CC BY
119
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
УДК 615.322: 615.071: 615.074
DOI: 10.18413/2313-8955-2016-2-4-43-53
Писарев Д.И. Новиков О.О. Бочарникова М.А. Васильева Ю.Г. Малютина А.Ю.
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ СКВАЛЕНА В НЕКОТОРЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ ЖИРНЫХ МАСЛАХ
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», ул. Победы, д. 85, г. Белгород, 308015, Россия
E-mail: pisarev@bsu.edu.ru
Аннотация
Сквален - природное биологически активное соединение, обладающее уникальной фармакологической активностью. Настоящий изопреноид принимает активное участие в обмене веществ, в первую очередь как предшественник биосинтеза стероидов, являясь базовым структурным фрагментом липидного слоя эпидермиса. Для данного соединения характерна пролиферативная, иммунокоррегирующая и антиоксидантная активность. Также сквален в настоящее время рассматривается как перспективная молекула в онкологии. До недавнего времени сквален извлекали из печени глубоководных рыб, поэтому он являлся весьма дорогостоящим продуктом. Однако из-за введения ограничений вылова глубоководных животных во всём мире, данный способ в настоящее время утратил свою актуальность. Поэтому, возникает необходимость в использовании других продуктов, содержащих данную молекулу. Возможными источниками сквалена могут служить жирные масла растительного происхождения. Поиск уникальных и наиболее полезных жирных масел, являющихся, в том числе источниками сквалена до сих пор остаётся актуальной проблемой. В результате настоящего исследования предложена методика обнаружения сквалена в растительных жирных маслах с помощью метода хромато-масс-спектрометрии. Определение проводилось в изотермическом режиме элюирования при температуре испарителя 270 °С, что гарантировало десорбцию образца растительного жирного масла из испарителя. Несомненным достоинством предложенной методики является то, что для определения сквалена не требуется его предварительная экстракция и очистка из жирного масла. Методом абсолютной градуировки удалось дать количественную оценку содержания сквалена в исследованных жирных маслах. Установлено, что наибольшее количество сквалена содержится в амарантовом и тыквенном маслах.
Ключевые слова: сквален; растительные жирные масла; хромато-масс спектрометрия; метод абсолютной градуировки.
Pisarev D.I. Novikov O.O. Bocharnikova M.A. Vasilyeva Yu.G. Malyutina A.Yu.
DEVELOPMENT OF TECHNIQUES FOR QUANTIFICATION OF SQUALENE IN CERTAIN VEGETABLE FATTY OILS
Belgorod State National Research University, Pobedy St., 85, Belgorod, 308015, Russia. E-mail: pisarev@bsu.edu.ru
Abstract
Squalene is a natural biologically active compound. It has a unique pharmacological activity. This isoprenoid is actively involved in metabolism, primarily as a predecessor of biosynthesis of steroids, as a basic structural fragment of the epidermis. This compound is characterized by proliferative, immune-supportive and antioxidant activity. Squalene is also currently being considered as a promising molecule in oncology. Until recently, squalene was extracted from the liver of deep-sea fish, so it was a very expensive product. However, due to the introduction of deep-sea animals catch limits in the world, now this method has lost its relevance. Therefore, it becomes necessary to use other products containing this molecule. Fatty oils of vegetable origin
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
can be possible sources of squalene. The search for unique and most useful fatty oils, including potential sources of squalene, still remains a challenge. As a result of the study, the authors have developed a technique of detection of squalene in vegetable fatty oils by the method of gas chromatography-mass spectrometry. The determination was carried out in the isothermal mode elution evaporator at 270°C, that ensured the desorption of the sample of vegetable fatty oil from the evaporator. The apparent advantage of the proposed method is that the determination of squalene does not require its preliminary extraction and purification of fatty oils. The use of the absolute calibration method enabled to quantify the content of squalene in the studied fatty oils. It was found that the greatest amount of squalene was found in amaranth and pumpkin seed oil. Keywords: squalene; vegetable fatty oils; chromatography-mass spectrometry; method of absolute calibration.
Введение
Сквален - природное биологически активное соединение, интерес к которому в последнее время возрос в связи с уникальностью его фармакологической активности. Сквален по химическому строению является алифитическим изопреноидом, содержащим 30 углеродных атомов и шесть двойных связей, поэтому для него свойственна цис-, транс-изомерия. Характерно, что сквален природного происхождения является транс-изомером [4].
Из-за присутствия большого количества двойных связей молекула сквалена крайне нестабильна, поэтому медленно окисляется, переходя в сквалан [9].
Указанный изопреноид найден во многих живых организмах, принимая активное участие в обмене веществ, в первую очередь как предшественник биосинтеза стероидов. Образуется он в тех организмах, где присутствуют тритерпены, которые
синтезируются из него в ходе биохимической реакции, заключающейся в эпоксидировании концевой кратной связи, с одновременным замыканием цикла скваленоксида [2].
Пристальное внимание к указанному соединению в последние годы вызвано широким спектром его биологической активности. Ещё в 1906 году японскими исследователями был зафиксирован факт, что акулы почти не страдают онкологическими заболеваниями. Оказалось, что эти рыбы, живущие в глубоких водах, имеют высокую концентрацию сквалена в печени, что обеспечивает их плавучесть в воде и вместе с тем противоопухолевую активность [1].
В 1931 году учёными Цюрихского университета было доказано, что у сквалена для приобретения стабильного состояния не хватает 12-и атомов водорода, поэтому данный углеводород заимствует их у любой доступной ему молекулы, в том числе из воды. В результате реакции с водой, выделяется молекулярный кислород, который идёт на обеспечение органов и тканей [4].
Сквален - важнейший участник биосинтеза холестерина в животных организмах, являясь базовым структурным фрагментом липидного слоя эпидермиса. Данный углеводород в процессе синтеза холестерина способен превращаться в его биохимический аналог - 7-дегидрохолестерин, который под действием солнечного света переходит в витамин Д, обусловливая тем самым радиопротекторные свойства [2]. Кроме того, для данной структуры характерна пролиферативная, иммунокорригирующая и антиоксидантная активность. Сквален в настоящее время рассматривается как перспективная молекула в онкологии [6].
До недавнего времени сквален получали из печени глубоководных рыб, поэтому он являлся весьма дорогостоящим продуктом. Однако из-за введения ограничений вылова глубоководных животных во всём мире, данный способ в настоящее время утратил свою актуальность [8]. Поэтому, возникает необходимость в использовании других продуктов, содержащих данную молекулу. Возможными источниками сквалена могут служить жирные масла растительного происхождения [3, 5, 7, 10].
Жирные масла являются одними из важнейших нутриентов. Известно, что потребление растительных масел имеет важнейшее значение для роста и развития организма, и как следствие поддержания здоровья.
Первостепенное пищевое значение имеют подсолнечное, оливковое, кукурузное масла, которые обладают своими достоинствами, но поиск уникальных и наиболее полезных жирных масел, являющихся, в том числе источниками сквалена до сих пор остаётся актуальной проблемой. Поэтому разработка эффективных методов их анализа является необходимым условием для изучения любого растительного масла.
Основная часть
Для оценки жирных масел по содержанию сквалена и выявления наиболее потенциально значимых из них, необходимо предложить
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
аналитическим подход, с помощью которого можно определить качественное и количественное содержание данного компонента в указанных объектах.
Целью данной работы явилось создание аналитического подхода для качественной и количественной оценки сквалена в ряде растительных жирных масел.
Для реализации цели был поставлен ряд нижеперечисленных задач:
1. Предложить методику определения подлинности сквалена в растительных жирных маслах;
2. Разработать схему количественного определения сквалена в выбранных объектах.
Для исследования сквалена в растительных маслах известен ряд методов идентификации и количественного определения. Одним из них является - высокоэффективная жидкостная хроматография, характеризующаяся как один из наиболее чувствительных [3, 9].
Помимо этого для определения сквалена в следовых количествах также используют метод газовой хроматографии с пламенно-ионизационным детектором[8].
Для того чтобы оптимизировать процесс анализа сквалена в природных объектах нами разработана методика его определения.
Материалы и методы исследования
С целью определения сквалена в выбранных объектах нами использован метод хромато-масс-спектрометрии, то есть гибридный метод, сочетающий газожидкостную хроматографию с масс-спектрометрическим детектированием. Данный метод был выбран по ряду нижеперечисленных причин. Поскольку сквален является липофильной структурой,
следовательно, имеет термостабильность, что позволяет использовать термическую десорбцию в ходе его определения газохроматографическим методом. Поскольку сквален представляет собой жидкость с температурой кипения около 280 оС , то другие компоненты растительных масел, а именно триглицериды, стероиды, имеющие более высокие температуры кипения, не будут мешать его прямому определению в жирных маслах. В качестве детектора наиболее рационально использовать масс-спектрометрический, который является универсальным, а также наиболее информативным и чувствительным из всех известных. Кроме того, данный метод позволит определить состав сопутствующих компонентов, содержащихся в масле - глицеридов, жирных кислот, каротиновидов.
Измерение проводили на приборе хромато-масс-спектрометр, модель GCMS-QP2010 Ultra, фирмы «Shimadzu», Япония, регистрационный номер №46022-10.
Хромато-масс-спектрометр включает в себя газовый хроматограф, модель GC-2010 Plus, квадрупольный масс-спектрометр, форвакуумный насос, персональный компьютер, программное обеспечение и дополнительные аксессуары.
Режим ионизации масс-спектрометра -электронный удар. Деление ионов совершается квадрупольным масс-фильтром, детекция -вторичным электронным умножителем с обращённым динодом. Детектирование проводится в режимах селективного ионного детектирования (SIM), или по полному ионному току (SCAN) или в режиме одновременной регистрации SIM/ SCAN.
Разделение проводили на колонке:
Zebron ZB-5MS 30 m L х 0,25 mm ID x 0,25 цт df;
Жидкая фаза: 5%-polysilarylene-
95polydimethylsiloxane;
Температурные пределы: от -60 С° до 325/350 С°;
Серийный номер № 238059.
Условия хроматографирования:
Газ-носитель - гелий с постоянным потоком -2,0 мл/мин;
Анализ осуществлялся в изотермическом режиме.
Температура колонки - 250 С°;
Температура испарителя - 270 С°;
Температура ионного источника - 250 С°;
Температура интерфейса - 250 С°;
Режим ввода пробы - без деления потока;
Напряжение на детекторе - 0,84 кВ;
Поток эмиссии - 60 цА;
Объём вводимой пробы - 5ц1.
Детектирование выполняли в режиме полного ионного тока (SCAN) в диапазоне m/z 40 - 500 Da, скорость сканирования 1000 и результирующее время 0,5 сек.
Идентификацию веществ проводили путём сравнения масс-спектров, полученных в ходе эксперимента с масс-спектрами базы данных масс-спектров NIST 11.
Выбор представленного температурного режима обусловлен тем, что сквален имеет достаточно большую молекулярную массу, поэтому малолетучий, следовательно температура испарителя 270 °С обеспечивает испарение образца.
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
Результаты исследования и их обсуждение
На первом этапе настоящего исследования была разработана методика хромато-масс-спектрометрического определения сквалена. Для этого был взят образец сквалена с концентрацией 0,0001 г/мл, в качестве растворителя использовался н-гексан.
Приготовление образца сравнения. 10 мг (точная навеска) стандартного образца сквалена
помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 20,0 мл растворителя - н-гексана, перемешивали до полного растворения сквалена, доводили объём раствора растворителем до метки и перемешивали.
Полученный образец хроматографировали в приведённых выше условиях. Хроматограмма стандартного образца сквалена изображена на рисунке 1.
Рис. 1. Хроматограмма стандартного образца сквалена Fig. 1. The chromatogram of the standard sample of squalene
На рисунке 1 видно, что время удерживания сквалена в приведённых условиях составило 9,325 мин.
Масс-спектр рисунке 2.
сквалена представлен на
1.0ft
0.75
0.50-
0.25
1x10,000)
41 / i
LA
121 137
161
191
217,
231
273 299
341
r367_
410
50.0
75.0
100.0
125.0
150.0
175.0
200.0
225.0
250.0
275.0
300.0
325.0
350.0
375.0
400.0
425.0
450.0
475.0
500.0
Рис. 2. Масс-спектр сквалена Fig. 2. Mass spectrum of squalene
95
В масс-спектре сквалена имеется несколько приведенных в таблице 1.
характеристических пиков ионов,
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
Характеристические пики ионов Characteristic ions peaks
Таблица 1 Table 1
m/z Абсолютная
интенсивность, (%)
39,S5 14,39
4G,9G 55,39
42,9G 22,76
43,S5 38,30
54,9G 25,20
56,9G 11,45
бб,95 19,80
6S,G5 16,35
69,00 100,00
S1,GG 43,94
Результаты, представленные в таблице, показывают, что базовый пик сквалена представлен характеристическим ионом m/z = 69, имеющим интенсивность 100%.
Количественное определение сквалена проводили с помощью метода абсолютной градуировки, то есть сопоставление результата определения сквалена в исследуемом образце с калибровочным графиком, построенным на основании регистрации стандартного образца сквалена с известной концентрацией.
В результате проведения градуировки, построен калибровочный график зависимости высоты пика от концентрации СО сквалена, представленный на рисунке 3. Диапазон концентраций, в которых построен градуировочный
график 0,01 мкг/мл - 0,1 мкг/мл, что перекрывает весь возможный диапазон содержания сквалена в растительных маслах. В указанном диапазоне концентраций калибровочный график имел прямолинейную зависимость. Данные высоты пика преобразовали в логарифмическую форму для упрощения расчётов. Аргумент, то есть независимая функция Х, представлена массовой концентрацией, то есть мкг/мл.
В результате построения градуировочного графика (рисунок 3) получено уравнение регрессии и рассчитан коэффициент аппроксимации, составивший 0,9989, что свидетельствует о надлежащей степени соответствия концентрации логарифму высоты пика.
17,05 17 16,95 16,9 16,85 16,8 16,75 16,7 16,65
y = 3,5572x + 16,649 R2 = 0,9989
0 0,02 0,04 0,06 0,08
C, мкг/мл сквалена
0,1
0,12
Рис. 3. Градуировочный график зависимости высоты пиков от концентрации сквалена Fig. 3. The calibration graph of the peak height of the concentration of squalene
В качестве объектов исследования взяты 5 оливковое, масло зародышей пшеницы,
образцов растительных масел: пальмовое, амарантовое и тыквенное.
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
Приготовление испытуемого образца. Пробу исследуемого образца масла в количестве 500 мг (точная навеска) помещали в мерную колбу вместимостью 10 мл, добавляли 5 мл н-гексана и встряхивали до растворения. Содержимое колбыдоводили н-гексаном до метки и перемешивали. 5 мкл полученного раствора
каждого образца далее хроматографировали в условиях, идентичных обнаружению
стандартного образца сквалена.
Пальмовое масло. В качестве образца пальмового масла было взято пищевое кондитерское пальмовое масло. Хроматограмма образца указанного масла изображена на рисунке 4.
Рис. 4. Хроматограмма образца пальмового масла Fig. 4. The chromatogram of palm oil sample
В полученной пробе обнаружены следующие доминантные компоненты: пальмитиновая кислота, глицерилпальмитат и сквален (таблица 2).
Оливковое масло. Для исследования образца оливкового масла было взято
масло фирмы (Altero», которое является оливковым маслом класса «Extra Virgin». Хроматограмма раствора оливкового масла изображена на рисунке 5.
Рис. 5. Хроматограмма раствора оливкового масла Fig. 5. The chromatogram of olive oil solution
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
В пробе обнаружены вещества: олеиновая кислота, сквален, бета-токоферол (таблица 2).
Масло зародышей пшеницы. Для
исследования был взят образец масла фирмы
«Аспера». Хроматограмма образца масла зародышей пшеницы представлена на рисунке 6.
Рис. 6. Хроматограмма образца масла зародышей пшеницы Fig. 6. The chromatogram of the sample wheat germ oil
В пробе обнаружены вещества: метиловый эфир линолевой кислоты, олеиновая кислота, сквален и бета-токоферол (таблица 2).
Амарантовое масло. В качестве объекта исследования был использован образец масла «Формула жизни». Хроматограмма масла амаранта представлена на рисунке 7.
Рис. 7. Хроматограмма образца масла амаранта Fig. 7. The chromatogram of the sample of amaranth oil
В жирном масле амаранта обнаружены олеиновая кислота и сквален (таблица 2).
Тыквенное масло. Объектом исследования
тыквенного масла стало пищевое масло. Хроматограмма тыквенного масла представлена на рисунке 8.
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
S75-aso- IE в
435-4.S0
aso
ZJ5- V
Z«J «5- 1Я- 4j 1 H i в / \ Я / ^V, * в S " g
¡i
зо 40 5» an 7Л яа
но vi i а на
«о па
Рис. 8. Хроматограмма образца тыквенного масла Fig. 8. The chromatogram of the sample of pumpkin seed oil
В тыквенном масле обнаружены олеиновая кислота,
сквален и ß-каротин (таблица 2).
Компонентный состав изученных жирных масел Component composition of the studied fatty oils
Таблица 2 Table 2
Жирное масло
Масс-спектр
Идентифицированный
компонент, время удерживания на хроматограмме
y^WS/WW
168 185 21З
29, З12 ъ
Пальмитиновая кислота 4,839 мин
75.0 100.0 1 250 150.0 175.0 200.0 2250 250.0 2750 З00.0 З250 З50.0 З75 0 «0.0 «50 «0.0 <750
Пальмовое
¿11 .000)
т
W
"1-!-!-Г
154
75.0 1O0.O 125.0 150.O 17
1-!-!-Г
-I-1-1-1-
"1-!-!-Г
Il
il Il
Глицерилпальмитат 4,638мин
2o0.0 ' ' 225.0 ' ' 250.0 ' ' 275 o" ' З000" ' З25.0 ' ' З50.0 ' ' З75.0" ' 4o0d ' ' 425.0" ' 45O0' ' ' 475.0 ' ' 50O.0
121 1З7 ш 19, 23,
W' MO1''' ' 125^ " Úi 11175.0 ', 2O0O' ' 2172250 ' ' 25O0" ' ' 275o" ' З000 ' ' З25.0 ' ' З50.0 ' ' З75.0" ' 400.0' ' ' 425.0" ' 45O.0' ' ' 475.0" ' 50O0
З4^_З6^_!_410
Сквален 9,990 мин
41 I,
69
AI J 111 bJb 1З7 166 Ш 22 2З5 264 282
500 750 10 .0 12 .0 150.0 17 .0 20 .0 22 0 25 .0 27 0 З0 0 З2
Олеиновая кислота 3,030мин
Ю З5 0 З 75 0 400 0 425 0 450.0 475.0 500.0
2З,
1З4
257 1
154
I
2З9
299
182 21З
З12 ЗЗ(
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
Оливковое
VW
/\М
161 191 217 231 273 299 341 367 410
750 100.0 125.0 ' 150.0 175.0 200.0 225.0 250.0 275.0 300J^ 3250 35ÍD 375о ' 40Í)I) 42 5 0 4500 47 5 0 ' 50Í)0
71 95 122
500 75.0 1000 1250 150.0 17 .0 20 .0 22 0 2500 2750 30 .0 325.0 350.0 375.0 400 0 4250 4500 475.0 500.0
Сквален 9,491 мин
Бета-токоферол 18,743мин
Зародышей пшеницы
50.0 750 100.0 1250 150.0 1750 200.0 2250 250.0 27 .0 3000 325.0 3500 375.0 4000
M/wWVw
ш
137 166 193 222 235 264 212
500 750 100.0 125.0 150.0 175.0 2000 2250 2500 2750 300.0
\АД
95 121 137
161 191 217 231_
50 .0 75.0 1000 1250 1500 175.0 200.0 225.0 250.0 275.0 300.0
3750 4000 4250 4500 4750 50 0
: ! . .75: i .50- 1 ! i i i i 1 41
.25 43 иД Д J7 95 122 I1*1' * .............. 191 163 ........1....................... ..................... i i i
Метиловый эфир линолевой кислоты 3,075мин
Олеиновая кислота 3,216мин
Сквален 10,405мин
Бета-токоферол 17,637мин
Амарантовое масло
К
l 9 .i, .. 137 16, 193 22 235 2» 212
41 \t :f\t\ дАл Км \h, k
ill 95 12 137
Олеиновая кислота 3,113 мин
Сквален 9,571 мин
137 К 193
235 262
50.0 750 100.0 125.0 150.0 175.0 200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 400.0 425.0 450.0 475.0 500.0
Тыквенное масло
1 1
• Ml ЛЛ \A / »-VVV'A
11. 12 137 , 161 151 217 231 273 299 3.1 367
Олеиновая кислота 3,106
Р-каротин
6,483
Сквален 9,586 мин
4 6
43
191
163
УН
16:
0,000)
(x10000)
222
171 |8.
261 296
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
При проведении количественного анализа было установлено, что содержание сквалена в исследуемых маслах составило: оливковое масло -0,0248 мкг/мл, пальмовое масло - 0,031 мкг/мл, масло зародышей пшеницы - 0,035 мкг/мл, амарантовое масло - 0,058 мкг/мл и тыквенное масло - 0,18 мкг/мл. Таким образом, можно сделать вывод о том, что наибольшее количество сквалена содержится в тыквенном масле.
Заключение
В результате настоящего исследования предложена методика обнаружения сквалена в растительных жирных маслах. В качестве аналитического инструмента использован хромато-масс-спектрометрический метод. Определение проводилось в изотермическом режиме элюирования при температуре испарителя 270 °С, что гарантировало десорбцию образца растительного жирного масла из испарителя. Регистрацию сквалена и фоновых компонентов масел осуществляли с помощью базы данных масс-спектров NIST 11. В итоге эксперимента определено, что время удерживания сквалена находилось в диапазоне 9,5- 10 мин, что может служить объективным параметром его подлинности. Несомненным достоинством предложенной методики является то, что для определения сквалена не требуется его предварительная экстракция и очистка из жирного масла.
Используя метод абсолютной градуировки, разработана методика количественного
определения сквалена в жирных маслах. В качестве критерия соотнесения использована функция логарифма высоты пика сквалена. Установлено, что наибольшее количество сквалена содержится в амарантовом и тыквенном маслах.
Список литературы
1. Акулий сквален. URL: http ://skvalene.ru/svoystva-akulego-skvalena. html (дата обращения 6.08.2016).
2. Де Люка Кьяра. Сквален как акцептор прооксидантных воздействий на кожу: Диссертация на соискание уч. степени канд. биол. наук. М. 2009. 110 с.
3. Качественное и количественное определение сквалена в маслах и реакционных смесях методом ВЭЖХ/
URL:http ://cyberleninka. ru/article/n/kachestvennoe -i-kolichestvennoe-opredelenie-skvalena-v-maslah-i-reaktsionnyh-smesyah-metodom-vezhh (дата обращения 6.08.2016).
4. Сквален. URL: http://slovariki.org/biologiceskij-enciklopediceskij-slovar/5790 (дата обращения 6.08.2016)
5. Степычева Н.В., Фудько А.А. Купажированные растительные масла с оптимизированным жирнокислотным составом // Химия растительного сырья. 2011. № 2. С. 27-33.
6. Desai K.N., Wei H., Lamartiniere C.A. The preventive and therapeutic potential of the squalene-containing compound. Roidex on tumor promotion and regression // Cancer Lett. 2014. Vol. 101. Pp. 93-96.
7. Lehmann J.W. Case history of grain amaranth as an alternative crop. Cereal Foods World. 2014. Vol. 41. Pp. 399-411.
8. Ronald J. Development and application of an analytical method for the determination of squalene in formulations of anthrax vaccine adsorbed/ J. of Pharm. Biomed. Analyt. 2009. Vol. 29. Pp. 183-193.
9. Sulpice J. C., Ferezou J. Squalene isolation by HPLC and quantitative comparison by HPLC and GLC. Lipids. 2014. Vol. 19. Pp. 631-635.
10. Bruni R .Wild Amaranthus caudatus seed oil, a nutraceutical resource from Ecuadorian flora. J. Agric. Food Chem. 2001.Vol. 49.Pp. 5455-5460.
References
1. Shark squalene URL: http://skvalene.ru/svoystva-akulego-skvalena.html (date of access: August 6, 2016).
2. Chiara De Luca. Squalene as an acceptor of prooxidant effects on the skin: PhD Thesis in Biological Sciences. М. 2009. 110 p.
3. Qualitative and quantitative determination of squalene in oils and reaction mixtures HPLC URL: http://cyberleninka.ru/article/n/kachestvennoe-i-kolichestvennoe-opredelenie-skvalena-v-maslah-i-reaktsionnyh-smesyah-metodom-vezhh (date of access: August 6, 2016).
4. Squalene. URL: http://slovariki.org/biologiceskij-enciklopediceskij-slovar/5790 (date of access: August 6, 2016)
5. Stepycheva N.V., Fudko A.A. Blended oils with optimized fatty acid composition // Chemistry of plant raw materials. 2011. № 2. Pp. 27-33.
6. Desai K.N., Wei H., Lamartiniere C.A. The preventive and therapeutic potential of the squalene-containing compound. Roidex on tumor promotion and regression. Cancer Lett. 2014. Vol. 101. Pp. 93-96.
7. Lehmann J.W. Case history of grain amaranth as an alternative crop. Cereal Foods World. 2014. Vol. 41. Pp. 399-411.
8. Ronald J. Development and application of an analytical method for the determination of squalene in formulations of anthrax vaccine adsorbed/ J. of Pharm. Biomed. Analyt. 2009. Vol. 29. Pp. 183-193.
9. Sulpice J. C., Ferezou J. Squalene isolation by HPLC and quantitative comparison by HPLC and GLC. Lipids. 2014. Vol. 19. Pp. 631-635.
10. Bruni R .Wild Amaranthus caudatus seed oil, a nutraceutical resource from Ecuadorian flora. J. Agric. Food Chem. 2001.Vol. 49.Pp. 5455-5460.
RESEARCH
Писарев Д.И., Новиков О.О., Бочарникова М.А., Васильева Ю.Г., Малютина А.Ю. Разработка методики определения содержания сквалена в некоторых растительных жирных маслах// Научный результат. Медицина и фармация. - Т.2, №4,2016.
Писарев Дмитрий Иванович профессор кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии, доктор фармацевтических наук, доцент
Новиков Олег Олегович заведующий кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии, доктор фармацевтических наук, профессор
Бочарникова Марина Анатолиевна ассистент кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии
Васильева Юлия Геннадьевна аспирант второго года обучения кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии
Малютина Анастасия Юрьевна старший преподаватель кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии, кандидат фармацевтических наук
Pisarev Dmitri Ivanovich Professor, Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy, Doctor of Pharmacy, Associate Professor
Novikov Oleg Olegovich Head of Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy, Doctor of Pharmacy, Professor
Bocharnikova Marina Anatolievna Assistant Lecturer, Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy
Vasilyeva Yuliya Gennedievna Graduate Student of the second year of study, Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy
Malyutina Anastasiya Yurievna Senior Lecturer, Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosy, PhD in Pharmacy
