CC BY
92
УДК 615.21:616-053.2
ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ПОМОЩИ ДЕТЯМ С ЭПИЛЕПСИЕЙ
В УСЛОВИЯХ СТАЦИОНАРА
© Спичак И.В., Вареных Г.В.
Кафедра фармацевтической технологии, управления и экономики здравоохранения фармацевтического факультета Белгородского государственного университета, Белгород
E-mail: Spichak@bsu .edu.ru
В работе представлены результаты исследования лекарственной помощи детям с эпилепсией в условиях стационара, основанного на данных контент-анализа 704 историй болезней пациентов. В ходе изучения определен социально-демографический портрет ребенка, страдающего эпилепсией; осуществлен структурный и сегментационный анализ ассортимента лекарственных средств (ЛС), назначаемых в стационаре, проведена экспертная оценка рациональности ассортимента высококвалифицированными врачами-неврологами; сформирован формулярный список ЛС, осуществлен нормативно-стоимостной анализ курса лечения и определен объем финансирования лекарственной помощи детям с эпилепсией в ЛПУ.
Ключевые слова: эпилепсия, фармакоэкономические исследования, формулярный список, лекарственная помощь.
THE OPTIMIZATION OF MEDICINAL HELP FOR CHILDREN WITH EPILEPSY IN HOSPITAL
Spichak I.V., Varenykh G. V.
Department of Pharmaceutical Technology, Economic & Organization of the Healthcare of the Pharmaceutical Faculty of the Belgorod State University, Belgorod In work we have results of researches pharmacological attention for children with epilepsy in hospital. We analyzed 704 patient medical records. In research we formed sociodemographic image of baby with epilepsy; we analyzed structure of assortment medicaments in hospital; we made expert judgement of rationality assortment medicaments by highly skilled neurologists. Finally we formed formulary and normative of value for course of treatment. We prognosticated financing of pharmaceutical support for children with epilepsy in hospital.
Keywords: epilepsy, researches of pharmacoeconomics, formulary, pharmacological attention.
Среди всех заболеваний детей в Российской Федерации болезни нервной системы занимают 7-е ранговое место, а среди причин, приведших к инвалидности - 3-е, уступив лишь врожденным аномалиям развития, психическим расстройствам и расстройствам поведения. Эпилепсия является одним из наиболее тяжелых заболеваний нервной системы. Ее распространенность составляет 5-10/1000 чел., не менее одного припадка в течение жизни переносят 5,0% населения, у
20,0 - 30,0% больных заболевание является пожизненным. Частота встречаемости эпилепсии в детском возрасте составляет 3-6 случаев на 1000 детей и увеличивается с возрастом. В настоящее время в России 800 тыс. детей и подростков страдают активной эпилепсией [1]. В Белгородской области распространенность эпилепсии составляет 3,3 случая на 1000 детей, из них свыше 30,0 % являются инвалидами детства [3].
Наиболее оптимальным способом лечения данной формы нозологии является фармакотерапия. Она предусматривает использование значительного количества лекарственных препаратов (ЛП). В настоящее время существует стандарт лечения эпилепсии, разработанный в 1995 г., но с появлением на фармацевтическом рынке новых эффективных лекарственных средств он нуждается в значительной коррекции. В связи с этим актуальным является проведение фармакоэкономи-ческого исследования лекарственной помощи детям с эпилепсией, результатом которого является разработка формулярного списка ЛП оптимального по критерию "фармакоте-рапевтическая эффективность - цена" [2].
Целью работы является оптимизация лекарственной помощи детям с эпилепсий в условиях стационара на примере неврологического отделения ГУЗ "Детская областная больница" г. Белгорода (ГУЗ "ДОБ").
Объекты исследования: статистическая
отчетность неврологического отделения ГУЗ "ДОБ" г. Белгорода за 2006-2008 гг.; 704 истории болезней детей, страдающих эпилепсией; 25 анкет экспертной оценки врачей-специалистов, прайс-листы фирм-
поставщиков ЛС.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Контент-анализ, методы группировки, ранжирования, корреляционно-регрессионный анализ, социологические методы (экспертные оценки, анкетирование), фармако-экономические (АВС-анализ, УЪ^анализ).
Для реализации цели разработана концепция исследования, включающая 8 этапов:
1) определение социально-демографического портрета ребенка, страдающего эпилепсией;
2) формирование информационного массива ЛС; 3) структурный анализ ассортимента ЛС;
4) сегментационный анализ ассортимента;
5) экспертная оценка рациональности ассортимента в условиях детского стационара;
6) формирование формулярного списка ЛС;
7) нормативно-стоимостной анализ курса лечения; 8) определение объема финансирования лекарственной помощи детям с эпилепсией в ЛПУ.
На начальном этапе исследования осуществлен контент - анализ 704 историй болезней пациентов неврологического отделения ГУЗ "ДОБ" г. Белгорода, находившихся на лечении в 2006-2008 гг.
Определен социально-демографический портрет пациента неврологического отделения ГУЗ "ДОБ" г. Белгорода. Это - мальчик (59,7%), в возрасте от 10 до 14 лет (38,0%), проживающий в полной семье (68,4%), житель города (53,6%); находившийся в неврологическом отделении стационара ГУЗ "ДОБ" в среднем 14 дней с диагнозом «эпилепсия», с парциальным типом приступов (92,7 %), направленный в стационар из ГУЗ "Детская областная поликлиника" (68,6%) с первично установленным диагнозом (94,0%).
На основе контент-анализа 704 истории болезней детей с эпилепсией - пациентов неврологического отделения ГУЗ "ДОБ" г. Белгорода в 2006-2008 гг. сформирован информационный массив лекарственных средств (ЛС), который включает 56 наимено-
ваний препаратов из 22 фармакотерапевтиче-ских групп согласно АТХ классификации.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Установлено, что структуру ассортимента ЛС формируют в основном 9 фармакотера-певтических групп (64,2%). Первую ранговую позицию занимают противоэпилептиче-ские лекарственные препараты - 21,4%, на втором месте - психолептики и препараты для лечения функциональных расстройств со стороны ЖКТ - по 7,0%, далее - психостимуляторы и ноотропные препараты, анальгетики и антипиретики, диуретики, витамины и антигистаминные препараты для системного применения - по 5,4%. На долю "Прочих" ЛС приходится 35,8% (табл.).
Структуру потребления в основном формируют 6 фармакотерапевтических групп с долей 93,48% от общего объема потребления. Первое место также занимают противоэпи-лептические лекарственные препараты -56,1%, на втором - комбинированные ЛС для лечения заболеваний печени и желчевыводящих путей - 12,9 %, на третьем - психостимуляторы и ноотропные препараты - 9,2% и т.д. На долю "Прочих" ЛС приходится 6,4%.
В ходе детального внутригруппового анализа установлено, что группа противоэпилеп-тических средств включает практически все зарегистрированные в РФ препараты, как Де-пакин-хроно, Депакин энтерик, Конвулекс, Фенобарбитал, Кеппра, Топамакс и т.д. Однако свыше 35,0% в её формировании занимают только 2 ЛС - Депакин-хроно и Депа-кин энтерик. Остальные ЛП в данной группе представлены значительно меньшим количеством единиц потребления, так как применяются в качестве дополнительной терапии эпилепсии или при более сложных состояниях в комбинированной терапии.
В группе "Комбинированные препараты для лечения заболеваний печени и желчевыводящих путей" зарегистрирован только один препарат - Эссенциале форте Н в капсулах. Он является сопутствующим ЛС при назначении препаратов Депакин-хроно, Депакин энтерик, Конвулекс и т.д., которые вызывают необратимые метаболические процессы в печени.
Таблица
Структура ассортимента и потребления ЛС для лечения детей с эпилепсией ____________________________в условиях ^ стационара___________________________________
№ п/п Наименование фармакотерапевтической группы АТХ группа Ассортимент Потребление
% ранг % ранг
1. Противоэпилептические N03 21,4 1 56,1 1
2. Психолептики N05 7,0 2 - -
3. Препараты для лечения функциональных расстройств со стороны ЖКТ А03 7,0 2 - -
4. Психостимуляторы и ноотропные препараты Ш6Б 5,4 3 9,2 3
5. Анальгетики и антиперетики Ш2Б 5,4 3 - -
6. Диуретики С03 5,4 3 - -
7. Витамины А11 5,4 3 - -
8. Антигистаминные препараты для системного применения Я06 5,4 3 - -
9. Препараты для лечения ран и язв Б03 - - 6,9 4
10. Минеральные добавки А12 - - 6,7 5
11. Анксиолитики Ш5В 1,8 4 1,8 6
12. Комбинированные препараты для лечения заболеваний печени и желчевыводящих путей А05С 12,9 2
13. Прочие препараты 35,8 6,4
Всего 100,0 100,0
Группу "Психостимуляторы и ноотроп-ные препараты", занявшую третью ранговую позицию, формируются такие препараты, как Глицин, Винпоцетин, Фенибут.
На следующем этапе исследования осуществлен сегментационный анализ ассортимента.
В ходе АВС-анализа по каждому ЛС информационного массива рассчитан коэффициент использования (Ки). Его значения варьировали от 26,30 до 0,01. Полученный массив Ки был подвергнут ранжированию по степени убывания с целью определения границ групп потребления ЛС и сегментирования ассортимента. Для получения дополнительных аргументов при установлении оценочных критериев групп потребления проведен графический анализ ранжированного ряда в виде гистограмм распределения. В ходе исследования выявлено, что группу высокого спроса (А) с границами Ки от 26,3 до 5,4 сформировали 8 ЛС, на долю которых приходится 14,3 % от общего объема потребления. Это такие препараты, как Депакин-хроно, Эс-сенциале Н форте, Депакин энтерик 300, Винпоцетин и т.д.
Группа среднего потребления (В) занимает 55,3 % от общего объема потребления и
включает 24 ЛС с Ки от 2,17 до 0,15 (Кеппра, Топамакс, Фенибут, Суксилеп и т.д.).
Группу ЛС низкого потребления (С) формируют единичные в назначении или случайные ЛП (13 препаратов) с Ки от 0,14 до 0,01, на долю которых приходится 28,6 % в общем объеме потребления.
Для изучения рациональности назначения ЛС в неврологическом отделении ЛПУ на следующем этапе исследования осуществлена экспертная оценка ассортимента ЛС высококвалифицированными врачами-невроло-гами (25 человек), рекомендованными департаментом здравоохранения в качестве экспертов. Определен обобщенный портрет врача-эксперта. Это - врач-невролог со стажем работы более 20 лет или от 15 до 20 лет (40,0%), имеющий высшую квалификационную категорию (60,0%), со средним коэффициентом компетентности 0,87, с высокой степенью знакомства с ЛС, применяемыми при терапии эпилепсии, в основе экспертного решения которого основными аргументами служили практический опыт и глубокие теоретические знания.
Экспертная оценка осуществлялась по специально разработанной анкете, включающей 39 наименований ЛС А и В групп АВС-анализа.
Для ранжирования ЛС по степени рациональности назначения в стационаре экспертам были предложены следующие показатели (в баллах):
2.0 - ЛС оптимальное по фармакотерапев-тическому эффекту и цене;
1.0 - ЛС резерва (замена при отсутствии основного);
0.0 - нет необходимости в ЛС.
Возврат анкет составил 100%.
В ходе обработки результатов анкетирования по каждому ЛС определена " средневзвешенная оценка" с учетом полученного оценочного балла и коэффициента компетентности эксперта, значения которых варьировали от 2,0 до 0,5. Для определения согласованности мнений экспертов по всей номенклатуре препаратов для ДДУ и Ш рассчитан коэффициент корреляции Киёег-ШсЬагёБОп, значение которого составило 0,92, что свидетельствует о существующей взаимосвязи мнений экспертов.
На основе полученных данных осуществлено сегментирование ассортимента на группы: жизненно важные (обязательные в наличии в ЛПУ) (V), препараты замены или резерва (Е) и необязательные для наличия (К). Так, группу "V" сформировали препараты со "средневзвешенной" оценкой 2,0 - 1,81, отвечающие требованию фармакотерапевтиче-ской и экономической целесообразности. Ее составили 3 препарата: Депакин - хроно, Де-пакин энтерик, Конвулекс.
Группу "Е" сформировали 13 ЛП. В нее вошли препараты со "средневзвешенной" оценкой 1,76 - 1,55, которые назначаются в комплексе с основными в качестве дополнительной терапии (Эссенциале, Мексидол, Ак-товегин, Фенибут и т.п.), а также новые и дорогостоящие противоэпилептические препараты - Ламиктал, Кеппра, Топамакс и т.п.
Группу "К" составили ЛС "средневзвешенной" оценкой менее 1,5, имеющие высокую стоимость и/или недостаточную эффективность. В нее вошло 19 препаратов.
На следующем этапе сформирован формулярный список ЛС для лечения детей, страдающих эпилепсией с учетом следующих подходов:
1. В основу должны быть положены ЛС, отобранные по результатам АВС- и УЪК-анализов по критериям: безопасность для де-
тей, фармакотерапевтическая эффективность, ценовая оптимальность.
2. Должна быть учтена необходимость комплексной терапии эпилепсии, включающей препараты следующих фармакотерапев-тических групп: противоэпилептические ЛС (препараты вальпроевой кислоты), гепато-протекторы (эссенциалле Н форте), транквилизаторы, ноотропы, комплексные витаминные препараты, нейропротекторы.
В результате сформирован формулярный список ЛС, включающий 9 препаратов основной терапии и 8 препаратов замены.
На заключительном этапе исследования осуществлен нормативно-стоимостной анализ разработанного формулярного списка, для чего определен средний расход препаратов на курс лечения одного ребенка в условиях стационара. С этой целью по прайс-листам поставщиков проведен скрининг цен на ЛС на белгородском фармацевтическом рынке, выявлены средние цены на исследуемые препараты. Определена средняя стоимость курса лечения одного ребенка с эпилепсией в неврологическом отделении (10 дней), которая составила 1561,35 руб.
С помощью корреляционно-регрессионного метода осуществлено прогнозирование численности пациентов с эпилепсией в неврологическом отделении ГУЗ «ДОБ» в 2009 г. - 352 ребенка. Определен необходимый объем финансирования их лекарственного обеспечения на 2009 г., который составил 1967550,82 руб.
Результаты исследования внедрены в деятельность неврологического отделения МУЗ "ДОБ" г. Белгорода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аванцини Дж. Клинические формы и классификация эпилепсии // Журнал неврологии и психиатрии. - 2005. - №8. - С. 59-62.
2. Дремова Н.Б., Овод А.И., Солянина В.А. Методические подходы к определению суммы денежных средств на лекарственное обеспечение больных в условиях стационара // Экономический вестник фармации. - 2004. -№ 7. - С. 41-42.
3. Основные показатели деятельности лечебно -профилактических учреждений и состояния здоровья населения Белгородской области за 2008 год // Сборник ОГУЗ "Медицинский информационно - аналитический центр". -г. Белгород. - 2008. - 293 с.
УДК 615.2.001.57:541.1(021) РАЗРАБОТКА НООТРОПНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ КОМПЛЕКСОВ ДИМЕФОСФОНА С СОЕДИНЕНИЯМИ ЛИТИЯ
© Мельникова Н.Б., Гуляев И.В., Волков А.А., Гаврилова С.А.
Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии Нижегородской государственной медицинской академии, Нижний Новгород
E-mail: melnikow@rol.ru. chem-pharm@vandex.ru
Методами ИК- и УФ-спектроскопии и ВЭЖ хроматографии показано, что взаимодействие димефосфо-на с соединениями лития приводит к донорно-акцепторным комплексам в водном растворе. Изучены ноо-тропное дейтвие, общая двигательная активность, ориентировочно-исследовательская активность крыс линии Wistar при применении комплексов димефосфона с лития цитратом. Установлен ноотропный эффект аналогичный пирацетаму.
Ключевые слова: димефосфон, соединения лития, комплексы димефосфона с лития цитратом, ноо-тропный эффект, эксперимент на крысах.
DEVELOPMENT OF NOOTROPIC MEDICINALS ON BASE OF COMPLEXES OF DIMEPHOSPHONE
WITH LITHIUM COMPOUNDS Melnikova N.B., Gulyaev I.V., Volkov A.A., Gavrilova S.A.
Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy of the Nizhniy Novgorod State Medical Academy, Nizhniy Novgorod
It has been shown, that the interaction of dimephosphone with lithium compounds leads to donor-acceptor complexes in aqueous solution by using IR - and UV-spectrometry, HL chromatography. The form of aqueous solution of nootropic medicinals was developed on base of dimephosphone and lithium citrate. Examination of the nootropic action carries out in the experiments by Wistar lines in white rats. The influence of medicinal on an acquisition of conditional reflexes (passive and active) depends on the dose by characterization of cognitive-mental facility, behavior activity and emotional condition. It has been estimated the analogous nootropic effect as Pyrace-tam.
Keywords: dimephosphone, lithium compounds, complexes of dimephosphone with lithium citrate, nootropic effect, experiment by rats.
Традиционными ноотропными препаратами являются циклические аналоги гамма-аминомасляной кислоты или ГАМК-ергические вещества. В случае заболеваний, сопровождающихся синдромом психомоторной расторможенности, обычные средства (пирацетам, пиридитол, центрофеноксин, глютаминовая кислота, аминалон) нередко приводят к усилению гипердинамического синдрома, появлению эпилептических припадков, повышению возбудимости, раздражительности. Поэтому актуальным остаётся разработка новых эффективных лекарственных средств, лишённых указанных недостатков, нормализующих физиологическую и функциональную активность центральной нервной системы (ЦНС), интеллектуально-мнестические функции головного мозга.
В связи с этим представляет интерес отечественный препарат Димефосфон (ДМФ), позволяющий осуществлять коррекцию ин-теллектуально-мнестических функций головного мозга у детей с задержкой психического развития [2, 5].
Для лечения неврологических и психических заболеваний у детей могут применяться также препараты лития, нормализующие клеточную мембрану, выполняющие роль посредников нервной и гормональной регуляции, участвующие в иммунных, гомеостатических и адаптационных реакциях [4].
Настоящая работа посвящена разработке нового ноотропного препарата на основе комплексов димефосфона с соединениями лития и изучению его действия на когнитив-но-мнестические функции крыс.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Субстанция "Димефосфон" (Dimephospho-num), производимая ООО "ТЕХНОФОС" (Лицензия Минздрава РФ № 008041), расфасованная по 1,0 кг (серия 181005). Содержание димефосфона - не менее 99% (ФС42-2993-99).
СНэ 0CH3
H3C—C- CH—C—P= O 3 II I \
O Ch3 OCH3
Димефосфон (диметиловый эфир 1,1-диметил-3-оксобутилфосфоновой кислоты).
Физико-химические исследования. Электронные спектры записаны в области 200-700 нм в кварцевых кюветах на UV-Vis спектрофотометре "Specord 100-S bio". ИК-спектры получены на ИК-спектрометре "Shimadzu LC-10Avp" в области 4000-500 см-1 в виде смесей с бромистым калием при концентрации изучаемых веществ в смеси 0,1-
0,3%, а также в тонкой пленке вазелинового масла. Высокоэффективную жидкостную хроматографию проводили на хроматографе марки "Shimadzu LC-10", колонка С18, подвижная фаза - ацетонитрил - вода, температура колонки 40°С в градиентном режиме.
Медико-биологические исследования проведены в соответствии с "Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, 2005.", Приказом Минздрава России № 267 от 19.06.03 "Об утверждении правил лабораторной практики в РФ" [7].
В экспериментах были использованы 90 половозрелых (6 месяцев) белых крыс линии Wistar, полученных из питомника "Столбовая" ГУ НЦ БМТ РАМН. Основные правила содержания и ухода за животными соответствовали нормативам, данным в руководстве Guide for care and use of laboratory animais. ILAR publication, 1996, NationalAcademy Press.
Сравнительное изучение влияния препаратов на когнитивно-мнестические функции и поведение крыс было проведено при одноразовом и курсовом внутрижелудочном введении в весеннее время года (2005 г.).
Оценку когнитивно-мнестических особенностей проводили в установке для выра-
ботки условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ) "челночная камера". Установка для выработки УРПИ состоит из вытянутой пластмассовой камеры длиной 50 см, шириной 10 см и высотой 10 см с электрифицированным решетчатым полом. Стены и потолок одной половины камеры выкрашены в черный цвет, а в другой половине они прозрачны. Потолок состоит из двух крыш на шарнире в середине установки, поэтому имеется доступ в обе половины камеры.
Обычная экспериментальная ситуация состоит из трех этапов:
1. Ознакомление. Крысу помещали в освещенную камеру спиной к темному отсеку (стартовое положение), после чего крышку закрывали. Вскоре животное поворачивалось, находило вход в темный отсек и перемещалось в него. Через 10 с крысу убирали из темного отсека в жилую клетку. Процедуру повторяли 3 раза с 30-минутными интервалами. Латентный период перехода в темноту измеряли с момента помещения животного в камеру с помощью секундомера.
2. Обучение. При последней попытке ознакомления, как только крыса вступала в темный отсек, подавали удар тока (50 Гц, 1,5 мА в течение 1 с). Затем крысу сразу же переводили в жилую клетку. Препарат вводили внутрижелудочно с помощью зонда за 30 минут до начала обучения.
3. Воспроизведение. Через 24 ч. животное вновь помещали в освещенную половину и устанавливали латентный период входа в темноту. Тест заканчивается, когда животное вступает в темный отсек или если животное не делает этого в течение 3 мин.
Животные были разделены на 5 групп, каждая из которых включала по 10 животных: препарат объемом 0,7 мл; препарат объемом 1,4 мл; препарат объемом 2,8 мл; пира-цетам объемом 1,5 мл; контроль - дистиллированная вода, объемом 1,5 мл.
Тестирование общей двигательной активности, ориентировочно-исследовательской активности, эмоционального состояния животных проводили в установке "открытое поле" [1, 7]. Установка представляет собой круглую камеру диаметром 120 см с металлическими стенками высотой 28 см. Пол изготовлен из белого пластика, на нем черной краской нанесена решетка, делящая его на 25
равных квадратов со стороной 20 см. Лампы накаливания (6 ламп по 60 Вт) располагались по кругу диаметром 60 см на высоте 80 см от поверхности пола. Освещенность площадки во время опыта составляла 200 Лк. Животное помещали в центральный квадрат и за ним проводилось наблюдение. Подсчитывали количество отдельных поведенческих актов в течение 5 минут тестирования. Препарат вводили внутрижелудочно с помощью зонда за 30 минут до начала тестирования. Регистрировались следующие поведенческие показатели крыс:
1. Вертикальная двигательная активность (ВДА), отражающая ориентировочно-исследовательское поведение животных.
2. Горизонтальная двигательная активность (ГДА), отражающая общую двигательную активность крыс.
Для оценки эмоционального состояния крыс использовали следующие показатели:
3. Продолжительность реакции замирания, с.
4. Длительность реакции груминга, с.
5. Длительность реакции принюхивания, с.
Установка "челночная камера" для выработки условного рефлекса активного избегания (УРАИ) аналогична описанной выше установке исследования УРПИ. Безусловное электрокожное аверзивное раздражение подавалось на лапы животного после предварительного изолированного действия условного сигнала, в качестве которого использовали звук длительностью 4с. Параметры раздражающего тока: 50 Гц, 0.4 - 0,8 мА (в зависимости от индивидуальной чувствительности, определяемой по выраженности ответа). Интервалы между предъявлением условного сигнала и электрокожным раздражением составляли 2 с; максимальная продолжительность каждого электрокожного раздражения - 4 с; интервал между предъявлениями условных сигналов - 20 с. Условный рефлекс активного избегания - переход в смежный отсек камеры в течение 6 с после включения условного сигнала.
Условный рефлекс активного избегания вырабатывали в течение 5 дней по 30 сочетаний раздражителей ежедневно. Крысы, которые в конце четвертого дня тестирующего
обучения имели более 15 неадекватных или невыполненных реакций, классифицировались как плохо обучаемые (животные с пониженным уровнем обучаемости). Остальные животные были разделены на 4 группы, каждая из которых включала по 10 животных: препарат объемом 1,4 мл; препарат объемом 2,8 мл; пирацетам объемом 1,5 мл; контроль -дистиллированная вода, объемом 1,5мл.
Обучение животных возобновляли через 15 дней после курсового введения препаратов в течение 7 дней. Обучение осуществляли в течение 4 дней. Определение сохранности навыка проводили через 5 дней после последнего сеанса обучения.
При оценке результатов исследований динамики выработки условного рефлекса активного избегания регистрировали основные поведенческие показатели, характеризующие процесс обучения животных:
• число реакций избегания (РИ);
• число коротколатентных реакций избавления от электрокожного раздражения (менее 1с) (КЛИ);
• число “невыполненных” реакций (не-избеганий);
• число межсигнальных реакций (МСР);
• латентное время избегания (ЛВИ).
Методы статистической обработки данных. Полученные результаты были обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов прикладных программ Statistica 6.0. Вероятность различий показателей средних в группах определяли с использованием t-критерия Стьюдента. Различия считали достоверными при уровне значимости р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Кислая среда в водном препарате "Димефосфон" (рН от 2,7 до 4,0) обусловлена взаимодействием димефосфона (ДМФ) с водой по схеме 1.
Значение рН зависит от концентрации ДМФ в водном растворе и от времени хранения. В разбавленных растворах в области концентраций от 0,084 М до 0,010 М диме-
HOH
" ÇH3 0СН3
I 1 --С —C I I —С— P = < )+H
II I \
о CH3 OCH3
A
- HOH
OH
CH3 OH HOH I 3 I /OCH3
-HOH H^^CH'C------P\
' I I OCH3
CH3 OH 3
O
HOH
h3c-c-ch2-C O
CH3 O I 3
I
I 1^ CH3 OH
OCH3 +
+ H3O
OCH33
Б
В
Схема 1. Взаимодействие димефосфона с водой.
фосфона рН изменяется от 6,79 до 7,36, соответственно.
За основу анализа ИК- спектров гидратированного димефосфона (продукты А, Б, В) была принята методика Р.Р. Шагидуллина и др. [3]. В ИК- спектре ДМФ в присутствии воды наблюдается изменения в области ОН- групп: вместо двух нечетко выраженных полос появляется одна широкая полоса 3442 см-1, интенсивность которой увеличивается в шесть раз. Происходит сдвиг полосы карбонильной группы с 1718 до 1712 см-1. Более значительные изменения происходят с полосой валентных колебаний фосфорильной связи, она изменяет свою форму и трансформируется из узкой полосы 1244 см- в двойную широкую полосу 1224 см-1 и 1207 см-1. Две полосы поглощения (Р-ОСН3) остались неизменными 1033 и 1056 см-1. Принципиальным отличием спектров является появление новой широкой полосы в области 1647 см-1 (5ОН2), характеризующей включение воды в молекулу ДМФ, что наиболее вероятно соответствует структуре А (рис. 1).
При избытке воды, например в разбавленных растворах, возможно дальнейшее превращение продукта А в продукты Б и В (схема 1).
Следовательно, субстанция "Димефосфон" в присутствии воды (минимально 1%) содержит кроме диметилового эфира 1,1-диметил-3-оксобутилфосфоновой кислоты (собственно димефосфона), его примеси -монометилового эфира 1,1-диметил-3 -оксобутилфосфоновой кислоты и гидратированные формы димефосфона типа А, Б, В.
В УФ- спектре раствора ДМФ полосы поглощения карбонильной и фосфорильной групп в области 235 и 285 нм широкие и размытые и, вероятно, обусловлены вкладом
продуктов гидролиза димефосфона (рис. 2), что подтверждается данными высокоэффективной (обращенно-фазовой) жидкостной хроматографии (рис. 3).
Добавление соединений лития (лития цитрата, лития хлорида, лития карбоната) в водный раствор ДМФ приводит к образованию донорно-акцепторных комплексов, что подтверждается повышением рН и ИК- спектрами. ИК- спектры смеси ДМФ с лития хлоридом в присутствии 1% воды близки спектрам исходного ДМФ, содержащем 1% воды (рис. 1). Отмечается широкая полоса ОН- групп в области 3450 см-1, наблюдается более сильный сдвиг в области валентных колебаний фосфорильной группы с 1244 до 1207 см-1. Еще большие отличия вносит полоса 1634 см-1, отсутствующая у чистого ДМФ (рис. 1в). В случае хлорида лития эта полоса более широкая и интенсивная по сравнению с полосой валентных колебаний карбонильной С=О группы, и имеет плечо в области 1680 см-1. Аналогичный вид имеют спектры комплексов ДМФ с другими соединениями лития в присутствии воды.
На основании ИК- спектральных исследований можно предположить, что продукт Б будет также реагировать с солями Li+ с образованием комплекса Д (схема 2).
В пользу данного предположения свидетельствует также УФ- спектр продукта взаимодействия ДМФ с хлоридом лития, в котором оптическая плотность Аотн в области КПЗ уменьшается в 3 раза по сравнению с исходным раствором ДМФ этой же концентрации, а Аотн, характерная для карбонильной группы при Х=285 нм, остается постоянной.
Замена хлорида лития на другие соли, в том числе цитрат лития, либо получение цитрата лития in situ при добавлении безводного
: : : :
: : : :
і і і і [" і і і і [" і і і і [" і і і і [" і і і і
175O 15OO 125O 1OOO
Рис. 1. HK- спектры димефосфона (таб. KBr): а - товарная субстанция; б - смесь субстанции с 1% воды; в - смесь субстанции с хлоридом лития и 1% воды.
X, нм
Рис. 2. УФ-спектры поглощения свежеприготовленных 0,01 М растворов димефосфона в воде.
7в)
карбоната лития в водный раствор лимонной кислоты также обеспечивает образование до-норно-акцепторных комплексов ДМФ или продуктов его гидролиза с ионами лития (данные ИК-, УФ- спектров).
На основании проведенных исследований нами предложены водные растворы состава (в масс. %) [4]: димефосфон - 15,0-30,0; кар-
бонат лития - 0,5-5,0; лимонная кислота -3,0-4,0; вода - до 100.
Специфическое фармакологическое действие препарата изучено при оценке когни-тивно-мнестических особенностей, поведенческой активности и эмоционального состояния крыс при одноразовом и курсовом внут-рижелудочном введении водного раствора состава (в масс.%): димефосфон - 30,0; кар-
