулином А (жостер слабительный) и сеннозидами (кассия остролистная).
На сегодняшний момент не существует методики
количественного определения антраценпроизвод-ных в сборе «Для очищения организма».
Ранее нами была разработана методика количественного определения суммы антраценпроиз-водных в плодах жостера слабительного, предусматривающая пересчёт содержания анализируемых веществ на франгулин А, являющийся доминирующим антрагликозидом данного растения [6]. Учитывая то обстоятельство, что плоды жостера слабительного входят в состав сбора «Для очищения организма», нами сделано предположение о возможности применения разработанных подходов к стандартизации плодов жостера слабительного к этому сбору.
Цель настоящих исследований — разработка методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма».
Материалы и методы исследования. Объектом исследования служило сырьё промышленного образца сбора «Для очищения организма» ООО «Витачай»» (г. Тверь) (2013 г.), листьев сенны (ОАО «Красно-горсклексредства») (2013 г.), образцы плодов жостера слабительного, собранные в период плодоношения (август-сентябрь, 2012—2013 гг.) в Оренбургской области, г. Бузулук, близ реки Сакмары.
Электронные спектры измеряли на спектрофотометрах «Specord 40» (Analytik Jena) и «UNICO — 2800» в кюветах с толщиной слоя 10 мм.
Ранее с целью обоснования методических подходов к стандартизации плодов жостера слабительного было проведено исследование по выделению веществ из сырья данного растения [6]. Было установлено, что доминирующими компонентами являются 3-О-рутинозид рамнетина (флавоно-ид), 6-О-а^-рамнопиранозид франгула-эмодина (франгулин А) и 6-О-р-О-апиофуранозид франгула-эмодина (франгулин В) (антраценпроизводные), причём было обосновано использование в ме-
2.75 2.5 2.25
2
1.75 1.5 1.25
0.75 0.5 0.25
250 300 350 400 450 500 550 600 650 [™]
Рис. 1 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения сбора «Для очищения организма» (1), щёлочно-аммиачного раствора сбора «Для очищения организма» (2)
тодиках анализа плодов жостера слабительного франгулина А в качестве стандартного вещества [6]. В ходе разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма» изучены УФ-спектры растворов водно-спиртовых извлечений из данного сбора, растворов водно-спиртовых извлечений из плодов жостера слабительного, а также раствора франгулина А. Кроме того, изучены также в сравнительном плане растворы водно-спиртовых извлечений из листьев сенны, входящих в состав сбора.
Результаты исследований. При исследовании щёлочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из сбора «Для очищения организма» в электронном спектре обнаруживается характерный максимум поглощения при длине 524±2 нм (рис. 1). Сравнительное исследование УФ-спектров щёлочно-аммиачных растворов водно-спиртовых извлечений из плодов жостера слабительного и листьев сенны показало (рис. 2), что в случае обоих видов сырья имеет место вклад в кривую поглощения веществ исследуемых видов сырья в кривую поглощения щёлочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из сбора (рис. 1), однако в наибольшей степени корреляция наблюдается со щёлочно-аммиачным раствором водно-спиртового извлечения из плодов жостера слабительного (рис. 3). Ранее нами было показано, что одним из доминирующих антраценпроизводных из плодов жостера слабительного является франгулин А [6]. Следовательно, как и в случае плодов жостера слабительного, в качестве аналитической длины волны может быть использовано значение 524 нм, а стандартным образцом может служить доминирующий антрагликозид — франгулин А (рис. 4). В случае отсутствия данного стандарта в расчётной формуле может быть использовано теоретическое значение удельного показателя поглощения (Е™) - 180.
\ V
4
и-
■25р 300 350 400 450 500 550 S00 .650; \М
Рис. 2 - Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения листьев сенны (1), щёлоч-но-аммиачного раствора листьев сенны (2)
Рис. 3 - Электронные спектры раствора водно-спир- Рис. 4 - Электронные спектры исходного раство-
тового извлечения плодов жостера слаби- ра франгулина А (1), щёлочно-аммиачного
тельного (1), щёлочно-аммиачного раствора раствора франгулина А (2) плодов жостера слабительного (2)
С целью разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных нами определены оптимальные условия экстракции антраценпроизводных из сбора «Для очищения организма»»: экстрагент 40-процентный этиловый спирт; соотношение сырьё экстрагент — 1:50; время экстракции — извлечение на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин.
Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма» включает измельчение аналитической пробы сбора до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г измельчённого сбора (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 40-процентного этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарированных весах с точностью до +0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем колбу закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр («красная» полоса) и охлаждают в течение 30 мин. Испытуемый раствор готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора до метки щёлочно-аммиачным раствором (испытуемый раствор А). Испытуемый раствор А помещают в колбу ёмкостью 50 мл и нагревают в течение 15 мин. на кипящей водяной бане с обратным холодильником. После охлаждения измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 524 нм. В качестве раствора сравнения используют воду очищенную.
Содержание суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма» в пересчёте на
франгулин А и абсолютно сухое сырьё в процентах (X) вычисляют по формуле:
D•50•50 100
X —-,
m 180 • (100 - W)
где D — оптическая плотность испытуемого раствора;
W — потеря в массе при высушивании в процентах;
180 — удельный показатель поглощения РСО франгулина А.
Метрологические характеристики методики количественного определения содержания суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма» представлены в таблице. Результаты статистической обработки проведённых опытов свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения суммы антраценпроизводных в сборе с доверительной вероятностью 95% составляет ±1,20% (табл.).
Метрологические характеристики методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма»
f X S P, % t (P, f) ДХ E, %
10 2,39 0,0129 95 2,23 ±0,0287 ±1,20
С использованием разработанной методики нами проанализирован ряд образцов сбора «Для очищения организма» и при этом определено, что содержание суммы антраценпроизводных варьирует от 2,00 до 2,39%, что позволяет рекомендовать в качестве нижнего предела для исследуемого сбора содержание суммы антраценпроизводных не менее 2,0%.
Выводы. Разработаны методологические подходы к стандартизации сбора «Для очищения организма», заключающиеся в определении со-
держания суммы антраценпроизводных и использовании в методиках анализа стандартного образца франгулина А.
Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в пересчёте на франгулин А в сборе «Для очищения организма» с использованием 40-процентного этилового спирта в качестве экстрагента и УФ-спектроскопии при аналитической длине волны 524 нм.
Установлено, что содержание суммы антраценпроизводных в сборе «Для очищения организма» варьирует от 2,00 до 2,39%.
Литература
1. Государственный реестр лекарственных средств. Т. 1. Официальное издание. М., 2008. 1398 с.
2. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов. Изд. 2-е, перераб. и доп. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. 1239 с.
3. Куркин В.А. Основы фитотерапии: учебное пособие для студентов фармацевтических вузов. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. 963 с.
4. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: учебник. М.: Медицина, 2002. 656 с.
5. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование; семейство Rutaceae Elaeagnaceae. Л.: Наука, 1988. С. 182-186.
6. Куркин В.А., Шмыгарева А.А. Разработка новых подходов к стандартизации плодов жостера слабительного // Фармация. 2012. Т. 60. № 6. С. 10-14.
